第二十一章臨床免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量保證

1、第二十一章第二十一章臨床免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量保證臨床免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量保證第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 一、與質(zhì)量保證相關(guān)的定義一、與質(zhì)量保證相關(guān)的定義 二、實(shí)驗(yàn)方法診斷效率評(píng)價(jià)二、實(shí)驗(yàn)方法診斷效率評(píng)價(jià)第二節(jié)第二節(jié) 免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制原則免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制原則 一、標(biāo)本的正確收集及處理一、標(biāo)本的正確收集及處理 二、標(biāo)準(zhǔn)化操作及流程二、標(biāo)準(zhǔn)化操作及流程 三、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的應(yīng)用三、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的應(yīng)用 四、實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境、設(shè)施和設(shè)備四、實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境、設(shè)施和設(shè)備第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)量保證、室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)之間質(zhì)量保證、室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評(píng)之間的關(guān)系的關(guān)系第四節(jié)第四節(jié) 常用免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制常用免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制 一、免

2、疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制中常用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法的選一、免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制中常用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法的選擇擇 二、定性免疫檢驗(yàn)二、定性免疫檢驗(yàn) 三、定量免疫檢驗(yàn)三、定量免疫檢驗(yàn)第五節(jié)第五節(jié) 免疫檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的數(shù)據(jù)處理免疫檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的數(shù)據(jù)處理 一、免疫檢驗(yàn)質(zhì)量保證的意義一、免疫檢驗(yàn)質(zhì)量保證的意義 思考題思考題小結(jié)小結(jié) 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 為保證病人臨床診療或臨床實(shí)驗(yàn)研究的為保證病人臨床診療或臨床實(shí)驗(yàn)研究的有效性，臨床實(shí)驗(yàn)室采取一系列有效的措有效性，臨床實(shí)驗(yàn)室采取一系列有效的措施證明其測(cè)定數(shù)據(jù)能夠達(dá)到所確定的質(zhì)量施證明其測(cè)定數(shù)據(jù)能夠達(dá)到所確定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，這就是質(zhì)量保證的內(nèi)容。標(biāo)準(zhǔn)，這就是質(zhì)量保證的內(nèi)容。 l質(zhì)量保

3、證質(zhì)量保證(quality assurance,qa(quality assurance,qa) ) 為一產(chǎn)品為一產(chǎn)品或服務(wù)滿足特定質(zhì)量要求提供充分或服務(wù)滿足特定質(zhì)量要求提供充分可信性可信性所必所必要的要的有計(jì)劃的和系統(tǒng)的措施有計(jì)劃的和系統(tǒng)的措施。 l室內(nèi)質(zhì)量控制室內(nèi)質(zhì)量控制（internal quality internal quality control,iqccontrol,iqc) ) 由由實(shí)驗(yàn)室工作人員實(shí)驗(yàn)室工作人員，采取一，采取一定的方法和步驟，連續(xù)評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)室工作的可定的方法和步驟，連續(xù)評(píng)價(jià)本實(shí)驗(yàn)室工作的可靠性程度?？啃猿潭?。一、與質(zhì)量保證相關(guān)的定義一、與質(zhì)量保證相關(guān)的定義l室間

4、質(zhì)量評(píng)價(jià)室間質(zhì)量評(píng)價(jià) （external quality external quality assessment, eqaassessment, eqa） 為客觀比較一實(shí)驗(yàn)為客觀比較一實(shí)驗(yàn)室的測(cè)定結(jié)果與靶值的差異，由室的測(cè)定結(jié)果與靶值的差異，由外單位外單位機(jī)構(gòu)機(jī)構(gòu)客觀地評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)誤客觀地評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)室的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)誤差并校正結(jié)果差并校正結(jié)果l準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度 (accuracy)(accuracy) : :待測(cè)物的測(cè)定值與其真待測(cè)物的測(cè)定值與其真值的一致性程度。值的一致性程度。l偏倚偏倚 (bias) (bias) 待測(cè)物的測(cè)定值與一可接受參待測(cè)物的測(cè)定值與一可接受參考值之間的差異?？贾抵g

5、的差異。l精密度精密度(precision) (precision) 在一定條件下所獲得的在一定條件下所獲得的獨(dú)立的測(cè)定結(jié)果之間的一致性程度。獨(dú)立的測(cè)定結(jié)果之間的一致性程度。準(zhǔn)確度好的實(shí)驗(yàn)，其精密度不一定好；準(zhǔn)確度好的實(shí)驗(yàn)，其精密度不一定好；準(zhǔn)確度差的實(shí)驗(yàn)，其精密度則不一定差；反之亦然。準(zhǔn)確度差的實(shí)驗(yàn)，其精密度則不一定差；反之亦然。 測(cè)定的精密度與準(zhǔn)確度之間的關(guān)系測(cè)定的精密度與準(zhǔn)確度之間的關(guān)系l 重復(fù)性條件重復(fù)性條件(repeatability conditions) (repeatability conditions) 是指在短的間隔時(shí)間內(nèi)，在同一實(shí)驗(yàn)室對(duì)是指在短的間隔時(shí)間內(nèi)，在同一實(shí)驗(yàn)室對(duì)

