高中生物 第二章 克隆技術(shù) 第3節(jié) 動(dòng)物的克隆教案 浙科版選修3

1、學(xué)必求其心得，業(yè)必貴于專精第三節(jié) 動(dòng)物的克隆課標(biāo)解讀重點(diǎn)難點(diǎn)1.結(jié)合教材圖2。6，簡(jiǎn)述動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆。2.通過實(shí)例分析，了解動(dòng)物組織培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展歷程。3.分析比較細(xì)胞系及細(xì)胞株的含義。4。結(jié)合克隆概念，簡(jiǎn)述動(dòng)物的克隆培養(yǎng)法。1。動(dòng)物細(xì)胞組織培養(yǎng)、細(xì)胞核移植和動(dòng)物的克隆繁殖。（重難點(diǎn))2.細(xì)胞株系、細(xì)胞核移植和動(dòng)物的克隆繁殖。（重點(diǎn)）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和克隆的形成1。過程(如圖)幼齡動(dòng)物組織細(xì)胞懸浮液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng).2細(xì)胞株與細(xì)胞系（1)細(xì)胞系：原代培養(yǎng)細(xì)胞首次傳代時(shí)就成為細(xì)胞系.分為有限細(xì)胞系和連續(xù)細(xì)胞系兩類。（2）細(xì)胞株：從原代培養(yǎng)物中或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞稱細(xì)胞株.也分

2、為有限細(xì)胞株與連續(xù)細(xì)胞株。3克隆培養(yǎng)法把一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)為一個(gè)新的細(xì)胞群體的技術(shù)叫克隆培養(yǎng)法.這樣培養(yǎng)獲得的細(xì)胞群叫純系。4.1把動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞所用的胰蛋白酶能否換成胃蛋白酶？【提示】不能。因?yàn)槲傅鞍酌傅淖钸mph呈酸性,環(huán)境不適合。2為什么細(xì)胞系或細(xì)胞株中有些細(xì)胞可無限傳代？這些細(xì)胞為癌細(xì)胞嗎?【提示】這些細(xì)胞往往有異倍體核型,使其能夠無限傳代.能夠無限傳代的細(xì)胞有的仍保留接觸抑制現(xiàn)象，一般不是癌細(xì)胞.動(dòng)物的細(xì)胞融合技術(shù)及其應(yīng)用1.單克隆抗體的制備過程(如圖）多種雜種細(xì)胞能產(chǎn)生專一抗體的且可無限增殖的細(xì)胞群。23應(yīng)用在疾病診斷、治療與預(yù)防方面與常規(guī)抗體相比具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)。單

3、抗可作為特異探針，研究相應(yīng)抗原蛋白的結(jié)構(gòu)、細(xì)胞學(xué)分布及其功能.3單克隆抗體生產(chǎn)中兩次篩選的目的有何不同?【提示】第一次篩選為了選出雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選是從雜交瘤細(xì)胞中選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞.動(dòng)物的克隆繁殖1。過程2動(dòng)物克隆成功證明了（1)高度分化細(xì)胞經(jīng)一定技術(shù)處理,也可回復(fù)到類似受精卵時(shí)期的功能。（2)在胚胎和個(gè)體發(fā)育中，細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核（包括異源細(xì)胞核)發(fā)育的作用.3克隆的意義（1)為遺傳病的治療、優(yōu)良品種的培育等提供了重要途徑。(2)對(duì)物種的進(jìn)化、瀕危動(dòng)物的保存及對(duì)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的擴(kuò)群有重要意義.(3)豐富了人們的物質(zhì)生活。（4)縮短育種年限，提高生產(chǎn)效率。1細(xì)胞株是具有特殊性質(zhì)

