分子生物學試題庫

1、第2章 染色體與DNA名詞解釋原癌基因：細胞內與細胞增殖相關的正?；颍蔷S持機體正常生命活動所必須的，在進化上高等保守。 當原癌基因的結構或調控區(qū)發(fā)生變異，基因產物增多或活性增強時，使細胞過度增殖，從而形成腫瘤。復制：以親代DNA或RNA為模板，根據堿基配對的原則，在一系列酶的作用下，生成與親代相同的子代DNA或RNA的過程。轉座子 (transposon 或 transposable element)：位于染色體DNA上可自主復制和位移的基本單位。包括插入序列和復合轉座子。半保留復制：以親代DNA雙鏈為模板以堿基互補方式合成子代DNA，這樣新形成的子代DNA中，一條鏈來自親代DNA，而另一

2、條鏈則是新合成的，這種復制方式叫半保留復制。染色體： 染色體是遺傳信息的載體，由DNA、RNA和蛋白質構成，其形態(tài)和數目具有種系的特性。在細胞間期核中，以染色質形式存在。在細胞分裂時，染色質絲經過螺旋化、折疊、包裝成為染色體，為顯微鏡下可見的具不同形狀的小體。核小體：是構成真核生物染色體的基本單位，是DNA和蛋白質構成的緊密結構形式，包括200bp左右的DNA和9個組蛋白分子構成的致密結構。填空題1.真核細胞核小體的組成是 DNA和 蛋白2.天然染色體末端不能與其他染色體斷裂片段發(fā)生連接，這是因為天然染色體末端存在端粒結構。3.在聚合酶鏈反應中，除了需要模板DNA外，還需加入引物、DNA聚合酶

3、、dNTP和鎂離子。4.引起DNA損傷的因素有自發(fā)因素、物理因素、化學因素。5.DNA復制時與DNA解鏈有關的酶和蛋白質有拓撲異構酶、解螺旋酶、單鏈DNA結合蛋白。6.參與DNA切除修復的酶有DNA聚合酶、DNA連接酶、特異的核酸內切酶。7.在真核生物中DNA復制的主要酶是DNA聚合酶。在原核生物中是DNA聚合酶。8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆轉錄酶。9.DNA的修復方式有錯配修復、堿基切除修復、核苷酸切除修復、DNA的直接修復。選擇題1.真核生物復制起點的特征包括（B）A. 富含G-C區(qū) B. 富含A-T區(qū) C. Z-DNA D. 無明顯特征2.插入序列（IS）編碼（A）A.轉座酶 B

4、.逆轉錄酶 C. DNA合成酶 D.核糖核酸酶3.紫外線照射對DNA分子的損傷主要是(D)A.堿基替換 B.磷酸脂鍵斷裂 C。堿基丟失 D.形成共價連接的嘧啶二聚體4.自然界中以DNA為遺傳物質的大多數生物DNA的復制方式（C）A.環(huán)式 B.D環(huán)式 C.半保留 D.全保留5.原核生物基因組中沒有（A）A.內含子 B.外顯子 C.轉錄因子 D.插入序列 6.關于組蛋白下列說法正確的是(D)A.為中性蛋白 B.為酸性蛋白 C.進化上不具保守性 D.染色體結合蛋白7.DNA聚合酶（C）A.是復制酶，但不是修復酶 B.沒有模板依賴性 C.有53外切酶活性D. 53聚合酶活性極強簡述DNA復制的過程 D

5、NA的復制過程可被分為3個階段，即復制的起始、延伸和終止。每個DNA復制的獨立單元主要包括復制起始位點和終止位點。 DNA復制的起始包括預引發(fā)和引發(fā)兩個階段。在預引發(fā)階段，DNA解旋解鏈，形成復制叉，引發(fā)體組裝；在引發(fā)階段，在引發(fā)酶的催化下以DNA鏈為模板合成一段短的RNA引物。復制時DNA鏈的延伸由DNA聚合酶催化，以親代DNA鏈為模板，引發(fā)體移動，從53方向聚合子代DNA鏈。當子鏈延伸到達終止位點是，DNA復制就終止了，切除RNA引物，填補缺口，在DNA連接酶的催化下將相鄰的岡崎片段連接起來形成完整的DNA長鏈。試述真原核生物的DNA復制的特點的不同之處真核生物染色體有多個復制起點，多復制