6、相同的測(cè)定項(xiàng)目使用同一方法和同一儀器相同的測(cè)定項(xiàng)目使用同一方法和同一儀器設(shè)備，由相同的操作者獲得獨(dú)立的測(cè)定結(jié)設(shè)備，由相同的操作者獲得獨(dú)立的測(cè)定結(jié)果的條件。果的條件。l批批 (run) (run) 在相同條件下所獲得的一組測(cè)定。在相同條件下所獲得的一組測(cè)定。 l均值均值（meanmean） l標(biāo)準(zhǔn)差（標(biāo)準(zhǔn)差（standard deviation, sd)standard deviation, sd)l變異系數(shù)變異系數(shù)（coefficient of variation, cvcoefficient of variation, cv） l正態(tài)分布正態(tài)分布(gaussian distribution)

7、 (gaussian distribution) 當(dāng)一質(zhì)控物用同一方法在不同的時(shí)間重復(fù)多次測(cè)當(dāng)一質(zhì)控物用同一方法在不同的時(shí)間重復(fù)多次測(cè)定，得到一個(gè)兩頭低，中間高，中為所有測(cè)定值定，得到一個(gè)兩頭低，中間高，中為所有測(cè)定值的均值，左右對(duì)稱的的均值，左右對(duì)稱的“鐘形鐘形”曲線，又稱高斯分曲線，又稱高斯分布。布。 l正態(tài)分布的基本統(tǒng)計(jì)學(xué)含義可用均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差正態(tài)分布的基本統(tǒng)計(jì)學(xué)含義可用均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差（s s）和概率來(lái)說(shuō)明。）和概率來(lái)說(shuō)明。l診斷敏感性診斷敏感性（sensitivity of diagnosissensitivity of diagnosis） 是指將實(shí)際患病者正確地判斷為陽(yáng)性（真陽(yáng)性）是指

8、將實(shí)際患病者正確地判斷為陽(yáng)性（真陽(yáng)性）的百分率。的百分率。l診斷特異性診斷特異性（specificity of diagnosisspecificity of diagnosis） 是指將實(shí)際無(wú)病者正確地判斷為陰性（真陰性）是指將實(shí)際無(wú)病者正確地判斷為陰性（真陰性）的百分率。的百分率。二、實(shí)驗(yàn)方法診斷效率評(píng)價(jià)二、實(shí)驗(yàn)方法診斷效率評(píng)價(jià)l診斷效率診斷效率（efficiency of diagnosisefficiency of diagnosis） 是指是指能準(zhǔn)確區(qū)分患者和非患者的能力。能準(zhǔn)確區(qū)分患者和非患者的能力。l陽(yáng)性預(yù)測(cè)值陽(yáng)性預(yù)測(cè)值（positive predictive value, po

9、sitive predictive value, ppvppv） 是指特定試驗(yàn)方法測(cè)定得到的陽(yáng)性結(jié)是指特定試驗(yàn)方法測(cè)定得到的陽(yáng)性結(jié)果中真陽(yáng)性的比率。果中真陽(yáng)性的比率。l陰性預(yù)示值陰性預(yù)示值(negative predictive value, (negative predictive value, npv) npv) 是指特定試驗(yàn)方法測(cè)定得到的陰性結(jié)是指特定試驗(yàn)方法測(cè)定得到的陰性結(jié)果中真陰性的比率。果中真陰性的比率。第二節(jié)第二節(jié) 免疫檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制原則的質(zhì)量控制原則l標(biāo)本類型及采集容器標(biāo)本類型及采集容器l標(biāo)本采集時(shí)間及患者準(zhǔn)備標(biāo)本采集時(shí)間及患者準(zhǔn)備l內(nèi)源性干擾因素內(nèi)源性干擾因素l外源性

10、干擾因素外源性干擾因素一、標(biāo)本的正確收集及處理一、標(biāo)本的正確收集及處理l最常用的標(biāo)本：最常用的標(biāo)本：血液，包括血清、血漿血液，包括血清、血漿和全血。唾液或尿液和全血。唾液或尿液 。l建議采用建議采用真空采血管及蝶形針具真空采血管及蝶形針具，以免，以免直接接觸血液。采集容器最好為一次性直接接觸血液。采集容器最好為一次性無(wú)菌密閉容器。無(wú)菌密閉容器。標(biāo)本類型及采集容器標(biāo)本類型及采集容器 標(biāo)本采集時(shí)間及患者準(zhǔn)備標(biāo)本采集時(shí)間及患者準(zhǔn)備l激素和治療藥物激素和治療藥物l感染性病原體抗原、抗體感染性病原體抗原、抗體l腫瘤標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物l特定蛋白特定蛋白內(nèi)源性干擾因素內(nèi)源性干擾因素 l類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性

