生物產(chǎn)品分析與檢驗(yàn)

1、 容量瓶的容量定義為：在20時(shí)，充滿至 刻度線所容納水的體積，以毫升計(jì)。調(diào)定彎液 面的正確方法是：調(diào)節(jié)液面使刻度線的上邊緣 與彎液面的最低點(diǎn)水平相切，視線應(yīng)在同一水 平面。 使用容量瓶時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)： 1、檢查瓶口是否漏水： 加水至刻線，蓋上瓶塞顛倒10次（每次顛倒過(guò)程 中要停留在倒置狀態(tài)l0s）以后不應(yīng)有水滲出（可用濾 紙片檢查）。 2.洗滌的方法一般是先用自來(lái)水洗滌，蒸餾 水洗凈后就可以了，污染嚴(yán)重的可用鉻酸洗液 洗滌，然后用自來(lái)水和純水洗凈。 3.用固體物質(zhì)（基準(zhǔn)試劑或被測(cè)樣品）配 制溶液時(shí)，然后用自來(lái)水和純水洗凈。應(yīng)先在 燒杯中將固體物質(zhì)完全溶解后再轉(zhuǎn)移至容量瓶 中。 燒杯中的溶液倒

2、盡后，燒杯不要直接離開(kāi)攪棒， 而應(yīng)在燒杯扶正的同時(shí)使杯嘴沿?cái)嚢羯咸?2cm，隨 后燒杯再離開(kāi)攪棒，這樣可避免杯嘴與攪棒之間的一 滴溶液流到燒杯外面。 然后再用少量水（或其他溶劑）測(cè)洗燒杯34 次，每次用洗瓶或滴管沖洗杯壁和攪棒，按同樣的方 法移入瓶中。 當(dāng)溶液達(dá)2/3容量時(shí)，應(yīng)將容量瓶沿水平方向輕輕 擺動(dòng)幾周以使溶液初步混勻。 v再加水至刻線以下約1cm，等待12min； v最后用滴管從刻線以上1cm以內(nèi)的一點(diǎn)沿頸 壁緩緩加水至彎液面最低點(diǎn)與標(biāo)線上邊緣水 平相切； v隨即蓋緊瓶塞，左手捏住瓶頸上端，食指壓 住瓶塞，右手三指托住瓶底，將容量瓶顛倒 15次以上，每次顛倒時(shí)都應(yīng)使瓶?jī)?nèi)氣泡升到 頂部；

3、 v倒置時(shí)應(yīng)水平搖動(dòng)幾周，如此重復(fù)操作，可 使瓶?jī)?nèi)溶液充分混勻。 v100mL以下的容量瓶，可不用右手托瓶，一 只手抓住瓶頸及瓶塞進(jìn)行顛倒和搖動(dòng)即可。 v對(duì)玻璃有腐蝕作用的溶液，如強(qiáng)堿溶液，不 能在容量瓶中久貯，配好后應(yīng)立即轉(zhuǎn)移到其 他容器（如塑料試劑瓶）中密閉存放。 不能在容量瓶里進(jìn)行溶質(zhì)的溶解 容量瓶不能進(jìn)行加熱，如果溶質(zhì)在溶解過(guò)程 中放熱，要待溶液冷卻后在進(jìn)行轉(zhuǎn)移。 容量瓶只能用于配制溶液 容量瓶用畢及時(shí)洗滌干凈，塞上瓶塞。 2、滴定管的使用 滴定管是滴定操作時(shí)準(zhǔn) 確測(cè)量放出標(biāo)準(zhǔn)溶液體積 的一種量器。管壁上有刻 度線和數(shù)值，最小的刻度 是0.1ml，0刻度在上，自 上而下數(shù)值由小到大。滴

4、 定管根據(jù)造型有酸式滴定 管和堿式滴定管2種。 酸式滴定管下端有玻璃旋塞，控制溶液的流 出。盛裝酸性溶液或氧化性溶液。 堿式滴定管下端連有一段橡皮管，管內(nèi)有 玻璃珠控制溶液的流出。盛裝堿性溶液或非氧 化性溶液。 1）使用前的準(zhǔn)備 新拿到一支滴定管，用前應(yīng)先作一些初步檢 查，初步檢查合格后，進(jìn)行下列準(zhǔn)備工作： 1.洗滌 2.涂凡士林 3.檢漏 4.滴定劑溶液的加入 （1）洗滌 滴定管可用自來(lái)水沖洗或用細(xì)長(zhǎng)的刷子蘸 洗衣粉液洗刷，但不能用去污粉，也不要用鐵 絲做的毛刷刷洗。 如果經(jīng)過(guò)刷洗后內(nèi)壁仍有油脂（主要來(lái)自 于旋塞潤(rùn)滑劑）或其他能用鉻酸洗液洗去的污 垢，可用鉻酸洗液蕩洗或浸泡。 對(duì)于酸式滴定管