4、（如病毒敏感性、生化特性）的細(xì)胞系.(）2有限細(xì)胞系易于克隆.()【提示】有限細(xì)胞系不易克隆。相反，無限細(xì)胞系易于克隆。3動(dòng)物細(xì)胞雜交可利用物理、化學(xué)方法進(jìn)行介導(dǎo)。()4制備單克隆抗體時(shí)使用的免疫細(xì)胞為t淋巴細(xì)胞。（)【提示】應(yīng)為b淋巴細(xì)胞。5“多莉的性狀與提供乳腺上皮細(xì)胞的6歲母羊完全相同.()【提示】“多莉”的性狀酷似6歲母羊。6低等動(dòng)物的全能性一般較易體現(xiàn)。（)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)分析【問題導(dǎo)思】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程如何？動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要有什么區(qū)別?什么是原代培養(yǎng)？什么是傳代培養(yǎng)?分別有什么特點(diǎn)？細(xì)胞株和細(xì)胞系有何區(qū)別與聯(lián)系？1過程原代培養(yǎng)接觸抑制傳代培養(yǎng)(1)胰酶的作用：

5、消化細(xì)胞間的蛋白（主要為纖維蛋白、層粘連蛋白、纖粘連蛋白、彈性纖維等），使組織分散成單個(gè)細(xì)胞.(2)原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng):從機(jī)體上獲取的組織，通過酶或機(jī)械方法分散成單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，在首次傳代前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖一定的時(shí)間后，由于空間不足或細(xì)胞密度過大導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)枯竭,會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，因此需要進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng),即傳代培養(yǎng)。(3)細(xì)胞株與細(xì)胞系含義：條件合適時(shí)，能連續(xù)傳代的細(xì)胞稱為細(xì)胞系.通過一定的選擇或純化方法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞稱為細(xì)胞株，細(xì)胞系細(xì)胞的遺傳物質(zhì)若發(fā)生了改變，具有癌細(xì)胞的特點(diǎn).細(xì)胞株一般具有恒定的染色體組型、同工酶類型、病毒敏感

6、性和生化特性等。圖示：(3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制.當(dāng)細(xì)胞癌變后，就失去接觸抑制的特點(diǎn)，而無限增殖。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)果1連續(xù)細(xì)胞系：能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系。是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系，大多數(shù)具有異倍體核型。有的是惡性細(xì)胞系，具有異體致瘤性；有的連續(xù)細(xì)胞系獲得了不死性，但保留接觸抑制現(xiàn)象，不致癌。2有限細(xì)胞系：不能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系。二倍體細(xì)胞一般為有限細(xì)胞系。3連續(xù)細(xì)胞株:可連續(xù)多次傳代的細(xì)胞株.4有限細(xì)胞株：可傳代次數(shù)有限的細(xì)胞株。2應(yīng)注意的問題(1

7、)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可以分散成單個(gè)細(xì)胞，也可以用細(xì)胞群（團(tuán)）、組織塊培養(yǎng)。分散成單個(gè)細(xì)胞后培養(yǎng)，細(xì)胞易獲得所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其代謝廢物容易排出；同時(shí)，分散成單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)，可使得在細(xì)胞水平操作的其他技術(shù)得以實(shí)現(xiàn)。(2)為了保證細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)滿足其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生長(zhǎng)因子的供給，培養(yǎng)基中添加一定量的血清，因?yàn)檠逯泻械鞍踪|(zhì)、氨基酸、葡萄糖、激素及一些未知的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。(3)由于大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜ph為7。27。4，而胃蛋白酶發(fā)揮活性的最適ph為2。0左右，因此不能使用胃蛋白酶使細(xì)胞分散開。3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用（1）生產(chǎn)病毒疫苗、單克隆抗體、干擾素等。（2)利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中的細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制的

