藥物分析09第九篇維生素類藥物分析匯編

1、 維生素是維持人體機體正常代謝功能所必需的一類維生素是維持人體機體正常代謝功能所必需的一類 活性物質(zhì)。活性物質(zhì)。 R=H Vit A 醇 R=CCH3 O VA 醋酸酯 R=CC15H31 O VA 棕櫚酸酯 CH3 CH3CH3 CH3 CH2OR CH3 9 1 2 3 4 5 6 7 8 共軛多烯醇側(cè)鏈環(huán)己烯 CH2OR CH3CH3 CH3 CH3 CH3 環(huán)己烯環(huán)己烯 共軛多共軛多 烯側(cè)鏈烯側(cè)鏈 多異構(gòu)體多異構(gòu)體 UV 易被氧化易被氧化 結(jié)構(gòu)分析結(jié)構(gòu)分析 性質(zhì)性質(zhì) 溶解性溶解性 易溶于三氯甲烷、乙醚等，微溶于乙醇，不溶水； 不穩(wěn)定性不穩(wěn)定性 不飽和鍵，易氧化； 紫外吸收特性紫外吸收特

2、性 325328nm最大吸收； 與三氯化銻呈色與三氯化銻呈色 p 鑒別 三氯化銻反應(yīng)三氯化銻反應(yīng) ChP（2000） 溶劑溶劑 無水無醇氯仿無水無醇氯仿 3 SbCl VitA CHCl3 藍色藍色紫紅色紫紅色 含量測定含量測定 Vit A含量表示 I.U.(international Unit) 國際單位 效價效價(I.U./g) 按WHO規(guī)定 VA acetate VA alcohol 效價效價(I.U./g) 2.907106 3.33106 1g pure VA acetate 2.907106 I.U. E max %1 cm1 /g).U.(I 效價 換算因數(shù) 1900)(/g.U

3、. I %1 cm1)(VA 測酯 E 1830)(/g.U. I %1 cm1)(VA 測醇 E 紫外分光度法（三點校正法） p在三個波長處分別測定吸收度，根據(jù)校正公在三個波長處分別測定吸收度，根據(jù)校正公 式計算吸收度式計算吸收度A校正值后，再計算含量。校正值后，再計算含量。 p測定原理測定原理 雜質(zhì)的吸收在雜質(zhì)的吸收在310340nm波長范圍內(nèi)呈一條直線波長范圍內(nèi)呈一條直線 物質(zhì)對光的吸收具有加和性物質(zhì)對光的吸收具有加和性 A 2 13 nm Vit A sample pure VA acetate impurities 第一法 測定VA acetate 環(huán)己烷為溶劑 如果 max為326

4、329nm; 測 )( nm328 A A -規(guī)定值0.02則不需要校正 如果 max為326329nm; 測 )( nm328 A A -規(guī)定值0.02 則需校正 第二法 測定維生素測定維生素A醇醇 第一法未通過第一法未通過，包括： max不在326329nm，必須經(jīng)皂化： 蒸去醚 水解 OH- 酯 乙醚提取VA醇，洗滌，過濾 溶于異丙醇 Vit A UV法校正公式 第一法第一法 A328(校正)=3.25(2A328- A316 -A340) A 213 nm A 213 nm Vit A sample pure VA acetate impurities 第二法第二法 A325(校正)=

5、6.815A325-2.555A310-4.260A334 Vit B1) N NNH2CH3 CH2 N SCH2CH2OH CH3 Cl-HCl 氨基嘧啶環(huán)氨基嘧啶環(huán)CH2噻唑環(huán)噻唑環(huán)(季銨堿季銨堿) N N H3CNH2 N S CH3 CH2CH2OH + Cl HCl - UV 氨基嘧啶環(huán)氨基嘧啶環(huán)噻唑環(huán)噻唑環(huán) 結(jié)構(gòu)分析結(jié)構(gòu)分析 N N H3CNH2 N S CH3 CH2CH2OH + Cl HCl - 還原性還原性 堿性堿性 與酸成鹽與酸成鹽 與生物堿與生物堿 非水堿量法非水堿量法 結(jié)構(gòu)分析結(jié)構(gòu)分析 熒光消失熒光消失 硫硫色色素素鐵鐵氰氰化化鉀鉀維維生生素素 OH 1 B 正丁醇

