色譜分析原理及應(yīng)用

1、2021-9-25III 篇章篇章 色譜分析法色譜分析法第第19章章 色譜法分離原色譜法分離原理理一、一、 色譜法概述色譜法概述二、有關(guān)術(shù)語(yǔ)二、有關(guān)術(shù)語(yǔ)三、色譜法基本理論三、色譜法基本理論四、分離度四、分離度五、定性定量分析五、定性定量分析 2021-9-25第一節(jié)第一節(jié) 色譜法概述色譜法概述一、一、 色譜法的特點(diǎn)、分類(lèi)和作用色譜法的特點(diǎn)、分類(lèi)和作用 1.1.概述概述 2. 2.分類(lèi)分類(lèi) 3. 3.特點(diǎn)特點(diǎn)2021-9-25一、一、 色譜法的特點(diǎn)、分類(lèi)和作用色譜法的特點(diǎn)、分類(lèi)和作用 1.1.概述概述 俄國(guó)植物學(xué)家茨維特在俄國(guó)植物學(xué)家茨維特在19061906年使用的裝置：年使用的裝置：色譜原型裝

2、置，如圖。色譜原型裝置，如圖。 色譜法是一種分離技術(shù)色譜法是一種分離技術(shù)， 試樣混合物的分離過(guò)程也就是試樣中各組試樣混合物的分離過(guò)程也就是試樣中各組分在稱之為色譜分離柱中的兩相間不斷進(jìn)行著的分在稱之為色譜分離柱中的兩相間不斷進(jìn)行著的分配過(guò)程。分配過(guò)程。 其中的一相固定不動(dòng)，稱為其中的一相固定不動(dòng)，稱為固定相固定相； 另一相是攜帶試樣混合物流過(guò)此固定相的另一相是攜帶試樣混合物流過(guò)此固定相的流體（氣體或液體），稱為流體（氣體或液體），稱為流動(dòng)相流動(dòng)相。（動(dòng)畫(huà)）動(dòng)畫(huà)）2021-9-25色譜法色譜法 當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí)，當(dāng)流動(dòng)相中攜帶的混合物流經(jīng)固定相時(shí)，其與固定相發(fā)生相互作用。由于混

3、合物中各組其與固定相發(fā)生相互作用。由于混合物中各組分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生分在性質(zhì)和結(jié)構(gòu)上的差異，與固定相之間產(chǎn)生的作用力的大小、強(qiáng)弱不同，隨著流動(dòng)相的移的作用力的大小、強(qiáng)弱不同，隨著流動(dòng)相的移動(dòng)，混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡動(dòng)，混合物在兩相間經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的分配平衡，使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同，從而，使得各組分被固定相保留的時(shí)間不同，從而按一定次序由固定相中流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z按一定次序由固定相中流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合，實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)方法結(jié)合，實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。測(cè)。 兩相及兩相的相對(duì)運(yùn)動(dòng)構(gòu)成了色譜法的基礎(chǔ)兩相及兩相的相對(duì)運(yùn)動(dòng)構(gòu)

4、成了色譜法的基礎(chǔ)2021-9-252.2.色譜法分類(lèi)色譜法分類(lèi) 氣相色譜氣相色譜：流動(dòng)相為氣體（稱為載氣）。流動(dòng)相為氣體（稱為載氣）。 按分離柱不同可分為：填充柱色譜和毛細(xì)管柱色譜；按分離柱不同可分為：填充柱色譜和毛細(xì)管柱色譜； 按固定相的不同又分為：氣固色譜和氣液色譜按固定相的不同又分為：氣固色譜和氣液色譜2021-9-25液相色譜液相色譜液相色譜液相色譜：流動(dòng)相為液體（也稱為淋洗液）。流動(dòng)相為液體（也稱為淋洗液）。按固定相的不同分為：液固色譜和液液色譜，鍵合相色譜按固定相的不同分為：液固色譜和液液色譜，鍵合相色譜離子色譜離子色譜：液相色譜的一種，以特制的離子交換樹(shù)脂為固液相色譜的一種，以特

