熒光顯微鏡操作手冊(cè)

1、熒光顯微鏡操作手冊(cè) Olympus X51 關(guān) N機(jī)g施款張丿JVIB壞 I巖尤軾髙度矚TH! J理境甕曲訓(xùn)節(jié)曙 K起怡蠱 miWDKfttt 00ICAU PftftSHhutter T目I* u 物鏡: 熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤(pán): 4 X 0.16 （無(wú) DIC） 10X 0.40 20 X 0.75 40 X 1.00 oil 100X 1.40 oil 1. WU 藍(lán) 2. WIB綠（長(zhǎng)通） 3. WIBA綠（帶通） 4. WIG紅 5. CFP青 6. YFP黃 操作步驟：（注意：樣品須在低倍鏡下放置和取下） DIC觀察： 1. 打開(kāi)明場(chǎng)電源開(kāi)關(guān)（“丨”為開(kāi)，“O”為關(guān)） 2. 將樣品置于載物

2、臺(tái)上，用樣品夾夾好 3. 將起偏器、檢偏器、 DIC 棱鏡推入光路，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤(pán)撥到“ 1 ”位置， DIC 棱鏡應(yīng) 與相應(yīng)的物鏡倍數(shù)相匹配 4. 先選用低倍物鏡（“ 10 X”） 5. 調(diào)節(jié)透射光的強(qiáng)度，調(diào)節(jié)焦距，找到視野 6. 換到高倍鏡頭，觀察樣品 7. DIC 觀察時(shí)，光路選擇拉桿拉到中間位置，既可觀察，也可拍照 熒光觀察： 1. 打開(kāi)明場(chǎng)電源開(kāi)關(guān) 2. 打開(kāi)汞燈電源開(kāi)關(guān) 3. 將樣品置于載物臺(tái)上，用樣品夾夾好 4. 檢偏器、 DIC 棱鏡在光路外 5. 將熒光光路shutter打開(kāi)（“O”為開(kāi)，”為關(guān)），需保護(hù)樣品時(shí)關(guān)閉 shutter 6. 光路選擇拉桿推至最里邊 7. 根據(jù)樣品的

3、標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置 8. 通過(guò)兩組減光濾片調(diào)節(jié)激發(fā)光強(qiáng)度 9. 從低倍鏡開(kāi)始觀察，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野， 10. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品 11. 拍照時(shí)光路選擇拉桿完全拉出 普通明場(chǎng)觀察： 1. 打開(kāi)明場(chǎng)電源開(kāi)關(guān)（“丨”為開(kāi)，“O”為關(guān)） 2. 將樣品置于載物臺(tái)上，用樣品夾夾好 3. 起偏器、檢偏器、 DIC 棱鏡在光路外，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤(pán)撥到“ 1”位置， DIC 棱鏡撥到 明場(chǎng)（BF）位置 4. 先選用低倍物鏡（ “ 4X”） 5. 調(diào)節(jié)透射光的強(qiáng)度，調(diào)節(jié)焦距，找到視野 6. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品 7. 光路選擇拉桿拉到中間位置既可觀察，也可拍照 關(guān)機(jī)： 1. 關(guān)閉

4、汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時(shí)以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時(shí)以后方可再次 開(kāi)啟） 2. 將透射光調(diào)到最小，關(guān)閉明場(chǎng)電源開(kāi)關(guān) 3. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡，取出樣品，若使用過(guò)油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭 4. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件 5. 使用光盤(pán)拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動(dòng)儲(chǔ)存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)） 6. 關(guān)閉電腦，登記使用時(shí)間、熒光數(shù)字等使用情況 Olympus 1X71 1 ttfeXMiWW 物鏡: Utt 畫(huà)路逸拝按制 機(jī)調(diào)他檢昭料力壞 銳調(diào)範(fàn)脂祖 掘謂滋護(hù)囲 眾対電嫌開(kāi)蕪至開(kāi)黃 畑站頤進(jìn)応潺 衰光變高擺 梅覺(jué)環(huán) 乩艷光關(guān)調(diào)書(shū)環(huán) CTU CTltR中有曲申普TA 3朮略申卅連斤敏 AAftshutter O

