生化知識點總結(jié)[共17頁]

1、 C、H、O 三種元素所組成,是一類多羥基醛或多羥基酮,20 種氨基酸的化學結(jié)構(gòu)（除甘氨酸外,均屬 非極性 R 基氨基酸： Ala Leu Ile Pro Phe Trp Met必需氨基酸： Val Leu Ile Thr Met Lys Phe Trp脯氨酸：沒有自由的 氨基,它是一種 亞氨基胱氨酸：是關(guān)半胱氨酸在蛋白質(zhì)中的主要存在形式pH 條件下的泳動情況常在試題中出現(xiàn)。氨基酸自動分析儀的使用要了解。Ehrlish ）；酪氨酸米倫氏Pauly）（也可以檢驗酪氨酸）等。常常在選擇題和氨基酸的序構(gòu)包括二級結(jié)構(gòu)（包括 螺旋結(jié)構(gòu), 折疊片層以及 轉(zhuǎn)角和無規(guī)則卷曲,以氫鍵維持其穩(wěn)定性） 、三級結(jié)構(gòu)的

2、化學方法, 后者是基于分子克隆的分子生物學方法。 重組 DNA 測序法首先需要得到編碼某種蛋白質(zhì)的基因片段) ,然后測定 DNA 分子中核苷酸的排列順序。 再根據(jù)三個核苷酸編碼一個氨基酸的原則扒演出氨基酸的排列(DNA順序。不必首先純化該種蛋白質(zhì)。這一復雜的過程借助于計算機的幫助可變得比較簡單并高效。而解法則比較復雜。這首先需要純化一定量的待測蛋白質(zhì)裂解成大小不同的肽段；將每一肽段作序列分析,再連接起來。兩種方法各有其特點。可以相互印證和補充。在Edman 化學降解中,常用肽羰與異硫氰酸苯酯反應,再用次序稀酸處理, 成為異硫氰酸苯酯衍生物, 用層析進行鑒定。 可作為 N 末羰鑒定的化學試劑還有

3、 FDNB 、DNS-CL(pI) 溶液中帶電并在電場中向一極移動原理來分離蛋白質(zhì)。 酶這一部分很重要, 近幾年來生物化學的熱點由核酸轉(zhuǎn)向蛋白質(zhì), 而人體各效用的實現(xiàn),最終還需依靠酶來完成,有關(guān)酶的概念和化學本質(zhì)經(jīng)常在各地的研究生入學考試題中出現(xiàn),主要有以下一些考點：(2) 度特異性：酶的專一性主要是由酶特定的結(jié)構(gòu)決定的,(3) 酶促反應沒有副作用；果糖二磷酸醛縮酶 EC4.1.2.13磷酸葡萄糖異構(gòu)酶 EC5.3.1.9pH、最適溫度、酶的比km 的意義用及其求法是出現(xiàn)最頻繁的考點。S。km 為酶的特征常數(shù), 單位為 mmol/L 。不同酶有不同的 km 值,同一酶催化不同底物則有不同的km

4、 值 。各同工酶的 km 值也不同, 可借 km 值 作用物親和力大； km 大則反映酶與作用物親和力小。雙倒數(shù)作圖法是求 km 和 Vmax 最常用的作圖法。 它將米氏方程作倒數(shù)處理, 得下式： 以 1/V 對 1/S 作圖,可得一直線,從縱軸處的截距1/Vmax 及橫軸上的截距 -1/km ,可準確求得 km 值和 Vmax 。pH 不是酶的特征常數(shù),而且并不是所有的最適 pH 都近中性,如胃蛋白酶的最c. 當溫度繼續(xù)升高,酶蛋白變性增加,反應速度開始下降。d. 酶活性隨溫度而,但低溫一般不使酶毀壞。e. 若酶捉反應進行時間短暫,其最適溫度可相應提高。 VmaxKm/Vmax1/ Vmax

5、-1/ Vmax 腺苷酸 (AMP) 鳥苷酸 (GMP)胞苷酸 (AMP) 尿苷酸 (UMP)脫氧腺苷酸 (dAMP) 脫氧鳥苷酸 (dGMP)脫氧胞苷酸 (dAMP) 胸苷酸 (dTMP)(1)DNA 的一級結(jié)構(gòu)： 指 DNA 分子中核苷酸的排列順序及連接方式。 核苷酸的排列順序代表了遺傳信息。 四種核苷酸是通過 3,5磷酸二酯鍵連接在一起的。(2)DNA 的二級結(jié)構(gòu)： 雙螺旋結(jié)構(gòu)中的堿基組成規(guī)則： A=T ,G=C ,且 A+G=T+C ；雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的具體內(nèi)容, Z-DNA(3)DNA 的三級結(jié)構(gòu)： 主要形式為超螺旋, 生物體中最常見的超螺旋為負超螺旋。 負超螺旋的存在可以使基對打開所

