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文檔簡介
1、探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動(dòng)態(tài)變化材料用具: 酵母菌貯用培養(yǎng)液、 無菌葡萄糖溶液、 血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、 蓋玻片、 移液管、 滴管、有螺旋蓋的試管、試管架、記號(hào)筆、直尺、坐標(biāo)紙、比濁計(jì)(比色計(jì)) 、顯微鏡。生長周期短,繁殖速度快,世代間不重疊。材料簡介:1. 選用酵母菌的原因:2.2. 血球計(jì)數(shù)板:1. 酵母菌是單細(xì)胞真核生物;蓋玻片 ,具體操作方式:用 滴管 從試管中取 1 滴 培養(yǎng)液到血球計(jì)數(shù)板的方格區(qū),蓋上讓培養(yǎng)液自行滲入。 (多余的培養(yǎng)液用 濾紙 吸去)計(jì)數(shù)板:五點(diǎn)取樣法1 個(gè)大方格 =16 個(gè)中方格=400 個(gè)小方格( 16 25)3. 比濁計(jì)(比色計(jì)) :測定溶解度。三. 實(shí)驗(yàn)步驟.
2、配置樣品并分組(配置 2個(gè)樣品):用記號(hào)筆 標(biāo)記 有螺旋蓋的試管 A、B;A組( 10mL無菌葡萄糖溶液 +0.1mL 酵母菌貯用培養(yǎng)液)B組( 10mL無菌葡萄糖溶液)注:酵母菌可以用 液體培養(yǎng)基 培養(yǎng)。 . 細(xì)胞計(jì)數(shù)( 抽樣檢驗(yàn)方法 )1. 擰緊試管蓋將試管 A 輕輕震蕩幾次( 目的 :使酵母菌分布均勻,減少誤差) 。2. 用滴管 從試管中取 1 滴 培養(yǎng)液到血球計(jì)數(shù)板的方格區(qū),蓋上 蓋玻片 ,讓培養(yǎng)液自行 滲入。靜待片刻, 待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部, 將計(jì)數(shù)板放在 顯微鏡 的載物 臺(tái)上,計(jì)數(shù) 一個(gè)小方格 內(nèi)的酵母菌數(shù)量。3. 試管 B 重復(fù)該步驟;4. 樣品 2 重復(fù) 2、 3。
3、1. 計(jì)數(shù)順序:左上 右上右下 計(jì)數(shù)注意事項(xiàng):細(xì)胞總數(shù)計(jì)算方法:每方格內(nèi)細(xì)胞數(shù) (細(xì)胞數(shù)方格數(shù)) 2500102500:每方格體積 =2mm 2mm 0.1mm=0.4mm2 1mL=1cm2=1000mm210000.4=2500 個(gè)(每毫升方格數(shù))10:一試管大約為 10mL。左下;2. 壓在方格線上的細(xì)胞,只計(jì) 左線 和 上線 上的細(xì)胞數(shù);3. 細(xì)胞間若有粘連(死亡) ,則數(shù)出團(tuán)塊中的每一個(gè)細(xì)胞;4. 出芽酵母 的芽體體積若超過細(xì)胞體積的 1/2 ,則算 獨(dú)立個(gè)體 。芽體 出芽生殖無性生殖5. 用比濁計(jì)測定各試管的渾濁程度(探究酵母菌數(shù)量變化與其渾濁度之間的關(guān)系)6. 記錄數(shù)據(jù),求平均值
4、時(shí)間1234567組別樣品 1樣品 2平均 . 培養(yǎng)1. 第 2天,重復(fù) 1-5 ,在坐標(biāo)紙 上標(biāo)記當(dāng)天樣品的渾濁度讀數(shù)與酵母數(shù)。用 直尺連接兩 個(gè)標(biāo)記點(diǎn),依據(jù)此線的延長線估算此后兩天的酵母數(shù)量。2. 第 4和第 7天進(jìn)行計(jì)數(shù), 每天 用比濁計(jì)測定混合度并記錄。 (也可每天計(jì)數(shù)) 注: 1. 每天計(jì)數(shù)酵母菌的 時(shí)間要固定 ;2. 若方格內(nèi)細(xì)胞數(shù)目多于 300 個(gè)或數(shù)不過來,則稀釋(詳見書P73) . 整理數(shù)據(jù),繪制種群數(shù)量變化曲線105109圖一. 酵母菌數(shù)量變化及其渾濁度的關(guān)系(橫坐標(biāo):渾濁度(0100);縱坐標(biāo):細(xì)胞數(shù))/ 天;縱坐標(biāo):細(xì)胞數(shù))圖二 . 酵母菌種群數(shù)量隨 時(shí)間 變化曲線(橫坐標(biāo):時(shí)間圖表分析: 1.A 曲線:趨于平穩(wěn)營養(yǎng)成分減少,種內(nèi)斗爭加??;下降 :細(xì)胞代謝毒素增加,使細(xì)胞死亡(死亡率出生率)
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