8、特點(diǎn),可用燒傷病人自己的健康皮膚細(xì)胞培養(yǎng)出大量的自身薄層皮膚細(xì)胞,以供植皮所需。（3）培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞用于檢測(cè)有毒物質(zhì),判斷物質(zhì)的毒性。區(qū)分原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)一般均需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行胰蛋白酶分散處理，區(qū)分兩種“培養(yǎng)”的關(guān)鍵是看用胰蛋白酶處理的對(duì)象。1第一次：用胰蛋白酶對(duì)剪碎的動(dòng)物組織進(jìn)行處理，分散后培養(yǎng)，即為原代培養(yǎng).2第二次：細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制，用胰蛋白酶使其從瓶壁上脫離下來，分散到多個(gè)培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng)。某研究小組進(jìn)行藥物試驗(yàn)時(shí)，以動(dòng)物肝細(xì)胞為材料,測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性。供培養(yǎng)的細(xì)胞有甲、乙兩種，甲細(xì)胞為肝腫瘤細(xì)胞、乙細(xì)胞為正常肝細(xì)胞。請(qǐng)回答下列有關(guān)動(dòng)

9、物細(xì)胞培養(yǎng)的問題。(1)將數(shù)量相等的甲細(xì)胞和乙細(xì)胞分別置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，培養(yǎng)液及其他培養(yǎng)條件均相同。一段時(shí)間后，觀察到甲細(xì)胞數(shù)量比乙細(xì)胞數(shù)量_。（2)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量血清,其原因是_。細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%co2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,co2的作用是_。(3)在兩種細(xì)胞生長(zhǎng)過程中，當(dāng)乙細(xì)胞鋪滿瓶壁時(shí)，其生長(zhǎng)_.藥物試驗(yàn)需要大量細(xì)胞，兩種細(xì)胞頻繁傳代，甲細(xì)胞比乙細(xì)胞可以傳代的次數(shù)更_。若用動(dòng)物的肝臟組織塊制備肝細(xì)胞懸液，需要_處理。(4）為了防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)菌的污染；可向培養(yǎng)液中加入適量的_?！緦忣}導(dǎo)析】由題干可獲取的信息有:(1）試驗(yàn)材料是肝細(xì)胞。（2）肝細(xì)胞有兩種，一

10、種是肝腫瘤細(xì)胞,一種是正常的肝細(xì)胞.解答本題時(shí)需明確動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件及應(yīng)用，再結(jié)合每小題作答?！揪v精析】癌細(xì)胞具有無限增殖的特點(diǎn)，故相同培養(yǎng)條件下，肝腫瘤細(xì)胞數(shù)量多于正常肝細(xì)胞數(shù)量。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需提供無菌環(huán)境，如向培養(yǎng)液中加入適量的抗生素可防止細(xì)菌的污染;需提供一定的營(yíng)養(yǎng)，如向培養(yǎng)基中加入適量血清，以便補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)；需提供一定的氣體環(huán)境,如向恒溫培養(yǎng)箱中加入5的co2,目的是維持培養(yǎng)液的ph?！敬鸢浮?1）多(2)血清可以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)維持培養(yǎng)液的ph(3)停止多胰蛋白酶 （4)抗生素下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是（）a培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁

11、上可形成多層細(xì)胞b克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)過程中多數(shù)細(xì)胞的基因型會(huì)發(fā)生改變c二倍體細(xì)胞的傳代培養(yǎng)次數(shù)通常是無限的d惡性細(xì)胞系的細(xì)胞可進(jìn)行傳代培養(yǎng)【審題導(dǎo)析】解答此題的關(guān)鍵必須明確二倍體核型的體細(xì)胞為有限細(xì)胞系，而異倍體核型細(xì)胞如惡性細(xì)胞系的細(xì)胞屬連續(xù)細(xì)胞系?！揪v精析】有接觸抑制的細(xì)胞只能形成單層細(xì)胞；克隆培養(yǎng)法培養(yǎng)的細(xì)胞可以是細(xì)胞株(遺傳物質(zhì)并未改變）；二倍體細(xì)胞形成的是有限細(xì)胞系,傳代次數(shù)有限；惡性細(xì)胞系為無限細(xì)胞系可以傳代培養(yǎng).【答案】d動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物【問題導(dǎo)思】動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的原理和過程是怎樣的？克隆動(dòng)物的應(yīng)用前景是怎樣的？體細(xì)胞核移植技術(shù)屬于百分之百的克隆嗎？1動(dòng)物核移植