5、制的離子交換樹(shù)脂為固定相，不同定相，不同pHpH值的水溶液為流動(dòng)相。值的水溶液為流動(dòng)相。2021-9-25其他色譜方法其他色譜方法薄層色譜和紙色譜：薄層色譜和紙色譜： 比較簡(jiǎn)單的色譜方法比較簡(jiǎn)單的色譜方法凝膠色譜法凝膠色譜法:超臨界色譜超臨界色譜: :高效毛細(xì)管電泳高效毛細(xì)管電泳: : 九十年代快速發(fā)展、九十年代快速發(fā)展、特別適合生物試樣分析分特別適合生物試樣分析分離的高效分析儀器。離的高效分析儀器。2021-9-25 迎頭色譜，頂替色譜和洗脫色譜2021-9-25 第二節(jié) 有關(guān)術(shù)語(yǔ)分配系數(shù)分配系數(shù) K 組分在固定相和流動(dòng)相間發(fā)生的吸附、脫附，或溶解、揮發(fā)的過(guò)程叫做分配過(guò)程。在一定溫度下，組分

6、在兩相間分配達(dá)到平衡時(shí)的濃度（單位：g / mL）比，稱為分配系數(shù)，用K 表示，即： 組分在流動(dòng)相中的濃度組分在固定相中的濃度K2021-9-25分配系數(shù)分配系數(shù) K的討論的討論 一定溫度下，組分的分配系數(shù)一定溫度下，組分的分配系數(shù)K越大，出峰越慢；越大，出峰越慢；試樣一定時(shí)，試樣一定時(shí)，K主要取決于固定相性質(zhì)；主要取決于固定相性質(zhì)；每個(gè)組份在各種固定相上的分配系數(shù)每個(gè)組份在各種固定相上的分配系數(shù)K不同；不同；選擇適宜的固定相可改善分離效果；選擇適宜的固定相可改善分離效果；試樣中的各組分具有不同的試樣中的各組分具有不同的K值是分離的基礎(chǔ)；值是分離的基礎(chǔ)；某組分的某組分的K = 0時(shí)，即不被固定

7、相保留，最先流出。時(shí)，即不被固定相保留，最先流出。 組分在流動(dòng)相中的濃度組分在固定相中的濃度K2021-9-25 分配系數(shù)K與濃度無(wú)關(guān)，即分配等溫線是線形的。2021-9-25一、色譜流出曲線色譜流出曲線1.1.基線基線 無(wú)試樣通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，檢測(cè)到的信號(hào)即為基線。2.2.保留值保留值 （1）時(shí)間表示的保留值）時(shí)間表示的保留值 保留時(shí)間（保留時(shí)間（tR）：）：組分從進(jìn)樣到柱后出現(xiàn)濃度極大值時(shí)所需的時(shí)間 死時(shí)間（死時(shí)間（tM）：）：不與固定相作用的組分（如空氣）的保留時(shí)間。 調(diào)整保留時(shí)間（調(diào)整保留時(shí)間（tR ）：）：tR= tRtM （動(dòng)畫(huà)）（動(dòng)畫(huà)）2021-9-25（2）用體積表示的保留值）用體

8、積表示的保留值 保留體積（保留體積（VR）：）：VR = tRF0 （ F0為色譜柱出口處的流動(dòng)相流量， 單位：m L / min。） 死體積（死體積（VM）：）： VM = tM F0 調(diào)整保留體積（調(diào)整保留體積（VR）：）： V R = VR VM 2021-9-253. 3. 相對(duì)保留值相對(duì)保留值r r2121 組分2與組分1調(diào)整保留值之比： r21 = tR2 / tR1= VR2 / V R1 相對(duì)保留值只與柱溫和固定相性質(zhì)有關(guān)，與其他色譜操作條件無(wú)關(guān)，它表示了固定相對(duì)這兩種組分的選擇性。2021-9-25 4. 區(qū)域?qū)挾葏^(qū)域?qū)挾扔脕?lái)衡量色譜峰寬度的參數(shù)， 有三種表示方法：有三種表示

