河北省邯鄲市高中生物專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題2土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)學(xué)案（無答案）新人教版選修1

1、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)知識(shí):了解土壤中能分解尿素的細(xì)菌能力：學(xué)會(huì)用實(shí)驗(yàn)對(duì)分解尿素的細(xì)菌的計(jì)數(shù)的能力情感：聯(lián)系生活實(shí)際，使學(xué)生對(duì)尿素的細(xì)菌形成一定的感性認(rèn)識(shí)。一、基礎(chǔ)知識(shí) 1篩選菌株（1）實(shí)驗(yàn)室中微生物篩選的原理：人為提供有利于 生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、ph等），同時(shí) 或 其他微生物生長. （2)選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，將允許 種類的微生物生長，同時(shí) 或 其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。（3）配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的.例如,培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng) 微生物；培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選擇培養(yǎng) 的微

2、生物。加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。 2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目（1)測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法有 和 。(2）稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目的原理當(dāng)樣品的 足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè) 。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。此外，測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法還有 直接計(jì)數(shù)。 3設(shè)置對(duì)照設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的 。例如為了排除培養(yǎng)基是否被雜菌污染了，需以培養(yǎng) 的培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)關(guān)于土壤中某樣品細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)操作步驟如下： 1

3、取樣：從肥沃、濕潤的土壤中取樣。應(yīng)先 3 cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的 中。2制備 ：準(zhǔn)備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基將菌液稀釋相同的倍數(shù)，在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)目應(yīng)明顯 選擇培養(yǎng)基上的數(shù)目，因此，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基可以作為 ,用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用。3微生物的 與觀察 將10g土樣加入盛有90 ml無菌生理鹽水的錐形瓶中(體積為250 ml),充分搖勻，吸取上清液 ，轉(zhuǎn)移至盛有 的生理鹽水的無菌大識(shí)管中，將土樣以1、101、102 依次等比稀釋至107稀釋度，并按照由107103稀釋度的順序分別吸取 進(jìn)行平板涂布操作.每個(gè)稀釋度下需要3個(gè)選擇培養(yǎng)基、1

4、個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基。 將涂布好的培養(yǎng)皿放在30溫度下培養(yǎng)，及時(shí)觀察和記錄。 挑選選擇培養(yǎng)基中不同形態(tài)的菌落接入含 培養(yǎng)基的斜面中，觀察能否產(chǎn)生如教材中圖2-lo的顏色反應(yīng)。 4細(xì)菌的計(jì)數(shù) 當(dāng)菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)，選取菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。在同一稀釋度下,至少對(duì)3個(gè)平板進(jìn)行重復(fù)計(jì)數(shù),然后求出 ，并根據(jù)平板所對(duì)應(yīng)的稀釋度計(jì)算出樣品中細(xì)菌的數(shù)目。三：思考與討論(1）如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)？（2）為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎?課堂檢測(cè)1要將從土壤中提取的自生固氮菌與其他的細(xì)菌分離出來,應(yīng)將它

5、們接種在（） a加入氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上 b不加入氮源和不加殺菌劑的培養(yǎng)基上c加入氮源，不加殺菌劑的培養(yǎng)基上 d不含氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上2將圓褐固氮菌接種到徹底滅菌的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過一段時(shí)間培養(yǎng)，就能夠得到( ）a菌絲 b無一定形態(tài)的群體 c單個(gè)細(xì)菌 d菌落3在接種操作的過程中，不正確的是( )a要將接種環(huán)灼燒滅菌 b取下棉塞后要將試管口灼燒滅菌c將接種環(huán)伸入試管內(nèi)，先接觸長菌多的部位 d接種后還要將管口滅菌加塞4高壓蒸氣滅菌的原理是（ ）a高壓使細(xì)菌dna變性 b高壓使細(xì)菌蛋白質(zhì)凝固變性 c高溫燙死細(xì)菌 d高溫使細(xì)菌dna變性5、尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培養(yǎng)基時(shí)（ ）a葡萄糖

6、在培養(yǎng)基中含量越多越好b尿素在培養(yǎng)基中含量越少越好c尿素分解菌有固氮能力，故培養(yǎng)基中尿素為無機(jī)氮d尿素分解菌無固氮能力，故培養(yǎng)基中的尿素為化合態(tài)氮6. 用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果,正確的是（ ）a涂布了一個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230b涂布了兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是215和260，取平均值238c涂布了三個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是21、212和2墨6，取平均值163d涂布了三個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是2l0、240和250，取平均值233 7.下列關(guān)于細(xì)菌的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）a硝化細(xì)菌能以nh3作為氮源和能源物質(zhì)b某些細(xì)菌可

