芹菜葉中黃酮類物質(zhì)提取工藝的研究

1、安徽工程科技學(xué)院優(yōu)秀畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）摘要樣式（標(biāo)題上方空一行）芹菜葉中黃酮類物質(zhì)提取工藝的研究（加粗小2號(hào)黑體，居中）（空1行）食品科學(xué)與工程061班 陶然（5號(hào)仿宋體）（居中）指導(dǎo)教師: 黃曉東（5號(hào)仿宋體）（居中）（空1行）摘要（5號(hào)黑體加粗）:以芹菜葉為原料，,利用超聲波輔助提取芹菜中的總黃酮類成分。在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,采用正交試驗(yàn)法,重點(diǎn)考察了乙醇濃度、超聲功率、超聲提取溫度、超聲提取時(shí)間和料液比五個(gè)單因素對(duì)總黃酮提取率的影響,并最終確定最佳工藝條件為:乙醇濃度為65%,超聲功率為55W,超聲提取溫度為50,料液比為180,超聲提取時(shí)間為10min,采用該最佳提取工藝,總黃酮的得率可

2、達(dá)0.221%。（5號(hào)宋體）關(guān)鍵詞（5號(hào)黑體加粗）: 芹菜葉；超聲波輔助提??；總黃酮 ；（5號(hào)宋體）（空1行）Abstract（5號(hào)Times New Roman，加粗）: The extraction of flavonoids from celery salt with ultrasonic wave was studied. On the basis of mono factor and orthogonal experimental design, the influence of several parameters on the extraction rate of total f

3、lavonoids were investigated importantly, including the ethanol concentration, ultrasonic power, ultrasonic extracted temperature, ultrasonic extracted time, and material/extraction solution ratio. And the optimum extraction conditions were as follows: ethanol concentration 65%, ultrasonic power 55W,

4、 ultrasonic extracted temperature 50, material/extraction solution ratio 180 and ultrasonic extracted time 15min. Under the above optimum conditions, the total flavonoids yielded 0.221%.Keywords: celery salt; ultrasonicwave assisted extraction; total flavonoids（5號(hào)）Keywords（5號(hào)Times New Roman，加粗）:；（5號(hào)

5、）（空2行）引 言芹菜(Apium graveolens L. )是一種二年生的傘形科芹菜屬的草本植物，是一種豐富的自然資源。芹菜中含有以芹菜素為主的黃酮類化合物，具有降壓安神、降血脂、鎮(zhèn)靜健胃、保護(hù)血管、增強(qiáng)免疫力，抗氧化、抗衰老，增強(qiáng)機(jī)體免疫力等功能，以及廣泛的生物活性和重要的藥用價(jià)值。作為天然抗氧化劑，黃酮類化合物一直受到人們的廣泛關(guān)注，因此研究提取和測(cè)定芹菜內(nèi)的黃酮類物質(zhì)，具有一定的實(shí)用價(jià)值。黃酮類化合物傳統(tǒng)的提取方法主要有煎煮法、回流提取法、索氏提取法、浸漬法、滲漉法、水蒸汽蒸餾法等。這些方法主要是基于天然產(chǎn)物的有效成分在一些極性或非極性溶劑中的溶解性來(lái)提取,存在著損失大、周期長(zhǎng)、工

6、序多、提取率低等缺點(diǎn)?，F(xiàn)已逐步被一些安全、操作方便、快捷、高效的現(xiàn)代提取方法所取代?？紤]到經(jīng)濟(jì)、環(huán)境和安全等多方面的因素，超聲波輔助提取黃酮類化合物的技術(shù)應(yīng)運(yùn)而生。此方法具有能耗低、效率高、不破壞有效成分的特點(diǎn)。在較低溫度超聲作用下，對(duì)乙醇浸提芹菜葉中黃酮類化合物的工藝研究表明，超聲可以強(qiáng)化乙醇浸提法，達(dá)到省時(shí)、高效、節(jié)能的目的。用超聲技術(shù)提取，可提高提取率并縮短提取時(shí)間，而且可以提高原料的利用率。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康木褪且页鲇贸暡ㄝo助提取中芹菜葉中黃酮類物質(zhì)的最佳提取條件，從而使的黃酮類化合物的提取效果最好，黃酮類化和物的得率達(dá)到最高?？疾禳S酮類化合物的活性和提取條件。實(shí)驗(yàn)中，從芹菜葉提取黃酮類化

7、化合物。將芹菜與乙醇以一定的比例混合后，經(jīng)過(guò)超聲波清洗儀進(jìn)行超聲，采用不同的加熱溫度，加熱時(shí)間，料液比、超聲波功率、乙醇濃度等條件等使黃酮從芹菜葉中分離，最終找出最佳的提取條件。本實(shí)驗(yàn)研究的結(jié)果不僅可用于芹菜葉中黃酮類化合物的提取，在其它植物中黃酮類化合物的提取中也具有參考作用。所以，本實(shí)驗(yàn)的研究有一定的實(shí)際意義。引言內(nèi)容引言內(nèi)容引言內(nèi)容引言內(nèi)容（用時(shí)請(qǐng)連此提示一起刪除） “引言”用小3號(hào)宋體字加粗、居中；引言內(nèi)容用小4號(hào)宋體。（用時(shí)請(qǐng)連此提示一起刪除紅色提示）第1章 緒論1.1 黃酮類化和物的特性1.1.1 物理特性 黃酮類化合物多為結(jié)晶性固體1，少數(shù)為無(wú)定型粉末。黃酮類化合物的顏色與分子中

8、存在的交叉共軛體系及助色團(tuán)（-OH、-CH3）等的類型、數(shù)目及取代位置有關(guān)。黃酮一般易溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、吡啶等溶劑，難溶于乙醚、三氯甲烷、苯等有機(jī)溶劑。黃酮類化合物因分子中多有酚羥基而呈酸性，故可溶于堿性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。1.1.2 化學(xué)特性生物類黃酮結(jié)構(gòu)是兩個(gè)苯環(huán)(A-與B-環(huán))通過(guò)中央碳鏈相互聯(lián)結(jié)而成的一系列C6-C3-C6化合物,主要指以2-苯基色原酮為母核的化合物,其基本結(jié)構(gòu)2為: 1.1.3 光譜特性 以乙醇為提取溶劑提取黃酮類化合物，取提取液以溶劑定容測(cè)得在510.0nm處的吸光度值最大3，因此確定510.0nm為最大吸收波長(zhǎng)。1.1.4 穩(wěn)定性（1

