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文檔簡介

1、目錄thermomultiskan ascentelectron corporationmultiskan ascent用戶手冊multiskan ascent, 分類編號 51118300和51118307軟件版本1.3.1用戶手冊,第2.1版; 2003年12月, 分類編號1507540目錄1. 安全符號和標(biāo)記72. 關(guān)于本用戶手冊83. multiskan ascent前言94. 安裝115. 應(yīng)用信息206. 使用內(nèi)部軟件267. 保養(yǎng)968. 功能說明1069. 技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)11510. 故障查找指南11911. 保修單12512. 訂購信息12613. 詞匯和縮寫12914. 索引13

2、515. 圖表目錄143附件 a. 簡明用戶指南144附件 b. 濾光輪波長表145附件 c. 系統(tǒng)備忘147附件 d. multiskan ascent 反饋表149附件 e. 地址150第1章:安全符號與標(biāo)記目錄1 安全符號與標(biāo)記72 關(guān)于本用戶手冊83 multiskan ascent前言93.1 設(shè)計用途103.2 使用multiskan ascent的優(yōu)點104 安裝114.1 安裝檢查表114.2 交貨注意事項114.2.1 打開包裝114.2.2 檢查交付的貨物是否完整124.2.3 檢查運輸過程中有無損壞124.2.4 環(huán)境要求134.2.4.1 應(yīng)避免的事項134.2.5 技

3、術(shù)前提144.3 儀器投入使用前的設(shè)置144.3.1打開運輸時加的鎖144.3.1.1 檢測器運輸鎖144.3.1.2 載板架運輸鎖154.3.2 安裝濾光輪164.3.3 確保起動174.4 開機184.5 操作檢查194.6 操作前的注意事項和限制條件195 應(yīng)用信息205.1 應(yīng)用舉例205.1.1 檢驗結(jié)果數(shù)量205.1.2 檢查結(jié)果質(zhì)量205.1.3 端點測量205.1.4 兩點測量225.1.5 動態(tài)測量235.1.5.1 動態(tài)測量的優(yōu)點256 使用內(nèi)部軟件266.1 使用鍵盤和顯示器266.2 用戶菜單286.3 用戶功能導(dǎo)航296.4 檢查結(jié)果快速衡量 (模式)326.4.1

4、端點測量336.4.2 兩點測量346.4.3 動態(tài)測量356.4.3.1 正常動態(tài)計算方法366.4.3.2 最大速率計算方法376.4.3.3 至最大速率時間和至最大速率的一半所需時間的計算方法386.4.3.4 最大abs, 至最大abs時間, 至最abs一半時間和合計delta abs 計算方法406.4.4 協(xié)議選擇416.4.5 振蕩426.4.6 孵化436.5 檢查結(jié)果生成 (prot/new)446.5.1 測量參數(shù)456.5.2 檢驗結(jié)果類型496.5.2.1量化檢驗結(jié)果496.5.2.1.1 批準(zhǔn)506.5.2.1.2 取舍等式546.5.2.1.3 樣本處置及后處理57

5、6.5.2.2檢驗結(jié)果定性586.5.2.2.1 保存的曲線596.5.2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)線606.5.2.2.3 模板上的曲線616.5.2.2.4 系數(shù)計算626.5.2.2.5 曲線調(diào)整636.5.2.2.6 質(zhì)量控制656.5.3使用模板繪圖儀676.5.3.1 填寫空白圖706.5.3.2 模板圖編輯器的可使用鍵716.5.3.3 模板圖編輯器的特點716.5.3.4 當(dāng)前孔酶顯示726.5.4報告726.5.4.1 打印輸出舉例746.5.5 編輯協(xié)議 (prot/edit)776.5.6 打印、復(fù)制和刪除協(xié)議 (prot/utilities)786.5.6.1 編輯熱鍵協(xié)議796.

6、5.7啟用、斷開和編輯缺省問題806.6使用設(shè)置(setup)模式816.6.1儀器設(shè)置816.6.1.1 輸入濾光器位置到濾光輪816.6.1.2 設(shè)置日歷時鐘826.6.1.3 設(shè)置模板尺寸836.6.1.4 制作打印輸出標(biāo)題836.6.2采取安全措施846.6.2.1 multiskan ascent 檢測器的安全等級846.6.3 安裝打印機866.6.4 打印輸出內(nèi)部質(zhì)量控制試驗876.6.5 設(shè)置孵化器876.7后處理結(jié)果時使用模板模式886.7.1 加工886.7.2 保存前次檢驗結(jié)果896.7.3 測量結(jié)果的用途896.7.4 自動保存916.8 multiskan ascen

7、t軟件中使用的文件類型926.9 起動946.10 關(guān)機956.11 使用指南957 保養(yǎng)967.1定期和預(yù)防性保養(yǎng)967.1.1 保養(yǎng)檢查列表977.1.2 即時保養(yǎng)977.1.3 日常保養(yǎng)977.1.4 每周保養(yǎng)977.2 清潔載板架987.3 清潔孵化器腔987.4 清潔纖維端光纖和探頭光纖987.5 材料報廢處理997.6 去污步驟997.7 更換濾光輪中的濾光器1017.8 更換照明燈1027.9 保留系統(tǒng)記錄1047.10 送維修包裝1047.11 維修合同1047.12 儀器報廢處理1058 功能說明1068.1 multiskan ascent 檢測器1068.2 光度測定原則

8、1068.2.1 垂直測量原則1068.2.2 試管內(nèi)的液面1078.2.3 測定模式1108.2.3.1 連續(xù)1108.2.3.2 逐步模式1108.2.4光學(xué)系統(tǒng)1108.3儀器布局1118.3.1 前視圖1118.3.2 后視圖1128.3.3 內(nèi)視圖1138.4 鍵盤/顯示裝置1138.5 孵化器1138.6 振蕩器1138.7 遙控multiskan ascent1149 技術(shù)規(guī)格1159.1 總體規(guī)格1159.2 光學(xué)性能1169.3 選裝孵化器1179.4 安全標(biāo)準(zhǔn)1179.5 符合要求11810 故障查找指南11910.1 報錯信息11910.2 關(guān)于multiskan asc

9、ent的常見問題12110.3 維修申請協(xié)議12310.3.1 去污12310.3.1.1 去污證書12411 保修單12511.1 保修限制12512 訂購信息12612.1 更新成套工具12612.2 選裝件和配件清單12612.2.1 標(biāo)準(zhǔn)濾光器清單12612.2.2 專用濾光器12612.2.3 光度性能檢查 (吸收率標(biāo)準(zhǔn)模板)12712.3 耗材清單12712.4 建議備件清單12813 詞匯和縮寫12913.1 網(wǎng)頁關(guān)鍵詞13413.2 參考文獻(xiàn)13414 索引13515 圖表目錄143附件 a. 簡明用戶指南144附件 b. 濾光輪波長表145附件 c. 系統(tǒng)記錄147附件 d.