5、，可直接在管中加人洗液浸 泡，而堿式滴定管則要先拔去乳膠管，換上一 小段塞有短玻璃棒的橡皮管，然后用洗液浸泡。 無(wú)論用哪種方法洗，最后都要用自來(lái)水充 分洗滌，繼而用蒸餾水蕩洗三次。 洗凈的滴定管在水流去后內(nèi)壁應(yīng)均勻地潤(rùn) 上一薄層水，若管壁上還掛有水珠，說(shuō)明未洗 凈，必須重洗。 （2）涂凡士林 使用酸式滴定管時(shí)，為使旋塞旋轉(zhuǎn)靈活而又 不致漏水，一般需將旋塞涂一薄層凡士林。 （3）檢漏 檢漏的方法是將滴定管用水充滿至“0”,刻 度 附近，然后夾在滴定管夾上，用吸水紙將滴定 管外擦干，靜置1min，檢查管尖或旋塞周圍有 無(wú)水滲出，然后將旋塞轉(zhuǎn)動(dòng)180，重新檢查。 如有漏水，必須重新涂油。 （4）裝溶

6、液 v加入滴定劑溶液前，先用蒸餾水蕩洗滴定管 三次，每次約10mL。 v蕩洗時(shí)，兩手平端滴定管，慢慢旋轉(zhuǎn)，讓水 遍及全管內(nèi)壁，然后從兩端放出。再用待裝 溶液蕩洗三次，用量依次為10、5、5 mL.蕩 洗方法與用蒸餾水蕩洗時(shí)相同。 蕩洗完畢，裝人滴定液至 “0”刻度以上，檢查旋塞附近 （或橡皮管內(nèi)）及管端有無(wú) 氣泡。 v如有氣泡，應(yīng)將其排出。排出氣 泡時(shí)，對(duì)酸式滴定管是用右手拿 住滴定管使它傾斜約30，左手 迅速打開(kāi)旋塞，使溶液沖下將氣 泡趕掉；對(duì)堿式滴定管可將橡皮 管向上彎曲，捏住玻璃珠的右上 方，氣泡即被溶液壓出。 2）滴定 v滴定管應(yīng)垂直地夾在滴定管應(yīng)垂直地夾在滴定管架 上。 v使用酸式滴

7、定管滴定時(shí)，左手無(wú)名指和小指彎向手 心，用其余三指控制旋塞旋轉(zhuǎn)不要將旋塞向外頂， 也不要太向里緊扣，以免使旋塞轉(zhuǎn)動(dòng)不靈。 v使用堿式滴定管時(shí)，左手無(wú)名指和中指夾住尖嘴， 拇指與食指向側(cè)面擠壓玻璃珠所在部位稍上處的乳 膠管，使溶液從縫隙處流出。 v但要注意不能使玻璃珠上下移動(dòng)，更不能捏玻璃珠 下部的乳膠管。 v必須掌握三種加液方法： v逐滴滴加；加1滴；加半滴。 v滴定操作一般在錐形瓶?jī)?nèi)進(jìn) 行 ； v在錐形瓶中進(jìn)行滴定時(shí)，右 手前三指拿住瓶頸，瓶底離 瓷板約23 cm.將滴定管下 端伸人瓶口約1 cm。左手如 前述方法操作滴定管，邊搖 動(dòng)錐形瓶，邊滴加溶液。 3）滴定時(shí)注意的事項(xiàng) 1.搖瓶時(shí)，轉(zhuǎn)

8、動(dòng)腕關(guān)節(jié)，使溶液向同一方向旋 轉(zhuǎn)（左旋、右旋均可），但勿使瓶口接觸滴 定管出口尖嘴。 2.滴定時(shí)，左手不能離開(kāi)旋塞任其自流。 3.眼睛應(yīng)注意觀察溶液顏色的變化，而不要注 視滴定管的 4.溶液應(yīng)逐滴滴加，不要流成直線。接近終點(diǎn) 時(shí)，應(yīng)每加1滴，搖幾下，直至加半滴使溶 液出現(xiàn)明顯的顏色變化。加半滴溶液的方法 是先使溶液懸掛在出口尖嘴上，以錐形瓶口 內(nèi)壁接觸液滴，再用少量蒸餾水吹洗瓶壁。 5.用堿式滴定管滴加半滴溶液時(shí)，應(yīng)放開(kāi)食指 與拇指，使懸掛的半滴溶液靠入瓶口內(nèi)，再 放開(kāi)無(wú)名指與中指。 6.每次滴定應(yīng)從“0”分度開(kāi)始 7.若在燒杯中進(jìn)行滴定，燒杯應(yīng)放在白瓷板上， 將滴定管出口尖嘴伸入燒杯約1 c