9、）對(duì)光照的穩(wěn)定性日光對(duì)黃酮穩(wěn)定性有一定影響4,自然光對(duì)生姜黃酮的穩(wěn)定性影響不大,避光條件下黃酮的穩(wěn)定性較好,紫外光照射4 min以下對(duì)黃酮的穩(wěn)定性幾乎沒(méi)有影響。總之,短時(shí)間里光照對(duì)生姜黃酮的穩(wěn)定性影響不大。（2）對(duì)熱的穩(wěn)定性50以下,黃酮溶液的吸光度變化很小,當(dāng)溫度超過(guò)50時(shí)吸光度呈明顯下降趨勢(shì),溶液顏色由黃色逐漸變?yōu)榈S色,表明,在50以上的溫度范圍內(nèi)黃酮的熱穩(wěn)定性較差,應(yīng)盡量在50以下制備和保存。（3）對(duì)pH的穩(wěn)定性pH為36時(shí)黃酮溶液的吸光度變化不大5，穩(wěn)定性較好。當(dāng)pH小于3或大于6時(shí),吸光度明顯下降,說(shuō)明溶液過(guò)酸或過(guò)堿時(shí),黃酮的穩(wěn)定性較差,可見(jiàn)酸堿對(duì)其影響都比較大。（4）氧化劑對(duì)黃酮

10、的影響隨著氧化劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，黃酮溶液的吸光度略有增加，但上升幅度不大，說(shuō)明氧化劑對(duì)黃酮的穩(wěn)定性的影響不大，所以可認(rèn)為黃酮具有抗氧化做用。1.2 黃酮類化合物的生理功能1.2.1 抗腫瘤、抗癌作用黃酮類化合物6是通過(guò)促進(jìn)腫瘤壞死因子，抑制致癌劑及抗氧化等多途徑發(fā)揮療效的。如大豆異黃酮的A環(huán)5、7位及B環(huán)的4位的羥基是抑制乳腺癌和前列腺癌的主要基團(tuán)，在前列腺細(xì)胞增殖階段大豆蛋白對(duì)其有抑制作用，因此，可減少前列腺腫瘤的發(fā)生。Kenneth研究表明，大豆異黃酮能降低乳腺癌、前列腺癌。趙秀蘭等的研究表明麥胚黃酮類粗提取物具有抑制乳腺腫瘤的作用。1.2.2 對(duì)心血管系統(tǒng)的作用對(duì)血壓的影響：黃酮類化合物

11、7對(duì)高血壓引起的頭痛、項(xiàng)強(qiáng)、頭暈、耳鳴等癥狀有明顯的療效，尤以緩解頭痛、項(xiàng)強(qiáng)為顯著。葛根素對(duì)正常和高血壓動(dòng)物都有一定的降壓作用，靜注葛根素能使正常麻醉犬的血壓短暫而明顯地降低，也能顯著降低清醒自發(fā)性高血壓大鼠血壓。抑制血小板凝集作用：黃酮類化合物對(duì)凝血因子具有較強(qiáng)的抑制作用，故表現(xiàn)出較好的抗凝血作用。試驗(yàn)表明，不同濃度的黃酮類化合物可以不同程度地抑制二磷酸腺苷誘導(dǎo)的大鼠血小板凝集，對(duì)5羥色胺和ADP聯(lián)合誘導(dǎo)的家兔和綿羊血小板凝集也有同樣的抑制作用。黃酮類化合物還可降低血管內(nèi)皮細(xì)胞羥脯酸代謝，使內(nèi)壁的膠原或膠原纖維含量相對(duì)減少，利于防止血小板粘附凝集和血栓形成，有利于防治動(dòng)脈粥樣硬化。大豆異黃酮

12、能抑制凝血酶和血小板活化因子誘導(dǎo)的血小板聚集，高濃度抑制血管滲透性因子誘導(dǎo)的冠狀動(dòng)脈舒張。對(duì)外周血管8的影響：靜注黃酮類化合物于麻醉犬后，全部動(dòng)物的腦血流量增加且血管阻力相應(yīng)降低，還能使乙酸膽堿引起的腦內(nèi)動(dòng)脈擴(kuò)張和去甲腎上腺素引起的收縮減弱，使處于異常狀態(tài)下的血管功能恢復(fù)正常水平。還可改善異丙腎上腺素引起的小鼠微循環(huán)障礙，使毛細(xì)血管前小動(dòng)脈管徑增加，流速加快。1.2.3抗氧化及抗自由基作用自由基性質(zhì)活潑，有極強(qiáng)的氧化反應(yīng)能力9，對(duì)人體有很大的危害性，在體內(nèi)自由基和脂質(zhì)過(guò)氧化作用導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變和功能破壞，而引起癌癥、衰老及心血管等退變性疾病。在黃酮提取物的抗氧化性研究方面，國(guó)外曾有人利用DPP

13、H法研究羥基黃酮以及單寧和類黃酮的抗氧化能力。徐雅琴研究了黑穗栗葉片黃酮提取物的抗氧化性，結(jié)果表明，葉片黃酮提取物具有一定抗氧化效果，且其抗氧化性隨天加量的增加而增強(qiáng)。于長(zhǎng)青等研究表明，麥胚黃酮可顯著增強(qiáng)大鼠血液中和活性，提示麥胚黃酮可能通過(guò)提高機(jī)體抗氧化酶類的生物合成而增強(qiáng)機(jī)體抗氧化能力。1.2.4抗炎、抗微生物及提高免疫功能的作用黃酮類化合物主要通過(guò)影響細(xì)胞的分泌過(guò)程，有絲分裂及細(xì)胞間的相互作用而起抗炎及提高免疫功能10。多數(shù)黃酮類化合物能抑制大鼠肥大細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞對(duì)多種刺激引起的組胺及慢反應(yīng)物質(zhì)的釋放，抑制PGE2、白三烯的合成和釋放，抑制透明質(zhì)酸酶的活性，抑制大鼠中性粒細(xì)胞溶酶體酶的