10、 multiskan ascent反饋表149附件 e. 地址150版權(quán)thermo electron corporation (熱電公司)1998-2003年版權(quán)所有。 第一版于1998年出版, 在芬蘭印刷。公司版權(quán)所有。不得復(fù)制提供的用戶文件的部分或整體。專利本產(chǎn)品的專利號為:us 6111636, 光密度計量設(shè)備。注冊商標(biāo)ascent software, finnpipette, immulon, microtiter, multiskan 和 multiskan ascent 都是熱電公司的注冊商標(biāo)。epson是seiko epson公司的注冊商標(biāo)。hewlett packard (h

11、p) 是惠普(hewlett-packard)公司的注冊商標(biāo)。microsoft (ms) 和 windows 是微軟公司的注冊商標(biāo)。所有其它商標(biāo)和注冊商標(biāo)均歸其持有者所有。聲明熱電公司有權(quán)在任何時候改動其產(chǎn)品,以吸納技術(shù)發(fā)展成果。本手冊可不經(jīng)通知進(jìn)行修改,這是產(chǎn)品不斷發(fā)展的一個部分。雖然我們在編寫本手冊時,已經(jīng)盡力確保其準(zhǔn)確性,但本手冊中仍然有可能包含錯誤或疏漏,對此熱電公司不承擔(dān)任何責(zé)任。如果因應(yīng)用或使用本手冊中的信息而造成損失,熱電公司也不承擔(dān)有關(guān)責(zé)任。本手冊替代以前出版印刷的版本。不承擔(dān)損壞后果熱電公司不承擔(dān)因使用本產(chǎn)品或無法使用本產(chǎn)品造成的任何損壞。聯(lián)系方式thermo(熱電公司)e

12、lectron corporationp.o. box 100, fin-01621 vantaa, finland 電話 +358-9-329 100, 傳真 +358-9-3291 0415 1 安全符號和標(biāo)記這些符號是為了讓您注意特別重要的信息,提醒您存在所指出的危險。multiskan ascent中使用的安全符號:接通電源電源關(guān)閉連接保護(hù)接地系統(tǒng)保護(hù)導(dǎo)體接線端儀器上使用的警告標(biāo)志:小心:有電擊危險!小心:可能對操作人員構(gòu)成人身傷害或?qū)χ車鷺?gòu)成安全危險。參見所附的文件。序列號目錄號制造日期參見使用說明文件中使用的警告標(biāo)志小心:有電擊危險!小心:生物危害風(fēng)險!小心:可能對操作人員構(gòu)成人身

13、傷害或?qū)χ車鷺?gòu)成安全危險。參見所附文件。小心:在具體應(yīng)用時,儀器、其它設(shè)備或性能和功能會受到嚴(yán)重?fù)p壞。用戶手冊,第2.1版,2003年12月,分類編號關(guān)于本用戶手冊本用戶手冊是為實際用戶編寫的(如實驗室技師),提供multiskan ascent光度顯微標(biāo)板檢測器的有關(guān)信息。本手冊內(nèi)容涉及multiskan ascent顯微標(biāo)板檢測器的安裝和操作說明等。操作儀器前通讀手冊全文本手冊包括有您需要的以下信息:l 安裝multiskan ascentl 日常使用multiskan ascent l 使用快速模式快速衡量檢驗結(jié)果l 使用協(xié)議模式生成和/或編輯檢驗結(jié)果l 使用設(shè)

14、置模式配置multiskan ascentl 連接multiskan ascent到打印機l 使用模板模式對結(jié)果作后處理l 基礎(chǔ)性保養(yǎng)程序本用戶手冊還說明了multiskan ascent 硬件的所有特點和規(guī)格及配置軟件。第5章“應(yīng)用信息”解釋了測量原理。第10章故障查找指南對所有報錯信息作了解釋,給出了解決問題的實用提示,說明了如何預(yù)防問題。用戶必須熟悉第7章“保養(yǎng)”中所提供的內(nèi)容。保修和訂購信息參見第11章“保修”和第12章“訂購信息”。3 multiskan ascent說明熱電公司生產(chǎn)的multiskan ascent (參見圖3.1)是先進(jìn)小型單信道垂直光路濾光光度計,用于標(biāo)準(zhǔn)光度測

15、量。測量類型有端點法、兩點法和動力測量法。multiskan ascent采用新型的光學(xué)系統(tǒng),可讀出96- 和 384-孔酶標(biāo)板,與4.0 a成線性。該儀器為快速顯微標(biāo)板檢測器 (9 秒/96-孔酶顯微標(biāo)板;持續(xù)模式)。儀器的速度可滿足當(dāng)前eia技術(shù)的要求。一次可裝入一張清晰的顯微標(biāo)板。multiskan ascent有兩種基本型號,另有選裝設(shè)備,如孵化器和軟盤等:l 51118300 multiskan ascent, 200 - 240 vl 51118307 multiskan ascent, 100 - 120 v參見第12章的訂購信息。利用濾光輪內(nèi)最多八個高質(zhì)量干擾濾波器來選擇波長(