11、抗體、治療性抗體、類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、治療性抗體、自身抗體、溶菌酶、磷脂、藥物小分子、總蛋自身抗體、溶菌酶、磷脂、藥物小分子、總蛋白濃度等白濃度等l稀釋標(biāo)本稀釋標(biāo)本l改變標(biāo)記抗體改變標(biāo)記抗體l用變性用變性iggigg預(yù)先封閉標(biāo)本中預(yù)先封閉標(biāo)本中rfrfl測(cè)抗原測(cè)抗原, ,可加入還原劑如可加入還原劑如2-2-巰基乙醇去除巰基乙醇去除rfrfl使用特異的雞抗體使用特異的雞抗體igyigy作為標(biāo)記或固相抗體作為標(biāo)記或固相抗體類風(fēng)濕因子干擾的排除類風(fēng)濕因子干擾的排除補(bǔ)體干擾補(bǔ)體干擾l固相抗體和標(biāo)記二抗可抗體分子發(fā)生變構(gòu)，從固相抗體和標(biāo)記二抗可抗體分子發(fā)生變構(gòu)，從而其而其fcfc段的補(bǔ)體段的補(bǔ)

12、體c1qc1q結(jié)合位點(diǎn)被暴露出來(lái)，這結(jié)合位點(diǎn)被暴露出來(lái)，這樣樣c1qc1q就成為一個(gè)中介物將二者交聯(lián)起來(lái)，從就成為一個(gè)中介物將二者交聯(lián)起來(lái)，從而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。l固相抗體也會(huì)因?yàn)榛罨a(bǔ)體的結(jié)合，封閉抗體固相抗體也會(huì)因?yàn)榛罨a(bǔ)體的結(jié)合，封閉抗體的抗原表位結(jié)合能力，而引起假陰性結(jié)果或結(jié)的抗原表位結(jié)合能力，而引起假陰性結(jié)果或結(jié)果偏低。果偏低。 補(bǔ)體干擾的排除補(bǔ)體干擾的排除l56 30min56 30min加熱可使標(biāo)本中補(bǔ)體加熱可使標(biāo)本中補(bǔ)體c1qc1q滅滅活活l使用特異的雞抗體使用特異的雞抗體igyigy作為標(biāo)記或固相作為標(biāo)記或固相抗體抗體異嗜性抗體的干擾異嗜性抗體的干擾天然的異嗜

13、性抗體（天然的異嗜性抗體（iggigg）可分為兩類）可分為兩類: :l可結(jié)合于山羊、小鼠、大鼠、馬和?？山Y(jié)合于山羊、小鼠、大鼠、馬和牛iggigg的的fabfab區(qū)域區(qū)域l可結(jié)合于小鼠、馬、牛和兔可結(jié)合于小鼠、馬、牛和兔iggigg的的fcfc區(qū)表位，區(qū)表位，通過(guò)交聯(lián)固相和標(biāo)記的單抗或多抗而出現(xiàn)假陽(yáng)通過(guò)交聯(lián)固相和標(biāo)記的單抗或多抗而出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)。性反應(yīng)。異嗜性抗體干擾的排除異嗜性抗體干擾的排除l使用特異的兔使用特異的兔f f(ab)2(ab)2片段片段作為固相或標(biāo)記抗體。作為固相或標(biāo)記抗體。l在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過(guò)量的動(dòng)物在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過(guò)量的動(dòng)物igig，封閉可能存在，封閉可能存

14、在的異嗜性抗體。但加入量不足或亞類不同時(shí)無(wú)效。的異嗜性抗體。但加入量不足或亞類不同時(shí)無(wú)效。l使用靶特異的非使用靶特異的非igig親和蛋白（親和蛋白（affibodyaffibody）替代固相或標(biāo)記）替代固相或標(biāo)記抗體之一。采用噬菌體展示技術(shù)展示來(lái)自單個(gè)金黃色葡萄抗體之一。采用噬菌體展示技術(shù)展示來(lái)自單個(gè)金黃色葡萄球菌球菌a a蛋白（蛋白（spaspa）聯(lián)合文庫(kù)的人聯(lián)合文庫(kù)的人igaiga結(jié)合親和蛋白，用于結(jié)合親和蛋白，用于igaiga的測(cè)定，不受異嗜性抗體的影響。的測(cè)定，不受異嗜性抗體的影響。l使用特異的雞抗體作為固相和測(cè)定抗體。使用特異的雞抗體作為固相和測(cè)定抗體?？故罂故骾gig 抗體的干擾抗

15、體的干擾l抗鼠抗體對(duì)使用鼠源性單克隆抗體的抗鼠抗體對(duì)使用鼠源性單克隆抗體的免疫測(cè)定，可產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果免疫測(cè)定，可產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果 l 使用特異的抗體使用特異的抗體f(ab)2f(ab)2片段作為固相或片段作為固相或測(cè)定標(biāo)記抗體。測(cè)定標(biāo)記抗體。l 在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過(guò)量的鼠在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過(guò)量的鼠igig，封閉可能存在的抗鼠抗體。封閉可能存在的抗鼠抗體。l 使用特異的雞抗體使用特異的雞抗體iggigg作為固相和測(cè)定抗作為固相和測(cè)定抗體。雞體。雞iggigg不與人抗鼠抗體反應(yīng)不與人抗鼠抗體反應(yīng)。干擾排除可采用下述方法干擾排除可采用下述方法: :自身抗體干擾自身抗體干擾l自身抗體如抗甲狀