6、需要的能量降低41KJ/mol ,因而,有利于 DNA 的雙鏈分開。許多 DNA 旋轉(zhuǎn)酶的抑制劑,如萘啶酮酸,香豆霉素和新生霉毒等均可以抑制大腸桿菌的DNA 復制。(二氫尿嘧啶環(huán)、反密碼子環(huán)、mRNA 的三聯(lián)體密碼形成堿基互補配對,解讀遺傳密碼, 稱為反密碼子, 次黃嘌呤 (I) 常出現(xiàn)于反密碼子中。 氨基酸臂 3末端的 CCA-OH 單鏈用于連接該 tRNATRNA 的三級結(jié)構(gòu)呈倒 L 型,其中反密碼環(huán)和氨基酸臂分別位于倒4核酸的性質(zhì)：主要是 DNA 的變性及復性。涉及到一些基本的概念,如：變性、復性、雜交、紫外吸收等,其中Tm 值、增色效應、減色效應是經(jīng)常出現(xiàn)的考點；此外,還有變性及復性

7、DNA 理化性質(zhì)的改變。許多試劑或一些物理因素,例如酸、堿、熱、低離子強度的影響,將使氫鍵斷裂,使DNA 由起初堅固的、螺旋(3)粘度下降： 天然 DNA 溶液具有很高的粘度, 這是由于 DNA 相當堅固的雙螺旋結(jié)構(gòu)及其長棒狀的性質(zhì)所決定的。當 DNA 變性雙螺旋解型 粘度急劇下降,浮力密度升高。DNA 變性在一定條件下是可逆的。變性 260nm 波長處具有最大光吸收。 DNA 變性后,在 260nm 處的紫外吸收增高,稱為增色Cytc1復合體 IIIATP復合體 I V ：H S COCN 抑制復合體 IV 。4氧化磷酸化的作用機理：主要有化學偶聯(lián)假立、構(gòu)象偶聯(lián)假說和化學滲透假說等幾種假說。

8、目前較為普遍公認的學說是“化學滲透學說” （chemiosnotic theory ）”。也是考試中出現(xiàn)得較多的一個考點。該學說認為, 電子經(jīng)呼吸鏈傳遞釋放的能量, 可將質(zhì)子 H 從線粒體基質(zhì)側(cè)泵到內(nèi)膜外側(cè), 產(chǎn)生質(zhì)子電化學梯度而積蓄能量。當質(zhì)子順此梯度經(jīng) ATP 合酶 F 部分回流時,其 F 部分催化 ADP 和 Pi 生成 A TP。 Na K ATP 酶,使 ATP 加速分解為 ADP 和 Pi,促進由于線粒體內(nèi)膜對物質(zhì)的通透性具有嚴格的選擇性,在線粒體外生成的化,需要借助穿梭系統(tǒng)才能使2H 進入線粒體內(nèi)。體內(nèi)有兩種穿梭機制： 磷酸甘油穿梭（ NADH FAD2H ,形NADH NADH

9、 ,形成 3ATP）。ATP 為中心。 磷酸肌酸是肌肉3磷酸甘油酸 1ATP1ATPCoA ,NADH H ,COTPP、硫辛酸、CoA 、 糖酵解和有氧氧化的比較有氧氧化a,b 兩種形式,去磷酸化的a 型是有活性的,而磷酸化的能量（指糖原上每生成或降解一個糖原合成酶（連接 1,4糖苷鍵）分枝酶（連接連接 1,6糖苷鍵）糖基轉(zhuǎn)移酶 （將 1,6鏈連接于分枝點的四個殘基的葡三糖轉(zhuǎn)移到另一鏈） 6磷酸酶。（1）乙醛酸循環(huán)的關(guān)鍵酶：異檸檬酸裂解酶和蘋果酸合成酶。脂肪分解代謝首先是脂肪的動員,在胞液內(nèi)進行。脂肪的動員是以甘油三酯脂肪酶起關(guān)鍵性作用,它是脂肪分解的限速酶,也是激素敏感性脂肪酶,受多種激素