6、眼，呈雙向復制，多復制子。原核生物的染色體只有一個復制起點，單復制子也呈雙向復制。 真核生物岡崎片段長約200bp比原核生物略短。真核生物DNA復制速度比原核慢，速度為10003000bp/min(僅為原核生物的1/201/50）。 真核生物復制的終止在端粒處，原核生物的復制叉相遇時即終止。真核生物染色體在全部復制完之前起點不再重新開始復制；而在快速生長的原核生物染色體DNA復制中，起點可以連續(xù)發(fā)動復制。真核生物快速生長時，往往采用更多的復制起點。 真核生物有多種DNA聚合酶，DNA聚合酶是真正的復制酶，在PCNA存在下有持續(xù)的合成能力。PCNA稱為增殖細胞核抗原，相當于大腸桿菌DNA聚合酶的

7、-夾子，RFC蛋白相當于夾子裝配器。原核生物的DNA聚合酶有三種DNA聚合酶DNA的真正復制酶：多亞基酶，含十種亞基，該酶DNA合成的持續(xù)能力強。真核生物線性染色體兩端有端粒結構，它是由許多成串的重短復序列組成，端粒功能是穩(wěn)定染色體末段結構，防止染色體間的末端連接，并可補償滯后鏈5-末段在消除RNA引物后造成的空缺，使染色體保持一定長度。端粒酶是含一段RNA的逆轉錄酶。RPA：真核生物的單鏈結合蛋白；RNaseH1和MF-1切除RNA引物，DNA聚合酶填補缺口。簡述半保留復制的生物學意義DNA的復制過程（以大腸桿菌為例）復制起始：（1）、拓撲異構酶解開超螺旋。（2）、Dna A蛋白識別并在AT

8、P存在下結合于四個9bp的重復序列。（3）、在類組蛋白（HU、ATP參與下, Dan A蛋白變性13個bp的重復序列,形成開鏈復合物。（4） 、Dna B借助于水解ATP產生的能量在Dna C的幫助下沿5 3 方向移動，解開DNA雙鏈，形成前引發(fā)復合物。（5）、單鏈結合蛋白結合于單鏈。（6）、引物合成酶（Dna G蛋白）開始合成RNA引物。 鏈的延長（岡崎片段的合成）：在DNA聚合酶的催化下，以四種5 -脫氧核苷三磷酸為底物，在RNA引物的3端以磷酸二酯鍵連接上脫氧核糖核苷酸并釋放出焦磷酸。DNA鏈的延伸同時進行前導鏈和滯后鏈的合成。兩條鏈方向相反。6、PCR的基本原理？PCR是在試管中進行的

9、DNA復制反應，基本原理是依據細胞內DNA半保留復制的機理，以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單鏈可以互相轉變的性質，人為地控制體外合成系統(tǒng)的溫度，以促使雙鏈DNA變成單鏈，單鏈DNA與人工合成的引物退火，然后耐熱DNA聚合酶以dNTP為原料使引物沿著單鏈模板延伸為雙鏈DNA。PCR全過程每一步的轉換是通過溫度的改變來控制的。需要重復進行DNA模板解鏈、引物與模板DNA結合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成，即高溫變性、低溫退火、中溫延伸個步驟構成PCR反應的一個循環(huán)，此循環(huán)的反復進行，就可使目的DNA得以迅速擴增。DNA模板變性：模板雙鏈DNA?單鏈DNA，94。退火：引物單鏈DNA?雜交

10、鏈，引物的Tm值。引物的延伸：溫度至70 左右， Taq DNA聚合酶以種dNTP為原料，以目的DNA為模板，催化以引物末端為起點的53DNA鏈延伸反應，形成新生DNA鏈。新合成的引物延伸鏈經過變性后又可作為下一輪循環(huán)反應的模板PCR，就是如此反復循環(huán)，使目的DNA得到高效快速擴增。第三章啟動子：是一段位于結構基因5，端上游區(qū)的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之與模板DNA準確地相結合并具有轉錄起始的特異性。指RNA聚合酶識別、結合和開始轉錄的一段特定的DNA序列。增強子：能強化轉錄起始的序列稱為增強子。轉錄：以DNA為模板，按照堿基配對原則合成RNA，即將DNA所含的遺傳信息傳給RNA，形

11、成一條與DNA鏈互補的RNA的過程。RNA的編輯：是某些RNA，特別是mRNA的一種加工方式，它導致了DNA所編碼的遺傳信息的改變。外顯子(Exon) ：真核細胞基因DNA中的編碼序 列，這些序列被轉錄成RNA并進而翻譯為蛋白質。內含子(Intron) ：真核細胞基因DNA中的間插序列，這些序列被轉錄成RNA，但隨即被剪除而不翻譯。 復制子：生物體的復制單位稱為復制子（replicon) ，是在同一個復制起點控制下的一段DNA序列。轉錄單元：是一段啟動子開始至終止子結束的DNA序列。轉錄起點：是與新生RNA鏈的第一個核苷酸相對應的DNA鏈上的堿基，通常為一個嘌呤。轉錄開始時模板上的第一個堿基，