9、m。滴定 管應(yīng)放在左后方，但不要靠杯壁，右手持玻 棒攪動(dòng)溶液。加半滴溶液時(shí)，用玻棒末端承 接懸掛的半滴溶液，放入溶液中攪拌。注意 玻棒只能接觸液滴，不能接觸管尖。 8.滴定結(jié)束后，棄去滴定管內(nèi)剩余的溶液，隨 即洗凈滴定管，并用水充滿滴定管，以備下 次再用。 4）讀數(shù) v讀數(shù)時(shí)，可將滴定管夾 在滴定管架上，也可以 右手指夾持滴定管上部 無(wú)刻度處。不管用哪一 種方法讀數(shù)，均應(yīng)使滴 定管保持垂直狀態(tài)。 v讀數(shù)時(shí)，視線應(yīng)與液面 成水平。視線高于液面， 讀數(shù)將偏低；反之，讀 數(shù)偏高。 v對(duì)于無(wú)色或淺色溶液，應(yīng)該讀取彎月面下緣 的最低點(diǎn)。溶液顏色太深而不能觀察到彎月 面時(shí)，可讀兩側(cè)最高點(diǎn)。初讀數(shù)與終讀數(shù)應(yīng)

10、 取同一標(biāo)準(zhǔn)。 v讀數(shù)應(yīng)估計(jì)到最小分度的1/10。對(duì)于常量滴 定管，讀到小數(shù)后第二位，即估計(jì)到0.01mL。 三、移液管的使用 v移液管是用于準(zhǔn)確移取一定體積溶液的量出式玻璃 量器，正規(guī)名稱是“單標(biāo)線吸量管”，習(xí)慣稱為移 液管。 v它的中間有一膨大部分，管頸上部刻有一標(biāo)線，用 來(lái)控制所吸取溶液的體積。 v移液管的容積單位為毫升（mL），其容量為在20 時(shí)按規(guī)定方式排空后所流出純水的體積。 （1）使用前的準(zhǔn)備 用洗凈并烘干的小燒杯倒出一部分欲移取的溶液，用移液 管吸取溶液510mL，立即用右手食指按住管口（盡量勿使溶 液回流，以免稀釋），將管橫過(guò)來(lái)，用兩手的拇指及食指分別 拿住移液管的兩端，轉(zhuǎn)動(dòng)

11、移液管并使溶液布滿全管內(nèi)壁，當(dāng)溶 液流至距上口23cm時(shí)，將管直立，使溶液由尖嘴（流液口） 放出，棄去。 （2）吸取溶液 v用移液管自容量瓶中移取溶液時(shí)，右手拇指及中指 拿住管頸刻線以上的地方（后面二指依次靠攏中 指），將移液管插入容量瓶?jī)?nèi)液面以下12cm深度。 v不要插入太深，以免外壁沾帶溶液過(guò)多；也不要插 人太淺，以免液面下降時(shí)吸空。左手拿洗耳球，排 除空氣后緊按在移液管口上，借吸力使液面慢慢上 升，移液管應(yīng)隨容量瓶中液面的下降而下降。 v當(dāng)管中液面上升至刻線以上時(shí)，迅速用右手食指堵 住管口（食指最好是潮而不濕），用濾紙擦去管尖 外部的溶液，將移液管的流液口靠著容量瓶頸的內(nèi) 壁，左手拿容量

12、瓶，并使其傾斜30o。 v稍松食指，用拇指及中指輕輕捻轉(zhuǎn)管身，使液面緩 慢下降，直到調(diào)定零點(diǎn)。按緊食指，使溶液不再流 出，將移液管移入準(zhǔn)備接受溶液的容器中，仍使其 流液口接觸傾斜的器壁。松開(kāi)食指，使溶液自由地 沿壁流下，待下降的液面靜止后，再等待15s，然 后拿出移液管。 注意的事項(xiàng)： v在調(diào)整零點(diǎn)和排放溶液過(guò)程中，移液管都要 保持垂直，其流液口要接觸傾斜的器壁（不 可接觸下面的溶液）并保持不動(dòng)； v等待15s后，流液口內(nèi)殘留的一點(diǎn)溶液絕對(duì)不 可用外力使其被震出或吹出； v移液管用完應(yīng)放在管架上，不要隨便放在實(shí) 驗(yàn)臺(tái)上，尤其要防止管頸下端被沾污。 二、常用的儀器設(shè)備 1、培養(yǎng)箱 為方形或長(zhǎng)形箱

