異常白細胞檢查

1、異常白細胞檢查（顯微鏡檢查法）1. 實驗原理用瑞氏染色法，對制備好的血涂片進行染色，然后在顯微鏡下進行形態(tài)檢查。2. 標本采集：2.1 標本種類：新抽取的抗凝血或手指末梢血。22 標本要求：2.2.1 抗凝劑采用EDTA K2抗凝。2.2.2 用手指末梢血作白細胞檢驗時，如手指有凍瘡，則主張采用耳垂血。3. 標本儲存：取材后應(yīng)立即推制成血涂片，并盡快送檢。4. 標本運輸：保持干燥，室溫運輸。5. 標本拒收標準：污染，凝固標本不能作測定。6. 實驗材料：瑞氏血細胞染色液，生產(chǎn)廠家：（臺資）珠海貝索生物技術(shù)有限公司。7. 實驗儀器：7.1 儀器名稱：OLYMPUS顯微鏡7.2 儀器廠家：OLYMP

2、US7.3 儀器 型號：OLYMPUS CH308. 操作步驟8.1 采血后推制厚薄適宜的的血膜片，血膜應(yīng)呈舌狀，頭、體、尾清晰可分。8.2 瑞氏染色：將制好的干燥血涂片平置于染色架上，滴加瑞氏染色液A液3-5滴 使其迅速蓋滿血膜，然后加瑞氏染色B液3-5滴，輕輕搖動玻片或用洗耳球吹氣使 A、B染液充分混勻，染色1-2分鐘（氣溫低或涂片較厚時可適當(dāng)延長染色時間）， 用自來水沖去染液，待干。8.3 高倍鏡（必要時油鏡）觀察白細胞形態(tài)。8.結(jié)果判斷與分析9.1 核象變化。（1）核左移：說明外周血中幼稚或桿狀核粒細胞增多，見于急性白血病，急性化膿 性細菌感染，急性中毒，急性溶血。正常妊娠、缺氧及低血

3、壓也可出現(xiàn)細胞核左移 現(xiàn)象。 核右移：說明中性粒細胞核分葉過多，見于巨幼細胞性貧血，惡性貧血，化療 及炎癥恢復(fù)期，遺傳性中性粒細胞分葉過多，尿毒癥等。巨多核中性粒細胞：成熟 中性細胞胞體增大，核分葉過多，常為5-9葉，甚至12-15葉。各葉大小差別很大， 常見于巨幼細胞性貧血。此外，在疾病進行期突然出現(xiàn)核右移，表示預(yù)后不良。 分葉過少：乳酸缺乏癥，假性pelger-huet 異常等。9.2 其他核異常環(huán)形或面包圈型核：見于慢粒，慢性粒細胞白血病，骨髓異常增生綜合征等。中性粒細胞形態(tài)變化9.3 中性粒細胞的毒性變化：1) 細胞大小不均：為骨髓內(nèi)幼稚粒細胞發(fā)生不規(guī)則的分裂增殖所致。2) 中毒顆粒：

4、比正常中性顆粒粗大，大小不等，分布不均勻，染色較深，呈黑色 或紫黑色。有時顆粒很粗大，與嗜堿粒細胞易混淆；有時小而稀少，散雜在正常中 性顆粒之中。含中毒顆粒的中性粒細胞應(yīng)與嗜堿粒細胞區(qū)別，其要點：嗜堿粒細胞核較少分葉、染色較淺、顆粒較大、大小不均、著色更深、細胞邊緣處常分布較多，可分布于核上，胞漿中常見小空泡。 在血片染色偏堿或染色時間過長時，易將中性顆粒誤認為中毒顆粒。但只要注意全片各種細胞 的染色情況，則不難區(qū)別。含中毒顆粒細胞在中性細胞中所占比值稱為毒性指數(shù)。毒性指數(shù)愈大，提示中 毒變性結(jié)果。3) 空泡：可為單個，但常為多個。大小不等，亦可在核中出現(xiàn)。被認為是細胞脂 肪變性的結(jié)果。4)

5、Dohle 體：是中性粒細胞胞漿內(nèi)因毒性變而保留的嗜堿性區(qū)域。呈圓形、梨形 或云霧狀。界限不清，染成灰藍色，直徑為1-2卩m,是胞質(zhì)局部不成熟，即核與胞 質(zhì)發(fā)育不平衡的表現(xiàn)。Dohle小體亦可見于單核細胞中，其意義相同。5) 退行性變：常見者有胞體腫大、結(jié)構(gòu)模糊、邊緣不清晰、核固縮、核腫脹和核 溶解(染色質(zhì)模糊、疏松)等等。如胞質(zhì)破裂后消失，只剩胞膜，則成裸核或藍狀 細胞，退行性變亦可見于衰老細胞，在正常情況下為數(shù)極少。這些毒性變化可單獨出現(xiàn)，亦可同時出現(xiàn)。觀察中性粒細胞的毒性的變化，對 估計疾病的預(yù)后有一定幫助。9.4 其它異常白細胞：1 ) Pelger-Huet 畸形：表現(xiàn)為成熟中性粒細

6、胞核分葉能力減弱。常為桿狀和分兩 葉(其間難成細絲)。呈腎形或啞鈴形。染色質(zhì)聚集成小塊或條索網(wǎng)狀，其間有空 折間隙。為常染色體顯性遺傳異常，一般無臨床癥狀。但也可繼發(fā)于某些嚴重感染、 白血病、骨髓增生異常綜合征、腫瘤轉(zhuǎn)移和某些藥物(如水仙胺、磺基二甲基異惡 唑)治療后。2) Chediak-Higashi 畸形：在 Chediak-Higashi 綜合征患者骨髓和血液各期粒細 胞中，含數(shù)個至數(shù)十個直徑2-5卩m的包涵體，即異常巨大的紫藍或紫紅色顆粒。電 鏡觀察和細胞化學(xué)顯示，巨大顆粒為異常溶酶體。患者容易感染，常伴白化病。為 常染色體顯性遺傳，此異常顆粒也偶見于單核細胞、淋巴細胞中。3）Ald