12、在原核中常為A或G，而且位置固定。填空1轉錄的基本過程包括：模板識別，轉錄起始，轉錄的延伸，轉錄的終止。2基因表達包括：轉錄和翻譯 兩個階段。3RNA的編輯方式：堿基突變，尿甘酸的缺失和添加。4在原核生物中，-35區(qū)與-10區(qū)之間的距離大約是1619bp5帽子結構的功能：1在翻譯中起識別作用2使mRNA免遭核苷酸的破壞6原核生物只有一種RNA聚合酶而真核生物有三種，每一種都有其特定的功能。聚合酶合成rRNA,聚合酶合成mRNA，聚合酶合成tRNA和5s rRNA。三種聚合酶都是具有多亞基的大的蛋白復合體。7 轉錄因子通常具有兩個獨立的結構域：一個結合DNA，一個激活轉錄。8 在真核細胞mRNA

13、的修飾中，“帽子”結構由甲基組成，“尾”由多聚腺嘌呤組成。9原核生物的絕大部分起啟動子都存在共同的序列，即位于-10bp處的 區(qū)和-35bp處的 區(qū)，他們都是RNA聚合酶與啟動子結合的位點，能與因子相互識別而具高度親和性。真核生物中，在轉錄起始位點上游-25-35bp處有 區(qū)和位于-70-80bp處 的 區(qū)。選擇題1因子的結合依靠（A）A對啟動子共有序列的長度和間隔的識別B與核心酶的相互作用C翻譯起始密碼子的距離D轉錄單位的長度2下列哪一項是對三元轉錄復合物的正確描述（C）A因子、核心酶和雙鏈DNA在啟動子形成的復合物B全酶、TFI和解鏈DNA雙鏈形成的復合物C全酶、模板DNA和新生RNA形成

14、的復合物D三個全酶在轉錄起始位點形成的復合物3因子和DNA之間相互的最佳描述是(C)A游離和與DNA結合的因子的數量是一樣的，而且因子合成的越多，轉錄起始的機會越大B因子通常與DNA結合，且沿著DNA搜尋，直到在啟動子碰到核心酶，他與DNA的結合不需要依靠核心酶C因子通常與DNA結合，且沿著DNA搜尋，直到碰到啟動子，再有核心酶存在時與之結合D因子加入三元復合物而啟動RNA合成4 因子專一性表現在（B）A因子修飾酶催化因子變構，使其成為可識別應激啟動子的因子B不同基因編碼識別不同啟動子的因子C不同細菌產生可互換的因子D因子參與起始依靠特定的核心酶5在大腸桿菌的熱激反應中，某些蛋白質表達的開啟和

15、關閉的機制是（C）A溫度升高使特定阻抑蛋白失活B編碼熱敏感蛋白的基因的啟動子區(qū)域在較高溫度下發(fā)生變形C在高溫時合成新的因子，調節(jié)熱激基因的表達D高溫時，已存在的聚合酶因子與啟動子的結合能力強6 真核生物中rRNA包括（D）A 28s,23s,5s rRNA B 23s,16s,5s rRNAC 23s,16s,5.8s rRNA D 28s,23s,5.8s,5s rRNA7 內含子的剪切位點具有的特征（A）A 5，GU，3，AG B 5，AG，3，GUC 5，GA，3，UG D 5，UG，3，GA8 部分原核基因的轉錄終止子在終止位點前均有（A）A 回文序列 B 多聚T序列 C TATA序列

16、 D 多聚A序列9 mRNA5，端帽子結構為（C）A pppmG B GpppG C m7GpppG D GpppmG簡答題1增強子的特點1有遠距離效應2無方向性3順勢調節(jié)4無物種和基因的特異性5具有組織的特異性6有相位性，其作用與DNA的構象有關7有的增強子可以對外部信號產生反應。2比較DNA復制和轉錄的異同點相同點：都以DNA鏈作為模板，合成方向均為5，端到3，端，聚合反應均遵循堿基配對原則，通過核苷酸之間形成的3，5，磷酸二酯鍵使核苷酸鍵延長。不同點：復制轉錄模板兩條鏈均被復制模板鏈轉錄（不對稱轉錄）原料DntpNTP酶DNA聚合酶RNA聚合酶產物子代雙鏈DNA（半保留復制）mRNA t