14、釋放及其脫顆粒。白鳳梅等研究表明，天然黃酮對(duì)小鼠急性胃潰瘍有明顯的消退作用。甘草第2期王長(zhǎng)遠(yuǎn)等：黃酮類化合物研究進(jìn)展 黃酮化合物中抗菌成分較多，其黃酮單體化合物licochalconeA，licochalconeB，glabridin，glabrene等對(duì)金黃色葡萄球菌，枯草桿菌，大腸桿菌，綠膿桿菌，白色念珠菌等均有抑制作用。Neobavai isolavone亦能明顯抑制煙曲霉菌和新型隱球菌的生長(zhǎng)。翟愛(ài)華等采用二倍稀釋法和管碟法對(duì)麥胚黃酮進(jìn)行體外抑菌試驗(yàn)，結(jié)果表明，對(duì)灰葡萄孢、白色念珠菌、黑根霉、意大利青霉等真菌具有較好的抑菌效果。1.2.5類黃酮對(duì)脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)作用有關(guān)對(duì)類黃酮作用的大量研

15、究表明，類黃酮物質(zhì)對(duì)動(dòng)物的脂質(zhì)代謝具有調(diào)節(jié)作用11。Lichtenstein認(rèn)為，大豆產(chǎn)品預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病的作用歸因于大豆類黃酮的降血膽固醇、抗氧化和保護(hù)動(dòng)脈完整的作用。Balmir等在大鼠試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，大鼠日糧中添加大豆異黃酮可顯著降低血清總膽固醇和LDL膽固醇濃度12。于長(zhǎng)青等試驗(yàn)研究表明麥胚黃酮可明顯地降低大鼠血清和肝臟中的膽固醇、甘油三酯的含量。1.3 黃酮類化合物的提取及影響因素黃酮類化合物分布范圍廣、種類多、生物活性廣泛，而且毒性小，使其分離提純技術(shù)得以快速發(fā)展。目前在黃酮類化合物的提取方法中13，溶劑提取法、熱水提取法等傳統(tǒng)方法仍占主導(dǎo)地位，但與一些新興的提取分離技術(shù)相比，

16、逐漸暴露了許多問(wèn)題，如能量消耗大，提取溫度高，時(shí)間長(zhǎng)，不利于黃酮類化合物母核活性的保護(hù)，產(chǎn)品中黃酮類化合物得率和含量低，尤其是存在溶劑殘留。相反一些新興技術(shù)如超聲波輔助提取技術(shù)、微波技術(shù)等具有物耗能耗少，提取速度快，產(chǎn)率和純度高，提取條件溫和，有利于黃酮類化合物母核活性的保護(hù)等特點(diǎn)。今后的黃酮類化合物提取的發(fā)展方向應(yīng)該是優(yōu)化現(xiàn)有的傳統(tǒng)提取工藝的同時(shí)，著手新興技術(shù)的完善和普及。1.4 黃酮類化合物在食品業(yè)的應(yīng)用1.4.1 天然甜味劑柚皮苷屬二氫黃酮，經(jīng)過(guò)氫化處理可以轉(zhuǎn)變?yōu)槎洳闋柾?具有甜味14,甜度是蔗糖的100倍。柚皮苷與異香蘭素作用得新橙皮苷,新橙皮苷經(jīng)過(guò)氫化轉(zhuǎn)變?yōu)樾鲁绕ぼ斩洳闋柾?其甜

17、度為蔗糖的950倍,而且此兩種甜味劑回味均無(wú)苦味,可直接用于各種食品中,并具保健作用。1.4.2 天然抗氧化劑研究表明,生物類黃酮均具有較強(qiáng)的抗氧化能力。SatuS Pekkarinen等人發(fā)現(xiàn)在亞油酸甲脂體系中,楊梅酮(myricetin)與槲皮素(Quercetin)的抗氧化效果優(yōu)于維生素E。Susana Nieto等人發(fā)現(xiàn)在魚(yú)油體系中,槲皮素與5 ,3,4-三羥基-7-甲氧基黃烷酮( 5 ,3,4-trihydroxy-7-methoxyflavanone)的混合物的抗氧化能力15高于人工合成的抗氧化劑丁基羥基茴香醚(BHA)及丁基羥基甲苯(BHT)。1.4.3 天然色素生物類黃酮多呈黃

18、色，同時(shí)又具有很寬的溶解性16，既具有水溶性的生物類黃酮,又有脂溶性的生物類黃酮,所以完全可以根據(jù)食品加工的需要來(lái)選擇合適的生物類黃酮作為著色劑。蕭偉祥等人利用低檔的綠茶或茶末制取了純天然的茶黃色素和茶綠色素，并確定主要成分是黃酮類化合物。1.3.4 保健食品由于生物類黃酮所具有的保健功能,人們又開(kāi)發(fā)出多種保健食品。以富含生物類黃酮的蕎麥為例,就有苦蕎米、苦蕎營(yíng)養(yǎng)粉、苦蕎療效粉、糖尿病食療粉、胃病食療粉、高血脂食療粉、苦蕎顆粒粉、苦蕎餅干、苦蕎掛面、苦蕎通心粉、苦蕎食療酒、苦蕎醋、苦蕎茶等產(chǎn)品。1.5 超聲波輔助萃取的基本原理1.5.1超聲波輔助提取技術(shù) 超聲波是指頻率為20千赫50兆赫左右的

19、電磁波17，它是一種機(jī)械波，需要能量載體介質(zhì)來(lái)進(jìn)行傳播。超聲波在傳遞過(guò)程中存在著的正負(fù)壓強(qiáng)交變周期，在正相位時(shí)，對(duì)介質(zhì)分子產(chǎn)生擠壓，增加介質(zhì)原來(lái)的密度；負(fù)相位時(shí)，介質(zhì)分子稀疏、離散，介質(zhì)密度減小。也就是說(shuō)，超聲波并不能使樣品內(nèi)的分子產(chǎn)生極化，而是在溶劑和樣品之間產(chǎn)生聲波空化作用，導(dǎo)致溶液內(nèi)氣泡的形成、增長(zhǎng)和爆破壓縮，從而使固體樣品分散，增大樣品與萃取溶劑之間的接觸面積，提高目標(biāo)物從固相轉(zhuǎn)移到液相的傳質(zhì)速率。利用超聲波進(jìn)行清洗、干燥、殺菌、提取及無(wú)損檢測(cè)等，是一種非常成熟且有廣泛應(yīng)用的技術(shù)。1.5.2超聲波輔助提取的原理超聲波萃取中的優(yōu)越性，是基于超聲波的特殊物理性質(zhì)。主要是主要通過(guò)壓電換能器產(chǎn)