9、方法：（1）標(biāo)準(zhǔn)偏差）標(biāo)準(zhǔn)偏差( )： 即0.607倍峰高處色譜峰寬度的一半。（2）半峰寬）半峰寬(Y1/2)： 色譜峰高一半處的寬度 Y1/2 =2.354 （3）峰底寬）峰底寬(Wb)： Wb=4 2021-9-25二、容量因子與分配系數(shù)二、容量因子與分配系數(shù) 分配系數(shù)分配系數(shù)K：組分在兩相間的濃度比；容量因子容量因子k：平衡時(shí)，組分在各相中總的質(zhì)量比； k =MS / MmMS為組分在固定相中的質(zhì)量，Mm為組分在流動(dòng)相中的質(zhì)量。容量因子容量因子k與分配系數(shù)與分配系數(shù)K的關(guān)系為：的關(guān)系為： 式中為相比。 填充柱相比：635；毛細(xì)管柱的相比：501500MRMMRtttttkKVVccVVM

10、VVMMMkmSmsmmSSSSmS容量因子越大，保留時(shí)間越長(zhǎng)。容量因子越大，保留時(shí)間越長(zhǎng)。 可由保留時(shí)間計(jì)算出容量因子，兩者有以下關(guān)系：可由保留時(shí)間計(jì)算出容量因子，兩者有以下關(guān)系：2021-9-25 第三節(jié) 色譜法基本理論2021-9-25一、塔板理論一、塔板理論- -柱分離效能指標(biāo)柱分離效能指標(biāo)色譜柱長(zhǎng)：色譜柱長(zhǎng)：L，虛擬的塔板間距離：虛擬的塔板間距離：H，色譜柱的理論塔板數(shù)：色譜柱的理論塔板數(shù)：n，則三者的關(guān)系為：則三者的關(guān)系為： n = L / H理論塔板數(shù)與色譜參數(shù)之間的關(guān)系為：理論塔板數(shù)與色譜參數(shù)之間的關(guān)系為：222116545)()(./bRRWtYtn2021-9-25有效塔板

11、數(shù)和有效塔板高度有效塔板數(shù)和有效塔板高度 單位柱長(zhǎng)的塔板數(shù)越多，表明柱效越高。單位柱長(zhǎng)的塔板數(shù)越多，表明柱效越高。 用不同物質(zhì)計(jì)算可得到不同的理論塔板數(shù)。用不同物質(zhì)計(jì)算可得到不同的理論塔板數(shù)。 組分在組分在tM時(shí)間內(nèi)不參與柱內(nèi)分配。需引入有效塔時(shí)間內(nèi)不參與柱內(nèi)分配。需引入有效塔板數(shù)和有效塔板高度：板數(shù)和有效塔板高度：222116545)()(./bRRWtYtn有效有效有效nLHWtYtnbRR222/1)(16)(54. 52021-9-25塔板理論的特點(diǎn)和不足：塔板理論的特點(diǎn)和不足： (1) (1)當(dāng)色譜柱長(zhǎng)度一定時(shí)，塔板數(shù)當(dāng)色譜柱長(zhǎng)度一定時(shí)，塔板數(shù) n 越大越大(塔板高度塔板高度 H 越

12、小越小) )，被測(cè)組分在柱內(nèi)被分配的次數(shù)越多，柱效能則越高，被測(cè)組分在柱內(nèi)被分配的次數(shù)越多，柱效能則越高，所得色譜峰越窄。，所得色譜峰越窄。 (2) (2)不同物質(zhì)在同一色譜柱上的分配系數(shù)不同，用有效不同物質(zhì)在同一色譜柱上的分配系數(shù)不同，用有效塔板數(shù)和有效塔板高度作為衡量柱效能的指標(biāo)時(shí)，應(yīng)指明塔板數(shù)和有效塔板高度作為衡量柱效能的指標(biāo)時(shí)，應(yīng)指明測(cè)定物質(zhì)。測(cè)定物質(zhì)。 (3) (3)柱效不能表示被分離組分的實(shí)際分離效果，當(dāng)兩組柱效不能表示被分離組分的實(shí)際分離效果，當(dāng)兩組分的分配系數(shù)分的分配系數(shù) K 相同時(shí)，無(wú)論該色譜柱的塔板數(shù)多大，都相同時(shí)，無(wú)論該色譜柱的塔板數(shù)多大，都無(wú)法分離。無(wú)法分離。 (4)