6、正丁醇 藍色熒光藍色熒光 H+ OH- 硫色素反應(yīng)硫色素反應(yīng) ChP（2000） p 鑒別試驗鑒別試驗 OHNHAgNO 233 AgCl 白白 3 HNO 3 HNO 藍藍 淀淀粉粉試試紙紙 KI 2 MnO Cl 2 H 生成沉淀反應(yīng)生成沉淀反應(yīng) 分子結(jié)構(gòu)中含有雜環(huán)，易與生物堿沉淀劑分子結(jié)構(gòu)中含有雜環(huán)，易與生物堿沉淀劑 ( (碘化鉍鉀、碘化汞鉀、苦酮酸等碘化鉍鉀、碘化汞鉀、苦酮酸等) )，硅鎢酸等，硅鎢酸等 作用形成組成恒定的沉淀作用形成組成恒定的沉淀 維生素維生素B1在堿性加熱條件下反應(yīng)放出在堿性加熱條件下反應(yīng)放出H2S,與與 Pb(Ac)2試液形成黑色試液形成黑色PbS 含量測定含量測

7、定 Assay p 紫外分光度法紫外分光度法 p 非水溶液滴定法非水溶液滴定法 p 硫色素熒光法硫色素熒光法 Vit C) O HOOH O C CH2OH HOH 6 1 2 3 4 5 O OH HO O C OHH CH2OH 1 23 4 5 6 維生素維生素C結(jié)構(gòu)性質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì) 二烯醇二烯醇 強還原性強還原性 弱酸性弱酸性 O OH HO O C OHH CH2OH 1 23 4 5 6 手性手性C UV 己糖結(jié)構(gòu)己糖結(jié)構(gòu) 去氫抗壞血酸去氫抗壞血酸 O VitC 強還原性強還原性 2,6-二氯靛酚二氯靛酚 褪色褪色 玫瑰紅玫瑰紅 OCu2 堿堿性性酒酒石石酸酸銅銅 紅 紅 3 AgNO

8、 Ag黑 黑 含量測定含量測定 碘量法碘量法 2,6-二氯靛酚法二氯靛酚法 NaHSO3RC H(CH3) ORC H(CH3) OH SO3Na 白色 溶于水 ONOH Cl Cl 玫瑰紅 有氧化性 OH Cl Cl NHO H 無色 還原型酚亞胺 Vit C H + 去氫Vit C Vit E) R1 R2 O CH3 ( )CH3 O CH3( ) CH3 (CH2)3 C O CH3 C(CH2)3 H H C(CH2)3 H H CH CH3 CH3 Vit E (dl-Tocopheryl Acetate) O CH3 CH3 R2 O R1 CH3 CH3CH3CH3 C O C

9、H3 O CH3 CH3 R2 OH R1 CH3 CH3CH3CH3 生育酚生育酚 乙?；阴；?酚羥基酚羥基 維生素維生素E 強還原性強還原性 O CH3 CH3 R2 O R1 CH3 CH3CH3CH3 C O CH3 天然品天然品 右旋體右旋體生物效價生物效價 右旋體右旋體:消旋體消旋體 = 1.4 : 10 合成品合成品 消旋體消旋體 手性手性C * * O CH3 CH3 R2 O R1 CH3 CH3CH3CH3 C O CH3 名名 稱稱R1R2生物活性生物活性 -生育酚生育酚 -生育酚生育酚 -生育酚生育酚 -生育酚生育酚 CH3 CH3 H H CH3 H CH3 H 1

10、.0 0.5 0.2 0.1 一、鑒別試驗一、鑒別試驗 1. 硝酸反應(yīng)硝酸反應(yīng) 生生育育紅紅生生育育酚酚 OHNO 3 VitE 橙紅色橙紅色 2. 三氯化鐵聯(lián)吡啶反應(yīng)三氯化鐵聯(lián)吡啶反應(yīng) 生育酚生育酚 KOH VitE 生育醌生育醌 + Fe2+ 聯(lián)吡啶聯(lián)吡啶 Fe3+ 二、生育酚的檢查二、生育酚的檢查 硫酸鈰滴定液（硫酸鈰滴定液（0.01mol/L） 生育酚生育酚 + 2Ce4+ 2Ce3+ + 對生育醌對生育醌 原理原理 二苯胺（亮黃二苯胺（亮黃灰紫）灰紫） （反應(yīng)摩爾比（反應(yīng)摩爾比1 : 2） O CH3 CH3 CH3 CH3COO CH3 C16H33 O CH3 CH3 CH3 HO CH3 C16H33 無水乙醇 H2SO4 回流 CH3 CH3 CH3 O O C16H33 CH3OH +2Ce3+ +2Ce4+ p 含量測定含量測定