16、340 - 850 nm)。multiskan ascent內(nèi)置有多種軟件,它采用了最新技術(shù),使其便于在當(dāng)今的實驗室環(huán)境下使用。菜單式軟件備有q&a (問題和答案)格式,引導(dǎo)用戶使用所有程序選項。菜單格式簡短,只需擊兩次鍵(mode/protocol(模式/協(xié)議)和start(開始))就可處理常見的檢驗結(jié)果。機器人自動操作功能集成使multiskan ascent操作簡單高效。載板架的應(yīng)用使得操作時接觸機器人臂更為容易, pc軟件(ascent 軟件)易于與自動操作和his/lims系統(tǒng)集成。在進(jìn)行大容量的試驗時, multiskan ascent可與機器人臂結(jié)合使用,將測量能力擴大至一百多個

17、384-孔酶標(biāo)板,且不必進(jìn)行手工操作。圖3.1 multiskan ascent3.1設(shè)計用途multiskan ascent是高質(zhì)量的顯微標(biāo)板光度計,供專業(yè)人員進(jìn)行實驗室研究時使用。該儀器可用于測量樣本的吸收率,適用于本手冊中提到的滿足sbs標(biāo)準(zhǔn)的96- 和 384-孔酶顯微標(biāo)板。它還具有孵化和振蕩功能。為了核實整個系統(tǒng)的使用,建議遵循優(yōu)良實驗室作業(yè)方法(good laboratory practices),以確保分析結(jié)果的可靠性。本儀器不適用于自行測試。3.2使用multiskan ascent的優(yōu)點multiskan ascent顯微標(biāo)板檢測有幾大優(yōu)點,主要得益于儀器的先進(jìn)功能:l 96

18、- 和 384-孔酶標(biāo)板極佳的光學(xué)性能l 容量增加使測量速度加快l 強大的ascent軟件(pc軟件),供研究使用l 機器人兼容,適用環(huán)境廣泛l 內(nèi)部軟件使用方便l 選裝軟盤保存結(jié)果和檢測結(jié)果協(xié)議l 選裝孵化器,用于需控制溫度的應(yīng)用。第4章:安裝4 安裝4.1安裝清單本章有關(guān)安裝的內(nèi)容主要包括清單中所列各項的概況。標(biāo)記欄q 仔細(xì)地打開multiskan ascent儀器。參閱4.2.1。保留原有的包裝與包裝材料,以備將來之用。q 檢查交付是否完整。參閱4.2.2。q 檢查運輸途中有否損壞。參閱4.2.3。q 將分配器放置在正常的實驗室工作臺上,須重視環(huán)境與技術(shù)條件。參閱第4.2.4及4.2.5

19、。在設(shè)備兩側(cè)及后方保留足夠的空間。q 安裝儀器。參閱4.3。q 將主要供電電纜連接到主要輸入接口上。參閱第4.4節(jié)。q 執(zhí)行操作檢查。參閱第4.5。4.2交付以后的操作4.2.1如何打開包裝將拆包的儀器轉(zhuǎn)移至操作現(xiàn)場。小心地拆開multiskan ascent及其附件,保持運輸包裝的箭頭標(biāo)志朝上。下列注意事項及指南隨儀器一并贈送,拆開包裝即可找到。l 質(zhì)量保證卡。l 包裝指南。l 包裝清單。l 關(guān)于如何打開運輸鎖的指南:注意,如何打開multiskan ascent運輸鎖,目錄編號:1507750。l 用戶手冊。注意:在拆開儀器之前,檢查運輸包裝上標(biāo)記的電壓是否正確。注意: 切勿觸摸或松開指南

20、中未要求松開的螺絲或部件。否則,可能導(dǎo)致儀器失準(zhǔn)以及儀器質(zhì)量保證無效。需要舉起儀器時,將手指放在兩側(cè)的底部,垂直上舉。保留原來的包裝及包裝材料,以備將來運輸之用。包裝旨在確保安全運輸以及運輸途中的損壞最小化。使用替代包裝材料可能使質(zhì)量保證失效。同時,需保留生產(chǎn)商提供的所有與儀器有關(guān)的指南,以備將來之用。4.2.2檢查交付是否完整對照訂單檢查所附的包裝清單。如果某些部件缺失,請與熱電公司駐當(dāng)?shù)卮砘驘犭姽局苯勇?lián)系。4.2.3檢查運輸途中是否損壞目視檢查運輸包裝、儀器及附件是否有運輸損壞。首先打開儀器的左側(cè)綠蓋,在儀器前板的左側(cè)小縫中(圖4.1及圖8.6)插入并按下隨儀器一并提供的黑蓋打開工具。

21、打開蓋子時,輕輕地向下按,同時在小縫中插入并按下開蓋工具。圖 4.1:打開蓋子注意:當(dāng)儀器閉合時,舉起有“舉起并打開”標(biāo)簽的黃銅色蓋子固定器(圖.2),防止儀器的蓋子閉合以及可能的損壞或損傷。目視檢查主要儀器的連接。檢查儀器內(nèi)部是否有松動的部件。如果部件已損壞,請與熱電公司駐當(dāng)?shù)卮砘驘犭姽局苯勇?lián)系。蓋托架圖 4.2:multiskan ascent蓋固定器4.2.4環(huán)境要求安裝multiskan ascent儀器時,須避免操作現(xiàn)場有過多灰塵、震動、強磁場、直接光照、大風(fēng)、濕度或溫度變化大。l 確保工作區(qū)平整、干燥、清潔、防震,并有額外的空間用于電纜、連接、打印機等。l 確保周圍空氣清潔,并

22、且不含腐蝕性氣體、煙、塵等。l 確保周圍溫度在+5c(41f)至+40c(104f)范圍之內(nèi)。l 確保相應(yīng)的濕度在10%至93% (非凝結(jié))。設(shè)備的兩側(cè)及后方須保留足夠的空間(至少厘米),保證適當(dāng)?shù)目諝饬魍?。該設(shè)備不會產(chǎn)生有害的噪音。警告:切勿在可能存在有害液體和氣體的環(huán)境下操作該儀器。4.2.4.1須避免的情況在使用multiskan ascent時,切勿抽煙、進(jìn)食或飲酒。在處理測試液體之后,應(yīng)徹底清洗雙手。在處理潛在的危險樣品時,須遵守實驗室程序。穿正確的防護(hù)服、手套。確保工作區(qū)通風(fēng)良好。切勿將液體灑到儀器內(nèi)或儀器上。4.2.5技術(shù)前提要求將儀器放置在常規(guī)的實驗室工作臺上。設(shè)備的凈重約為1