20、生的快速機(jī)械振動(dòng)波19來(lái)減少目標(biāo)萃取物與樣品基體之間的作用力從而實(shí)現(xiàn)固-液萃取分離。 （1）加速介質(zhì)質(zhì)點(diǎn)運(yùn)動(dòng)。高于20 KHz聲波頻率的超聲波的連續(xù)介質(zhì)（例如水）中傳播時(shí)，根據(jù)惠更斯波動(dòng)原理，在其傳播的波陣面上將引起介質(zhì)質(zhì)點(diǎn)的運(yùn)動(dòng)，使介質(zhì)質(zhì)點(diǎn)運(yùn)動(dòng)獲行巨大的加速度和動(dòng)能。質(zhì)點(diǎn)的加速度經(jīng)計(jì)算一般可達(dá)重力加速度的二千倍以上。由于介質(zhì)質(zhì)點(diǎn)將超聲波能量作用于有效成分質(zhì)點(diǎn)上而使之獲得巨大的加速度和動(dòng)能，迅速逸出基體而游離于水中。 （2）空化作用。超聲波在液體介質(zhì)中傳播產(chǎn)生特殊的“空化效應(yīng)”，“空化效應(yīng)”不斷產(chǎn)生無(wú)數(shù)內(nèi)部壓力達(dá)到上千個(gè)大氣壓的微氣穴，并不斷“爆破”產(chǎn)生微觀上的強(qiáng)大沖擊波作用在被提取物上，使其

21、中所需提取的成分物質(zhì)被“轟擊”逸出，并使得基體被不斷剝蝕，其中不屬于植物結(jié)構(gòu)的所需提取的成分不斷被分離出來(lái)。加速植物有效成份的浸出提取。 （3）超聲波的振動(dòng)勻化（Sanitation）使樣品介質(zhì)內(nèi)各點(diǎn)受到的作用一致，使整個(gè)樣品萃取更均勻。 綜上所述，一般所需提取的物質(zhì)在超聲波場(chǎng)作用下不但作為介質(zhì)質(zhì)點(diǎn)獲得自身的巨大加速度和動(dòng)能，而且通過(guò)“空化效應(yīng)”獲得強(qiáng)大的外力沖擊，所以能高效率并充分分離出來(lái)。1.5.3超聲波萃取的特點(diǎn) 相比較傳統(tǒng)的提取方法20，超聲波萃取具有如下突出特點(diǎn)：（1）無(wú)需高溫。在4050水中超聲波強(qiáng)化萃取，無(wú)水煮高溫，不破壞物質(zhì)的某些具有熱不穩(wěn)定，易水解或氧化特性的有效成份。超聲波

22、能促使植物細(xì)胞地破壁，提高提取效率。（2）常壓萃取，安全性好，操作簡(jiǎn)單易行，維護(hù)保養(yǎng)方便。（3）萃取效率高。超聲波強(qiáng)化萃取2040分鐘即可獲最佳提取率，萃取時(shí)間僅為水煮、醇沉法的三分之一或更少。萃取充分，萃取量是傳統(tǒng)方法的二倍以上。據(jù)統(tǒng)計(jì)，超聲波在6570時(shí)工作效率非常高。而溫度在65C度內(nèi)各種植物的有效成份基本沒(méi)有受到破壞。加入超聲波后（在65條件下），植物有效成份提取時(shí)間約40分鐘。而蒸煮法的蒸煮時(shí)間往往需要兩到三小時(shí)，是超聲波提取時(shí)間的3倍以上時(shí)間。（4）具有廣譜性。適用性廣，絕大多數(shù)的植物各類成份均可超聲萃取。（5）超聲波萃取對(duì)溶劑和目標(biāo)萃取物的性質(zhì)（如極性）關(guān)系不大。因此，可供選擇的

23、萃取溶劑種類多、目標(biāo)萃取物范圍廣泛。（6）減少能耗。由于超聲萃取無(wú)需加熱或加熱溫度低，萃取時(shí)間短，因此大大降低能耗。（7）藥材原料處理量大，成倍或數(shù)倍提高，且雜質(zhì)少，有效成分易于分離、凈化。（8）萃取工藝成本低，綜合經(jīng)濟(jì)效益顯著。1.6 本課題的目的意義和研究?jī)?nèi)容本課題所介紹的超聲波提取黃酮類化合物的方法與常規(guī)提取方法比：(1)超聲波提取具有提取溫度低等特點(diǎn)，可以避免高溫對(duì)有效成分的破壞，適合于熱敏性物料的提取。(2)提取物的有效成分含量高，有利于進(jìn)一步的精制。(3)溶媒用量少，可有效降低成本。(4)有效成分的提取率高，原料利用充分，提高經(jīng)濟(jì)效益。(5)對(duì)大多數(shù)有效成分的生理活性基本無(wú)影響。黃

24、酮類化和物用傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑加熱浸提，時(shí)間較長(zhǎng)，能源消耗大。采用超聲波輔助提取可以加速提取成分的擴(kuò)散釋放，充分與溶劑混合，提高提取效率，且與超臨界CO2萃取相比，成本低、投資少、提取效率高。所以研究此種方法對(duì)尋求更加有效的黃酮類化和物提取法有較大的幫助。第2章 材料與方法2.1 試驗(yàn)原料、藥品及器材2.1.1 試驗(yàn)原料 芹菜葉：購(gòu)買(mǎi)與安徽省蕪湖市鳩江區(qū)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)2.1.2 試驗(yàn)藥品 蘆?。褐袊?guó)醫(yī)藥(集團(tuán))上?；瘜W(xué)試劑公司(生化試劑)；無(wú)水乙醚，乙醇，NaOH, NaNO2， Al(NO3)3等均為國(guó)產(chǎn)分析純;蒸餾水。2.1.3 試驗(yàn)器材 FC104型電子分析天平；101A-2E型數(shù)顯電熱鼓風(fēng)干燥箱