17、RNA rRNA配對方式A-T G-CA-U A-T G-C引物RNA引物不需要引物DNA復制與轉錄的異同相同點： 都需要模板 都以三磷酸核苷酸為底物（NTP或dNTP） 合成方向都是53不同點轉錄不需引物；只轉錄DNA分子中的一個片段（稱為轉錄單位或操縱子,operon)；雙鏈DNA中只有一條鏈具有轉錄活性（稱為模板鏈）；哪個基因被轉錄與特定的時間、空間、生理狀態(tài)有關。RNA聚合酶無校對功能。原核生物與真核生物mRNA的比較（1）、原核生物mRNA的半衰期短；（2）、許多原核生物mRNA以多順反子形式存在；（3）、原核生物5端無帽子結構，3或只有短的poly(A)。（4）、真核生物mRNA5

18、端有帽子結構，（5）、絕大多數真核生物mRNA3具有poly(A)尾巴，是轉錄后加上的，是mRNA從核到質轉移所必需的形式，提高mRNA的穩(wěn)定性。大腸桿菌的轉錄過程：（1）、識別階段：RNA聚合酶在亞基的引導下結合于啟動子上；（2）、DNA雙鏈局部解開；（3）、起始階段：在模板鏈上通過堿基配對合成最初RNA鏈；（4）、延伸階段：核心酶向前移動，RNA鏈不斷生長；（5）、終止階段：RNA聚合酶到達終止子；（6）、RNA和RNA聚合酶從DNA上脫落。論述題1 真核生物轉錄的前體hnRNA如何加工為成熟的mRNA？真核生物mRNA的結構組成：5，端存在帽子結構，3，端通常具有poly(A)尾巴，無內

19、含子，部分堿基發(fā)生甲基化。5，端加帽：當RNA聚合酶聚合的轉錄產物達到25堿基長時，在其5，端加上一個以5，3，方向相連的7甲基鳥苷帽，防止5，核苷酸外切酶的攻擊，有利于剪接、轉運和翻譯的進行；3，端加尾：很多真核生物的hnRNA的3，端經過剪切后再加上多聚A殘基即poly(A)尾巴，這有助于整個分子的穩(wěn)定；剪接：在真核生物的mRNA加工過程中，內含子序列被切除，兩側的外顯子片段連接。剪接反應在核內進行，需要內含子有5，GU，AU3，以及一段分支點序列。其過程是：內含子先以一個具尾的環(huán)狀分子或套索狀分子形式被刪除，然后被降解，剪接包括snRNP與保守序列結合，形成剪接體，在其內發(fā)生剪接與連接反

20、應；編輯；甲基化修飾：當序列為5，RRACX3，時會在第6位N原子位置發(fā)生甲基化。2概括細菌細胞的轉錄過程轉錄是通過RNA聚合酶的作用，以一條DNA鏈為模板產生一條單鏈RNA過程。步驟如下：與RNA聚合酶全酶的結合：一個RNA聚合酶全酶分子與待轉錄的DNA編碼序列上游的啟動子序列松弛的結合。起始：RNA聚合酶往下游移動了幾個核苷酸到達啟動子的另一段短序列Pribnow框，緊密地與DNA結合。DNA上的啟動子區(qū)域解鏈，RNA便從Pribnow框下游的幾個核苷酸處開始合成，通常是DNA的反義鏈作為模板，合成幾個核苷酸后，因子被釋放并循環(huán)使用，以下步驟不再需要因子。延伸：RNA聚合酶核心酶沿著DNA

21、模板移動，使DNA解鏈，與DNA模板的下一堿基互補核苷三磷酸聚合到鏈上。RNA聚合酶繼續(xù)在DNA上移動，RNA鏈從模板鏈被釋放出來，DNA雙螺旋重新形成。當所有編碼序列被轉錄后，RNA聚合酶移動一個終止序列，即終止子。轉錄復合體解體，RNA聚合酶和新形成的RNA從DNA模板上脫落下來。3、復雜轉錄單位的原始轉錄產物的加工方式有幾種？分別是什么？（1）剪、利用多個5端轉錄起始為點或接位點產生不同的蛋白質。（2）、利用多個加poly（A）位點和不同的剪接方式產生不同的蛋白質。（3）、雖無剪接，但有多個轉錄起始位點或加poly（A）位點的基因。第四章.SD序列：在原核生物mRNA起始密碼AUG上游，