23、2.5公斤(27.6磅)。儀器的操作電壓在100至240瓦之間,頻率范圍為50至60赫茲。4.3設(shè)備投入操作之前的設(shè)置 4.3.1如何打開運輸鎖注意事項:參考所附的有關(guān)如何打開運輸鎖的“注意事項”(目錄編號為1507750)。有兩個運輸鎖(圖4.3)。儀器上貼有兩個白色的標(biāo)簽,上有紅色的字當(dāng)心!在使用前請打開運輸鎖以引起用戶注意。圖.3中標(biāo)簽及箭頭指明了運輸鎖的位置。取下標(biāo)簽并打開運輸鎖。在將設(shè)備投入使用之前,須確保已經(jīng)打開運輸鎖。圖 4.3 運輸鎖的位置4.3.1.1檢測器運輸鎖注意:在打開運輸鎖時,切勿觸摸檢測器磁頭。將其放在檢測器的形部件上。1 首先打開儀器的左側(cè)綠蓋,在儀器前板的左側(cè)小

24、縫中(圖4.1及圖8.6)插入并按下隨儀器一并提供的黑蓋打開工具。打開蓋子時,輕輕地向下按,同時在小縫中插入并按下開蓋工具。2 在固定的黑色檢測器支撐部件的前端明顯地粘貼了一個黃色標(biāo)簽,上面寫著“測量磁頭運輸鎖鎖定與開鎖位置”(圖.3)。使用提供的.5毫米六角螺絲起子打開檢測器磁頭的運輸鎖(黃色“鎖住”標(biāo)簽)(圖.4),也就是檢測器左側(cè)鍍鋁支撐部件的螺絲。3 隨后,將剛才拆下的螺絲裝到鍍鋁支撐部件的右側(cè)上部(黃色“開鎖”標(biāo)簽)。將螺絲保留在該位置,以備將來運輸之用。圖. 4.4 檢測器磁頭鎖已鎖住4.3.1.2 載板架運輸鎖1. 當(dāng)運輸鎖處于鎖住位置時,載板架位于非??孔蟮奈恢?。使用.5毫米的

25、六角螺絲起子拆開載板架的運輸鎖(黃色標(biāo)簽上寫“載板架運輸鎖螺絲”)(圖.),即黑色載板架頂部左側(cè)薄薄的白色塑料墊圏的螺絲。墊圈用于防止載板架的油漆被刮傷。2. 隨后,將剛拆下的螺絲固定到儀器左側(cè)固定的黑色載板架支援部件的最左側(cè)(黃色標(biāo)簽上寫“開鎖位置”)。保留螺絲以備將來運輸之用。3. 蓋上蓋子。圖 4.5 載板架的鎖位于鎖定位置。4.3.2如何安裝濾光輪1. 打開鎖住的塑料儲存盒,拆開濾光輪。2. 檢查所有濾波器是否清潔和有無損壞。3. 不要觸摸濾波器表面。4. 檢查濾光輪中所有濾波器是否位置正確(參見第.7節(jié))。5. 將輪放入濾波器槽內(nèi)(圖.6和.7),使有齒的一側(cè)面對儀器左側(cè)。永久磁鎖裝

26、置將自動把濾光輪鎖在正確的位置。圖. 4.6 濾波器槽位置圖 4.7 安裝濾光輪4.3.3 如何確保啟動檢查儀器內(nèi)的移動部件,如檢測器磁頭及載板架,是否在操作儀器前有所移動。1. 警告:確保后板右上方的主開關(guān)(圖.8)位于“關(guān)閉”()位置。2. 將主電源線連接到后板右下方的主電源接口(圖.8)上。如果需要更多的主電源線,只能使用當(dāng)?shù)嘏鷾?zhǔn)使用的電源線。3. 將儀器連接到正確安裝的電源接口上,該接口有保護(hù)性接地導(dǎo)線。警告:切勿使用沒有接地的電源插座操作該儀器。圖. 4.8 連接電源電纜4.4開機警告:確保后板右下方的主開關(guān)(圖.8)位于“關(guān)閉”()位置。切勿在電源輸出沒有接地的情況下操作該儀器。1

27、. 確保儀器開關(guān)“關(guān)閉”()。2. 將電源線插入儀器后部右下方的接口中。3. 將電源線與適當(dāng)?shù)碾娫矗ū仨氂薪拥芈?lián)接)連接。4. 將multiskan ascent打印機電線與打印機連接。5. 需要打印輸出時,打開打印機。6. 將儀器后部左上方的電源開關(guān)放至“打開”()位置,即打開multiskan ascent開關(guān)。儀器將進(jìn)行自動校準(zhǔn)。打開儀器電源開關(guān),顯示器首先將顯示“請等待”。大約秒的初始啟動階段之后,顯示器將顯示主菜單。儀器將立即開始執(zhí)行命令。參見第4.3.3節(jié)“確保啟動”以及 第6.6.3節(jié)“安裝打印機”。4.5操作檢查以下自測試程序必須準(zhǔn)確無誤地完成,以確認(rèn)檢測器在正常使用之前功能正

28、常。有關(guān)鍵盤與顯示器的更多信息,請參見第.1節(jié)“如何使用鍵盤與顯示器”、第6.2節(jié)“用戶菜單”以及第.3節(jié)“用戶功能向?qū)А薄?. 檢查濾光輪(參閱第4.3.2節(jié)“如何安裝濾光輪”)。2. 緊閉蓋子。3. 確保載板架空置,或者硬片位于正確位置。4. 打開設(shè)備開關(guān):a.顯示器將顯示啟動標(biāo)志,并出現(xiàn)“請等待”字樣。b.載板架將移入檢測器,并開始自動校準(zhǔn)。c.檢查濾光輪,并確定所有輪長的增益值。d.檢查測試系統(tǒng)是否在正常范圍之內(nèi),否則,顯示器將提示“出現(xiàn)故障”。e.載板架將回到最右側(cè)位置。5. 顯示器將顯示菜單結(jié)構(gòu),設(shè)備做好測量準(zhǔn)備。6. 確保能夠在顯示器菜單結(jié)構(gòu)中移動光標(biāo)鍵。需要更具體的檢查,請使用