5、開(kāi)關(guān) 10 20 40 60 4 X 0.13 PHL X 0.30 PH1 X 0.45 PH1 X 0.60 PH2 X 1.35 oil（無(wú)相差） 物鏡倍數(shù) 相差環(huán) 熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤(pán)： 1. WU 藍(lán) 2. WIB 綠 （長(zhǎng)通） 3. WIBA 綠 （帶通） 4. WIGA 紅 5. CFP 6. YFP 操作步驟： 相差觀察： 1. 打開(kāi)明場(chǎng)電源開(kāi)關(guān)（“丨”為開(kāi)，“O”為關(guān)） 2. 將樣品置于載物臺(tái)上 3. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置 4. 從低倍鏡開(kāi)始觀察，調(diào)節(jié)到與鏡頭相匹配的相差環(huán)，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤(pán)撥到“ 1 ”的位 置 5. 調(diào)節(jié)透射光光強(qiáng)，調(diào)節(jié)焦距，找到預(yù)觀察視野 6. 依次換到高倍

6、鏡， （注意調(diào)節(jié)相差環(huán)）觀察樣品 7. 拍照時(shí)將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置 熒光觀察： 1. 打開(kāi)明場(chǎng)電源開(kāi)關(guān) 2. 打開(kāi)汞燈開(kāi)關(guān) 3. 將樣品置于載物臺(tái)上 4. 將熒光光路shutter打開(kāi)（“O”為開(kāi)，”為關(guān)），需保護(hù)樣品時(shí)關(guān)閉 shutter 5. 將光路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置 6. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置 7. 通過(guò)兩組減光濾片調(diào)節(jié)激發(fā)光強(qiáng)度 8. 從低倍鏡開(kāi)始觀察，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野， 9. 依次換到高倍鏡頭，觀察樣品 10. 拍照時(shí)將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置 普通明場(chǎng)觀察： 1. 打開(kāi)明場(chǎng)電源開(kāi)關(guān)（“丨”為開(kāi)，“O”為關(guān)） 2. 將樣品置于載物臺(tái)上 3. 將光

7、路選擇旋鈕調(diào)至觀察位置 4. 從低倍鏡開(kāi)始觀察，相差環(huán)撥到明場(chǎng)（ BF）位置，熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤(pán)撥到“1”的位 置 5. 調(diào)節(jié)透射光光強(qiáng)，調(diào)焦，找到預(yù)觀察視野 6. 依次換到高倍鏡，觀察樣品 7. 拍照時(shí)將光路選擇旋鈕調(diào)至相機(jī)位置 關(guān)機(jī)： 1. 關(guān)閉汞燈電源（注意：汞燈需使用半小時(shí)以上方可關(guān)閉，關(guān)閉半小時(shí)以后方可再次 開(kāi)啟） 2. 將透射光強(qiáng)調(diào)到最小，透射光選擇按鈕按出 3. 關(guān)閉明場(chǎng)電源開(kāi)關(guān) 4. 將鏡頭轉(zhuǎn)到低倍鏡，取出樣品，若使用過(guò)油鏡用干凈的擦鏡紙擦拭鏡頭 5. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件 6. 使用光盤(pán)拷貝數(shù)據(jù)（禁止使用移動(dòng)儲(chǔ)存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)） 7. 關(guān)閉電腦，登記使用時(shí)間、熒光數(shù)字等使用情