25、；FW-100型高速萬(wàn)能粉碎機(jī)；KQ-250E超聲波清洗器；L-550型臺(tái)式大容量離心機(jī)；分光光度計(jì)。2.2 實(shí)驗(yàn)步驟2.2.1 芹菜葉的預(yù)處理 芹菜葉粉碎按120料液比加無(wú)水乙醚40冷凝回流2小時(shí)脫脂過(guò)濾濾渣干燥后備用。2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備及回歸方程的建立準(zhǔn)確稱取蘆丁20mg(120烘至恒重),加95%乙醇水溶液50 mL。準(zhǔn)確吸取0、1、2、4、6、8、10、12mL于50mL容量瓶中,加12mL 95%的乙醇,加含5% NaNO2水溶液2mL,搖勻靜置6min,再加含10% Al(NO3)3水溶液2mL,搖勻靜置6min,再加含5% NaOH水溶液20mL,用95%乙醇水溶液稀釋至

26、刻度,搖勻,在490510 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)掃描,確定最大吸收波長(zhǎng);在最大吸收波長(zhǎng)(510nm)處測(cè)定吸光值。以吸收度Y為縱坐標(biāo),濃度x為橫坐標(biāo),進(jìn)行回歸分析,繪制回歸曲線。濃度與吸光度有良好的線性關(guān)系。得出回歸方程:Y=6.363x-0.0119（R2=0.9980）（1）2.2.3 樣品總黃酮得率的確定以芹菜葉為原料,經(jīng)乙醇浸提總黃酮,提取液過(guò)濾離心后定容至50mL,每次準(zhǔn)確量取1.0mL。代入回歸方程(1)中計(jì)算,得出提取液中總黃酮含量。總黃酮的得率=C*50/(w*1000)*100 （2）式中：w為樣品的質(zhì)量，單位g；C為提取液中總黃酮的含量，單位mg/mL。2.2.4 單因素試驗(yàn) 選

27、擇提取乙醇濃度、超聲功率、超聲提取溫度、料液比、超聲提取時(shí)間進(jìn)行單因素試驗(yàn),考察其對(duì)提取率的影響。2.2.5 正交試驗(yàn)根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,選擇超聲功率、超聲提取溫度、料液比、超聲提取做4因素3水平正交試驗(yàn),確定最佳提取條件。正交試驗(yàn)因素和水平見(jiàn)表1。表1正交試驗(yàn)因素和水平表水平A超聲波功率/WB提取溫度/C料液比/g：mLD超聲波時(shí)間/min150501:705255601:8010360701:90152.3 穩(wěn)定性試驗(yàn) 分別取少量芹菜葉黃酮的提取液進(jìn)行日光、自然光、避光、加熱時(shí)間、加熱溫度、pH、Vc的穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn),在510 nm處測(cè)其吸光度,根據(jù)蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程計(jì)算總黃酮含量,由此判

28、斷芹菜葉黃酮的光及熱穩(wěn)定性。芹菜葉總黃酮保存率(%)(處理后溶液中總黃酮含量/處理前溶液中總黃酮含量)1002.4 提取物中黃酮類物質(zhì)的鑒定2.4.1 紅外光譜掃描 取少量蘆丁粉末與少量在最佳提取條件下干燥后的粉末進(jìn)行壓片，進(jìn)行紅外掃描。2.4.2 紫外可見(jiàn)光譜掃描第3章 結(jié)果與討論3.1 單因素試驗(yàn)3.1.1 乙醇濃度對(duì)得率的影響準(zhǔn)確稱取脫脂后的芹菜葉粉末0.5 g,分別加入50mL的水以及不同濃度的乙醇在60下浸提2h過(guò)濾,濾液按方程(2)測(cè)定總黃酮提取率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。結(jié)果表明,在較低濃度條件下,隨著乙醇濃度的增加,芹菜葉總黃酮的提取率逐漸提升,到65%的乙醇為溶劑時(shí),總黃酮的提取率

29、達(dá)到峰值,之后,總黃酮的得率隨著乙醇濃度的增加而降低。因此,選擇65%乙醇為最佳溶劑濃度。3.1.2 超聲波功率對(duì)得率的影響準(zhǔn)確稱取脫脂后的芹菜葉粉末0. 5g，加入40mL65%乙醇,在60下超聲功率分別為0、50W、60W、70W、80W、90W和100W時(shí)超聲提取10min，過(guò)濾，濾液按方程(2)測(cè)定總黃酮提取率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。結(jié)果表明隨著使用超聲波輔助提取,總黃酮的提取率在增加，而到50W之后，總黃酮提取率隨著超聲功率的增大而降低。因此50W為最佳提取功率。由于試驗(yàn)儀器的影響，最低的超聲波提取功率只能設(shè)定在50W。3.1.3 超聲波時(shí)間對(duì)得率的影響準(zhǔn)確稱取脫脂后的芹菜葉粉末0. 5

30、g，加入40mL 65%乙醇,在60、超聲功率為60W時(shí)分別超聲提取5min、10min、20min、30min和40min，過(guò)濾，濾液按方程(2)測(cè)定總黃酮得率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。結(jié)果表明，隨著時(shí)間的增加,總黃酮提取率增加,但在10min時(shí)候達(dá)到峰值，之后隨著時(shí)間的增加,總黃酮提取率降低。所以選擇10min為最佳的提取時(shí)間。3.1.4 提取溫度對(duì)得率的影響準(zhǔn)確稱取脫脂后的芹菜葉粉末0. 5 g，加入40mL 65%乙醇,分別在20、40、50、60、70和78下，超聲功率為60W時(shí)超聲提取10min,過(guò)濾,濾液按方程(2)測(cè)定總黃酮得率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。結(jié)果表明,超聲提取溫度為20至60時(shí)

31、,總黃酮得率隨著溫度的升高而增加,而60之后隨著溫度的升高,總黃酮提取率降低。因此,選擇60為最佳的超聲提取溫度。3.1.5 料液比對(duì)得率的影響準(zhǔn)確稱取脫脂后的芹菜葉粉末0. 5g，分別加入65%乙醇10mL、20mL、30mL、40mL和50mL，在60、超聲功率為60W時(shí)超聲提取10min,過(guò)濾,濾液按方程(2)測(cè)定總黃酮得率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。結(jié)果表明,總黃酮提取率隨料液比增大而增大,在料液比為180時(shí)為最大值,隨后減小。3.2 正交試驗(yàn)為了全面考察超聲波輔助提取的最佳工藝參數(shù)，在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選擇65%乙醇為最佳提取溶劑,以超聲功率,超聲提取溫度,料液比和超聲提取時(shí)間這4種因素進(jìn)