13、(4)塔板理論無(wú)法解釋同一色譜柱在不同的載氣流速下塔板理論無(wú)法解釋同一色譜柱在不同的載氣流速下柱效不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，也無(wú)法指出影響柱效的因素及提高柱效不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，也無(wú)法指出影響柱效的因素及提高柱效的途徑。柱效的途徑。2021-9-25二、二、 速率理論速率理論- -影響柱效的因素影響柱效的因素 速率方程（也稱范速率方程（也稱范.弟姆特方程式）弟姆特方程式）: H = A + B/u + Cu H：理論塔板高度，：理論塔板高度，u：載氣的線速度：載氣的線速度(cm/s) 減小減小A、B、C三項(xiàng)可提高柱效；三項(xiàng)可提高柱效； 存在著最佳流速；存在著最佳流速； A、B、C三項(xiàng)各與哪些因素有關(guān)？三項(xiàng)各

14、與哪些因素有關(guān)？2021-9-251. 1. 渦流擴(kuò)散項(xiàng)渦流擴(kuò)散項(xiàng)A A = 2dp dp：固定相的平均顆粒直徑固定相的平均顆粒直徑：固定相的填充不均勻因子固定相的填充不均勻因子 固定相顆粒越小固定相顆粒越小dp，填充的越均勻，填充的越均勻，A，H，柱效，柱效n。表現(xiàn)在渦流擴(kuò)散所引起的色譜峰變寬現(xiàn)象減輕，色譜。表現(xiàn)在渦流擴(kuò)散所引起的色譜峰變寬現(xiàn)象減輕，色譜峰較窄。峰較窄。2021-9-252.2. 分子擴(kuò)散項(xiàng)分子擴(kuò)散項(xiàng)B B = 2 Dg ：彎曲因子，填充柱色譜，彎曲因子，填充柱色譜，1。 Dg：試樣組分分子在氣相中的擴(kuò)散系數(shù)（：試樣組分分子在氣相中的擴(kuò)散系數(shù)（cm2s-1）。）。由于由于柱中

15、存在著濃度差，產(chǎn)生縱向擴(kuò)散：柱中存在著濃度差，產(chǎn)生縱向擴(kuò)散： a. 擴(kuò)散導(dǎo)致色譜峰變寬，擴(kuò)散導(dǎo)致色譜峰變寬，H(n)，分離變差。分離變差。 b. 分子擴(kuò)散項(xiàng)與流速有關(guān)，流速分子擴(kuò)散項(xiàng)與流速有關(guān)，流速，滯留時(shí)間，滯留時(shí)間，擴(kuò)散，擴(kuò)散 c. 擴(kuò)散系數(shù)：擴(kuò)散系數(shù)：Dg （M載氣載氣）-1/2 ； M載氣載氣，B值值2021-9-253.3.傳質(zhì)阻力項(xiàng)傳質(zhì)阻力項(xiàng) C 組分在氣相和液相兩相間進(jìn)行反復(fù)分配時(shí)，遇到阻力。組分在氣相和液相兩相間進(jìn)行反復(fù)分配時(shí)，遇到阻力。傳質(zhì)阻力包括氣相傳質(zhì)阻力傳質(zhì)阻力包括氣相傳質(zhì)阻力Cg和液相傳質(zhì)阻力和液相傳質(zhì)阻力CL ，液相傳，液相傳質(zhì)阻力大于氣相傳質(zhì)阻力。質(zhì)阻力大于氣相傳