22、存在49個富含嘌呤堿的一致性序列，如-AGGAGG-，稱為S-D序列。位于原核生物起始密碼子上游7-12個核苷酸處的保守區(qū)，該序列與16SrRNA3端反向互補。又稱為核蛋白體結合位點（ribosomal binding site，RBS)正轉錄調控：負轉錄調控：填空題1tRNA的種類有：起始tRNA和延伸tRNA，同工tRNA，校正tRNA。2. tRNA的二級結構為三葉草型，三級結構為倒L型。tRNA結構3.原核生物蛋白質合成的起始tRNA是甲酰甲硫氨酰tRNA（fMet-tRNA fMet）,它攜帶的氨基酸是甲酰甲硫氨酸（fMet），而真核生物蛋白質合成的起始tRNA是甲硫氨酰tRNA（M

23、et-tRNA Met），它攜帶的氨基酸是甲硫氨酸（Met）。4新生肽鏈每增加一個氨基酸單位都要經過AA-tRNA與核糖體的結合，肽鍵形成，移位三步反應。5. 核糖體的作用位點有：A位點、P位點、E位點。5在真核生物中蛋白質合成起始時先形成起始因子和起始tRNA復合物，再和40S亞基形成40S起始復合物。6氨酰tRNA合成酶既能識別氨基酸，又能識別相應的tRNA。7多肽合成的起始密碼子是AUG，而UAA，UAG，UGA是終止密碼子。8遺傳密碼的特點包括連續(xù)性，簡并性，擺動性，普遍性與特殊性。9核酸復制時，DNA聚合酶沿模板鏈35方向移動；轉錄時，RNA聚合酶沿模板鏈35方向移動；翻譯時，核糖體

24、沿模板鏈5 3方向移動。10原核生物蛋白質合成形成起始復合物時，其mRNA先與核糖體的30S亞基結合，然后再與結合起始因子和GTP的甲酰甲硫氨酰tRNA結合，形成30S起始復合物，然后再與50S形成70S起始復合物。選擇題1在蛋白質合成中催化肽鍵合成的是（D）A延長因子EF-Ts B. 延長因子EF-Tu C. 啟動因子IF3 D.轉肽酶2翻譯后加工過程的產物是（B）A一條多肽鏈 B. 一條多肽鏈或一條以上的多肽鏈C多條多肽鏈 D. 多肽鏈的降解產物3.已知某蛋白質多肽鏈編碼序列為GGA，則其mRNA轉錄本（A）A以5 GGA3為模板，沿轉錄本5 3方向延長B. 以5 GGA3為模板，沿轉錄本

25、3 5方向延長C. 以3GGA5為模板，沿轉錄本5 3方向延長D. 以3GGA5為模板，沿轉錄本3 5方向延長4.細菌核糖體RNA中大亞基由以下物質組成（C）A5S rRNA , 18S rRNA, 5.8S rRNA和49種蛋白質 B. 5S rRNA , 28S rRNA, 5.8S rRNA和49種蛋白質C5S rRNA , 23S rRNA和34種蛋白質 D. 5S rRNA , 16S rRNA和34種蛋白質5.肽鏈生物合成時信號肽序列（B）A決定糖類殘基的附著點 B.將新生肽鏈導入內質網C.控制蛋白質分子的最終構象 D.具有疏水性6.真核生物的翻譯起始復合物在何處形成（B）A. 起

26、始密碼子AUG處 B. 5端的帽子結構CTATA框 D.CAAT框7.蛋白質生物合成的終止信號由（D）AtRNA識別 B.EF識別 C.IF（或eIF ）識別 D.RF識別8.能編碼多肽鏈的最小DNA單位是（A）A順反子 B.操縱子 C .啟動子 D.復制子9.參與原核生物肽鏈延長的因子是（C）AIF1 B. IF2 C.EF-Tu D.RF110. 參與真核生物肽鏈延長的因子是（D）A eRF B. eIF1 C.EF-Tu D.eEF1簡答題：1簡述核糖體的結構及功能特點：答：核糖體的結構：真核生物：由60S大亞基和40S小亞基組成的80S的核糖體；原核生物：由50S大亞基和30S小亞基組