29、multiskan 確認(rèn)模板(目錄編號:24072800)。4.6操作前的注意事項與限制1. 完整地閱讀該手冊,它包含了確保安全操作所需的信息。2. 確保實驗室的當(dāng)?shù)毓╇婋妷悍蟽x器背面標(biāo)簽上的額定標(biāo)準(zhǔn)。3. 在操作之前打開運輸鎖。第5章:應(yīng)用信息5 應(yīng)用信息5.1應(yīng)用實例可用于對多種光度顯微標(biāo)板進(jìn)行測量。包括免疫測定(eia,elisa)、蛋白質(zhì)化驗、雜化化驗、細(xì)胞毒性和細(xì)胞增殖化驗、細(xì)菌繁殖、酶活性測定等等。這些化驗分別以端點測定、兩點測定或動力測定為基準(zhǔn)。進(jìn)行的數(shù)據(jù)處理則由化驗類型而定。進(jìn)行定量分析時需使用校準(zhǔn)器,并建立校準(zhǔn)曲線。在進(jìn)行定性分析時,則需進(jìn)行截止值計算。下面將對不同類型的測

30、定和化驗的特點加以介紹。5.1.1定量分析檢驗結(jié)果在進(jìn)行定量測定時,需要確定樣品中被分析物的絕對濃度。一次測定中需要用到已知被分析物濃度的多個校準(zhǔn)器。根據(jù)給出的濃度和相應(yīng)的吸光度建立校準(zhǔn)曲線。再從校準(zhǔn)曲線插入樣品濃度。在建立校準(zhǔn)曲線時,要選用最為擬合(最合適)的曲線擬合模型。在多種曲線擬合中,最常用的是線性回歸、三次多項式和邏輯模型(參見第63頁)。多種應(yīng)用,如很多免疫測定、荷爾蒙測定和蛋白質(zhì)化驗,都是在定量分析的基礎(chǔ)上進(jìn)行的。5.1.2定性分析檢驗結(jié)果進(jìn)行定性分析時不計算絕對濃度。根據(jù)閾值或截止值對測得的數(shù)據(jù)進(jìn)行定性的解讀。截止值可以是固定的吸光率,也可以是根據(jù)等式進(jìn)行計算的結(jié)果。等式中使用

31、負(fù)和或正控制的吸光率。將樣品吸光率與截止值進(jìn)行比較,然后確定為負(fù)值、正值、低正值或高正值。注意,定量化驗時也可以用到截止計算。使用截止計算進(jìn)行的定性化驗廣泛應(yīng)用于篩選測定。篩選測定廣泛用于血清檢測和病毒學(xué)檢測,其中一個典型的例子是用于肝炎和愛滋病的免疫測定。5.1.3端點測定在使用端點測定法時,光度計一次性測出樣品的吸光率。在達(dá)到穩(wěn)定的吸光率平穩(wěn)段后,或是在反應(yīng)經(jīng)過適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)期已經(jīng)停止后進(jìn)行測定。反應(yīng)過程可從圖5.1中看出。根據(jù)校準(zhǔn)曲線對結(jié)果進(jìn)行校準(zhǔn)。計算校準(zhǔn)曲線(圖5.2)時,可以使用校準(zhǔn)器測定的吸光率和給定的濃度。吸收率吸收率穩(wěn)定如:10分鐘時間圖. 5.1 反應(yīng)過程為消除端點化驗中一些固

32、有的錯誤,可使用運動法,因為運動法得出的結(jié)果較為準(zhǔn)確(參見第5.1.5動力測量法)圖5.2 elisa測試校準(zhǔn)曲線5.1.4兩點測量在兩點方法中,光度計測量樣品的吸收率兩次:(a1) 反應(yīng)開始之前,以及(a2)反應(yīng)完成之后。反應(yīng)進(jìn)程見圖5.3。圖5.3 反應(yīng)進(jìn)程圖. 5.4 線性校準(zhǔn)曲線濃度單位的結(jié)果使用系數(shù)或是校準(zhǔn)曲線(圖5.4),根據(jù)吸光率變化(da = a2 - a1)計算得出的。校準(zhǔn)曲線根據(jù)已經(jīng)校準(zhǔn)溶液的吸光率變化值得出。5.1.5動力測量法在使用動力測量法時,光度計至少對樣品的吸光率進(jìn)行三次測定。測定點的數(shù)量在測定參數(shù)中確定。每次測定要經(jīng)過一定的時間間隔。必須先對運動數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,然

33、后才能進(jìn)行進(jìn)一步的計算。最常用的一種運動計算方法是坡度計算,表示為a分(運動率)。其他運動計算法包括最大速度、時間最大速度、最大吸光率、吸光率變化總量等。(參見6.4.3節(jié)動力測量法)舉例來說,動力測量法可用于研究酶的運動,以及酶的機制和特點。在elisa測定中,使用運動法具有最高的敏感度和準(zhǔn)確性。臨床化學(xué)的很多化驗,如alt、肌酸酐、磷酸酶等,都要求進(jìn)行動力測量法。根據(jù)對校準(zhǔn)曲線的計算,或者有時候根據(jù)摩爾吸光系數(shù),得出最終的濃度。備注:摩爾吸光系數(shù)常數(shù)適用于10毫米長度路徑。在微板塊井中,路徑長度是不同的,在計算時必須加以考慮。在動力測量法,即反應(yīng)率測定中,培養(yǎng)基吸光率相關(guān)性曲線的坡度變化十