16、質(zhì)阻力。即：即： C =（Cg + CL）LfLDdC22021-9-25 流動(dòng)相的傳質(zhì)阻力流動(dòng)相的傳質(zhì)阻力： 發(fā)生在氣相和氣液界面 與dp2/Dg成正比 采取小顆粒，質(zhì)量小的氣體 固定相傳質(zhì)阻力固定相傳質(zhì)阻力： 發(fā)生在氣液界面和固定相之間 與df2/Dl成正比 Df為液膜厚度；Dl 為組分在液相中的擴(kuò)散系數(shù)2021-9-254. 4. 載氣流速與柱效載氣流速與柱效- -最佳流速最佳流速 載氣流速高時(shí)：載氣流速高時(shí)： 傳質(zhì)阻力項(xiàng)是影響柱效傳質(zhì)阻力項(xiàng)是影響柱效的主要因素，的主要因素，流速流速 ，柱效，柱效 , ,右圖曲線的右邊。右圖曲線的右邊。 載氣流速低時(shí)：載氣流速低時(shí)： H - u曲線與最佳

17、流速：曲線與最佳流速： 由于流速對(duì)這兩項(xiàng)完全相反的作用，流速對(duì)柱效的總影由于流速對(duì)這兩項(xiàng)完全相反的作用，流速對(duì)柱效的總影響使得存在著一個(gè)響使得存在著一個(gè)最佳流速最佳流速值，即速率方程式中塔板高度對(duì)值，即速率方程式中塔板高度對(duì)流速的一階導(dǎo)數(shù)有一極小值。流速的一階導(dǎo)數(shù)有一極小值。 以塔板高度以塔板高度H H對(duì)應(yīng)載氣流速對(duì)應(yīng)載氣流速u(mài) u作圖，曲線最低點(diǎn)的流速即作圖，曲線最低點(diǎn)的流速即為為最佳流速最佳流速。 分子擴(kuò)散項(xiàng)成為影響柱效的分子擴(kuò)散項(xiàng)成為影響柱效的主要因素，主要因素，流速流速 ，柱效，柱效 ，右圖曲線的坐邊。右圖曲線的坐邊。2021-9-255. 速率理論的要點(diǎn)速率理論的要點(diǎn) (1) (1)

18、組分分子在柱內(nèi)運(yùn)行的組分分子在柱內(nèi)運(yùn)行的多路徑與渦流擴(kuò)散多路徑與渦流擴(kuò)散、濃度梯度所濃度梯度所造成的造成的分子擴(kuò)散分子擴(kuò)散及及傳質(zhì)阻力傳質(zhì)阻力使氣液兩相間的分配平衡不能瞬使氣液兩相間的分配平衡不能瞬間達(dá)到等因素是造成色譜峰擴(kuò)展柱效下降的主要原因。間達(dá)到等因素是造成色譜峰擴(kuò)展柱效下降的主要原因。 (2)通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)墓潭ㄏ嗔６?、載氣種類(lèi)、液膜厚度及載通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)墓潭ㄏ嗔６?、載氣種類(lèi)、液膜厚度及載氣流速可提高柱效。氣流速可提高柱效。 (3) (3)速率理論為色譜分離和操作條件選擇提供了理論指導(dǎo)。速率理論為色譜分離和操作條件選擇提供了理論指導(dǎo)。闡明了流速和柱溫對(duì)柱效及分離的影響。闡明了流速和柱溫對(duì)

19、柱效及分離的影響。 (4) 各種因素相互制約，如載氣流速增大，分子擴(kuò)散項(xiàng)的影各種因素相互制約，如載氣流速增大，分子擴(kuò)散項(xiàng)的影響減小，使柱效提高，但同時(shí)傳質(zhì)阻力項(xiàng)的影響增大，又使響減小，使柱效提高，但同時(shí)傳質(zhì)阻力項(xiàng)的影響增大，又使柱效下降；柱溫升高，有利于傳質(zhì)，但又加劇了分子擴(kuò)散的柱效下降；柱溫升高，有利于傳質(zhì)，但又加劇了分子擴(kuò)散的影響，選擇最佳條件，才能使柱效達(dá)到最高。影響，選擇最佳條件，才能使柱效達(dá)到最高。2021-9-25第四節(jié)第四節(jié) 分離度分離度 塔板理論和速率理論都難以描述難分離物質(zhì)對(duì)的實(shí)際分離程度。即柱效為多大時(shí)，相鄰兩組份能夠被完全分離。 難分離物質(zhì)對(duì)的分離度大小受色譜過(guò)程中兩種因