27、成的70S的核糖體功能特點：合成蛋白質 。在單個核糖體上，包括至少5個功能活性中心，在蛋白質合成過程中，各有專一的識別作用和功能：mRNA的結合部位小亞基 ，結合或接受AA-tRNA的部位大亞基A位，結合或接受肽基tRNA部位大亞基，肽基轉移部位大亞基P位，形成肽鍵部位（轉肽酶中心）大亞基E位。2.簡述氨基酸的活化過程答：游離的氨基酸必須經過活化以獲得能量，才能參與蛋白質的合成，活化反應由氨酰tRNA合成酶催化?；罨謨刹剑夯罨篴a + ATP+ E氨基酰-AMP釋放出 PPi 轉移：氨基酰-AMP轉移到 tRNA 并釋放出 AMP。3、論述蛋白質的翻譯過程。答：蛋白質的翻譯即合成過程可分為

28、四個階段：氨基酸的活化、肽鏈合成的起始、延伸和終止。 氨基酸的活化：游離的氨基酸必須經過活化以獲得能量，才能參與蛋白質的合成，活化反應由氨酰tRNA合成酶催化，最終氨基酸連接在tRNA的3端合成氨酰- tRNA。 肽鏈合成的起始：核蛋白體大小亞基分離 ，mRNA在小亞基上定位結合，起始氨基酰tRNA與小亞基結合，核蛋白體大亞基結合。肽鏈的延伸：肽鏈的延長是在核蛋白體上連續(xù)性循環(huán)式進行，每次循環(huán)增加一個氨基酸，分為以下三步：（一）進位:根據mRNA下一組遺傳密碼指導，使相應氨基酰-tRNA進入核蛋白體A位。（二）成肽:肽酰轉移酶將相鄰的兩個氨基酸相連形成肽鍵，該過程不需要能量的輸入；（三）轉位：

29、移位酶利用GTP水解釋放的能量使核糖體沿mRNA移動一個密碼子，釋放出空載的tRNA并將新生肽鏈運至P位點。 肽鏈合成的的終止與釋放：釋放因子識別并與終止密碼子結合，水解P位上多肽鏈與tRNA之間的二脂鍵，接著，新生肽鏈和tRNA從核糖體上釋放，核糖體大、小亞基解體，蛋白質合成結束。4、原核生物翻譯的起始過程（1）核糖體大小亞基分離（2）30s小亞基通過SD序列與mRNA模板相結合（3）在IF-2和GTP的幫助下fMet-tRNAfMet進入小亞基的P位，tRNA的反密碼子與mRNA上密碼子配對。（4)帶有tRNA、mRNA和三個翻譯起始因子的小亞基起始復合物與50s的大亞基結合，GTP水解釋

30、放翻譯起始因子。5、以大腸桿菌為例簡述蛋白質合成的過程從以下四個方面詳細論述（1）氨基酸的活化：（2）肽鏈合成的起始：（3）肽鏈的延生：（4）肽鏈合成的終止：第六章乳糖操縱子模型內容（1）Z、Y、A基因產物由同一條多順反子mRNA分子所編碼。（2）乳糖操縱子mRNA分子的啟動區(qū)（P）位于阻遏基因（I）與操縱區(qū)（O）之間，不能單獨起始半乳糖苷酶和透過酶基因的高效表達。（3）乳糖操縱子的操縱區(qū)是DNA上的一小段序列（僅為26bp），是阻遏物的結合位點。（4）當阻遏物與操縱區(qū)相結合時，lacmRNA的轉錄起始受到抑制。（5）誘導物通過與阻遏物結合，改變其三維構象，使之不能與操縱區(qū)相結合，誘發(fā)lac

31、mRNA的合成。色氨酸操縱子轉錄水平上的調控通過核糖體與mRNA前導序列結合，對轉錄終止進行調控。 Attenuator(衰減子)： 是位于轉錄單位開始區(qū)的一種內部終止子，由核糖體在mRNA上的位置決定該終止發(fā)夾是否形成。若不形成發(fā)夾，RNA聚合酶通讀終止子，基因得以表達。當缺乏色氨酸時，核糖體在trp密碼子上暫停，此密碼子是1區(qū)的一部分。所以1區(qū)被核糖體隔離，不能與2區(qū)堿基配對，這意味著在4區(qū)轉錄之前2區(qū)已和3區(qū)配對，迫使4區(qū)保持單鏈形式，不能形成終止子發(fā)夾，RNA聚合酶穿越衰減子繼續(xù)轉錄。核糖體可以合成前導肽，并延伸到mRNA上的UGA密碼子，UGA密碼子位于1區(qū)與2區(qū)之間。當核糖體前進到