34、分重要。反應(yīng)坡度可以增大(圖5.5)也可以減?。▓D5.6)。注意,在被分析的酶反應(yīng)中,通常有一段具體的滯后時間(即第一次讀數(shù)之前的延時)和反應(yīng)時間(即化驗或反應(yīng)所需的總時間)。反應(yīng)的線性部分吸光率被計算時間延時 反應(yīng)時間圖. 5.5 反應(yīng)過程增加吸光率延時 反應(yīng)時間 時間圖. 5.6 反應(yīng)過程減少5.1.5.1進(jìn)行動力測量法的優(yōu)點微板塊讀數(shù)動力測量法有以下幾個優(yōu)點:l 運動法得出的結(jié)果較為準(zhǔn)確,因為它沒有端點化驗所固定的一些錯誤。這些錯誤包括添加培養(yǎng)基和透過板塊在井中讀數(shù)之間的時間間隔、板塊上井的光學(xué)均勻性差異、以及井內(nèi)培養(yǎng)基量的差異。l 使用競爭分析法時,運動法可以增加分析的敏感性。l 運動

35、法無需使用酸等限動試劑來終止反應(yīng)。使用運動法時,無需知道何時要終止反應(yīng)。l 因為速度,但不一定是端點吸光率值,直接對應(yīng)于限定試劑的濃度,所以運動法更加準(zhǔn)確。l 運動分析可以對更為廣泛的濃度動態(tài)范圍進(jìn)行測定,所以可以減少對未知樣品進(jìn)行稀釋的需要。l 因為運動分析法可以縮短培養(yǎng)基的培養(yǎng)期,所以可以縮短分析化驗的時間。第5章:應(yīng)用信息第6章:使用內(nèi)部軟件6 使用內(nèi)部軟件6.1如何使用鍵盤與顯示器21x8的液晶顯示器劃分三個菜單區(qū)。第一級菜單或菜單條位于顯示器的第一行。第2至第8行的第1至第13字符,為第二級菜單。第三級菜單為第2至第8行的第14至第21字符。第一層菜單第二層菜單第三層菜單在空閑模式下

36、,當(dāng)前用戶程序、當(dāng)前濾光片、當(dāng)前日期與時間在第至行顯示。如果選擇了一個菜單項,該信息即從顯示中除去,可以使其返回至空置模式中。鍵盤及顯示器見圖6.1。圖. 6.1 multiskan ascent鍵盤主要鍵為 (亦可參考第 6.3節(jié)“用戶功能指南”):-四個光標(biāo)鍵 (或鍵頭鍵、方向鍵): 在菜單結(jié)構(gòu)內(nèi)移動向左移動光標(biāo)向右移動光標(biāo)向上移動光標(biāo)向下移動光標(biāo)-四個編輯鍵:在菜單結(jié)構(gòu)內(nèi)移動esc放棄當(dāng)前操作并確認(rèn)錯誤信息。prev回到上一個窗口、上一個問題、上一種模式等。next到下一個窗口、下一個問題、下一種模式等。有時用于輸入模式或參數(shù)。enter大部分情況下用于接受模式或參數(shù)。-六個功能鍵cle

37、ar刪除光標(biāo)區(qū)內(nèi)數(shù)字或字母。option從上至下或從下至上變換所顯示的字符。所有依次顯示的字符格式相同。stop有三種功能:1. 在“mode”或“prot”程序模式上終止程序進(jìn)程。儀器立即返回到空置狀態(tài)。用戶應(yīng)選擇是否在“prot、edit”模式下保存當(dāng)前的修改,者是放棄該程序定義,以建立一個新的檢驗結(jié)果(prot/new)。2. 終止閱讀進(jìn)程。這一程序中從板塊上讀取的數(shù)據(jù)將丟失。3. 終止計算進(jìn)程。用戶可以選擇保留微板塊數(shù)據(jù)。space空白鍵。print產(chǎn)生一份硬拷貝報告。根據(jù)當(dāng)前用戶程序(協(xié)議),重新開始當(dāng)前板塊進(jìn)程。start使用當(dāng)前選定的用戶程序(協(xié)議)開始微板塊閱讀。啟動閱讀和計算

38、程序。-一個數(shù)字鍵區(qū)0 9.-用于輸入數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)。6.2用戶菜單使用用戶菜單進(jìn)入程序功能。用戶菜單由三層組成。使用四個光標(biāo)鍵在菜單內(nèi)禾移動,在微軟視窗(microsoft windows)模式下,當(dāng)儀器為空置狀態(tài)時,僅顯示第一行菜單??罩脿顟B(tài)為儀器的默認(rèn)狀態(tài)。光標(biāo)顯示當(dāng)前欄時,該欄內(nèi)容顏色變深。第一層菜單包括以下模式: mode; plate; setup, 以及 prot。 prot是“協(xié)議”( protocol)的縮寫。如果還有更多的選項可供選擇,會出現(xiàn) 字符。如果用戶使用返回鍵或回車鍵選擇選項,該菜單被拉出且僅顯示被選定的選項,然后顯示子菜單。下表為用戶菜單示意圖。測量英尺操作模式結(jié)果管理

39、儀器結(jié)構(gòu)管理協(xié)議模式板塊設(shè)置protl終點 l程序l儀器 l編輯l兩點 l保存上一次結(jié)果l濾光片l新建l動力l應(yīng)用 l時間/日期l應(yīng)用 l協(xié)議l打印l模板l打印l振蕩l復(fù)制l探頭l打印圖l孵化l刪除l安全 l復(fù)制l自動保存 l登錄l刪除lenablel修改口令l熱鍵l取消l退出l默認(rèn)值l打印機 l恢復(fù)l類型l取消l邊寬l編輯l復(fù)制l新線lglpl狀態(tài)報告l孵化l恢復(fù)l取消6.3用戶功能導(dǎo)航下文介紹鍵的用途。多數(shù)鍵根據(jù)顯示的屏幕不同而具有多種用途。屏幕可以分為:主屏包含第一行的主菜單、最低行的當(dāng)前溫度設(shè)置和時間以及中間行的當(dāng)前功能概要。模板版圖該屏幕使用戶可以對模板版圖進(jìn)行定義,以確定每個腔室的