32、行L9(34)正交試驗(yàn)，確定最優(yōu)方案，結(jié)果見(jiàn)表。從表中極差數(shù)據(jù)可知,超聲功率,超聲提取溫度,料液比和超聲提取時(shí)間這4種因素對(duì)總黃酮提取率影響的主次順序?yàn)椋毫弦罕瘸暡ㄌ崛囟瘸曁崛r(shí)間超聲提取功率，最佳的提取條件為65%乙醇濃度，超聲功率為55W，超聲提取溫度為50，料液比為180，超聲提取時(shí)間為10min，最佳提取條件下所得的黃酮類化合物的得率為0.221%。試驗(yàn)號(hào)ABCD黃酮得率111110.212220.31 3330.421230.522310.623120.731320.832130.933210.K10.0.0.0.K20.0.0.0.K30.0.0.0.k10.0.0.0.k2

33、0.0.0.0.k30.0.0.0.極差R0.0.0.0.因素主 次料液比提取溫度超聲波提取時(shí)間超聲波功率最優(yōu)方案55W50度8010min來(lái)源: 虛構(gòu)數(shù)據(jù)，僅用作圖表示例3.3 穩(wěn)定性的研究3.3.1 光照對(duì)芹菜葉黃酮穩(wěn)定性的影響分別準(zhǔn)確稱取3份芹菜葉粉末0.5g，于正交試驗(yàn)最佳提取條件下進(jìn)行提取，定容后按標(biāo)準(zhǔn)方程測(cè)其初始吸光度，并將裝有提取液的3支容量瓶，1支置于日光下照射，另2支分別在室內(nèi)自然光下和暗箱藥品柜中放置,每隔1d測(cè)其吸光度，共測(cè)定4次，并將每天測(cè)得的吸光度值與初始吸光度對(duì)比分別計(jì)算，得出黃酮的保存率含量。由圖可知，黃酮提取液在日光、自然光、避光下放置2d，其黃酮提取液保存率分

34、別為93.6%，94.3%，94.3%，放置4d，其黃酮保存率分別為81.5%，87.2%，91.5%?？梢?jiàn)，日光對(duì)芹菜黃酮穩(wěn)定性有一定影響,自然光對(duì)芹菜黃酮的穩(wěn)定性影響不大,避光條件下芹菜黃酮的穩(wěn)定性較好。3.3.2 加熱時(shí)間對(duì)芹菜葉黃酮穩(wěn)定性的影響準(zhǔn)確稱取芹菜葉粉末0.5g，于正交試驗(yàn)最佳提取條件下進(jìn)行提取，定容后按標(biāo)準(zhǔn)方程測(cè)其初始吸光度，并將裝有提取液容量瓶放在水浴鍋中進(jìn)行加熱，分別在20、30、40、50、60、70、80、90測(cè)量其吸光度，與初始吸光度對(duì)比分別計(jì)算，得出黃酮的保存率含量。 由圖可知，在2060下，熱對(duì)芹菜黃酮的穩(wěn)定性幾乎沒(méi)有影響，在70是保存率為78.3%，在70以上

35、時(shí)分解加速，90時(shí)保存率為58.9%。說(shuō)明高溫對(duì)芹菜黃酮穩(wěn)定性具有影響。3.3.3 pH對(duì)芹菜葉黃酮穩(wěn)定性的影響以檸檬酸-檸檬酸鈉為緩沖體系，研究了不同pH值對(duì)芹菜總黃酮熱穩(wěn)定性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖。由圖可見(jiàn)，芹菜總黃酮的熱穩(wěn)定性隨pH值增大而減弱。因此，在利用芹菜總黃酮加工保藏食品時(shí)，在食品感官品質(zhì)允許的情況下，應(yīng)盡量采用較低的pH值。3.4 黃酮類化合物的鑒定3.4.1 紅外掃描光譜蘆丁的結(jié)構(gòu)中含有各種具有紅外吸收的官能團(tuán)，其中-OH基團(tuán)在36503500cm-1處峰形尖，吸收強(qiáng)。當(dāng)-OH基團(tuán)濃度大時(shí)，波峰移至35003200處，峰形較寬。其中的芳環(huán)在16201480cm-1處具有4個(gè)波峰

36、，15001480 cm-1最強(qiáng)，16201590 cm-1其次，1580 cm-1較弱，450 cm-1常觀測(cè)不到。-C=O基團(tuán)在16001850 cm-1具有吸收峰。-CH基團(tuán)在27003000 cm-1具有吸收峰。由圖像可知，在32003500 cm-1處，具有較強(qiáng)的吸收值且波形較寬，說(shuō)明有大量-OH基團(tuán)存在。在14711519 cm-1處具有一個(gè)明顯的吸收峰，說(shuō)明物質(zhì)中含有芳環(huán)。在18562956 cm-1處有一個(gè)較小的吸收峰，說(shuō)明有-CH鍵的存在。在1647 cm-1處具有一個(gè)吸收峰，說(shuō)明有-C=O基團(tuán)存在。圖中粗品的曲線的吸收峰在32003500 cm-1處、14711519 cm

37、-1處、18562956 cm-1處、1647 cm-1處同樣出現(xiàn)，但峰形并沒(méi)有蘆丁曲線尖，說(shuō)明次樣品中含有黃酮類物質(zhì)。由圖像可知，圖中正交后的曲線在32003500 cm-1處、14711519 cm-1處、18562956 cm-1處、1647 cm-1處仍然出現(xiàn)波峰，說(shuō)明正交后樣品中含有黃酮類物質(zhì)，并且在正交干燥后的樣品中的黃酮已經(jīng)被提取走，較原先的含量已明顯減少，證明超聲波輔助提取技術(shù)有效的增加的黃酮類物質(zhì)的提取含量。1、標(biāo)題層次畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）的全部標(biāo)題層次應(yīng)有條不紊，整齊清晰。相同的層次應(yīng)采用統(tǒng)一的表示體例。章節(jié)編號(hào)方法應(yīng)采用分級(jí)阿拉伯?dāng)?shù)字編號(hào)方法，第一級(jí)為“第1章”、“第2章”、