20、素的綜合影響：保留值之差色譜過(guò)程的熱力學(xué)因素； 區(qū)域?qū)挾壬V過(guò)程的動(dòng)力學(xué)因素。 色譜分離中的四種情況如圖所示：色譜分離中的四種情況如圖所示： 柱效較高，K (分配系數(shù))較大,完全分離； K 不是很大，柱效較高，峰較窄，基本上完全分離；柱效較低，K 較大,但分離的不好； K 小，柱效低，分離效果更差。2021-9-25分離度的表達(dá)式：分離度的表達(dá)式：R =0.8：兩峰的分離程度可達(dá)89%；R =1.0：分離程度98%；R =1.5：達(dá)99.7%（相鄰兩峰完全分離的標(biāo)準(zhǔn)）。)(.)()()(/)(/)()()()()()(121221121212699122YYttWWttRRRbbRR2021-

21、9-25令Wb(2)=Wb(1)=Wb（相鄰兩峰的峰底寬近似相等），引入相對(duì)保留值和塔板數(shù)，可導(dǎo)出下式：有效有效HrrRLrrRn221212221212116116)()(Rs=1/4 * (-1)/ * n 1/2* K2/(1+k2)(（1+k2） /k2)2/U *(1+k2 )3/k222021-9-25 分離度與柱效（動(dòng)力學(xué)因素），選擇因子（熱力學(xué)因素），和容量因子（容量因素）有關(guān) 1,分不開(kāi) 改變流動(dòng)相的組成；溫度；固定相組成；特殊反應(yīng) n,改變流動(dòng)相的流速，黏度；液膜厚度，柱長(zhǎng) k,1-52021-9-25例題例題1： 在一定條件下，兩個(gè)組分的調(diào)整保留時(shí)間分別為在一定條件下，兩

22、個(gè)組分的調(diào)整保留時(shí)間分別為85秒和秒和100秒，要達(dá)到完全分離，即秒，要達(dá)到完全分離，即R=1.5 。計(jì)算需要多少塊有效計(jì)算需要多少塊有效塔板。若填充柱的塔板高度為塔板。若填充柱的塔板高度為0.1 cm，柱長(zhǎng)是多少？柱長(zhǎng)是多少？解： r21= 100 / 85 = 1.18 n有效 = 16R2 r21 / (r21 1) 2 = 161.52 (1.18 / 0.18 ) 2 = 1547（塊）L有效 = n有效H有效 = 15470.1 = 155 cm 即柱長(zhǎng)為1.55米時(shí)，兩組分可以得到完全分離。2021-9-25例題例題2： 在一定條件下，兩個(gè)組分的保留時(shí)間分別為在一定條件下，兩個(gè)組

23、分的保留時(shí)間分別為12.2s和和12.8s，計(jì)算分離度。要達(dá)到完全分離，即計(jì)算分離度。要達(dá)到完全分離，即R=1.5 ，所需要的所需要的柱長(zhǎng)。柱長(zhǎng)。n=3600解：8533. 036008 .12448133. 036002 .12442211ntWntWRbRb分離度：72. 08133. 08533. 0)2 .128 .12(2RmLRRL34. 4172. 05 . 1212122塔板數(shù)增加一倍，分離度增加多少？2021-9-25第五節(jié) 定性和定量分析2021-9-25一、一、色譜定性鑒定方法色譜定性鑒定方法1.1.利用純物質(zhì)定性的方法利用純物質(zhì)定性的方法 利用保留值定性利用保留值定性：