32、此點時，通過2區(qū)并阻止其形成堿基配對，導致3區(qū)與4區(qū)配對，產生終止子發(fā)夾。因此，在這種情況下，RNA聚合酶在衰減子處終止。乳糖操縱子(lac operon)的結構1、結構基因（1）lacZ：編碼b 半乳糖苷酶 （使乳糖水解）（2）lacY：編碼b 半乳糖苷透過酶 （使b 半乳糖苷透過細胞壁、質膜進入細胞內）（3）lacA：編碼b 半乳糖苷乙酰轉移酶（將乙?；D移到b 半乳糖苷上）2、調節(jié)基因（regulatory gene）（1）概念： 其產物參與調控其他結構基因表達的基因（2）特點： a、可在結構基因群附近、也可遠離結構基因 b、不僅對同一條DNA鏈上的結構基因起作用，而且能對不同DNA鏈上

33、的結構基因起作用（3）調控蛋白：類型：a、阻遏蛋白（repressive protein）與操縱元件結合后能減弱或阻止所調控基因轉錄的調控蛋白 b、激活蛋白（activating protein）：與操縱元件結合后能增強或啟動所調控基因轉錄的調控蛋白3、操縱元件（operator）（1）與啟動子鄰近或與啟動子部分序列重疊（2）具有回文結構，能形成十字形結構。（3）與不同構像的蛋白質結合，可以分別起阻遏或激活基因表達的作用 4、啟動子(promoter)是指能被RNA聚合酶識別、結合并啟動基因轉錄的一段DNA序列。（1）-10序列- Pribnow盒：TATAAT；（2）-35bp序列：TTGA

34、CA操縱子至少有一個啟動子，一般在第一個結構基因5上游，控制整個結構基因群的轉錄5、終止子（terminator）是給予RNA聚合酶轉錄終止信號的DNA序列（1）不依賴因子的終止子 （2）依賴因子的終止子在一個操縱元中至少在結構基因群最后一個基因的后面有一個終止子 大腸桿菌乳糖操縱子（lactose operon）包括3個結構基因：Z、Y和A，以及啟動子、控制子和阻遏子等。轉錄的調控是在啟動區(qū)和操縱區(qū)進行的。LacI阻抑蛋白， LacZ-糖苷酶，LacY透性酶，LacA轉乙?；浮ＨN酶的功能： . -半乳糖酶：將乳糖分解成半乳糖和葡萄糖 . 滲透酶：增加糖的滲透，易于攝取乳糖和半乳糖 . 轉

35、乙酰酶：-半乳糖轉變成乙酰半乳糖lac 操縱子小結通常情況（葡萄糖供應正常）阻遏蛋白與操縱序列結合，基因不轉錄。細胞外的乳糖通過透性酶吸收到細胞內；細胞內的-半乳糖苷酶將乳糖轉變?yōu)楫惾樘?。異乳糖結合到乳糖阻抑物上使之從操縱序列上脫離，聚合酶迅速開始lacZYA基因的轉錄。這就是負控誘導。然而，還需要細菌生長系統(tǒng)中缺少葡萄糖，使cAMP含量增加，才有足夠量的cAMP與CRP結合形成CRP-cAMP復合物結合于Plac上游。使DNA雙螺旋發(fā)生彎曲，轉錄才可以有效地進行。組氨酸操縱子：與His降解代謝有關的兩組酶類被稱為hut酶(histidine utilizing enzyme)，控制這些酶合成

36、的操縱子被稱為hut operon。由一個多重調節(jié)的操縱子控制，有兩個啟動子，兩個操縱區(qū)及兩個正調控蛋白。轉錄后調控一、 翻譯起始的調控 遺傳信息的翻譯起始于mRNA上的核糖體結合位點（RBS）起始密子AUG上游的一段非翻譯區(qū)。在RBS中有SD序列，與核糖體16S rRNA的3端互補配對，促使核糖體與mRNA相結合。RBS的結合強度取決于SD序列的結構及與AUG的距離。SD與AUG相距一般以410核苷酸為佳，9核苷酸最佳。二、mRNA穩(wěn)定性對轉錄水平的影響所有細胞都有一系列核酸酶，用來清除無用的mRNA。一個典型的mRNA半衰期為2-3min。mRNA分子被降解的可能性取決于其二級結構。SD序