12、的概念將一種動(dòng)物的細(xì)胞核移植到去核的卵母細(xì)胞中，并發(fā)育成新個(gè)體的方式。2核移植過程3圖例：4核移植特點(diǎn)主要是指不同種的細(xì)胞的拆合，新個(gè)體主要具備供核親本的遺傳特性。5動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用（1)畜牧生產(chǎn)方面：培育良種動(dòng)物。(2)保護(hù)瀕危物種.(3)醫(yī)藥衛(wèi)生方面：生產(chǎn)醫(yī)用蛋白、器官和組織等。6動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題（1)成功率低。（2）克隆技術(shù)的各個(gè)環(huán)節(jié)有待進(jìn)一步改進(jìn)。（3)克隆動(dòng)物存在健康問題，表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷?？寺?dòng)物絕大部分dna來自于供體細(xì)胞核，但其核外還有少量的dna，即線粒體中的dna。所以，用教材中所述的方法克隆的動(dòng)物不是對(duì)供核動(dòng)物的完全相同的復(fù)制。此外，即便動(dòng)物的

13、遺傳物質(zhì)完全相同，但動(dòng)物的一些行為、習(xí)性的形成與所處環(huán)境有很大關(guān)系,核供體動(dòng)物生活的環(huán)境與克隆動(dòng)物所生活的環(huán)境不會(huì)完全相同，其形成的行為、習(xí)性也不可能和核供體動(dòng)物完全相同,從這一角度看，克隆動(dòng)物不會(huì)是核供體動(dòng)物100的復(fù)制?！爸委熜钥寺　睂⑹侨伺咛ジ杉?xì)胞（簡(jiǎn)稱es細(xì)胞)造福于人類的一種非常重要的途徑。應(yīng)用人胚胎干細(xì)胞進(jìn)行“治療性克隆”研究的技術(shù)途徑包括以下幾個(gè)步驟:首先取病人的體細(xì)胞核,移植到去核的成熟受體卵母細(xì)胞中；在早期胚胎形成后，從中分離獲得es細(xì)胞；對(duì)es細(xì)胞進(jìn)行基因修飾和定向分化研究,將定向分化后的細(xì)胞移植給病人。進(jìn)行核移植的目的并不是用于克隆人，而是希望通過對(duì)es細(xì)胞進(jìn)行分離培養(yǎng)、

14、定向分化等處理后，進(jìn)一步獲得再造的人體組織或器官.請(qǐng)根據(jù)材料回答下列問題。(1)人類“治療性克隆”屬于動(dòng)物細(xì)胞工程的_技術(shù)。(2)科學(xué)家為何要將患者的體細(xì)胞核植入去核的卵母細(xì)胞中，而不直接用體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)?_。（3)“治療性克隆”的結(jié)果說明高度分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核仍然具有_。相同的胚胎干細(xì)胞，“克隆”的結(jié)果各種各樣,如有的是胰島細(xì)胞，有的是血細(xì)胞，有的是心肌細(xì)胞，究其本質(zhì)原因是基因_的結(jié)果。(4)克隆的器官在給自身移植方面的主要優(yōu)點(diǎn)是_.【思維導(dǎo)圖】解答此題的思維流程如下：【精講精析】（1）依據(jù)“治療性克隆”的步驟分析,可知此技術(shù)屬于動(dòng)物細(xì)胞工程的細(xì)胞核移植技術(shù)。（2）動(dòng)物體細(xì)胞全能性隨著