24、通過(guò)對(duì)比試樣中具有與純物質(zhì)相同保留值的色譜峰，來(lái)確定試樣中是否含有該物質(zhì)及在色譜圖中位置。不適用于不同儀器上獲得的數(shù)據(jù)之間的對(duì)比。 利用加入法定性利用加入法定性：將純物質(zhì)加入到試樣中，觀察各組分色譜峰的相對(duì)變化。 2. 2.利用文獻(xiàn)保留值定性利用文獻(xiàn)保留值定性 相對(duì)保留值相對(duì)保留值r r2121：相對(duì)保留值r21僅與柱溫和固定液性質(zhì)有關(guān)。在色譜手冊(cè)中都列有各種物質(zhì)在不同固定液上的保留數(shù)據(jù)，可以用來(lái)進(jìn)行定性鑒定。2021-9-253.3.保留指數(shù)保留指數(shù)p380p380 又稱Kovats指數(shù)（），是一種重現(xiàn)性較好的定性參數(shù)。測(cè)定方法： 將正構(gòu)烷烴作為標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定其保留指數(shù)為分子中碳原子個(gè)數(shù)乘以10

25、0（如正己烷的保留指數(shù)為600）。 其它物質(zhì)的保留指數(shù)（IX）是通過(guò)選定兩個(gè)相鄰的正構(gòu)烷烴，其分別具有Z和Z1個(gè)碳原子。被測(cè)物質(zhì)X的調(diào)整保留時(shí)間應(yīng)在相鄰兩個(gè)正構(gòu)烷烴的調(diào)整保留值之間如圖所示：2021-9-25保留指數(shù)計(jì)算方法保留指數(shù)計(jì)算方法)lglglglg()()()()()()()(ZttttItttZRZRZRXRXZRXRZR111002021-9-253.3.與其他分析儀器聯(lián)用的定性方法與其他分析儀器聯(lián)用的定性方法小型化的臺(tái)式色質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS；LC-MS）色譜-紅外光譜儀聯(lián)用儀；組分的結(jié)構(gòu)鑒定SampleSample 58901.0 DEG/MINHEWLETTPACKARD

26、HEWLETTPACKARD5972AMass Selective DetectorDCBA ABCDGas Chromatograph (GC)Mass Spectrometer (MS)SeparationIdentificationBACD2021-9-25二、二、 色譜定量分析方法色譜定量分析方法1. 1. 峰面積的測(cè)量峰面積的測(cè)量 （1）峰高）峰高（h）乘半峰寬乘半峰寬（Y 1/2）法：法：近似將色譜峰當(dāng)作等腰三角形。此法算出的面積是實(shí)際峰面積的0.94倍： A = 1.064 hY1/2 （2）峰高乘平均峰寬法：）峰高乘平均峰寬法：當(dāng)峰形不對(duì)稱時(shí)，可在峰高0.15和0.85處分別測(cè)

27、定峰寬，由下式計(jì)算峰面積： A = h（Y 0.15 + Y 0.85 ）/ 2 （3）峰高乘保留時(shí)間法：）峰高乘保留時(shí)間法：在一定操作條件下，同系物的半峰寬與保留時(shí)間成正比，對(duì)于難于測(cè)量半峰寬的窄峰、重疊峰（未完全重疊），可用此法測(cè)定峰面積： A = hbtR （4）自動(dòng)積分和微機(jī)處理法）自動(dòng)積分和微機(jī)處理法2021-9-252. 定量校正因子定量校正因子 試樣中各組分質(zhì)量與其色譜峰面積成正比，即： m i = fi Ai 絕對(duì)校正因子絕對(duì)校正因子：比例系數(shù)f i ，單位面積對(duì)應(yīng)的物質(zhì)量： f i =m i / Ai 定量校正因子與檢測(cè)器響應(yīng)值成倒數(shù)關(guān)系： f i = 1 / Si 相對(duì)校正因子相對(duì)校正因子f i ：即組分的絕對(duì)校正因子與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的絕對(duì)校正因子之比。 當(dāng)mi、mS以摩爾為單位時(shí)，所得相對(duì)校正因子稱為相對(duì)摩爾校正因子（f M）,用表示；當(dāng)mi、mS用質(zhì)量單位時(shí), 以（f W）,表示。ississiisiiA