10、調(diào)節(jié)。脂肪酸分解代謝過程：主要是脂肪酸的 氧化,包括：（1）脂肪酸的活化脂酰輔酶 A 的生成 （在胞液）在胞液中脂酰輔酶 A 合成酶（存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及線粒體外膜上） 的作用下, 由 ATP 提供能量, 在有 CoASH 存在下,可將脂肪酸活化生成脂酰CoA。I 和內(nèi)側(cè)的肉堿脂?；D(zhuǎn)移酶I 是 氧化的限速酶。A 生成 1 分子乙酰 CoA 和 1 分子比原來少了 2 個碳原子的 CoA 脂酰。后者可再進行脫氫、加水、再脫氫和硫解,如A 分解成若干乙酰 CoA 、FADH 和 NADH H 。FADH 和 NADH H 通過呼吸鏈經(jīng)氧化磷酸化后產(chǎn)生能量。 氧化HMGCoA 羥丁酸都先被轉(zhuǎn)化成乙酰 A

11、CP）。在胞液內(nèi)進行。 酮脂酰 ACP 合成酶CoA 參加的那步反應。（3）合成原料：乙酰 CoA 、NADPH H ,它是葡萄糖、氨基酸及脂肪酸在線粒體內(nèi)的分解代謝的產(chǎn)物,需經(jīng)檸檬7脫氫膽固醇、膽固醇酯、維生素PRPP,作為重要中間產(chǎn)物,可參與哪些反應考題中出現(xiàn)過多次） （1） 一般是在二磷酸核苷的水平上生成, 此特點既適于脫氧嘌呤核苷酸, 也適于脫氧嘧啶核苷酸 （dUDP 和 dCDP）。PRPP反應生成嘧啶核苷酸。CO 。基中胞嘧啶和尿嘧啶分解主要考察基本概念、復制方式、復制的基本過程、復制的酶、知識點。 NAD6 種蛋白結(jié)合形成引發(fā)體。（1） 起始：過程較復雜,把DNA 解成單鏈和生成

12、引物,包括在拓撲酶和解鏈酶的作用下把原核生物： 催化酶是 DNA 聚合酶 III ,是多亞基的不對稱二聚體, 各有核心酶組分, 在連續(xù)和不吉分別執(zhí)行效用。DNA 采取的特殊復制形式。5逆轉(zhuǎn)錄：依賴 RNA 的 DNA 合成作用,以 RNA 為模板,由 dNTP 聚合成 DNA 分子。其過程包括三步：以為模板合成 DNA ,雜化雙鏈上 RNA 的水解,再以單鏈 DNA 為模板合成雙鏈 DNA 。方向也是從 5 3RNA逆轉(zhuǎn)錄酶：依賴 RNA 的 DNA 聚合酶。具有三種酶活性：RNA 指導的 DNA 合成反應RNA 的水解反應（1）轉(zhuǎn)錄的模板： DNA 雙鏈中按堿基配對能指引轉(zhuǎn)錄生成（2）酶：

13、RNA 聚合酶。起始過程和終止過程中起作用的因子或序列,原核生物中錄終止信號。另外,在轉(zhuǎn)錄終止部位有特殊的堿基序列,即一段因子能辨認啟動子部位,起始轉(zhuǎn)錄 因子可識別轉(zhuǎn)GC 富集區(qū),隨后是一段 AT 富集區(qū)。在 GC 富集區(qū)內(nèi)組成一段反向重得序列, 轉(zhuǎn)錄至此生成的 RNA 在相應序列中形成了發(fā)卡結(jié)構(gòu), 使 RNA 聚合酶脫離模板而終止轉(zhuǎn)錄。 RNA ,其前體是非均一 RNA （hnRNA ）。HnRNA 需要經(jīng)垞復雜的加工過程才剪接： 去除內(nèi)含子部分, 再將外顯子連接起來, 此過程中有多種酶和其他活性物質(zhì)參與 （如 snRNA、UsnRNA ；第十一章 蛋白質(zhì)代謝FAD ）和 D氨基酸氧化酶。基

14、酸,如谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ GPT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（ GOT ）。（1） 關(guān)鍵酶：氨基酸脫羧酶（2） 輔酶：為磷酸吡哆醛 氨基甲酰磷酸合成酶 II涉及基本概念較多,翻譯、 ribozyme（核酶）、翻譯的起始因子、延長因子、釋放因子、氨基酸密碼的簡并性、擺動性、 SD 序列、信號肽、酶的誘導、端粒酶等。合成原料氨基酸,以 mRNA 為模板, tRNA 為運載體,核蛋白體為裝配場所。此外,還有有關(guān)的酶蛋白質(zhì)因子、tRNA 從“給位”上脫落,并促進移動。 RF 使大亞基轉(zhuǎn)肽酶將“給位”上已合成的肽鏈水解釋放。2遺傳密碼的特點：連續(xù)性；簡并性；擺動性；通用性GTP,真核還需 ATP。（2）肽鏈延長階段： 每增加一個氨基酸, 就按進位、 轉(zhuǎn)肽、脫落和移位這四個步驟重復進行。 進位除需延