高效液相色譜法測定鹽酸馬尼地平片的技術(shù)分析

1、高效液相色譜法測定鹽酸馬尼地平片的技術(shù)分析【摘要】目的 建立測定鹽酸馬尼地平片含量的高效液相色譜（HPLC）法。方法 采用外標(biāo)法。供試液濃度0.1mg/ml。色譜柱為Kromasil C18 （250mmx4.6mm，5?m），以乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（6535）為流動相，檢測波長為228nm，流速為1.0mL/min。結(jié)果 在47.6?g/ml285.6?g/ml濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，回歸方程為A=53851C+16836（r=1），平均回收率為100.1%，RSD=0.69%。結(jié)論 本法用于測定鹽酸馬尼地平片的含量，重現(xiàn)性好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。【關(guān)鍵詞】鹽酸馬尼地平片；高效

2、液相色譜法；含量鹽酸馬尼地平（Manidipine Hydrochloride）是由日本武田藥品株式會社研制開發(fā)的用于治療高血壓的新藥，于1990年首次在日本上市。鹽酸馬尼地平是第三代二氫吡啶類鈣離子拮抗劑，能夠抑制平滑肌細(xì)胞電壓依賴性鈣離子內(nèi)流，引起系統(tǒng)性的血管擴(kuò)張，從而降低血壓。鹽酸馬尼地平的原料和制劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚未被任何藥典收載。筆者建立了高效液相色譜法測定鹽酸馬尼地平片的含量，該方法靈敏度高，專屬性強(qiáng)。1.儀器與試藥LC-2010AHT高效液相色譜儀（日本島津公司）；CPA225D電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）；鹽酸馬尼地平對照品（企業(yè)工作對照，批號：D140501）；鹽酸馬尼地平

3、片（自制，規(guī)格：5mg/片，批號：140701、140702、140703）；乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純；試驗(yàn)用水為純化水。2.方法與結(jié)果2.1色譜條件色譜柱：Kromasil C18 （250mmx4.6mm，5?m），流動相：乙腈-0.05mol/L磷酸二氫鉀溶液（6535），柱溫：35，流速：1.0mL/min，檢測波長：228nm，進(jìn)樣量：20?l。2.2對照品溶液的制備精密稱取鹽酸馬尼地平對照品10mg，置100ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。2.3供試品溶液的制備與測定取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于鹽酸馬尼地平10mg），置1

4、00ml量瓶中，加流動相適量，超聲處理使鹽酸馬尼地平溶解，并用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液。按2.1;項(xiàng)下色譜條件測定，按外標(biāo)法以峰面積計算含量。2.4檢測波長選擇取鹽酸馬尼地平對照品適量，精密稱定，用流動相溶解并稀釋制成20?g/ml的溶液，在200400nm的波長內(nèi)掃描，結(jié)果在228nm、352nm處有最大吸收。352nm波長處的吸收強(qiáng)度比228nm弱，故選定228nm為檢測波長。2.5方法學(xué)考察2.5.1專屬性試驗(yàn)按鹽酸馬尼地平片處方，稱取空白輔料約91mg，置50ml量瓶中，加流動相適量，超聲處理，加流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾20?l注入液相色譜儀，記錄色譜圖

5、。結(jié)果，空白輔料在鹽酸馬尼地平主峰處不出峰，說明輔料不會干擾鹽酸馬尼地平片的含量測定。2.5.2線性取鹽酸馬尼地平對照品23.80mg，置50ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋到刻度，作為貯備液。精密量取適量稀釋成47.6、95.2、142.8、238.0、285.6?g/ml的濃度，以進(jìn)樣濃度C對峰面積A做線性回歸，回歸方程為A=53851C+16836，r=1。結(jié)果表明，在47.6?g/ml285.6?g/ml濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。2.5.3回收率試驗(yàn)取鹽酸馬尼地平原料，按標(biāo)示量的80%（8mg）、100%（10mg）、120%（12mg）精密稱定，分別置100ml量瓶中，各加約182mg

6、的空白輔料，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，過濾，取續(xù)濾液適量，作為供試品溶液；另取鹽酸馬尼地平對照品約10mg，置100ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。取上述兩溶液各20?l，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法計算回收率，結(jié)果見表1。2.5.4儀器精密度試驗(yàn)取對照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，測定峰面積。結(jié)果的RSD為0.31%（n=6）。2.5.5重復(fù)性試驗(yàn)取同一批號（140701）樣品，按2.3;項(xiàng)下方法制備并重復(fù)測定6 次，平均含量為99.5%，RSD為0.47%（n=6）。2.5.6溶出度測定溶液的穩(wěn)定性取同一供試品溶液，于室溫下放置，分別于0h、2h、4h、6

7、h、8h時進(jìn)樣，測定結(jié)果RSD為0.62%，表明在8小時內(nèi)供試品溶液穩(wěn)定。2.5.7定量限試驗(yàn)精密吸取2.2;項(xiàng)下對照品溶液適量，加流動相稀釋成濃度約為0.042?g/mL的溶液。按2.1;項(xiàng)下色譜條件測定，以信噪比101計算，鹽酸馬尼地平含量測定的定量限為0.84ng。2.6樣品測定取3批樣品，按2.3;項(xiàng)下所述方法制備供試品溶液，按2.1;項(xiàng)下色譜條件，分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20?L，注入高效液相色譜儀，記錄各自的色譜圖和峰面積，按外標(biāo)法計算鹽酸馬尼地平片的含量，結(jié)果140701批樣品含量為99.4%，140702批樣品含量為100.5%，140703批樣品含量為99.8%。結(jié)果表明，本法測定的準(zhǔn)確度較高，重現(xiàn)性和精密度較好。3.討論鹽酸馬尼地平原料和制劑尚無任何公開的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，且國內(nèi)也鮮有關(guān)于該品種檢測方法的文獻(xiàn)，本研究為鹽酸馬尼地平片含量測定方法提供了一種參考。系統(tǒng)適用性試驗(yàn)結(jié)果顯示，色譜圖中鹽酸馬尼地平峰的理論板數(shù)和分離度均符合要求，表明本色譜條件符合中國藥典2010年版（二部）【1】及中國藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范（2010年版）【2】的相關(guān)規(guī)定。相關(guān)研究結(jié)果表明，本法用于測定鹽酸馬尼地平片的含量，重現(xiàn)性好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。本法亦可作為鹽酸