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1、 第一節(jié)第一節(jié) 細(xì)菌細(xì)胞的代謝過(guò)程細(xì)菌細(xì)胞的代謝過(guò)程細(xì)菌與真核生物新陳代謝的主要區(qū)別:細(xì)菌與真核生物新陳代謝的主要區(qū)別: 1.細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖速度快細(xì)菌生長(zhǎng)和繁殖速度快 2.利用各種化合物作為能源的能力強(qiáng)利用各種化合物作為能源的能力強(qiáng) 3.營(yíng)養(yǎng)需求多種多樣營(yíng)養(yǎng)需求多種多樣 4 .可利用超常流水線合成大分子物質(zhì)可利用超常流水線合成大分子物質(zhì) 5.細(xì)菌能產(chǎn)生特殊物質(zhì)細(xì)菌能產(chǎn)生特殊物質(zhì) 物質(zhì)攝取物質(zhì)攝取生物合成生物合成聚合作用聚合作用組裝組裝細(xì)菌細(xì)胞的代謝過(guò)程細(xì)菌細(xì)胞的代謝過(guò)程一、物質(zhì)攝取一、物質(zhì)攝取n單純擴(kuò)散單純擴(kuò)散n促進(jìn)擴(kuò)散促進(jìn)擴(kuò)散n主動(dòng)運(yùn)輸主動(dòng)運(yùn)輸n基團(tuán)轉(zhuǎn)位基團(tuán)轉(zhuǎn)位 需要載體蛋白,需要能量。兩個(gè)
2、突出特點(diǎn)需要載體蛋白,需要能量。兩個(gè)突出特點(diǎn): (1)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中物質(zhì)發(fā)生了化學(xué)變化;轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中物質(zhì)發(fā)生了化學(xué)變化; (2)主要存在于厭氧菌和兼性厭氧菌中。主要存在于厭氧菌和兼性厭氧菌中。 二、生物合成二、生物合成 1. 作為鑒別細(xì)菌的主要措施作為鑒別細(xì)菌的主要措施 2. 細(xì)菌生物合成環(huán)節(jié)可被藥物影響細(xì)菌生物合成環(huán)節(jié)可被藥物影響 三、聚合作用三、聚合作用ndna復(fù)制復(fù)制 半保留復(fù)制半保留復(fù)制n轉(zhuǎn)轉(zhuǎn) 錄錄n翻譯翻譯轉(zhuǎn)轉(zhuǎn) 錄錄翻翻 譯譯dna mrna 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)四、組裝四、組裝n自我組裝(自我組裝(self-assembly): 自我組裝可自我組裝可在體外試管內(nèi)完成,鞭毛及核糖體即采用此在體外試
3、管內(nèi)完成,鞭毛及核糖體即采用此種方式。種方式。n指導(dǎo)組裝(指導(dǎo)組裝(guided assembly): 細(xì)菌表面細(xì)菌表面膜結(jié)構(gòu)則只能依賴指導(dǎo)組裝來(lái)完成。膜結(jié)構(gòu)則只能依賴指導(dǎo)組裝來(lái)完成。 第二節(jié)第二節(jié) 細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖細(xì)菌的生長(zhǎng)繁殖一、細(xì)菌個(gè)體的生長(zhǎng)繁殖一、細(xì)菌個(gè)體的生長(zhǎng)繁殖 世代時(shí)間世代時(shí)間:一個(gè)菌體分裂為兩個(gè)菌體所需的時(shí)間一個(gè)菌體分裂為兩個(gè)菌體所需的時(shí)間 。 一般一般20-30min。二、細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖二、細(xì)菌群體的生長(zhǎng)繁殖 生長(zhǎng)曲線(生長(zhǎng)曲線(growth curve ):):將細(xì)菌接種在液體將細(xì)菌接種在液體 培養(yǎng)基并置于適宜的溫度中,定時(shí)取樣檢查活菌數(shù),可發(fā)培養(yǎng)基并置于適宜的溫度中,定
4、時(shí)取樣檢查活菌數(shù),可發(fā) 現(xiàn)其生長(zhǎng)過(guò)程具有規(guī)律性。以時(shí)間為橫坐標(biāo),以活菌數(shù)的現(xiàn)其生長(zhǎng)過(guò)程具有規(guī)律性。以時(shí)間為橫坐標(biāo),以活菌數(shù)的 對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),可得出一條生長(zhǎng)曲線。對(duì)數(shù)為縱坐標(biāo),可得出一條生長(zhǎng)曲線。液體培養(yǎng)細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線液體培養(yǎng)細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線n細(xì)菌來(lái)到新環(huán)境的一個(gè)適應(yīng)過(guò)程。細(xì)菌來(lái)到新環(huán)境的一個(gè)適應(yīng)過(guò)程。n特點(diǎn):特點(diǎn): (1)代謝活躍,合成并積累所需酶系統(tǒng)代謝活躍,合成并積累所需酶系統(tǒng) ; (2) rna含量明顯增多,但含量明顯增多,但dna的量無(wú)變化的量無(wú)變化; (3)細(xì)菌數(shù)并不增加細(xì)菌數(shù)并不增加1.遲緩期(遲緩期(lag phase) 細(xì)菌此時(shí)生長(zhǎng)迅速,以恒定速度進(jìn)行分裂繁殖,活細(xì)菌此時(shí)生長(zhǎng)迅速
