微生物檢驗概述

1、微生物檢驗的簡單介紹 微生物室微生物室(龍憲川龍憲川) 2012年年8月月主要內(nèi)容 一、微生物的簡單概述 二、微生物檢驗中的常見技術(shù) 三、常見臨床標(biāo)本的基本檢驗程序 四、總結(jié)微生物的簡單概述 微生物的分類1、原核細(xì)胞型微生物（僅有原始核缺乏細(xì)胞器）：細(xì)菌、放線菌、螺旋體、支原體、衣原體、立克次體2、真核細(xì)胞型微生物（有典型的核結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器）：真菌、原蟲3、非細(xì)胞型微生物（由DNA或RNA和蛋白質(zhì)外殼組成）：病毒、朊粒微生物的簡單概述 微生物的作用 絕大多微生物對人類和動植物是有益的，有些還是必不可少的。寄居在人體的微生物可以分為三類：1、正常菌群：不但無害，還可以幫助人體拮抗某些病原微生物和提

2、供營養(yǎng)。2、條件致病菌：菌群失調(diào)、機(jī)體抵抗力下降、寄居部位的改變或失調(diào)則引起致病。現(xiàn)抗生素的濫用使其越來越體現(xiàn)出致病性。3、病原微生物：引起人類和動、植物致病的微生物，是醫(yī)學(xué)微生物研究的主體。微生物的簡單概述 臨床微生物學(xué)檢驗 主要研究的是病原微生物，通過一些檢驗手段和技術(shù)準(zhǔn)確的檢出病原體，為臨床診斷提供依據(jù)，并指導(dǎo)進(jìn)一步的合理用藥和防止感染的繼續(xù)擴(kuò)散。所以我們在工作中要做到仔細(xì)、認(rèn)真、負(fù)責(zé)！微生物檢驗中的常見技術(shù) 細(xì)菌形態(tài)學(xué)的檢驗方法：通過顯微鏡檢查染色后的標(biāo)本。 染色的基本程序：涂片（干燥）固定染色（媒染）（脫色）（復(fù)染） 革蘭染色：最為常見的染色技術(shù)，可以明確的區(qū)分出革蘭陽性（紫色）和革

3、蘭陰性（紅色）球、桿菌。 抗酸染色：分支桿菌檢驗最為重要的檢驗染色方法，鏡下分支桿菌為紅色。 墨汁染色 ：常用來檢驗新型隱球菌。 熒光染色等 微生物檢驗中的常見技術(shù)革蘭陽性革蘭陽性革蘭陰性革蘭陰性微生物檢驗中的常見技術(shù)抗酸染色抗酸染色微生物檢驗中的常見技術(shù) 細(xì)菌的培養(yǎng)技術(shù)1、需氧培養(yǎng)：接種在平板或液體培養(yǎng)基上，置于35溫箱孵育18-24小時。2、二氧化碳培養(yǎng)：5%-10%的CO2環(huán)境中生長良好，如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等。3、厭氧培養(yǎng)：專性厭氧菌的培養(yǎng)。 微生物檢驗中的常見技術(shù) 細(xì)菌的分離技術(shù)1、分離培養(yǎng)基： 麥康凱平板，中等強度選擇培養(yǎng)基，可以選擇出大部分的革蘭陰性菌。 SS瓊脂平板，強選

4、擇性，用于志賀菌和沙門菌的分離。 堿性瓊脂平板，霍亂弧菌的分離培養(yǎng)基。2、分區(qū)劃線：適用于雜菌較多的標(biāo)本。每畫完一個區(qū)，將接種環(huán)滅菌一次，使菌落量逐漸減少，以獲得單個菌落。微生物檢驗中的常見技術(shù)分區(qū)劃線得到單個菌落微生物檢驗中的常見技術(shù) 細(xì)菌的生長現(xiàn)象1、菌落的特征:大小、形狀、突起、顏色、表面、透明度、黏度。2、血平板上的溶血 溶血：菌落周圍血培養(yǎng)基變成綠色環(huán)狀。溶血：菌落周圍形成一個完全透明的環(huán)。溶血：菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化。溶血：菌落周圍的培養(yǎng)基沒有變化。3 3、半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象、半固體培養(yǎng)基中的生長現(xiàn)象; ;主要觀察動主要觀察動力（不動桿菌、志賀菌為陰性）力（不動桿菌、志賀菌