16、腺球蛋白、抗胰島素等，自身抗體如抗甲狀腺球蛋白、抗胰島素等，能與其相應(yīng)靶抗原結(jié)合形成復(fù)合物，在免疫能與其相應(yīng)靶抗原結(jié)合形成復(fù)合物，在免疫測(cè)定方法中可干擾相應(yīng)抗原抗體的測(cè)定。測(cè)定方法中可干擾相應(yīng)抗原抗體的測(cè)定。l為避免以上情況出現(xiàn)，可在測(cè)定前用理化方為避免以上情況出現(xiàn)，可在測(cè)定前用理化方法將其解離法將其解離。 溶菌酶干擾溶菌酶干擾l雙抗體夾心法雙抗體夾心法elisaelisa測(cè)定中，溶菌酶可在測(cè)定中，溶菌酶可在包被的包被的iggigg和標(biāo)記的和標(biāo)記的iggigg間形成橋接，從而間形成橋接，從而導(dǎo)致假陽(yáng)性。去除溶菌酶或?qū)⑵浞忾]，導(dǎo)致假陽(yáng)性。去除溶菌酶或?qū)⑵浞忾]，cucu2+2+離子和卵白蛋白可有效

17、地封閉溶菌酶，離子和卵白蛋白可有效地封閉溶菌酶，防止其聯(lián)接防止其聯(lián)接iggigg。外源性干擾因素外源性干擾因素l溶血、細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、凝固溶血、細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、凝固不全、反復(fù)凍融不全、反復(fù)凍融標(biāo)本溶血標(biāo)本溶血 l注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。l血紅蛋白類似過(guò)氧化物的活性，使反應(yīng)顯血紅蛋白類似過(guò)氧化物的活性，使反應(yīng)顯色色。標(biāo)本被細(xì)菌污染標(biāo)本被細(xì)菌污染l細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原細(xì)菌的生長(zhǎng)，其所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗原抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用抗體等蛋白產(chǎn)生分解作用l細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的-半乳糖苷酶半乳糖苷酶本身會(huì)對(duì)用

18、相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特本身會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測(cè)定方法產(chǎn)生非特異性干擾。異性干擾。 標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng) l標(biāo)本在標(biāo)本在2 288下保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，下保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，iggigg可聚合成多可聚合成多聚體，在間接法免疫測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、聚體，在間接法免疫測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、甚至造成假陽(yáng)性。甚至造成假陽(yáng)性。l血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離，則可以在血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作分離，則可以在2 288下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍下保存一周，如為有菌操作，則建議冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存，應(yīng)在保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存，應(yīng)在7070以下以下。 標(biāo)本凝固不全標(biāo)本凝固不全 l血液采集后，離

19、心分離血清沒(méi)有完全凝固，離血液采集后，離心分離血清沒(méi)有完全凝固，離出的出的“血清血清”并非為完全的血清，其中仍殘留并非為完全的血清，其中仍殘留部分纖維蛋白原，易造成假陽(yáng)性結(jié)果部分纖維蛋白原，易造成假陽(yáng)性結(jié)果l血液標(biāo)本采集后，應(yīng)使其充分凝固后再分離血血液標(biāo)本采集后，應(yīng)使其充分凝固后再分離血清，或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采清，或標(biāo)本采集時(shí)用帶分離膠的采血管或于采血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?。血管中加入適當(dāng)?shù)拇倌齽?。冰凍保存?biāo)本避免反復(fù)凍融冰凍保存標(biāo)本避免反復(fù)凍融l反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，從而引起假的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，

20、從而引起假陰性結(jié)果。陰性結(jié)果。試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本收集、測(cè)定方法和試劑準(zhǔn)備、標(biāo)本收集、測(cè)定方法和儀器操作寫(xiě)出儀器操作寫(xiě)出“標(biāo)準(zhǔn)操作程標(biāo)準(zhǔn)操作程序序”(sop)(sop) 二、標(biāo)準(zhǔn)化操作及流程二、標(biāo)準(zhǔn)化操作及流程l標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的分類標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的分類l標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的基本條件標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的基本條件三、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的應(yīng)用三、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的分類標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的分類l標(biāo)準(zhǔn)品即含量確定的處于一定基質(zhì)中的特性標(biāo)準(zhǔn)品即含量確定的處于一定基質(zhì)中的特性明確的物質(zhì)。明確的物質(zhì)。 l標(biāo)準(zhǔn)品分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品分級(jí): :一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品為國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)品二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)品為國(guó)家標(biāo)