15、分化程度的提高而受到限制，而卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有促使其全能性表達(dá)的物質(zhì)。(3）“治療性克隆”可利用基因選擇性表達(dá)這一特點(diǎn)分化出各種組織或器官，同時(shí)此技術(shù)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。（4）自身移植的最大優(yōu)點(diǎn)是沒有免疫排斥反應(yīng)?！敬鸢浮?（1)動(dòng)物細(xì)胞核移植（2）體細(xì)胞核在體細(xì)胞中不能表達(dá)全能性，而卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可以為其提供表達(dá)全能性的環(huán)境（3)全能性選擇性表達(dá)(4）沒有免疫排斥反應(yīng)動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體【問題導(dǎo)思】動(dòng)物細(xì)胞融合的原理、意義和應(yīng)用分別是什么?單克隆抗體制備應(yīng)用什么生物技術(shù)？雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體的最大優(yōu)點(diǎn)是什么？1動(dòng)物細(xì)胞融合(1)動(dòng)物細(xì)胞融合是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成

16、一個(gè)細(xì)胞的過程。融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。（2)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似，常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電融合等.（3）動(dòng)物細(xì)胞融合的意義：克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性，成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。2單克隆抗體及其制備過程與原理(1)單克隆抗體的概念由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖,形成細(xì)胞群（稱為克隆)，由這樣的細(xì)胞群產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體稱為單克隆抗體。(2）制備單克隆抗體的基本方法(3）制備過程中要經(jīng)過兩次篩選第一次篩選：b淋巴細(xì)胞

17、與骨髓瘤細(xì)胞融合之后,兩兩融合有三種情況，b淋巴細(xì)胞與b淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合、b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合。而只有b淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。第二次篩選：在雜交瘤細(xì)胞中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞.(4)單克隆抗體的應(yīng)用單抗作為探針，研究相應(yīng)抗原蛋白的結(jié)構(gòu)，細(xì)胞學(xué)分布及其功能等。1血清抗體與單克隆抗體的區(qū)別(1)血清抗體：產(chǎn)量低、種類多、純度差、特異性差、反應(yīng)不夠靈敏。（2)單克隆抗體：化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)、反應(yīng)靈敏。2體細(xì)胞雜交與有性雜交的不同體細(xì)胞雜交為無性雜交，雜交后細(xì)胞染色體數(shù)目可能加倍或增加，如雜交瘤細(xì)胞染色體為效應(yīng)b細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞染

18、色體數(shù)目之和。而有性雜交前后染色體數(shù)目不變.下圖表示單克隆抗體的制備過程，請(qǐng)回答下列問題.（1)圖中小鼠需經(jīng)過_才能用于單克隆抗體生產(chǎn).(2）細(xì)胞a具有產(chǎn)生_的功能。細(xì)胞b的突出特點(diǎn)是_。誘導(dǎo)a、b細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑通常是_或聚乙二醇。(3）若細(xì)胞a的基因型為hh，細(xì)胞b的基因型為ss，生產(chǎn)的目標(biāo)應(yīng)是基因型為_的細(xì)胞。在兩兩融合后的眾多細(xì)胞中,基因的組合類型還可能有_。是否有可能出現(xiàn)三個(gè)或四個(gè)細(xì)胞融合在一起的現(xiàn)象?_?？赏ㄟ^特定的_培養(yǎng)基將所需的融合細(xì)胞篩選出來。(4）培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是,還含有_。細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長(zhǎng),隨著細(xì)胞的增

19、多，需要定期地用_處理使細(xì)胞從瓶壁上脫離下來，以便于分裝到更多的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。(5)單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，具有_等特點(diǎn)。單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合制成“生物導(dǎo)彈”,可明顯減少用藥劑量和毒副作用,原因是_?！舅季S導(dǎo)圖】解答此題的思維流程如下： 【精講精析】b淋巴細(xì)胞能夠產(chǎn)生特異性抗體，但不能在體外大量增殖，骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖但不能產(chǎn)生抗體，如果將二者融合成雜交瘤細(xì)胞，則不僅能夠在體外大量增殖，也能產(chǎn)生與相應(yīng)的免疫抗原特異性結(jié)合的抗體。通過特定的選擇性培養(yǎng)基將所需的雜交瘤細(xì)胞篩選出來,進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，便可大量制備單克隆抗體。單抗具有特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn),通過其良好的導(dǎo)航功能，可攜帶抗