8、況 Olympus SZX16 lift 冷摩黑開(kāi)黃 粗f像虞鈕 毒CT卅義 光鼻審師 底光海畀餐 應(yīng)充洋海軽調(diào)節(jié)星刖 ww反光朋嗣池軌片關(guān) 綁比廈控:WT 物鏡： 1 X 變倍： 0.711.5 熒光濾色塊轉(zhuǎn)盤(pán)：UV藍(lán) GFPHQ 綠 RFP2 紅 操作步驟： 明場(chǎng)觀察： 1. 將樣品置于載物臺(tái)上 2. 推入光路選擇拉桿，熒光濾塊轉(zhuǎn)盤(pán)撥到空位 3. 選擇合適的光源 冷光源觀察 使用不透明的底板（黑或白），打開(kāi)環(huán)形光電源開(kāi)關(guān)（“丨”為開(kāi)，“O”為 關(guān)）,調(diào)節(jié)光強(qiáng)度，找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比，觀察樣品 底光源觀察 使用透明玻璃底板，打開(kāi)底座電源開(kāi)關(guān)（“丨”為開(kāi)，“O”為關(guān)），將LBD 濾片推入

9、光路，調(diào)節(jié)反光鏡方向、對(duì)比度和光強(qiáng)度，找到預(yù)觀察視野，調(diào) 節(jié)變倍比，觀察樣品 4. 拍照時(shí)將光路選擇拉桿拉出 熒光觀察： 1. 將樣品置于載物臺(tái)上 2. 一般選擇黑色不透明底板 3. 打開(kāi)汞燈電源開(kāi)關(guān) 4. 熒光光路擋板推出 5. 根據(jù)樣品的標(biāo)記情況將熒光濾塊轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)到相應(yīng)的位置 6. 找到預(yù)觀察視野，調(diào)節(jié)變倍比 7. 觀察樣品 8. 拍照時(shí)將光路選擇拉桿拉出 關(guān)機(jī)： 關(guān)閉半小時(shí)以后方可再次 1. 關(guān)閉汞燈電源 （注意： 汞燈需使用半小時(shí)以上方可關(guān)閉， 開(kāi)啟） 2. 將明場(chǎng)光強(qiáng)調(diào)到最小，關(guān)閉明場(chǎng)電源開(kāi)關(guān) 3. 取出樣品，將變倍比調(diào)到最小 4. 確認(rèn)數(shù)據(jù)已經(jīng)保存，關(guān)閉軟件 5. 使用光盤(pán)拷貝數(shù)據(jù)（

10、禁止使用移動(dòng)儲(chǔ)存設(shè)備拷貝數(shù)據(jù)） 6. 關(guān)閉電腦，登記使用時(shí)間、熒光數(shù)字等使用情況 軟件應(yīng)用 預(yù)覽鍵 拍照鍵 軟件介紹 1. 雙擊打開(kāi)DP Controller軟件 2. 點(diǎn)擊預(yù)覽鍵，選擇 image size（ 般 1360 X 1024）、objective 、ISO sensitivity（明 場(chǎng)拍照選擇ISO200,熒光拍照選擇ISO400）、exposure mode（ 一般選擇 manual），調(diào)節(jié) exposure time 3. 調(diào)節(jié)黑/白平衡（明場(chǎng)拍照用白平衡，熒光拍照用黑平衡）。點(diǎn)擊color面板，點(diǎn)擊one touch在圖片背景位置選個(gè)小框，軟件自動(dòng)做好平衡 4. 若需添加

11、標(biāo)尺，點(diǎn)擊scale面板，選中show scale，選擇標(biāo)尺顯示模式和長(zhǎng)度，選中 free size ，改變標(biāo)尺長(zhǎng)度 5. 若需調(diào)整圖象色階，點(diǎn)擊level面板，拖動(dòng)小滑塊調(diào)整色階，可以改變圖象對(duì)比度 6. 點(diǎn)擊capture面板，還可再次調(diào)節(jié)曝光時(shí)間、圖象亮度及對(duì)比度。點(diǎn)擊拍照鍵，獲取圖 象 7. 此時(shí)彈出DP manager軟件，選擇保存圖象格式保存圖象到硬盤(pán)上 8. 若需將不同通道圖象合成，可點(diǎn)擊DP manager軟件中image宀image composition ，選 擇需合成圖片的名稱，點(diǎn)擊apply , merging image生成，保存合成圖象 9. 若需拍攝Timelapse,點(diǎn)擊Timelapse/Movie 面板，選擇拍攝模式，選擇拍攝時(shí)間、間隔 時(shí)間等