7、以利用光能因定co2合成有機(jī)物c生長因子是某些細(xì)菌生長過程中需要額外補(bǔ)充的營養(yǎng)物質(zhì)d含伊紅和美藍(lán)試劑的培養(yǎng)基不能用來簽別牛奶中的大腸桿菌8。列說法不正確的是( ）a科學(xué)家從7080熱泉中分離得到耐高溫的taqdna聚合酶b統(tǒng)計(jì)某一稀釋度的5個(gè)平板的菌落數(shù)依次為m1、m2、m3、m4、m5，以m3作為該樣品菌落數(shù)估計(jì)值c設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度d同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量最大,種類最多9尿素分解菌能分解尿素是因?yàn)榭梢院铣蒩尿素酶 b脲酶 c蛋白酶 d 細(xì)菌酶10配制的培養(yǎng)基成分是:纖維素粉、nan03、na2hp04、kh2

8、p04、mgs04、kcl、酵母膏、水解酪素,該培養(yǎng)基能使下面哪種微生物大量繁殖 ( ）a酵母菌 b自生固氮菌 c各種細(xì)菌 d纖維素分解菌11下列說法正確的是a同一種物質(zhì)不可能既作碳源又作氮源 b凡是碳源都能提供能量c除水以外的無機(jī)物僅提供無機(jī)鹽 d無機(jī)氮源也能提供能量12.要將從土壤中提取的自生固氮菌與其他細(xì)菌分離開來，應(yīng)將它們接種在a含五大類營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上 b加入某種指示劑的鑒別培養(yǎng)基上c含蛋白胨等營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上 d無氮的選擇培養(yǎng)基上13。能夠測(cè)定樣品活菌數(shù)的方法是（ ）a稀釋涂布平板法 b直接計(jì)數(shù)法 c重量法 d比濁法14.下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述,其中錯(cuò)誤

9、的是a用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板b取104、105 、106倍的土壤稀釋液和無菌水各01ml，分別涂布于各組平板上c將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，370c恒溫培養(yǎng)24-48小時(shí)d確定對(duì)照組無菌后，選擇菌落數(shù)在300以上的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)二、填空15某化工廠的污水池中,含有一種有害的、難于降解的有機(jī)化合物a，研究人員用化合物a、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功地篩選到能高效降解化合物a的細(xì)菌（目的菌)。實(shí)驗(yàn)的主要步驟如下圖所示.請(qǐng)分析回答問題:培養(yǎng)基中加入化合物a的目的是篩選 ，這種培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。“目的菌”生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的 ,實(shí)驗(yàn)需

10、要振蕩培養(yǎng)，由此推測(cè)“目的菌的代謝類型是 。培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物a含量 的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使“目的菌”的數(shù)量 。轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用 的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。若研究“目的菌”的生長規(guī)律，將單個(gè)菌落進(jìn)行液體培養(yǎng)，可采用 的方法進(jìn)行計(jì)數(shù)，以時(shí)間為橫坐標(biāo)，以 為縱坐標(biāo)，繪制生長曲線.實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行 處理后，才能倒掉。16。分析下面培養(yǎng)基的配方：kh2po4、na2hpo4、mgso47h20、葡萄糖、尿素、瓊脂。請(qǐng)回答:(1）在該培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別 和 （2）想一想這種培養(yǎng)基對(duì)微生物是否具有選擇作用?如果

11、具有,又是如何進(jìn)行選擇的？（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件.由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、變異類型容易選擇、_、_等優(yōu)點(diǎn),因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)材料。（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中,為防止雜菌污染，需對(duì)培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行_（消毒、滅菌）;操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和_；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能_。（3）若用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)大腸桿菌活菌的個(gè)數(shù)，要想使所得估計(jì)值更接近實(shí)際值,除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測(cè)樣品稀釋的_。（4）通常，對(duì)獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對(duì)細(xì)菌進(jìn)行初步的_.(5

12、)培養(yǎng)大腸桿菌時(shí)，在接種前需要檢測(cè)培養(yǎng)基是否被污染。對(duì)于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測(cè)方法是_。（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。尊敬的讀者：本文由我和我的同事在百忙中收集整編出來，本文稿在發(fā)布之前我們對(duì)內(nèi)容進(jìn)行仔細(xì)校對(duì)，但是難免會(huì)有不盡如人意之處，如有疏漏之處請(qǐng)指正，希望本文能為您解開疑惑,引發(fā)思考。文中部分文字受到網(wǎng)友的關(guān)懷和支持，在此表示感謝！在往后的日子希望與大家共同進(jìn)步，成長。this article is collected and compiled by my colleagues and i in our busy schedule. we proofread the content carefully before the release of this article, but it is inevitable that there will be some unsatisfactory points. if there are omissions, please corr