13、，以鐵皮噴漆制成外殼，鉛 板做內(nèi)壁，夾層充以石棉或玻璃棉等絕緣材料 以防溫度的擴(kuò)散，內(nèi)層底下安裝電阻絲以加 熱，利用空氣對(duì)流，使箱內(nèi)溫度均勻。箱門(mén)雙 重，內(nèi)有玻璃門(mén)，便于觀察箱內(nèi)標(biāo)本，外為金 屬門(mén)。 2）操作方法與維護(hù) （1）先關(guān)箱門(mén)，接通電源。 (2)箱內(nèi)不應(yīng)該放過(guò)熱過(guò)冷之物，取放物品， 應(yīng)隨手關(guān)閉箱門(mén)，維持恒溫。 （3）箱內(nèi)可經(jīng)常放入裝水容器一只，維持 箱內(nèi)溫度和減少培養(yǎng)物中的水分大量蒸發(fā)。 （4）培養(yǎng)箱最底層溫度較高，培養(yǎng)物不宜 與之接觸 （5）定期消毒箱內(nèi)，可每月一次。 2、超凈工作臺(tái) 是一種局部層流裝置，能在局部造成高潔凈 度的環(huán)境。應(yīng)注意的事項(xiàng)： （1）超凈臺(tái)用三相四線380v電源

14、。 （2）使用前30min打開(kāi)紫外燈 （3）使用前10min將通風(fēng)機(jī)啟動(dòng)。 （4）操作時(shí)把開(kāi)關(guān)按鈕拔在照明處 （5）操作區(qū)為層流區(qū)，物品放置不應(yīng)妨礙 氣流正常流動(dòng) （6）操作者應(yīng)穿潔凈工作服，工作鞋，戴 好口罩。 （7）工作完畢后停止風(fēng)機(jī)運(yùn)行，把防塵簾 放下。 （8）使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)問(wèn)題立即切斷電源， 保修理人員。 （9）安裝的地方遠(yuǎn)離有振動(dòng)及噪聲大的地 方，以防止振動(dòng)對(duì)它的影響 （10）每36個(gè)月檢查一下工作臺(tái)的性能有 無(wú)變化 （11）搬運(yùn)要小心。 3、顯微鏡 1）光學(xué)顯微鏡的結(jié)構(gòu) （1）光學(xué)部分 目鏡(接目鏡) 物鏡(接物鏡) “5”，“10”的含義。 低倍鏡 (8x，10 x)：0.25,

15、160 高倍鏡 (40 x,45x):0.65,160/0.17 油 鏡 (90 x,100 x):1.25,160/0.17 集光器 位于載物臺(tái)下方，可上下移動(dòng)， 起調(diào)節(jié)和集中光線的作用。 反光鏡 裝在顯微鏡下方，有平凹兩面，可 自由轉(zhuǎn)動(dòng)方向，將最佳的光線反射至集光器。 機(jī)械部分 調(diào)焦器 鏡筒 物鏡轉(zhuǎn)換器 載物臺(tái) 推片器與游標(biāo)卡尺 鏡座 鏡柱 活動(dòng)關(guān)節(jié) 鏡臂 普通生物顯微鏡 顯微圖象系統(tǒng) 生物顯微鏡(含攝影系統(tǒng)) 數(shù)碼生物顯微鏡 2）工作原理 普通的光學(xué)顯微鏡利用目鏡和物鏡2組透鏡 系統(tǒng)放大成像，一般微生物學(xué)使用的顯微鏡有3 個(gè)物鏡，其中油鏡對(duì)微生物的研究最為重要。 3）試驗(yàn)程序 安置 調(diào)光

16、源 調(diào)目鏡 調(diào)聚光器 低 倍鏡 高倍鏡 油鏡 擦鏡 復(fù)原。 4）顯微鏡的使用 （1）觀察前的準(zhǔn)備 顯微鏡的安置 距試驗(yàn)臺(tái)邊緣10cm左右。 光源調(diào)節(jié) 安裝在鏡內(nèi)的光源可通過(guò)調(diào)節(jié) 電壓獲得適當(dāng)?shù)牧炼?，若使用反光鏡采集自然 光可使用平面或凹面反光鏡。 雙筒顯微鏡的使用 根據(jù)個(gè)人情況，目鏡 間距可以調(diào)整，左目鏡上一般配有屈光光度調(diào) 節(jié)環(huán)，可以適應(yīng)眼距不同或兩眼視力有差異的 不同觀察者。 聚光器數(shù)值孔徑值的調(diào)節(jié) 聚光鏡主要參 數(shù)就是數(shù)值孔徑，有一定的可變范圍，一般聚 光鏡邊框上的數(shù)字代表她的最大數(shù)值孔徑，通 過(guò)調(diào)節(jié)聚光鏡下面可變光闌的開(kāi)放程度，可以 得到各種不同數(shù)值孔徑，以適應(yīng)不同物鏡的需 要。 （2