7、er-Reilly 畸形：其 特點是在中性粒細胞中含巨大深染的嗜天青顆粒，染深 紫色。此異常顆粒與中毒顆粒的區(qū)別是顆粒較大，不伴有白細胞數(shù)增高、核象左移 和空泡等其它毒性變化?；颊叱０橛兄拒浌菭I養(yǎng)不良或的遺傳性粘多糖代謝障礙。 類似顆粒亦可見于其它白細胞中。4） May-Heggl in畸形：患者粒細胞終身含有淡藍色包涵體。實驗證明這種包涵體 與前述常見于嚴重感染、中毒等所見Dohle體相同，但常較大而圓。除中性粒細胞 外，其他粒細胞甚至巨核細胞內(nèi)亦可見到。9.5 淋巴細胞形態(tài)學(xué)變化（1）異型淋巴細胞：在傳染性單核增多癥、病毒性肺肝炎、流行性出血熱等病毒 感染或過敏原刺激下，可使淋巴細胞增生

8、，并出現(xiàn)某些形態(tài)學(xué)變化，稱為異型淋巴 細胞。Dow ney將其按形態(tài)特征分為三型：I型（空泡型）：最多見。胞體比正常淋巴細胞稍大，多為圓形、橢圓形或不 規(guī)則形。核圓形、腎形或分葉狀、常偏位。染色質(zhì)粗糙，呈粗網(wǎng)狀或小塊狀，排列 不規(guī)則。胞質(zhì)豐富，染深藍色，含空泡或呈泡沫狀。n型（幼稚型）：胞體較大，核圓形或卵圓形。染色質(zhì)細致呈網(wǎng)狀排列，可見 1-2個發(fā)生母細胞化的結(jié)果。川型（不規(guī)則型）：胞體較大，外形常不規(guī)則，可有多數(shù)偽足。核形狀及結(jié)構(gòu) 與I型相同或不同，染色質(zhì)較粗糙致密。胞質(zhì)量豐富，染色淡藍或灰藍色，有透明 感，邊緣處著色較深藍色?？捎猩贁?shù)空泡。（2）受放射線損傷后淋巴細胞形態(tài)變化：通過放射生

9、物學(xué)的研究以及對射線損傷 病人觀察，證實淋巴細胞是白細胞中對電離輻射最敏感的細胞。人體遭受較小劑量 的電離輻射之后，雖未出現(xiàn)明顯臨床癥狀，但血中淋巴細胞的數(shù)量卻已顯著減少。 若經(jīng)較大劑量照射后，淋巴細胞迅速減少，劑量越大，減少得越嚴重以致衰竭，與 此同時受損傷的淋巴細胞還出現(xiàn)形態(tài)學(xué)改變，如核固縮、核破壞、雙核的淋巴細胞 以及含有衛(wèi)星核的淋巴細胞。后者是指胞質(zhì)中主核之旁出現(xiàn)小核也稱微核，是射線 損傷后較為特殊的所見。（3）淋巴細胞性白血病時形態(tài)學(xué)變化：在急、慢性淋巴細胞白血病時，不但出現(xiàn) 各階段的原幼細胞，且處于各分階段的白血病的細胞都有特殊的形態(tài)變化。10. 質(zhì)量控制：每30份樣本，抽兩份樣本

10、進行室內(nèi)工作人員比對分析，要求差異 在10 %以內(nèi)。11. 變異的潛在來源11.1 取材不當(dāng)。11.2 涂片過厚或過薄，影響形態(tài)觀察。12. 操作注意事項：12.1 取材后，必須立即涂片。12.1 推好的血膜片應(yīng)在空氣中搖動，使其盡快干燥，以免細胞變形。天氣寒冷或 潮濕時，應(yīng)于37 C溫箱中保溫促干，以免細胞變形縮小。12.3 根據(jù)血膜厚薄，細胞量多少及室內(nèi)溫度等把握好染色時間，使染色效果滿意。12.4 鏡檢時循序檢查，必要時用油鏡確認；并注意整體情況。13. 參考文獻：中華人民共和國衛(wèi)生部醫(yī)政司編。全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）5-7頁。古希臘哲學(xué)大師亞里士多德說：人有兩種，一種即 吃飯是為

11、了活著”一種是 活著是為了吃飯”一個人之所以偉大，首先是因為他有超于常人的心。志當(dāng)存高遠”風(fēng)物長宜放眼量 ”這些古語皆鼓舞人們要樹立雄心壯志，要有遠大的理想。有一位心理學(xué)家到一個建筑工地，分別問三個正在砌磚的工人：你在干什么？ ”第一個工人懶洋洋地說：“我在砌磚?！钡诙€工人缺乏熱情地說：我在砌一堵墻?！钡谌齻€工人滿懷憧憬地說：我在建一座高樓！ ”聽完回答，心理學(xué)家判定：第一個人心中只有磚，他一輩子能把磚砌好就不錯了；第二個人眼中只有墻，好好干或許能當(dāng)一位技術(shù)員；而第三個人心中已經(jīng)立起了一座殿堂，因為他心態(tài)樂觀，胸懷遠大的志向！井底之蛙，只能看到巴掌大的天空；摸到大象腿的盲人，只能認為大象長得像柱子；登上五岳的人，才能感覺一覽眾山小”看到大海的人，就會頓感心胸開闊舒暢