38、“第3章”等，第二級(jí)為“2.1”、“2.2”、“2.3”等，第三級(jí)為“2.2.1”、“2.2.2”、“2.2.3”等，兩級(jí)之間用下角圓點(diǎn)隔開(kāi)，每一級(jí)的末尾不加標(biāo)點(diǎn)，后空一格書(shū)寫(xiě)標(biāo)題。分級(jí)以少為宜，根據(jù)實(shí)際需要選擇。層次要求統(tǒng)一，但若節(jié)下內(nèi)容無(wú)需列條的，可直列款、項(xiàng)。層次用到哪一層次視需要而定。標(biāo)題書(shū)寫(xiě)：各層標(biāo)題均單獨(dú)占行書(shū)寫(xiě)。第一級(jí)標(biāo)題（章）用小3號(hào)宋體字加粗、居中；第二級(jí)標(biāo)題（節(jié)）用小4號(hào)黑體字、居左頂格書(shū)寫(xiě)；第三級(jí)標(biāo)題用小4號(hào)宋體字、居左頂格書(shū)寫(xiě)。正文與參考文獻(xiàn)正文用小4號(hào)宋體字；圖表字號(hào)采用5號(hào)宋體字。2、標(biāo)點(diǎn)符號(hào)畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）中的標(biāo)點(diǎn)符號(hào)應(yīng)按新聞出版署公布的“標(biāo)點(diǎn)符號(hào)用法”使用。3、

39、引用文獻(xiàn)引用文獻(xiàn)標(biāo)示方式應(yīng)全文統(tǒng)一，并采用所在學(xué)科領(lǐng)域內(nèi)通用的方式，置于所引內(nèi)容最末句的右上角，用小5號(hào)宋體字。所引文獻(xiàn)編號(hào)用阿拉伯?dāng)?shù)字置于方括號(hào)中，如：“成果1”。當(dāng)提及的參考文獻(xiàn)為文中直接說(shuō)明時(shí)，其序號(hào)應(yīng)該用小4號(hào)字與正文排齊，如“由文獻(xiàn)2,68可知”。不得將引用文獻(xiàn)標(biāo)示置于各級(jí)標(biāo)題處。4、名詞、名稱科技名詞術(shù)語(yǔ)及設(shè)備、元件的名稱，應(yīng)采用國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或部頒標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的術(shù)語(yǔ)或名稱。標(biāo)準(zhǔn)中未規(guī)定的術(shù)語(yǔ)要采用行業(yè)通用術(shù)語(yǔ)或名稱。全文名詞術(shù)語(yǔ)必須統(tǒng)一。一些特殊名詞或新名詞應(yīng)在適當(dāng)位置加以說(shuō)明或注解。采用英語(yǔ)縮寫(xiě)詞時(shí)，除本行業(yè)廣泛應(yīng)用的通用縮寫(xiě)詞外，文中第一次出現(xiàn)的縮寫(xiě)詞應(yīng)該用括號(hào)注明英文全文。外國(guó)人名

40、一般采用英文原名，按名前姓后的原則書(shū)寫(xiě)。一般很熟知的外國(guó)人名（如牛頓、達(dá)爾文、馬克思等）可按通常標(biāo)準(zhǔn)譯法寫(xiě)譯名。5、量和單位量和單位必須采用中華人民共和國(guó)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB3100GB3102-93。非物理量的單位，如件、臺(tái)、人、元等，可用漢字與符號(hào)構(gòu)成組合形式的單位，例如：件/臺(tái)、萬(wàn)元/km、萬(wàn)tkm等。6、外文字母的正、斜體用法按照GB3100GB3102-86及GB7159-87的規(guī)定，即物理量符號(hào)、物理常量、變量符號(hào)用斜體。計(jì)量單位等符號(hào)均用正體。7、數(shù)字畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）中的測(cè)量統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)一律用阿拉伯?dāng)?shù)字，但在敘述不很大的數(shù)目時(shí)，一般不用阿拉伯?dāng)?shù)字，如“八顆小行星”、“三力作用于一點(diǎn)”，不宜

41、寫(xiě)成“8顆小行星”、“3力作用于1點(diǎn)”。大約的數(shù)字可以用中文數(shù)字，也可以用阿拉伯?dāng)?shù)字，如“約一百二十人”，也可寫(xiě)成“約120人”。8、注解畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）中有個(gè)別名詞或情況需要解釋時(shí)，可加注說(shuō)明，注解可用頁(yè)末注（將注文放在加注頁(yè)的下端）或篇末注（將全部注文集中在文章末尾），而不可行中注（夾在正文中的注）。9、公式公式應(yīng)居中書(shū)寫(xiě)，公式的編號(hào)按章編排，用圓括號(hào)括起放在公式右邊行末，公式和編號(hào)之間不加虛線。10、插表插表的表序一般按章編排，如第一章第一個(gè)插表的序號(hào)為“表1-1”等。表序與表名之間空一格，表名中不允許使用標(biāo)點(diǎn)符號(hào)，表名后不加標(biāo)點(diǎn)。表序與表名置于表上，表序、表名、表格內(nèi)容均用5號(hào)宋體字居

42、中書(shū)寫(xiě)。表頭設(shè)計(jì)應(yīng)簡(jiǎn)單明了，盡量不用斜線。全表如用同一單位，將單位符號(hào)移至表頭右上角，加圓括號(hào)。表中數(shù)據(jù)應(yīng)正確無(wú)誤，書(shū)寫(xiě)清楚。數(shù)字空缺的格內(nèi)加“”字線（占2個(gè)數(shù)字），不允許用“”、“同上”之類的寫(xiě)法。表內(nèi)文字說(shuō)明，起行空一格、轉(zhuǎn)行頂格、句末不加標(biāo)點(diǎn)。表格位于正文中引用該表格字段的后面。11、插圖插圖應(yīng)與文字緊密配合，文圖相符，內(nèi)容正確。選圖要力求精練。每個(gè)圖均應(yīng)有圖題（由圖號(hào)和圖名組成）。圖號(hào)按章編排，如第一章第一圖的圖號(hào)為“圖1-1”等。圖號(hào)和圖題應(yīng)放在圖位下方居中處。圖題和圖內(nèi)均用5號(hào)宋體字書(shū)寫(xiě)。圖名在圖號(hào)之后空一格排寫(xiě)。引用圖應(yīng)說(shuō)明出處，在圖題右上角加引用文獻(xiàn)號(hào)。圖中若有分圖時(shí)，分圖號(hào)用