37、列的微小變化，往往會導致表達效率成百上千倍的差異，這是由于核苷酸的變化改變了形成mRNA 5端二級結構的自由能，影響了30S亞基與mRNA的結合，從而造成了蛋白質合成效率上的差異。三、蛋白質的調控作用細菌中有些mRNA結合蛋白可激活靶基因的翻譯。相反，mRNA特異性抑制蛋白則通過與核糖體競爭性結合mRNA分子來抑制翻譯的起始。大腸桿菌中的核糖體蛋白就存在翻譯抑制現象。四、反義RNA的調節(jié)作用RNA調節(jié)是原核基因表達轉錄后調節(jié)的另一種重要機制。細菌相應環(huán)境壓力的改變，會產生一些非編碼小RNA分子，能與mRNA中的特定序列配對并改變其構象，導致翻譯過程的開啟或關閉等作用。第七八章操縱子(opero

38、n)：是指數個功能上相關的結構基因串聯在一起，構成信息區(qū)，連同其上游的調控區(qū)（包括啟動子和操縱基因）以及下游的轉錄終止信號所構成的基因表達單位，所轉錄的RNA為多順反子。在原核生物中，若干結構基因可串聯在一起，其表達受到同一調控系統(tǒng)的調控，這種基因的組織形式稱為操縱子。反式作用因子（trans-acting factor)：能直接或間接地識別或結合在各類順式作用元件核心序列上，參與調控靶基因轉錄效率的蛋白質。弱化子：在trp mRNA 5端有一個長162bp的mRNA片段被稱為前導區(qū)，其中123150位堿基序列如果缺失，trp基因表達可提高6-10倍。mRNA合成起始以后，除非培養(yǎng)基中完全沒有

39、色氨酸，轉錄總是在這個區(qū)域終止，產生一個僅有140個核苷酸的RNA分子，終止trp基因轉錄。這個區(qū)域被稱為弱化子，該區(qū)mRNA可通過自我配對形成莖-環(huán)結構。順式作用元件(cis-acting element)影響自身基因表達活性的非編碼DNA序列。斷裂基因（splite gene）：真核生物結構基因，由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔開但又連續(xù)鑲嵌而成，去除非編碼區(qū)再連接后，可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成的完整蛋白質，這些基因稱為斷裂基因。基因的分子生物學定義：產生一條多肽鏈或功能RNA所必需的全部核苷酸序列?；虮磉_的時間特異性：基因表達的空間特異性：填空題1、真核生物中反式作用因子的DNA結合結構

40、域有：螺旋轉角螺旋，堿性螺旋-環(huán)-螺旋，鋅指，堿性亮氨酸拉鏈，同源域蛋白。2、轉錄調節(jié)因子按功能可以分為：基本轉錄因子和特異轉錄因子。3、真核生物有3類RNA聚合酶，負責轉錄rRNA基因的RNA聚合酶是：RNA聚合酶I4、典型的原核啟動子的四個特征是：轉錄起始位點，原核基因轉錄起始位點通常是嘌呤，-10區(qū)，-35區(qū)。5、乳糖操縱子的結構結構基因有：lacZ，lacY，lacA。選擇題1、在什么情況下，乳糖操縱子的轉錄活性最高（ A ）A 高乳糖，低葡萄糖 B 高乳糖，高葡萄糖 C 低乳糖，低葡萄糖 D低乳糖，高葡萄糖2、在真核基因表達調控中，( B )調控元件能促進轉錄的速率。A 弱化子 B

41、增強子 C repressor D TATA Box3、外顯子是（ D ）A 基因突變的表現 B DNA被水解斷裂開的片段C 不轉錄的DNA D真核生物基因的編碼序列4、關于外顯子和內含子的敘述，正確的是（ C ）A 僅外顯子在DNA模板上有相應的互補序列 B hnRNA上只有外顯子而無內含子序列C 除去內含子及連接外顯子的過程稱為剪接 D 除去外顯子的過程稱為剪接5、不屬于轉錄后修飾的是（ C ）A 腺苷酸聚合 B 5端加帽子結構C 外顯子切除 D 內含子切除 6、AAUAAA序列是（ D ）A 啟動子的辨認序列 B 真核生物的轉錄終止點C 真核生物的反式作用因子 D 真核生物轉錄終止修飾點7、下列哪項不是真核生物轉錄后水平的調控機制（ D ）A 5端加帽和3端多聚腺苷酸化 B mRNA選擇性剪接C mRNA運輸的控制 D 外顯子切除問答題1、乳糖操縱子的作用機制。答：（1）乳糖操縱子的組成：大腸桿菌乳糖操縱子含Z，Y，A三個結構基因,分別編碼半乳糖苷酶，透酶和半乳糖苷乙酰轉移酶，此外還有一個操縱序列O，一個啟動子P和一個調節(jié)基因I。（2）阻遏蛋白的負性調節(jié)：沒有乳糖存在時，I基因編碼的阻遏蛋白結合于操縱序列