20、癌藥物準(zhǔn)確作用于癌細(xì)胞，不僅減少了用藥劑量，而且也可最大限度地降低藥物的毒副作用?！敬鸢浮浚?)特定抗原免疫（2）抗體能夠無限增殖滅活的(仙臺(tái))病毒（3)hhsshhhh、ssss是選擇（4)動(dòng)物血清胰蛋白酶（5）特異性強(qiáng)，靈敏度高,并可大量生產(chǎn)經(jīng)過癌細(xì)胞抗原免疫產(chǎn)生的單克隆抗體能夠與癌細(xì)胞特異性結(jié)合如圖是制備分泌抗x(h1n1流感病毒)抗體的過程，根據(jù)圖解回答問題：（1)給小鼠注射抗原的目的是_。（2)在單克隆抗體制備過程中之所以選用b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_的特性。(3）由圖中可看出，單克隆抗體制備過程運(yùn)用了_和_的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段.（4）在動(dòng)物細(xì)胞融合

21、過程中，需要將所選取的組織細(xì)胞離散開，以利于細(xì)胞融合，可用_處理離體組織細(xì)胞使之分散。（5）請(qǐng)根據(jù)以下信息，設(shè)計(jì)一方法(不考慮機(jī)械方法),從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞。已知細(xì)胞合成dna有d和s兩條途徑，其中d途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種dna的合成途徑,但一般不分裂增殖.鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管只有d途徑，但能不斷分裂增殖,將這兩種細(xì)胞在試管中混合，加入聚乙二醇促融，獲得雜種細(xì)胞。方法:_.原理：_。【審題導(dǎo)析】解答此題應(yīng)從以下兩點(diǎn)入手考慮：（1)由圖示的“融合”,“培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞”可知制備單抗過程涉及的生物技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等。(2)由于氨基嘌呤對(duì)d途徑的阻斷，使雜交瘤

22、細(xì)胞沿s途徑進(jìn)行而得以篩選?！揪v精析】（1）根據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理,為獲得特定抗體，用特定抗原刺激，小鼠體內(nèi)便可產(chǎn)生能產(chǎn)生特定抗體的漿細(xì)胞，即可獲得相應(yīng)的b淋巴細(xì)胞.(2）雜交瘤細(xì)胞具有兩種細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，既能產(chǎn)生特定抗體，又能無限增殖。（3）從圖中看出，單克隆抗體技術(shù)實(shí)際是應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。(4）細(xì)胞融合時(shí)是單個(gè)細(xì)胞和單個(gè)細(xì)胞的融合，為將細(xì)胞從動(dòng)物組織中離散,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。(5）據(jù)題干信息可知，可在培養(yǎng)液中加氨基嘌呤,使d合成途徑阻斷，僅有d合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞不能增殖，而b淋巴細(xì)胞一般不增殖，但b淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種

23、細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的s途徑合成dna而增殖?！敬鸢浮?1）獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的b淋巴細(xì)胞(2)既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體(3)動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（4)胰蛋白酶或膠原蛋白酶(5）方法：培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤，收集增殖的細(xì)胞原理:加入氨基嘌呤后，使d合成途徑阻斷，僅有d合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，但人的淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用b淋巴細(xì)胞中的s途徑合成dna而增殖本 課 知 識(shí) 小 結(jié)網(wǎng) 絡(luò) 構(gòu) 建結(jié) 論 語 句1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)包括原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩個(gè)過程,培養(yǎng)的結(jié)果是獲得細(xì)胞株和細(xì)胞系。2克隆培養(yǎng)法是指把一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)為一個(gè)群體，培養(yǎng)條件有添加