5、,以恒定速度進(jìn)行分裂繁殖,活菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng),達(dá)到頂峰,生長(zhǎng)曲線接近一菌數(shù)以幾何級(jí)數(shù)增長(zhǎng),達(dá)到頂峰,生長(zhǎng)曲線接近一條斜的直線。一般而言,該期的病原菌條斜的直線。一般而言,該期的病原菌致病力最強(qiáng),致病力最強(qiáng),其形態(tài)、染色特性及生理活性均較典型,對(duì)抗菌藥其形態(tài)、染色特性及生理活性均較典型,對(duì)抗菌藥物等的作用較為敏感。物等的作用較為敏感。2. 對(duì)數(shù)期(對(duì)數(shù)期(logarithmic phase) 新繁殖的活菌數(shù)與死菌數(shù)大致平衡新繁殖的活菌數(shù)與死菌數(shù)大致平衡 ,營(yíng)養(yǎng)的消,營(yíng)養(yǎng)的消 耗、耗、代謝產(chǎn)物的蓄積等。代謝產(chǎn)物的蓄積等。 3.穩(wěn)定期(穩(wěn)定期(stationary phase)4.衰亡期(衰亡期(
6、decline phase)死菌數(shù)超過(guò)活菌數(shù)死菌數(shù)超過(guò)活菌數(shù),如不移植到新的培養(yǎng)基,最如不移植到新的培養(yǎng)基,最終可全部死亡,此期細(xì)菌的菌體變形或自溶,終可全部死亡,此期細(xì)菌的菌體變形或自溶,染色不典型,難以進(jìn)行鑒定染色不典型,難以進(jìn)行鑒定 。第三節(jié)第三節(jié) 細(xì)菌的人工培養(yǎng)細(xì)菌的人工培養(yǎng) 培養(yǎng)基(培養(yǎng)基(culture medium) 是人工配制的基質(zhì),含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖是人工配制的基質(zhì),含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基制成后,通常都要必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)基制成后,通常都要經(jīng)滅菌處理。經(jīng)滅菌處理。 (一一)按營(yíng)養(yǎng)組成的差異按營(yíng)養(yǎng)組成的差異 1.基礎(chǔ)培養(yǎng)基基礎(chǔ)培養(yǎng)基 : 基本營(yíng)養(yǎng)成分基本營(yíng)養(yǎng)成分
7、 2.營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基 : 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加一些其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如葡萄在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加一些其它營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如葡萄 糖、血液、血清、生長(zhǎng)因子等糖、血液、血清、生長(zhǎng)因子等 培養(yǎng)基的分類培養(yǎng)基的分類 普通培養(yǎng)基普通培養(yǎng)基 血液培養(yǎng)基血液培養(yǎng)基 1.固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基 : 1.5%2%瓊脂,用于細(xì)菌分離純化。瓊脂,用于細(xì)菌分離純化。 2.半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基: 0.5%瓊脂,作穿刺試驗(yàn)。瓊脂,作穿刺試驗(yàn)。 3.液體培養(yǎng)液體培養(yǎng) : 擴(kuò)增純培養(yǎng)的菌體。擴(kuò)增純培養(yǎng)的菌體。 (二二)按狀態(tài)的差異按狀態(tài)的差異細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況細(xì)菌在固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況光滑型菌落光滑型菌落粗糙型菌落粗糙型
8、菌落粘液型菌落粘液型菌落 細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況1:有動(dòng)力:有動(dòng)力2:無(wú)動(dòng)力:無(wú)動(dòng)力 細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況菌膜菌膜菌沉淀菌沉淀均勻渾濁均勻渾濁對(duì)照對(duì)照 1.鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入特定底物,觀察細(xì)菌在其生長(zhǎng)后分解在培養(yǎng)基中加入特定底物,觀察細(xì)菌在其生長(zhǎng)后分解 底物如何,從而鑒別細(xì)菌。底物如何,從而鑒別細(xì)菌。 2.選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基:在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),使之抑制一類細(xì)菌在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),使之抑制一類細(xì)菌 生長(zhǎng),而有利于另一類細(xì)菌生長(zhǎng),從而將后者選擇出來(lái)。生長(zhǎng),而有利于另一類細(xì)菌生長(zhǎng),從而將后者選擇出來(lái)。 3.厭氧培養(yǎng)基厭氧培養(yǎng)基:專供厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別用專供厭氧菌的分離、培養(yǎng)和鑒別用. 將普通培養(yǎng)基放在將普通培養(yǎng)基放在 無(wú)氧環(huán)境中培養(yǎng),或者使培養(yǎng)基本身成為無(wú)氧的環(huán)境。無(wú)氧環(huán)境中培養(yǎng),或者使培養(yǎng)基本身成為無(wú)氧的環(huán)境。(三三)按功能的差異按功能的差異麥康凱瓊脂培
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