43、a)、b)等置于分圖之下。插圖與其圖題為個(gè)整體，不得拆開(kāi)排寫(xiě)于兩頁(yè)。插圖處的該頁(yè)空白不夠排寫(xiě)該圖整體時(shí)，可將其后文字部分提前排寫(xiě)，將圖移至次頁(yè)最前面。有數(shù)字標(biāo)注的坐標(biāo)圖，必須注明坐標(biāo)單位。照片圖均應(yīng)是原版照片粘貼，不得采用復(fù)印方式。照片可為黑白或彩色，應(yīng)主題突出、層次分明。清晰整潔。反差適中。照片采用光面相紙，不宜用布紋相紙。插圖不得采用復(fù)印件，不得徒手畫(huà)。對(duì)于復(fù)雜的引用圖，可采用數(shù)字化儀輸入計(jì)算機(jī)打印出來(lái)的圖稿。12、頁(yè)眉頁(yè)腳設(shè)置頁(yè)眉：奇數(shù)頁(yè)書(shū)寫(xiě)“安徽工程科技學(xué)院畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）”，用宋體小五號(hào)書(shū)寫(xiě)；偶數(shù)頁(yè)書(shū)寫(xiě)“學(xué)生姓名：課題題目”，用宋體小五號(hào)書(shū)寫(xiě)。頁(yè)腳：頁(yè)碼居中，形式為“-1-”，用Ti

44、mes New Roman字體小五號(hào)書(shū)寫(xiě)。（用時(shí)請(qǐng)連此提示一起刪除紅色提示）結(jié)論與展望結(jié)論本實(shí)驗(yàn)獲得了超聲波法提取芹菜葉中黃酮類化合物的最優(yōu)預(yù)處理及提取條件。回顧近兩個(gè)月的實(shí)驗(yàn)工作，從把新鮮的芹菜葉制成粉末，再經(jīng)進(jìn)一步提取得到黃酮類物質(zhì)，從單因素實(shí)驗(yàn)一直到正交實(shí)驗(yàn)，這其中的每一步都是至關(guān)重要的，來(lái)不得半點(diǎn)虛假?，F(xiàn)在實(shí)驗(yàn)已經(jīng)結(jié)束了，實(shí)驗(yàn)結(jié)果是最能證明實(shí)驗(yàn)效果的。在本次研究中，綜合上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果及圖表分析可知，超聲波輔助提取芹菜葉中黃酮類化合物的最優(yōu)工藝條件并最終確定最佳工藝條件為:乙醇濃度為65%,超聲功率為55W,超聲提取溫度為50,料液比為180,超聲提取時(shí)間為10min,采用該最佳提取工藝,

45、總黃酮的得率可達(dá)0.221%。各種因素對(duì)提取效果影響的主要順序依次為：料液比提取溫度超聲波時(shí)間超聲波功率。通過(guò)方差分析檢驗(yàn)可知，料液比對(duì)黃酮類化合物的提取影響最為顯著。采用超聲波輔助提取芹菜葉中黃酮類化合物，可大大縮短提取時(shí)間，避免因提取時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而造成的黃酮氧化損失，提取率較高、成本低、投資少、適宜大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。展望目前，人們?cè)絹?lái)越重視保健食品，注重天然植物的活性成分對(duì)疾病的預(yù)防作用，更注重飲食對(duì)健康的重要性。鑒于黃酮類化合物對(duì)人體具有重要的生理功能，黃酮的提取就顯得日益重要。黃酮類化合物作為非常有前途的功能性天然抗氧化劑，加上其具有資源豐富，安全無(wú)毒等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)人體保健有十分重要的意義，其

46、價(jià)值也在不斷受到人們的關(guān)注，無(wú)論是作為醫(yī)藥產(chǎn)品還是食品添加劑，都具有很大的市場(chǎng)潛力。但是如將其作為人體食用的物質(zhì)，提取出的黃酮類化合物的安全性必須引起人們的注意。目前，有機(jī)溶劑提取難免會(huì)在成品黃酮類化合物中有殘留，大多有機(jī)溶劑都是對(duì)人體有害的。因此，在成品的最后精致過(guò)程中要制定標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)定方法，保證它的安全性。要求作者根據(jù)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所獲得全部材料，經(jīng)過(guò)分析、判斷、歸納等邏輯處理，得出正確的學(xué)術(shù)觀點(diǎn)、總的見(jiàn)解，結(jié)論必須準(zhǔn)確、完整、扼要地表明以下內(nèi)容：1）通過(guò)本課題找到了什么規(guī)律，解決了什么理論和實(shí)際工程上技術(shù)問(wèn)題；2）對(duì)前人相關(guān)的看法和做法作了何修正、補(bǔ)充、創(chuàng)新、證實(shí)與否定；3）本課題存在的不足及其完善的可能方向；4）本課題繼續(xù)開(kāi)展工作的價(jià)值。論文的結(jié)論與展望應(yīng)單獨(dú)作為一章排寫(xiě)，但不加章號(hào)。內(nèi)容一般在2000字以內(nèi)。（用時(shí)請(qǐng)連此提示一起刪除紅色提示）致 謝本實(shí)驗(yàn)是在黃曉東導(dǎo)師的悉心指導(dǎo)下完成的。在此論文完成之際，首先致以最誠(chéng)摯的謝意！大學(xué)四年來(lái)，黃老師淵博的專業(yè)知識(shí)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)態(tài)度、開(kāi)朗的性格以及和藹友善的待人深深的影響著我，這將是一筆精神財(cái)富讓我終身受益。在論文的選題、試驗(yàn)方案的設(shè)計(jì)、試驗(yàn)結(jié)果的分析討論、論文的撰寫(xiě)、審閱和定稿都傾注了導(dǎo)師的大量心血和時(shí)間，并指出很多錯(cuò)誤之處，提出了具體的改進(jìn)意見(jiàn)。特別是在論文審