24、血清、激素、無菌、無毒、co2氣體環(huán)境等。3單克隆抗體制備應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞克隆等生物技術(shù)，雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖。4細(xì)胞核移植是指利用一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核來取代另一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核、形成一個(gè)重建的“合子”。5動(dòng)物體細(xì)胞克隆的成功證明了高度分化的體細(xì)胞的細(xì)胞核可回復(fù)到類似受精卵時(shí)期的功能，細(xì)胞質(zhì)具有調(diào)控細(xì)胞核發(fā)育的作用。1下列關(guān)于細(xì)胞株與細(xì)胞系的敘述，不正確的是（)a在傳代培養(yǎng)時(shí)，必須用胰蛋白酶處理附壁生長(zhǎng)的細(xì)胞，使之成為單細(xì)胞b傳代培養(yǎng)的原因是培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞密度過大或代謝消耗引起營(yíng)養(yǎng)枯竭 c連續(xù)細(xì)胞系是指發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，失去了接觸抑制的現(xiàn)象d細(xì)胞株一般具有恒

25、定的染色體組型，同工酶類型、病毒敏感性和生化特性等。 【解析】細(xì)胞系可泛指一般可能傳代的細(xì)胞.其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系，不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。連續(xù)細(xì)胞系有的仍保留接觸抑制的現(xiàn)象,不是癌細(xì)胞?！敬鸢浮縞2英國(guó)紐卡斯?fàn)柕纳飳W(xué)家卡里姆調(diào)制出一種化學(xué)物質(zhì)和維生素構(gòu)成的“雞尾酒，在這種“雞尾酒”的培養(yǎng)環(huán)境里，人體干細(xì)胞能轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓木?，整個(gè)培養(yǎng)過程是在含有co2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行的。下列有關(guān)“雞尾酒”的成分和培養(yǎng)過程的敘述不正確的是()a產(chǎn)生的精細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞b該培養(yǎng)過程在含有co2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行的主要目的是滿足細(xì)胞對(duì)co2的需求c該“雞尾酒”的化學(xué)成分中應(yīng)有氨基酸

26、、葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)成分和激素等生命活動(dòng)調(diào)節(jié)的物質(zhì)d該實(shí)驗(yàn)不能證明動(dòng)物細(xì)胞具有全能性【解析】精細(xì)胞不再具有分裂能力，屬于高度分化的細(xì)胞；該過程在含有co2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行是為了維持培養(yǎng)液ph的相對(duì)穩(wěn)定；該“雞尾酒中含有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需要的各種化學(xué)成分;細(xì)胞具有全能性是指細(xì)胞可以發(fā)育成一個(gè)完整的個(gè)體，此實(shí)驗(yàn)并沒有證明細(xì)胞具有全能性.【答案】b3下列動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中屬于原代培養(yǎng)的是（）a用胰蛋白酶使組織分散成單個(gè)細(xì)胞的過程b從機(jī)體取得細(xì)胞后立即進(jìn)行培養(yǎng)的過程c出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象后取下的細(xì)胞的培養(yǎng)過程d哺乳動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)基中的懸浮生長(zhǎng)過程【解析】原代培養(yǎng)是最初的細(xì)胞培養(yǎng)，即還沒分瓶培養(yǎng)前的細(xì)胞培養(yǎng)?！敬鸢浮?/p>

27、b4某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí)，列表比較了動(dòng)物、植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容，你認(rèn)為錯(cuò)誤的是（）比較內(nèi)容植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程a理論基礎(chǔ)細(xì)胞的全能性細(xì)胞增殖b融合方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法化學(xué)方法、生物方法c典型應(yīng)用人工種子、種間雜種植物單克隆抗體的制備d培養(yǎng)基區(qū)別蔗糖是離體組織賴以生長(zhǎng)的成分動(dòng)物血清不可缺少【解析】植物細(xì)胞工程常用的融合方法有物理方法、化學(xué)方法；動(dòng)物細(xì)胞工程常用的融合方法有物理方法、化學(xué)方法、生物方法(滅活的病毒）.【答案】b5如圖表示單克隆抗體的制備過程，下列敘述不正確的是()a圖中有一處明顯錯(cuò)誤b中培養(yǎng)基應(yīng)加入選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞dna復(fù)制的物質(zhì)c中的篩選是為了獲得能產(chǎn)生多種抗體的雜交