40、內(nèi)容。菜單屏幕包括第一行的主菜單和一個或多個顯示的子菜單。問題屏幕指出現(xiàn)問題需要回答的任何屏幕。清單屏幕有欄目清單的任何屏幕。錯誤屏幕顯示錯誤信息。顯示一個包括錯誤內(nèi)容的框。等式屏幕可以輸入等式以求值。各鍵的用途概述如下:鍵續(xù)表. 用途esc在模板版圖上,取消選擇。在菜單中,取消當(dāng)前菜單級。在錯誤屏幕中,取消錯誤顯示。在問題屏幕中,取消當(dāng)前輸入并保存最初結(jié)果。.next在主屏幕上,顯示下一個協(xié)議設(shè)置。在問題屏幕上,選擇下一個問題。 prev在主屏幕上,顯示上一個協(xié)議設(shè)置。在菜單屏幕上,取消當(dāng)前菜單級。在問題屏幕上,選擇上一個問題。在錯誤屏幕上,取消錯誤顯示。enter在主屏幕上,選擇當(dāng)前主菜單

41、欄。在菜單屏幕上,選擇當(dāng)前菜單欄。如果該欄旁邊顯示“”,則顯示子菜單。在模板版圖上,如果模塊未開始,則開始一個新的模塊。如果已經(jīng)開始,終止該模塊,并用當(dāng)前腔型填補。如果已經(jīng)填補,則選擇一個包含相同腔型的三角形模塊。在問題屏幕上,該鍵用于結(jié)束回答。在清單屏幕上,該鍵用于選擇當(dāng)前欄。待續(xù)鍵續(xù)表. 用途在主屏幕中,向左移動主菜單顯示或回到上一欄。將菜單移至當(dāng)前欄的左側(cè)。在模板版圖上,選擇當(dāng)前欄的左側(cè)或上一欄。如果模塊已經(jīng)選擇,則向左移一欄。在清單屏幕中,在多欄清單中,向當(dāng)前欄左側(cè)移一欄。在問題屏幕中,將光標(biāo)位置從當(dāng)前位置向左移一位。在等式屏幕中,向左移一個字符。使較長的等式全文顯示。在主屏幕中,向右

42、移動主菜單顯示或到下一欄。將菜單移至當(dāng)前欄的右側(cè)。在模板版圖上,選擇當(dāng)前欄的右側(cè)或下一欄。如果模塊已經(jīng)選擇,則向右移一欄。在清單屏幕中,在多欄清單中,向當(dāng)前欄右側(cè)移一欄。在問題屏幕中,將光標(biāo)位置從當(dāng)前位置向右移一位。在等式屏幕中,向右移一個字符。使較長的等式全文顯示。在菜單屏幕中,將菜單欄向上移動或回到上一欄。在模板版圖中,選擇當(dāng)前欄的上一欄。如果模塊已經(jīng)選擇,則向上移一行。在清單屏幕中,選擇當(dāng)前欄的前一欄。在問題屏幕中,將顯示字母從當(dāng)前字母向上移一位。在主屏幕中,使當(dāng)前菜單欄下向。在菜單屏幕中,將菜單欄向下移一欄。在模板版圖中,選擇當(dāng)前欄的下一欄。如果模擬已經(jīng)選擇,則向下移一行。在清單屏中,

43、選擇當(dāng)前欄的下一欄。在問題屏幕中,將顯示字母從當(dāng)前字母向下移一位。 1在主菜單中,選擇熱鍵協(xié)議數(shù)字1。在問題屏幕中,在輸入欄中插入數(shù)字1。在模板版圖中,修改腔型。2在主菜單中,選擇熱鍵協(xié)議數(shù)字2。在問題屏幕中,在輸入欄中插入數(shù)字2。在模板版圖中,在自動與手動之間修改。3在主菜單中,選擇熱鍵協(xié)議數(shù)字3。在問題屏幕中,在輸入欄中插入數(shù)字3。在模板版圖中,選擇下一欄數(shù)字。4在主菜單中,選擇熱鍵協(xié)議數(shù)字.4。在問題屏幕中,在輸入欄中插入數(shù)字4。5在主菜單中,選擇熱鍵協(xié)議數(shù)字5。在問題屏幕中,在輸入欄中插入數(shù)字5。6在主菜單中,選擇熱鍵協(xié)議數(shù)字6。在問題屏幕中,在輸入欄中插入數(shù)字6。7在主菜單中,選擇熱

44、鍵協(xié)議數(shù)字7。在問題屏幕中,在輸入欄中插入數(shù)字7。待續(xù)鍵續(xù)表. 用途8在主菜單中,選擇熱鍵協(xié)議數(shù)字.8。在問題屏幕中,在輸入欄中插入數(shù)字8。9在主菜單中,選擇熱鍵協(xié)議數(shù)字9。在問題屏幕中,在輸入欄中插入數(shù)字9。0在問題屏幕中,在輸入欄中插入數(shù)字0。在模板版圖中,顯示腔型。在問題屏幕中,插入一個標(biāo)點。如果不需要標(biāo)點,則按下該鍵也不起作用。-在問題屏幕中,插入減號。如果不需要減號,則按下該鍵也不起作用。start在主屏幕中,使用當(dāng)前模式開始運行。stop正在運行時,停止當(dāng)前運行。在問題屏幕中,可以終止問題框。clear在問題屏幕中,如果光標(biāo)當(dāng)前位置沒有字符,則該鍵可以起字符后退作用,使字符向左退并

45、刪除所顯示的字符。如果光標(biāo)當(dāng)前位置有字符,則該鍵可以起字符刪除作用。在模板版圖中,開始清除模塊。如果該模塊已經(jīng)開始,第二個“clrear”鍵使所選擇的模塊清空。option在問題屏幕中,在上下之間變化,根據(jù)用戶定義的方案,如單位,參數(shù)和人性化探頭。space在問題屏幕中,插入空格。如果輸入欄無需空格,則按下該鍵也不起作用。print在主屏幕中,通過當(dāng)前協(xié)議對已提取的數(shù)據(jù)進(jìn)行再處理,產(chǎn)生一份新的打印報告。字母字符要將字母字符輸入編輯框中,可使用數(shù)字字符、標(biāo)點、減號以及空格鍵。其他字符只能通過使用上下箭頭使顯示的字母在可用字符中滾動時才能輸入。字符設(shè)置下源于:前四個專用字符只能用于為限制電平命名。