21、準(zhǔn)品二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品為商品校準(zhǔn)品為商品校準(zhǔn)品l臨床免疫檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有充分合理的空間、臨床免疫檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有充分合理的空間、良好的照明、空調(diào)及濕度維持設(shè)備良好的照明、空調(diào)及濕度維持設(shè)備l實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備應(yīng)保養(yǎng)良好，實(shí)驗(yàn)用品要達(dá)實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備應(yīng)保養(yǎng)良好，實(shí)驗(yàn)用品要達(dá)到相應(yīng)的要求到相應(yīng)的要求。四、實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境、設(shè)施和設(shè)備四、實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境、設(shè)施和設(shè)備第三節(jié)第三節(jié) 質(zhì)量保證、室內(nèi)質(zhì)質(zhì)量保證、室內(nèi)質(zhì)控控和室間質(zhì)評(píng)之間的關(guān)系和室間質(zhì)評(píng)之間的關(guān)系 iqciqc僅覆蓋標(biāo)本收集、實(shí)驗(yàn)室測(cè)定過(guò)程和結(jié)僅覆蓋標(biāo)本收集、實(shí)驗(yàn)室測(cè)定過(guò)程和結(jié)果報(bào)告及其解釋分析步驟；而果報(bào)告及其解釋分析步驟；而eqaeqa還包括一個(gè)較還包括

22、一個(gè)較大范圍的實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)，諸如在標(biāo)本接收中樣本大范圍的實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)，諸如在標(biāo)本接收中樣本處理的可靠性，以及測(cè)定結(jié)果的報(bào)告和解釋。處理的可靠性，以及測(cè)定結(jié)果的報(bào)告和解釋。qaqa覆蓋了更寬范圍的活動(dòng)，最為重要的是標(biāo)本覆蓋了更寬范圍的活動(dòng)，最為重要的是標(biāo)本收集、結(jié)果報(bào)告和解釋階段。收集、結(jié)果報(bào)告和解釋階段。qaqa還應(yīng)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)還應(yīng)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)報(bào)告的發(fā)出周期（及時(shí)性）、完整性和簡(jiǎn)潔性。報(bào)告的發(fā)出周期（及時(shí)性）、完整性和簡(jiǎn)潔性。實(shí)驗(yàn)室工作的質(zhì)量保證在確保患者治療質(zhì)量上實(shí)驗(yàn)室工作的質(zhì)量保證在確?；颊咧委熧|(zhì)量上有重要意義。有重要意義。第四節(jié)第四節(jié) 常用免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制常用免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制l免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制中

23、常用統(tǒng)計(jì)學(xué)免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制中常用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法的選擇方法的選擇l定性定性免疫檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn) l定量定量免疫檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn) 統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)量控制統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)量控制: :使用室內(nèi)質(zhì)控物與臨床常使用室內(nèi)質(zhì)控物與臨床常規(guī)標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)，然后根據(jù)室內(nèi)質(zhì)控物的測(cè)定結(jié)規(guī)標(biāo)本同時(shí)檢測(cè)，然后根據(jù)室內(nèi)質(zhì)控物的測(cè)定結(jié)果，采用統(tǒng)計(jì)學(xué)的原理方法判斷所進(jìn)行的臨床常果，采用統(tǒng)計(jì)學(xué)的原理方法判斷所進(jìn)行的臨床常規(guī)標(biāo)本測(cè)定是否在控的一種質(zhì)量控制措施。規(guī)標(biāo)本測(cè)定是否在控的一種質(zhì)量控制措施。一、免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制中常用統(tǒng)計(jì)學(xué)一、免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制中常用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法的選擇方法的選擇統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)控的特點(diǎn)統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)控的特點(diǎn) l檢驗(yàn)誤差有兩類：一是檢驗(yàn)誤差有兩類：一是系統(tǒng)

24、誤差，系統(tǒng)誤差，一是一是隨機(jī)誤差隨機(jī)誤差。l系統(tǒng)誤差通常表現(xiàn)為質(zhì)控物測(cè)定均值的漂移，是由系統(tǒng)誤差通常表現(xiàn)為質(zhì)控物測(cè)定均值的漂移，是由操作者所使用的儀器設(shè)備、試劑、標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)物操作者所使用的儀器設(shè)備、試劑、標(biāo)準(zhǔn)品或校準(zhǔn)物出現(xiàn)問(wèn)題而造成的，這種誤差可以通過(guò)前述的措施出現(xiàn)問(wèn)題而造成的，這種誤差可以通過(guò)前述的措施方法加以控制，是可以排除的。方法加以控制，是可以排除的。l隨機(jī)誤差則表現(xiàn)為測(cè)定隨機(jī)誤差則表現(xiàn)為測(cè)定sdsd的增大，主要是由實(shí)驗(yàn)操的增大，主要是由實(shí)驗(yàn)操作人員的操作等隨機(jī)因素所致，其出現(xiàn)難以完全避作人員的操作等隨機(jī)因素所致，其出現(xiàn)難以完全避免和控制。免和控制。l統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)控的功能就是發(fā)現(xiàn)誤差的產(chǎn)