17、）顯微鏡 低倍鏡 高倍鏡 油鏡觀察 （3）顯微鏡的處理及維護(hù) 上升鏡筒，取下載玻片 使用時(shí)要十分愛(ài)惜，各部位不要隨意拆 卸，搬動(dòng)顯微鏡時(shí)應(yīng)一手托鏡座，一手握鏡 壁，放于胸前以免損壞。 顯微鏡放置的地方要干燥，以免鏡片生 霉，避免灰塵，在箱外放置不用時(shí)要用紗布等 蓋住鏡體避免陽(yáng)光直射遠(yuǎn)離熱源。 4、高壓蒸汽滅菌鍋 可用于培養(yǎng)基、生理鹽水、廢棄的培養(yǎng)物以 及耐高溫藥品、紗布、剝離等滅菌。 1）構(gòu)造 2）操作應(yīng)注意 (1)先加適量水 （2）將待滅菌的物品放入到鍋里 （3）打開(kāi)放氣閥，放氣35min，然后關(guān)閉放 氣閥，控制溫度 （4）待壓力降到0時(shí)打開(kāi)放氣閥 （5）滅菌結(jié)束，打開(kāi)水閥門(mén)，排進(jìn)鍋內(nèi)剩 水

18、。 3）滅菌工作狀態(tài)檢驗(yàn)方法 （1）化學(xué)檢驗(yàn)法 （2）溫度計(jì)檢查法 第二節(jié) 溶液的配制 一、溶液濃度的表示方法 1、物質(zhì)的量濃度 指單位體積溶液中所含溶質(zhì)的物質(zhì)的量。每升 溶液中所含溶質(zhì)B的物質(zhì)的量，稱為B的物質(zhì) 的量濃度，簡(jiǎn)稱濃度，以B表示或以方括號(hào) 表示，常用單位為molL1。 過(guò)去習(xí)慣稱該濃度為體積摩爾濃度。 CB=nB/V 2、物質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù) 單位質(zhì)量的溶液中所含溶質(zhì)B的質(zhì)量，或 者說(shuō)混合 物中某一組分B的質(zhì)量與各組分質(zhì)量之和的 比。WB=mB/m 3、滴定度 滴定度是指1 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液A（又稱滴定劑） 相當(dāng)于被測(cè)組分B的質(zhì)量，用符號(hào)TB/A表 示： TB/A = mB / VA式中：

19、mB為被測(cè)組分質(zhì)量；VA為標(biāo) 準(zhǔn)溶液的體積。式中：mB為被測(cè)組分質(zhì)量；VA為 標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積。 TB/A的常用單位為gmL1。 二、溶液的配制 1、一般溶液的配制 要求不是很準(zhǔn)確，配制時(shí)用托盤(pán)天平稱量，用量筒， 量杯或燒杯量取，試劑溶解時(shí)有放熱現(xiàn)象或以加 熱溶解時(shí)，應(yīng)待冷卻后再轉(zhuǎn)入試劑瓶中。 應(yīng)注意的問(wèn)題 1、用易水解的鹽配制溶液時(shí)，需加入適量酸后， 再加水或稀酸稀釋。 2、易腐蝕剝離的溶液，不能盛裝在玻璃瓶中 3、配制指示劑溶液時(shí)，用分析天平。 4、經(jīng)常使用的溶液，可配置成使用濃度是10 倍的儲(chǔ)備液。 2、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制方法 1）直接配置法 適合于基準(zhǔn)物質(zhì)配制標(biāo)準(zhǔn)溶液 具備條件： （1）試劑

20、的純度高 （2）物質(zhì)的組成與化學(xué)式相符， （3）試劑穩(wěn)定 （4）摩爾質(zhì)量盡可能大 2）間接配制法 先配制近似濃度的溶液在標(biāo)定的方法 3、標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制與標(biāo)定的注意事項(xiàng) （1）配制用水要是蒸餾水或是離子交換水。 （2）工作中使用的天平砝碼，滴定管容量瓶及移液 管需呀校正。 （3）如果規(guī)定要用標(biāo)定和比較2中方法測(cè)定時(shí)，不要 略去任何一種誤差不得大于0.2% （4）標(biāo)準(zhǔn)溶液規(guī)定為20標(biāo)定之濃度為準(zhǔn) （5）標(biāo)定時(shí)所用基準(zhǔn)試劑應(yīng)符合要求-化學(xué)試劑分析 純級(jí)。 （6）配制標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度與規(guī)定濃度誤差不得大于5% 第三節(jié)培養(yǎng)基的配制 以人工方法配制成的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或 積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)，稱為培養(yǎng)基。