46、需要數(shù)字字符時,使用上下箭頭鍵。 6.4快速測量檢驗結(jié)果 (mode)在菜單條中,mode可用于快速運行已編輯并保存過的協(xié)議(mode/protocol)。此外,不同的測量類型 (例如,終點、兩點以及動力測量)使用這種模式均能快速運行。mode還可以孵化或振蕩微型板。l 首先選擇模式l 然后按“start”鍵獲取讀數(shù)。6.4.1終點測量在終點測量方法中,使用光度計一次測量樣品的吸光率。有關(guān)終點測量的更詳細(xì)信息請參閱第5.1.3節(jié)。滾動至“mode/end point” 并按回車鍵。問題答案選擇模板與測量模式96 持續(xù)式, 96 步進(jìn)式, 384 持續(xù)式或 384 步進(jìn)式在測量前是否要振蕩模板?

47、是或否l 輸入振蕩時間(小時、分、秒)如果是最少振蕩時間為5秒。通過鍵盤輸入所需振蕩時間。l 選擇振蕩速度慢速、中速、快速慢速指8 hz以下, 中速指 12 hz以下,快速指 16 hz以上。.選擇濾光片最多可以從8個濾光片中選擇。默認(rèn)的濾光片為上一次使用的濾光片。選擇參照濾光片從最多8個濾光片中另外選擇一個,或者沒有。默認(rèn)濾光片為上一次使用的濾光片。注意:振蕩或孵化的倒計時在顯示器上有顯示。參照濾光片一般比測量濾光片略高幾微毫米。使用參照濾光片用于消除背景吸光率。參照濾光片在顯示器中出現(xiàn)在測量濾光片的右側(cè)。一旦完成問題與答案,顯示器會顯示。6.4.2兩點測量在兩點測量方法中,使用光度計兩次測

48、量樣品的吸光率。在開始反應(yīng)前一次(a1),在結(jié)束反應(yīng)后一次(a2)。有關(guān)兩點測量的更多信息請參閱第5.1.4節(jié)。滾動至“mode/two point”并按回車鍵。問題答案選擇模板及測試模式96 持續(xù)式, 96 步進(jìn)式, 384 持續(xù)式或 384 步進(jìn)式測量前是否需要振蕩模板?是或否l 輸入振蕩時間(小時、分、秒)如果是。最少振蕩時間為5秒。通過鍵盤輸入所需振蕩時間。l 選擇振蕩速度慢速、中速、快速選擇濾光片最多可從8個濾光片中選擇。選擇參照濾光片從最多8個濾光片中另選一個或者沒有。* 如果對“測量之前是否需要振蕩”這個問題的回答為否定的,則不會顯示該問題。注意:在兩點測量方法中,在協(xié)議模式(p

49、rot/new, prot/edit)中執(zhí)行時,程序能夠在兩次測量之間將模板發(fā)出。注意:在兩點測量方法中,如果需要孵化,則協(xié)議開始執(zhí)行。參閱第6.5節(jié)“如何建立新的檢驗結(jié)果 (prot/new)”。6.4.3動力測量在動力測量方法中,使用光度計至少三次測量樣品的吸光率。測量點的數(shù)量在測量參數(shù)中有規(guī)定。測量每隔一定時間進(jìn)行。有關(guān)動力測量的更多信息以及動力測量相對于其他測量方法的優(yōu)勢請參閱第5.1.5 和 5.1.5.1節(jié)滾動至“mode/kinetic” 并按回車鍵。問題答案選擇模板及測試模式96 持續(xù)式, 96 步進(jìn)式, 384 持續(xù)式或 384 步進(jìn)式測量前是否需要振蕩模板?是或否l 輸入振

50、蕩時間(小時、分、秒)如果是。最少振蕩時間為5秒。通過鍵盤輸入所需振蕩時間。l 選擇振蕩速度慢速、中速、快速輸入延遲時間(小時、分、秒)最少延遲時間等于所需振蕩時間加一秒。使用鍵盤輸入所需延遲時間。選擇濾光片最多可從8個濾光片中選擇。6.4.3.1正常(normal)的動力計算類型 正常的動力率(吸光度率斜線與時間曲線之比)通過線性回歸來計算,即使用所選吸光度率與時間段內(nèi)的所有數(shù)據(jù)點。也就是說,“正?!笔怯伤形舛茸x數(shù)的線性平方擬合(lls)計算出來的參數(shù)。滾動至“normal” 并按回車鍵。注意:如果你對“在測量前是否需要振蕩”這一問題的回答是否定的,則“在測量之間是否需要振蕩”這一問題不

51、會顯示。問題答案測量之間是否需要振蕩?是或否輸入測量間隔時間(小時、分、秒)根據(jù)所選擇的振蕩與延遲時間、模板類型以及測量方法的不同,最小的測量時間間隔也各不相同。通過鍵盤輸入所需時間。6.4.3.2 最高率計算類型如果選擇最高率計算類型,程序?qū)⑺阉鲾?shù)據(jù)以計算出每個腔室中的最高率。為了獲取最高率,將執(zhí)行一系列線性曲線擬合,用于不同的吸光度率與時間曲線扇面。第一個扇面開始于第一個數(shù)據(jù)點,第二個扇面開始于第二個數(shù)據(jù)點,依此類推,直至所有數(shù)據(jù)點均分析完畢。對所有計算進(jìn)行評估,以確定最高率。扇面中數(shù)據(jù)點的編號是由用戶規(guī)定的(為計算最高率輸入點的編號)。數(shù)據(jù)點的數(shù)量從兩個到n個(n等于所需的動力讀數(shù)減一)。滾動至“max rate” 并按回車鍵。問題答案輸入

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