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打靶載體打靶載體(targeting vector)。 如何使外源基因能定點(diǎn)整合于靶基因上呢如何使外源基因能定點(diǎn)整合于靶基因上呢?根據(jù)根據(jù)DNA同源重同源重 組的原理,導(dǎo)入的外源基因必須和靶基因有一定的同源序列。因此,組的原理,導(dǎo)入的外源基因必須和靶基因有一定的同源序列。因此, 外源基因?qū)肭氨仨毥?jīng)過精巧的構(gòu)建,經(jīng)構(gòu)建的外源基因稱為外源基因?qū)肭氨仨毥?jīng)過精巧的構(gòu)建,經(jīng)構(gòu)建的外源基因稱為打靶打靶 載體載體(targeting vector)。 78 neo 8 9 6789 78 neo 8 96 打靶載打靶載 體體 野生野生ES細(xì)細(xì) 胞胞 突 變突 變 E S 細(xì)胞細(xì)胞 通過同源重組將外源基因?qū)牍潭ㄎ稽c(diǎn),從而有目的的突變內(nèi)源基 因,圖中單線表示內(nèi)含子,框圖表示外顯子 78 neo 89 6789 78 neo 89 6 打靶載體打靶載體 野生野生ES細(xì)胞細(xì)胞 突變突變ES細(xì)胞細(xì)胞 導(dǎo)入外源基因的陽性導(dǎo)入外源基因的陽性ES細(xì)胞的篩選細(xì)胞的篩選 123Hsv-tkneor G418 GANC Loxp 位點(diǎn)位點(diǎn) Cre loxploxp 兩個(gè)兩個(gè)loxp位點(diǎn)之間的基因被切除位點(diǎn)之間的基因被切除 gene Cre loxp loxpGene Gene promoter promoterloxp loxp Duke University Labo
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