21、 含有微生物所必須的碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、 生長(zhǎng)素、水分等還具有適宜pH、一定的緩沖能 力、一定的氧化還原電位及合適的滲透壓。 一、培養(yǎng)基的種類 按物理狀態(tài)分為固體、半固體、液體培養(yǎng)基； 按組成成分分為天然、合成、半合成培養(yǎng)基； 按作用分為基礎(chǔ)、加富、選擇、鑒別、厭氧及活體培 養(yǎng)基。 1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基 基本營(yíng)養(yǎng)成分 2、加富培養(yǎng)基 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基匯總再加入葡萄 糖、血糖、血清等物質(zhì)。 3、選擇培養(yǎng)基 根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求 或?qū)σ恍┪锢砘瘜W(xué)條件的抗性二設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。 4、鑒別培養(yǎng)基 在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使培 養(yǎng)后發(fā)生某種變化從而鑒別不同種類的微生物 5、厭氧培養(yǎng)基 將培

22、養(yǎng)基與環(huán)境中空氣隔絕，或降低培養(yǎng)基 中氧化還原電勢(shì)。 6、活體培養(yǎng)基 二、主要成分 1、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 蛋白胨、肉浸汁、牛肉膏、糖 類、血液、雞蛋、動(dòng)物血清、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī) 鹽類。 2、水分 3、凝固物質(zhì) 瓊脂、明膠、卵蛋白、血清 4、抑制物 5、指示劑 三、培養(yǎng)基的制備 1、稱量藥品 2、溶解 3、調(diào)pH 4、融化瓊脂 5、過(guò)濾分裝 6、包扎標(biāo)記 7、滅菌 第四節(jié) 無(wú)菌操作 一消毒與滅菌 1、消毒 用物理、化學(xué)或生物學(xué)方法殺死病 原微生物稱為消毒。只對(duì)細(xì)菌的繁殖體有效， 對(duì)于細(xì)菌芽孢無(wú)效。 2、滅菌 殺滅物體中或物體上說(shuō)有微生物的繁 殖體和芽孢的過(guò)程稱為滅菌。有物理滅菌法 和化學(xué)滅菌法。 3、防腐

23、 防止或抑制微生物生長(zhǎng)繁殖的方法稱 為防腐。某些藥劑在低濃度時(shí)是防腐劑高濃 度時(shí)是消毒劑。 4、無(wú)菌及無(wú)菌操作 無(wú)菌是指物體中沒(méi)有活的微生物存在。防止微 生物進(jìn)入人體或物體的操作方法稱為無(wú)菌及 說(shuō)或無(wú)菌操作。 二、常用的滅菌方法 1、加熱滅菌 是通過(guò)加熱高溫使菌體內(nèi)蛋白 質(zhì)變性凝固，酶失活從而達(dá)到殺菌目的。 1）干熱滅菌法 通過(guò)使用干熱空氣殺滅微生 物的方法教干熱滅菌法。 1602h用于玻璃儀器、金屬器皿的滅菌。 （1）滅菌前的準(zhǔn)備 玻璃儀器要進(jìn)行正確包裹和加 塞。 （2）干燥箱滅菌 物品不要擺放太密，不能和烘箱 的內(nèi)層底板直接接觸，溫度不要超過(guò)170，如果 是烘烤玻璃儀器溫度為12030mi

24、n即可，溫度降至 5060才可打開(kāi)箱門(mén)。此法不能用油蠟質(zhì)包扎物 品。 2）濕熱滅菌法 A、巴氏消毒法 B、煮沸消毒法 C、間歇滅菌法 D高壓蒸汽滅菌法 2、過(guò)濾除菌法 3、紫外線殺菌法 殺菌最強(qiáng)的波段在240300nm 以253.7nm最強(qiáng)，與DNA吸收光譜范圍有一致，紫外線的 穿透能力不強(qiáng)，。 四、影響滅菌與消毒的因素 1、不同的微生物對(duì)熱的抵抗力和消毒劑的敏感性不同。 2、滅菌處理劑量對(duì)微生物的影響 3、微生物污染程度對(duì)滅菌的影響 4、溫度的影響 5、濕度的影響 6、酸堿度的影響 7、介質(zhì)對(duì)滅菌的影響 8、穿透條件的影響 9、氧的影響 五、微生物的接種和培養(yǎng) 將微生物的純種或含有微生物的材

25、料轉(zhuǎn)移到培 養(yǎng)基上的過(guò)程叫微生物接種。 微生物培養(yǎng)：經(jīng)微生物接種后的培養(yǎng)基被放置 在一定環(huán)境條件下，使微生物在培養(yǎng)基上生長(zhǎng) 繁殖。 1、微生物接種方法 1）涂布法 2）劃線法 3、傾注法 4、點(diǎn)值法 5、穿刺法 6、浸洗法 7、活體接種 用于病毒培養(yǎng) 2、微生物的培養(yǎng) 1）需氧培養(yǎng) 2）厭氧培養(yǎng) 第五節(jié) 生物產(chǎn)品分析的基本方法 物理分析法 有密度法和旋光法 方法 化學(xué)分析法 容量分析法和稱量法 儀器分析法 一、滴定分析法 1、滴定分析法原理 是將一種已知準(zhǔn)確濃度的試劑溶液，滴加到被測(cè)物質(zhì) 中，直到所加的試劑與被測(cè)物質(zhì)按化學(xué)計(jì)量定量反 應(yīng)為止，根據(jù)試劑溶液的濃度和消耗的體積，計(jì)算 被測(cè)物質(zhì)的含量