5、為陰性）細(xì)菌的生長現(xiàn)象發(fā)酵乳糖（紅色）發(fā)酵乳糖（紅色）細(xì)菌的生長現(xiàn)象銅綠假單胞菌銅綠假單胞菌 不規(guī)則不規(guī)則 綠色色素綠色色素細(xì)菌的生長現(xiàn)象變形桿菌變形桿菌遷徙生長遷徙生長細(xì)菌的生長現(xiàn)象肺炎克雷伯肺炎克雷伯 拉絲現(xiàn)象拉絲現(xiàn)象細(xì)菌的生長現(xiàn)象粘液型綠膿粘液型綠膿細(xì)菌的生長現(xiàn)象溶血溶血溶血溶血微生物檢驗中的常見技術(shù) 細(xì)菌的生物化學(xué)試驗1、氧化-發(fā)酵實驗（O/F試驗），主要用于發(fā)酵與非發(fā)酵之間的鑒別。2、七葉苷水解試驗，D群鏈球菌（陽性）與其他鏈球菌的鑒別。3、苯丙氨酸試驗，變形桿菌、普羅威登斯菌和摩根菌屬（陽性）與其他腸桿菌的鑒別。4、氧化酶實驗，非發(fā)酵菌陽性（與試劑接觸10s內(nèi)變成紫色），不動桿菌較

6、為特殊（陰性）。5、觸酶實驗（H2O2），葡萄球菌陽性，腸/鏈球菌陰性。微生物檢驗中的常見技術(shù)6、靛基質(zhì)、甲基紅、VP試驗、枸櫞酸鹽（IMViC）：大腸埃希菌（+-）、產(chǎn)氣腸桿菌（-+）7、動力、靛基質(zhì)、尿素分解試驗（MIU）、KIA、膽汁溶解試驗、血漿凝固酶試驗、桿菌肽試驗等都非常重要。微生物檢驗中的常見技術(shù)IMViC(+-)IMViC(-+)微生物檢驗中的常見技術(shù) 血清學(xué)試驗1、血清學(xué)鑒定：用含已知特異性抗體的免疫血清去檢測患者標(biāo)本中或培養(yǎng)物中的未知細(xì)菌及細(xì)菌抗原，以確定病原菌的種或型(莢膜腫脹試驗、制動試驗）。2、血清學(xué)診斷：用已知的抗原檢測病人血清中的相應(yīng)抗體（肥達(dá)試驗、外斐試驗）。微

7、生物檢驗中的常見技術(shù) 細(xì)菌檢驗的商品化、自動化 全自動的血液培養(yǎng)系統(tǒng)和微生物鑒定/藥敏系統(tǒng)大大的減少了工作量，提高了工作效率,使其微量化、標(biāo)準(zhǔn)化以及結(jié)果的準(zhǔn)確度和溯源性。但在工作中應(yīng)做好儀器的保養(yǎng)、維護(hù)和校正工作，堅持做好室內(nèi)、間質(zhì)控！微生物檢驗中的常見技術(shù)鑒定鑒定+藥敏試劑板條藥敏試劑板條臨床標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗基本程序 采集標(biāo)本（保存、運送） 觀察、前處理（標(biāo)本是否合格） 直接涂片 快速檢驗 增菌培養(yǎng)（需氧、厭氧、 二氧化碳） 報告 報告 分離培養(yǎng)（需氧、厭氧、 二氧化碳） 可疑菌落（分純培養(yǎng)）涂片檢查 生化試驗 血清學(xué)鑒定 藥敏試驗 報告 本科室檢驗程序 接種標(biāo)本 革蘭陰性桿菌 轉(zhuǎn)種（分純）

8、革蘭陽性球菌 OF(+) OF(-) OF (+) OX(-) OX(+) H2O2(+) H2O2(-) OX(-) OX(+) 腸桿菌 非發(fā)酵菌 弧菌 葡萄球菌 腸/鏈球菌少見少見臨床標(biāo)本中的常見病原菌類別類別革蘭陽性革蘭陽性革蘭陰性革蘭陰性病毒病毒/真菌真菌球菌桿菌球菌桿菌血血 液液感感 染染金葡、腸球菌鏈球菌（A、B群）產(chǎn)單核李斯特菌炭疽芽孢桿菌產(chǎn)氣莢膜梭菌腦膜炎奈瑟菌卡他布拉漢菌大腸、變形、不動桿菌綠膿桿菌傷寒、副傷寒真菌鉤端螺旋體呼吸道呼吸道感感 染染金黃色葡萄球菌肺炎鏈球菌化膿性鏈球菌白喉棒狀桿菌腦膜炎奈瑟菌大腸、產(chǎn)氣腸肺炎克雷伯不動、綠膿桿菌放線菌假絲酵母菌尿尿 道道感感 染染腸球菌金黃色葡萄球菌淋病奈瑟菌變形、不動桿菌大腸埃希菌銅綠假單胞菌肺炎克雷伯神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)系統(tǒng)感感 染染金葡、腸球菌肺炎、化膿性鏈球菌產(chǎn)單核李斯特菌炭疽芽孢桿菌腦膜炎奈瑟菌卡他布拉漢菌變形、不動桿菌大腸、產(chǎn)氣腸銅綠假單胞菌肺炎克雷伯新型隱球菌假絲酵母菌創(chuàng)傷創(chuàng)傷/外科外科感感 染染金黃色葡萄球菌鏈球菌破傷風(fēng)梭菌潰瘍棒狀桿菌大腸、變形桿菌綠膿桿菌肺炎克雷