25、統(tǒng)計(jì)學(xué)質(zhì)控的功能就是發(fā)現(xiàn)誤差的產(chǎn)生及分析誤差產(chǎn)生的原因，采取措施生及分析誤差產(chǎn)生的原因，采取措施予以避免。予以避免。l開(kāi)展統(tǒng)計(jì)質(zhì)量控制前，應(yīng)將可以控制開(kāi)展統(tǒng)計(jì)質(zhì)量控制前，應(yīng)將可以控制的誤差產(chǎn)生因素盡可能地加以控制，的誤差產(chǎn)生因素盡可能地加以控制，這不但是做好室內(nèi)質(zhì)控的前提，也是這不但是做好室內(nèi)質(zhì)控的前提，也是保證常規(guī)檢驗(yàn)工作質(zhì)量的先決條件。保證常規(guī)檢驗(yàn)工作質(zhì)量的先決條件。 基線測(cè)定基線測(cè)定l最佳條件下的變異（最佳條件下的變異（optimal conditions optimal conditions variance, ocvvariance, ocv）和常規(guī)條件下的變異）和常規(guī)條件下的變異（

26、routine conditions variance, rcvroutine conditions variance, rcv）；）； l當(dāng)當(dāng)rcvrcv與與ocvocv接近，或小于接近，或小于2 ocv2 ocv時(shí)，則時(shí)，則rcvrcv是可是可以接受的。以上為批間變異。以接受的。以上為批間變異。l批內(nèi)變異的測(cè)定；批內(nèi)變異的測(cè)定；l室內(nèi)質(zhì)控物的測(cè)定準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)。室內(nèi)質(zhì)控物的測(cè)定準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)。 臨床免疫檢測(cè)質(zhì)控圖的選擇、繪制臨床免疫檢測(cè)質(zhì)控圖的選擇、繪制及質(zhì)控結(jié)果判斷及質(zhì)控結(jié)果判斷 leveylevey-jennings-jennings質(zhì)控圖方法質(zhì)控圖方法 l也稱也稱shewhartshew

27、hart質(zhì)控圖，是由美國(guó)的質(zhì)控圖，是由美國(guó)的shewhartshewhart 于于19241924年首先提出，并用于工業(yè)產(chǎn)品的質(zhì)量控制。年首先提出，并用于工業(yè)產(chǎn)品的質(zhì)量控制。l二十世紀(jì)五十年代初，二十世紀(jì)五十年代初，leveylevey-jennings-jennings將其引入臨床將其引入臨床檢驗(yàn)的質(zhì)量控制檢驗(yàn)的質(zhì)量控制 。經(jīng)。經(jīng)henryhenry和和segalovesegalove的改良，即為的改良，即為目前常用的目前常用的leveylevey-jennings-jennings質(zhì)控圖。質(zhì)控圖。l(1)(1)統(tǒng)計(jì)學(xué)含義統(tǒng)計(jì)學(xué)含義: :穩(wěn)定條件下，在穩(wěn)定條件下，在2020個(gè)個(gè)iqciqc結(jié)

28、結(jié)果中不應(yīng)有多于果中不應(yīng)有多于1 1個(gè)結(jié)果超過(guò)個(gè)結(jié)果超過(guò)2 2sdsd（95.5%95.5%可可信限）信限）限度；在限度；在10001000個(gè)測(cè)定結(jié)果中超過(guò)個(gè)測(cè)定結(jié)果中超過(guò)3 3sdsd（99.7%99.7%可信限）可信限）的結(jié)果不多于的結(jié)果不多于3 3個(gè)。個(gè)。如以如以3s3s為失控限，假失控的概率為為失控限，假失控的概率為0.3%0.3%。l(2)(2)對(duì)待質(zhì)控品應(yīng)如對(duì)待病人標(biāo)本一樣同等對(duì)對(duì)待質(zhì)控品應(yīng)如對(duì)待病人標(biāo)本一樣同等對(duì)待，不能進(jìn)行特殊處理，在每批病人標(biāo)本測(cè)定待，不能進(jìn)行特殊處理，在每批病人標(biāo)本測(cè)定的同時(shí)測(cè)定質(zhì)控品，將所得結(jié)果標(biāo)在質(zhì)控圖上，的同時(shí)測(cè)定質(zhì)控品，將所得結(jié)果標(biāo)在質(zhì)控圖上，質(zhì)控品

29、在控時(shí)，方能報(bào)告該批病人標(biāo)本的測(cè)定質(zhì)控品在控時(shí)，方能報(bào)告該批病人標(biāo)本的測(cè)定結(jié)果，質(zhì)控品失控時(shí)，說(shuō)明測(cè)定過(guò)程存在問(wèn)題，結(jié)果，質(zhì)控品失控時(shí)，說(shuō)明測(cè)定過(guò)程存在問(wèn)題，不能報(bào)告病人標(biāo)本結(jié)果，應(yīng)解決存在的問(wèn)題，不能報(bào)告病人標(biāo)本結(jié)果，應(yīng)解決存在的問(wèn)題，并重新測(cè)定在控后方能報(bào)告；并重新測(cè)定在控后方能報(bào)告； l（3 3）當(dāng)使用一個(gè)以上濃度的質(zhì)控品想在同一）當(dāng)使用一個(gè)以上濃度的質(zhì)控品想在同一張質(zhì)控圖描點(diǎn)時(shí)，則質(zhì)控圖上均值和張質(zhì)控圖描點(diǎn)時(shí)，則質(zhì)控圖上均值和s s可不標(biāo)可不標(biāo)具體數(shù)據(jù)，而僅以和具體數(shù)據(jù)，而僅以和s s表示；表示； l（4 4）若以均值）若以均值2s2s為失控限，假失控的概率為失控限，假失控的概率太高，