26、。 將滴定溶液從滴定管中加到被測(cè)物質(zhì)中的過(guò)程叫做 滴定。 適合滴定分析的化學(xué)反應(yīng)具備條件： （1）反應(yīng)必須按方程式定量地完成，要求在99.9%以 上 （2）反應(yīng)能夠迅速地完成。 （3）共存物質(zhì)不干擾主要反應(yīng)或可用適當(dāng)?shù)姆椒ㄏ?除其干擾 （4）有比較簡(jiǎn)便的方法確定化學(xué)計(jì)量點(diǎn)。 2、滴定分析法的分類 1）直接滴定法 2）返滴定法 3）置換滴定法 4）間接滴定法 根據(jù)所利用的化學(xué)反應(yīng)類型不同，滴定分析法可以 分為： 1）酸堿滴定法 2）氧化還原滴定法 （1）高錳酸鉀法 是氧化劑，其氧化能力和溶液的 酸度有關(guān)。 在強(qiáng)酸溶液中能獲得5個(gè)電子，在微酸、中性、 或弱堿性溶液中獲3個(gè)電子有MnO2生成在強(qiáng)堿中

27、獲得 一個(gè)電子，故應(yīng)該在強(qiáng)酸中滴定，用硫酸控制酸度， 盡量避免用鹽酸不用硝酸。 高錳酸鉀的優(yōu)點(diǎn)：氧化能力強(qiáng)，應(yīng)用廣泛不需 要另加指示劑。缺點(diǎn)：試劑中含有少量雜質(zhì)， 溶液不夠穩(wěn)定，能與許多還原性物質(zhì)發(fā)生反 應(yīng)，干擾現(xiàn)象嚴(yán)重。 （2）重鉻酸鉀法 利用他在強(qiáng)酸性溶液中的 強(qiáng)氧化性的氧化還原滴定法。在酸性溶液中Cr2O7 2-獲 得6個(gè)電子被還原Cr3+ 優(yōu)點(diǎn)：易提純，是基準(zhǔn)物質(zhì)，可用直接法配 制溶液 溶液非常穩(wěn)定，可長(zhǎng)期保存 。 對(duì)應(yīng)電對(duì)的標(biāo)準(zhǔn)電極電位比高錳酸鉀 的小，可在鹽酸中測(cè)定鐵。 應(yīng)用廣泛，可直接、間接測(cè)定許多物 質(zhì)。 缺點(diǎn)：反應(yīng)速度慢，條件難以控制，需外加指 示劑，另外重鉻酸鉀有毒，使用時(shí)

28、注意廢液的 處理，以免污染環(huán)境。 （3）碘量法 利用I2的氧化性和I-的還原性的 氧化還原滴定法，即可測(cè)定還原性物質(zhì)也可 測(cè)定氧化性物質(zhì)，還可測(cè)定一些非氧化還原 性物質(zhì)。根據(jù)所用的標(biāo)準(zhǔn)溶液的不同可分為 直接碘量法和間接碘量法。 直接碘量法以I2溶液為標(biāo)準(zhǔn)溶液可測(cè)定電極電 位較小的還原性物質(zhì)。 間接碘量法以Na2S2O3為標(biāo)準(zhǔn)溶液間接測(cè)定氧 化性物質(zhì)。 以淀粉為指示劑碘遇淀粉顯藍(lán)與溫度，酸度I-密 切相關(guān)。 3）配位滴定法 4）沉淀滴定法 以沉淀溶解平衡為基礎(chǔ)的確定 分析法 （1）莫爾法 以鉻酸為指示劑，在中性或弱酸 性溶液中，用AgNO3標(biāo)定溶液直接滴定Cl-或 Br-。 Ag+Cl- AgC

29、l （白色） 2Ag+CrO42- Ag+CrO4 (磚紅色） （2）佛爾哈德法 用鐵銨礬為指示劑的銀量 法。 直接滴定法 Ag+SCN- AgSCN 白色 Fe3+ SCN - 【Fe（SCN】2+（血紅色） 返滴定法 在含有鹵素離子的硝酸溶液中，加入一定量過(guò) 量的AgNO3以鐵銨礬做指示劑，用NH4SCN為 標(biāo)準(zhǔn)溶液飯滴定過(guò)量的AgNO3。 （3）法揚(yáng)司法 用吸附指示劑指示終點(diǎn)的銀量 法稱為法揚(yáng)司法。吸附指示劑是一些有機(jī)燃 料。 3、滴定分析中的計(jì)算 滴定分析計(jì)算是以化學(xué)反應(yīng)中各物質(zhì)的量之間 的關(guān)系為基礎(chǔ)的，因而標(biāo)準(zhǔn)溶液與被測(cè)物質(zhì) 在反應(yīng)中的化學(xué)計(jì)量關(guān)系是解決一些列滴定 分析計(jì)算的關(guān)鍵 A

