AKTA全自動層析儀(AKTA Purifier)操作規(guī)程

1、-作者xxxx-日期xxxxAKTA全自動層析儀(AKTA Purifier)操作規(guī)程【精品文檔】AKTA全自動層析儀（AKTA Purifier）操作規(guī)程1. 開機(jī)打開主機(jī)和電腦電源，待儀器自檢完畢（CU950上面的3個(gè)指示燈完全點(diǎn)亮不閃爍），雙擊桌面上UNICORN圖標(biāo)，進(jìn)入操作界面。2. 準(zhǔn)備流動相和樣品所有的工作溶液和樣品必須經(jīng)過0.45 um的濾膜過濾，樣品也可高速離心后取上清備用。當(dāng)緩沖液中含有有機(jī)溶劑（如乙腈，甲醇），需在使用前用低頻超聲唾棄10 min。3. 清洗管道及裝柱3.1 首先將A1管道放入平衡液或banding buffer中，將B1管道放入高鹽溶液中或elution

2、 buffer中，再system control窗口點(diǎn)擊manual pump pump wash basic，選中A1，B1管道為ON，點(diǎn)擊execute。泵清洗程序會自動運(yùn)行至結(jié)束。3.2 選擇manual pump flow rate，輸入流速為1 mL/min，點(diǎn)擊insert；選擇manual alarmmon alarm pressure，設(shè)置high alarm（輸入填料的耐受壓力，可在填料說明書中查到），點(diǎn)擊insert，點(diǎn)擊execute。將進(jìn)樣閥的1號位管道接入柱子的柱頭（用幾滴管道中流出的液體潤濕，防止空氣進(jìn)入），稍微擰緊后將柱子下端的堵頭卸掉，直接擰入紫外流動池或連接管

3、道（可用柱子中流出的液體潤濕接頭，防止空氣進(jìn)入）。4. 手動運(yùn)行4.1 平衡柱子平衡好了（觀察電導(dǎo)COND及pH的數(shù)值曲線走穩(wěn)了），此時(shí)將紫外調(diào)零：選擇manual alarmmon autozero，點(diǎn)擊execute，就準(zhǔn)備上樣了。4.2 上樣4.2.1 用樣品環(huán)上樣：將樣品吸進(jìn)注射器，推掉氣泡，從進(jìn)樣閥的3號位推入（進(jìn)樣量不得低于樣品環(huán)的體積的2倍），不要取下注射器，選擇manual flowpath injectionValve inject，點(diǎn)擊execute。4.2.2 用樣品泵上樣（AKTA explorer系統(tǒng)）：將樣品置于Sample Valve 1號位（可以選8個(gè)不同的位置

4、），點(diǎn)擊manual pump Direct Load_960輸入進(jìn)樣流速和體積，點(diǎn)擊execute。注意樣品的管路要事先充滿緩沖液。4.2.3 用系統(tǒng)泵上樣：點(diǎn)擊pause，將A1放入樣品中，點(diǎn)擊continue；待樣品上樣完畢后，再將A1放入到平衡液中繼續(xù)清洗柱子。4.3 洗脫用緩沖液盡量將穿透峰洗回基線。選擇manual pump gradient，按照自己的條件選擇target% B（如100%）和length（如20 min），點(diǎn)擊execute。4.4 收集4.4.1 固定體積收集：選擇manual Frac fractionation_900，輸入每管收集體積，點(diǎn)擊execute

5、。結(jié)束固定體積收集選擇manual Frac fractionation_stop_900，點(diǎn)擊execute。4.4.2 峰收集：選擇manual Frac Peak_FracParametersUV，輸入峰收集參數(shù)，點(diǎn)擊insert，點(diǎn)擊Peak_fractionation_900，輸入每管最大收集體積，點(diǎn)擊insert，點(diǎn)擊execute。結(jié)束峰收集，選擇Peak_fracStop_900，點(diǎn)擊execute。5. 編程及自動運(yùn)行5.1 點(diǎn)擊method editor窗口中工具欄上的method wizard快捷圖標(biāo)，打開對話框。5.2 按照對話框的要求選擇條件，編號后點(diǎn)擊finish出

6、現(xiàn)編程結(jié)果，在變量框中可以更改變量。點(diǎn)擊工具欄中的保存快捷圖標(biāo)，輸入文件名，點(diǎn)擊OK。5.3 運(yùn)行自動程序：在system control窗口中點(diǎn)擊工具欄中的RUN打開編好的方法，點(diǎn)擊next直到start開始運(yùn)行。5.4 運(yùn)行中，按下工具欄中的hold鍵表示保持目前的運(yùn)行模塊狀態(tài)不進(jìn)入到下一個(gè)命令中。點(diǎn)擊manual other next breakpoint表示進(jìn)入到下一個(gè)模塊指令。5.5 運(yùn)行結(jié)束后，結(jié)果自動保存。6. 清洗系統(tǒng)及拆柱將A1和B1入口放入純水中，啟動pump wash purifier功能沖洗A泵和B泵及整個(gè)管路（約10-20 mL即可）。然后再將A1和B1入口放入20% 乙醇中，同樣的操作將乙醇充滿整個(gè)管路保存（約20 mL即可）。系統(tǒng)給柱子一個(gè)慢流速，設(shè)置系統(tǒng)保護(hù)壓力，然后先拆柱子