30、通常不能接受；以均值太高，通常不能接受；以均值3s3s為失控限，為失控限，假失控的概率低，但誤差檢出能力不強(qiáng)。假失控的概率低，但誤差檢出能力不強(qiáng)。 質(zhì)控圖的記錄質(zhì)控圖的記錄l質(zhì)控結(jié)果質(zhì)控結(jié)果l日期日期l試劑試劑l質(zhì)控物批號(hào)和含量質(zhì)控物批號(hào)和含量l測(cè)定者姓名等。測(cè)定者姓名等。 l通常質(zhì)控規(guī)則以符號(hào)通常質(zhì)控規(guī)則以符號(hào)a al l來(lái)表示，其中來(lái)表示，其中a a為質(zhì)控測(cè)定中超為質(zhì)控測(cè)定中超出質(zhì)量控制限的測(cè)定值的個(gè)數(shù)，出質(zhì)量控制限的測(cè)定值的個(gè)數(shù)，l l為控制限，通常用均為控制限，通常用均值或均值值或均值1 13sd3sd來(lái)表示。來(lái)表示。 l當(dāng)質(zhì)控測(cè)定值超出控制限當(dāng)質(zhì)控測(cè)定值超出控制限l l時(shí)，即該批測(cè)定

31、判為失控。時(shí)，即該批測(cè)定判為失控。 l常用的常用的1 13s3s質(zhì)控規(guī)則，其中質(zhì)控規(guī)則，其中1 1為原式中的為原式中的a a，3s3s為原式中為原式中的的l l，表示均值，表示均值3s3s，其確切的含義為：在質(zhì)控測(cè)定值，其確切的含義為：在質(zhì)控測(cè)定值中，如果有一個(gè)測(cè)定值超出均值中，如果有一個(gè)測(cè)定值超出均值3s3s范圍，即可將該批范圍，即可將該批測(cè)定判為失控。測(cè)定判為失控。 質(zhì)控規(guī)則的表達(dá)方式質(zhì)控規(guī)則的表達(dá)方式符符 號(hào)號(hào) 定定 義義1 12s2s 一個(gè)質(zhì)控測(cè)定值超出一個(gè)質(zhì)控測(cè)定值超出2s2s控制限?？刂葡?。1 13s3s 一個(gè)質(zhì)控測(cè)定值超出一個(gè)質(zhì)控測(cè)定值超出3s3s控制限?？刂葡?。2 22s2s

32、兩個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)超出兩個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)超出+2s+2s或或2s2s控制限?？刂葡?。r r4s4s 同一批測(cè)定中，兩個(gè)不同濃度質(zhì)控物的測(cè)定值之間的同一批測(cè)定中，兩個(gè)不同濃度質(zhì)控物的測(cè)定值之間的 差值超出差值超出4s4s控制限?？刂葡?。4 41s1s 四個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)超出四個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)超出+1s+1s或或1s1s控制限?？刂葡?。7 7t t 七個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值呈現(xiàn)一個(gè)向上或向下的趨勢(shì)變七個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值呈現(xiàn)一個(gè)向上或向下的趨勢(shì)變 化?；?。1010x x 十個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)處于均值（十個(gè)連續(xù)的質(zhì)控測(cè)定值同時(shí)處于均值（x x）的同一側(cè)。）的同一側(cè)。常用質(zhì)控規(guī)則

33、的符號(hào)及定義常用質(zhì)控規(guī)則的符號(hào)及定義leveylevey-jennings-jennings質(zhì)控圖結(jié)合質(zhì)控圖結(jié)合westgardwestgard多多規(guī)則質(zhì)控方法規(guī)則質(zhì)控方法 lwestgardwestgard多規(guī)則質(zhì)控方法即是將前述的多個(gè)質(zhì)控規(guī)則多規(guī)則質(zhì)控方法即是將前述的多個(gè)質(zhì)控規(guī)則同時(shí)應(yīng)用進(jìn)行質(zhì)控判斷的方法。同時(shí)應(yīng)用進(jìn)行質(zhì)控判斷的方法。l最初常用的有六個(gè)質(zhì)控規(guī)則，即最初常用的有六個(gè)質(zhì)控規(guī)則，即1 12s2s、1 13s3s、2 22s2s、r r4s4s、4 41s1s和和1010x x，其中，其中1 12s2s規(guī)則作為告警規(guī)則。規(guī)則作為告警規(guī)則。l1 13s3s和和r r4s4s規(guī)則反映的