30、a+bB Gg+hH nA:nB=a：b nb=b/anA 二、稱量分析法 1、方法原理及分類 稱量分析法是通過(guò)稱量物質(zhì)的質(zhì)量來(lái)確定被 測(cè)組分含量的一種方法根據(jù)被測(cè)組分與式樣中 其他組分分離手段不同，稱量分析法可分為沉 不淀法、揮發(fā)法和提取法?？蛇M(jìn)行干燥失重、 灼燒殘?jiān)?、灰分及不揮發(fā)物的測(cè)定，相對(duì)偏 差不得超過(guò)0.5% 2、結(jié)果結(jié)算 W=mcxF x100% W-樣品中被測(cè)組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù) M樣品的質(zhì)量 Mc稱量形式的質(zhì)量 F換算因素，為1g稱量形式相當(dāng)于被測(cè)組分的質(zhì) 量。 m 第五節(jié)誤差和檢驗(yàn)結(jié)果的數(shù)據(jù)處理 一、誤差 1、誤差產(chǎn)生原因及分類 1）系統(tǒng)誤差 （1）方法誤差 （2）儀器誤差 （3）

31、試劑誤差 （4）個(gè)人誤差 2）偶然誤差 在分析過(guò)程中由于某些偶然的原 因造成的誤差，也叫隨機(jī)誤差或不可定誤差。 2、誤差的表示方法 1）準(zhǔn)確度與誤差 準(zhǔn)確度表示分析結(jié)果與真實(shí)值接近的程度。 準(zhǔn)確度的大小用絕對(duì)誤差或相對(duì)誤差表示。若 以x表示測(cè)量值以u(píng)代表真實(shí)值。 絕對(duì)誤差=x-u 相對(duì)誤差=x-u x100% 2）精密度與偏差 對(duì)于不知道真實(shí)值的場(chǎng)合，可以用偏差的大小 來(lái)衡量測(cè)定結(jié)果的好壞。 u 偏差是指測(cè)定值與測(cè)定的平均值之差。精密度 是指在同一條件下，對(duì)同一樣品進(jìn)行多次重 復(fù)測(cè)定值相互接近的程度，偏差越小精密度 越高。 精密度可以用絕對(duì)偏差、相對(duì)平均偏差、標(biāo) 準(zhǔn)偏差與相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差來(lái)表示。

32、（1）絕對(duì)偏差和平均偏差 測(cè)量值與平均值之差稱為絕對(duì)偏差 各單個(gè)偏差絕對(duì)值的平均值稱為平均偏差。 （2）相對(duì)平均偏差為 3、誤差的減免 （1）選擇恰當(dāng)?shù)姆治龇椒?（2）減少測(cè)量誤差 （3）增加平行測(cè)定次數(shù) （4）消除測(cè)量中的系統(tǒng)誤差 方法校正 校準(zhǔn)儀器 作對(duì)照試驗(yàn) 做空白試驗(yàn) 二、定量分析結(jié)果的數(shù)據(jù)處理 1、有效數(shù)字及運(yùn)算 （1）有效數(shù)字 在分析工作中實(shí)際測(cè)量到的 數(shù)字稱為有效數(shù)字 （2）有效數(shù)字修約規(guī)則 四舍六入五成雙 （3）有效數(shù)字運(yùn)算法則 在加減法運(yùn)算中，沒(méi) 數(shù)及他們的和或差的有效數(shù)字的保留，以小 數(shù)點(diǎn)后面有效數(shù)字位數(shù)最少的為標(biāo)準(zhǔn)。 （4）在乘法運(yùn)算中 沒(méi)數(shù)及他們的積或商的 有效數(shù)字的保留，以每數(shù)中有效數(shù)字位數(shù)最 少的為標(biāo)準(zhǔn)。 2、可疑值的取舍 1）Q檢驗(yàn)法 x2-x1 Q= 2)4d法 4d法是先求出可疑值外的其余數(shù)據(jù)的算術(shù)平均值及平 均偏差d，然后將可疑值與平均值之差的絕對(duì)值與 4d比較，若絕對(duì)值大于或等于4d，則可疑值應(yīng)舍棄。 xn-x1 2）滴定 v滴定管應(yīng)垂直地夾在滴定管應(yīng)垂直地夾在滴定管架 上。 v使用酸式滴