34、是隨機(jī)誤差。規(guī)則反映的是隨機(jī)誤差。2 22s2s、4 41s1s和和1010x x反映的反映的是系統(tǒng)誤差，系統(tǒng)誤差超出一定的程度，也可從是系統(tǒng)誤差，系統(tǒng)誤差超出一定的程度，也可從1 13s3s和和r r4s4s規(guī)則反映出來(lái)。規(guī)則反映出來(lái)。 l在在leveylevey-jennings-jennings質(zhì)控圖方法的基礎(chǔ)上產(chǎn)生，質(zhì)控圖方法的基礎(chǔ)上產(chǎn)生，具有具有l(wèi)eveylevey-jennings -jennings 質(zhì)控圖方法的優(yōu)點(diǎn)，質(zhì)控圖方法的優(yōu)點(diǎn)，可通過(guò)相似的質(zhì)控圖來(lái)進(jìn)行分析?？赏ㄟ^(guò)相似的質(zhì)控圖來(lái)進(jìn)行分析。 l假失控和假告警概率低。假失控和假告警概率低。 l誤差檢出能力增強(qiáng)誤差檢出能力增強(qiáng)

35、。累積和累積和 (cusum) (cusum) 質(zhì)控方法質(zhì)控方法l累積和累積和 (cusum) (cusum) 質(zhì)控方法于質(zhì)控方法于19771977年由年由westgardwestgard等提出等提出, ,對(duì)系統(tǒng)誤差有較好的對(duì)系統(tǒng)誤差有較好的測(cè)出能力。測(cè)出能力。 “即刻法即刻法”質(zhì)控方法質(zhì)控方法 l“即刻法即刻法” ” 的實(shí)質(zhì)是一種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法的實(shí)質(zhì)是一種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法, ,即即grubsgrubs異常值取舍法。異常值取舍法。 l只要有只要有3 3個(gè)以上的數(shù)據(jù)即可決定是否有異常個(gè)以上的數(shù)據(jù)即可決定是否有異常值的存在。值的存在。 l已知的已知的弱陽(yáng)性質(zhì)控弱陽(yáng)性質(zhì)控: :每次測(cè)定都應(yīng)至少帶一每次測(cè)定都應(yīng)

36、至少帶一個(gè)已知的弱陽(yáng)性對(duì)照，從而有助于判斷臨床個(gè)已知的弱陽(yáng)性對(duì)照，從而有助于判斷臨床標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果是否有效。標(biāo)本的檢測(cè)結(jié)果是否有效。l陰性質(zhì)控陰性質(zhì)控: :必需必需 二、定性免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制二、定性免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制l定量免疫檢驗(yàn)方法通常需要使用全自動(dòng)免疫分定量免疫檢驗(yàn)方法通常需要使用全自動(dòng)免疫分析儀，由于其對(duì)測(cè)定結(jié)果要求有準(zhǔn)確的量值，析儀，由于其對(duì)測(cè)定結(jié)果要求有準(zhǔn)確的量值，因此在測(cè)定時(shí)須用校準(zhǔn)品對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)因此在測(cè)定時(shí)須用校準(zhǔn)品對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn). .l室內(nèi)質(zhì)控則應(yīng)選擇特定試劑盒或方法的測(cè)定范室內(nèi)質(zhì)控則應(yīng)選擇特定試劑盒或方法的測(cè)定范圍內(nèi)的高、中和低三種濃度的質(zhì)控品，以監(jiān)測(cè)圍內(nèi)的高、中和低三種濃度

37、的質(zhì)控品，以監(jiān)測(cè)對(duì)不同濃度標(biāo)本的測(cè)定變化。對(duì)不同濃度標(biāo)本的測(cè)定變化。三、定量免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制三、定量免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制第五節(jié)第五節(jié) 免疫檢驗(yàn)免疫檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制的數(shù)據(jù)處理室內(nèi)質(zhì)量控制的數(shù)據(jù)處理liqciqc可確保每次測(cè)定與確定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)一可確保每次測(cè)定與確定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)一致。致。l eqaeqa的實(shí)施，將有力地促進(jìn)臨床免疫檢的實(shí)施，將有力地促進(jìn)臨床免疫檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化。驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化。 一、免疫檢驗(yàn)質(zhì)量保證的意義一、免疫檢驗(yàn)質(zhì)量保證的意義1. 1. 與質(zhì)量保證相關(guān)的定義有哪些，各自的含義是什么？與質(zhì)量保證相關(guān)的定義有哪些，各自的含義是什么？2. 2. 免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制原則是什么？免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制原則是什么？3. 3. 作為標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的基本條件是什么？?jī)烧哂心男┞?lián)作為標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品的基本條件是什么？?jī)烧哂心男┞?lián)系和區(qū)別？系和區(qū)別？4. 4. 室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的概念及意義。室間質(zhì)量評(píng)價(jià)的概念及意義。5. ocv5. ocv和和rcvrcv的概念。的概念。6. 6. 常用免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制方法有哪些？常用免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制方法有哪些？7