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文檔簡(jiǎn)介
1、v1.0可編輯可修改、填空題1、植物組織培養(yǎng)成功與否,一方面取決于_培養(yǎng)材料本身_的性質(zhì);另一方面取決于培養(yǎng)基的種類_和成分。2. 一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)?分生狀態(tài),并形成 _細(xì)胞團(tuán)的現(xiàn)象稱為脫分化。3植物組織培養(yǎng)技術(shù)的三大難題分別為 _褐變_、_污染_和玻璃化_。4具有防止褐變作用的維生素是維生素C。5病毒在植物體內(nèi)的運(yùn)轉(zhuǎn)方式有 短距離運(yùn)轉(zhuǎn) 和_長(zhǎng)距離運(yùn)轉(zhuǎn) 兩種,前者經(jīng)過(guò) _胞間連絲 向鄰近細(xì)胞中擴(kuò)散,速度很慢。后者通過(guò)寄主植物 _韌皮部的疏導(dǎo)組織 隨著營(yíng)養(yǎng)輸送進(jìn)行轉(zhuǎn)移,速度很快。6、 6-BA / NAA勺高低決定了外植體的發(fā)育方向, 比值低時(shí)促進(jìn) 根的生長(zhǎng),這時(shí)分化 占主導(dǎo)地位;
2、比值高促進(jìn) 苗的生長(zhǎng),這時(shí)分裂占主導(dǎo)地位;懸浮培養(yǎng)的材料必須達(dá)到 懸浮培養(yǎng) 物質(zhì)分散性多、細(xì)胞核較小均一性好 和生長(zhǎng)迅速等三個(gè)要求。7、連續(xù)培養(yǎng)是指在培養(yǎng)過(guò)程中,以不斷抽取 _用過(guò)的培養(yǎng)基 _并注入_新鮮的培養(yǎng)基_,使培養(yǎng)不 斷得到養(yǎng)分補(bǔ)充,保持其 穩(wěn)定狀態(tài)一的培養(yǎng)。8 培養(yǎng)基的母液一般是配成 大量元素,微量元素,維生素 和 氨基酸 4類存放備用。MS培養(yǎng)基 中組成大量元素的鹽類分別是 硝酸鉀和硝酸銨_。9. 一般情況下,細(xì)胞分裂/生長(zhǎng)素的比值高,有利于愈傷組織長(zhǎng) 芽,比值低有利于長(zhǎng)根_。10. 在植物的材料滅菌中,酒精的濃度用 70%75%處理時(shí)間一般在幾秒至幾十秒范圍,是靠 _使蛋白質(zhì) 凝
3、固_殺菌的;升汞的濃度一般用1%2%處理的時(shí)間在510min范圍,升汞是靠_Hg2+_S菌的;殺菌劑中的 次氯酸鈉是靠_CIO-_殺菌的。11. 培養(yǎng)植物適宜的溫度大多在252C_,光照強(qiáng)度在1000IX光照時(shí)間在16h_。12. 進(jìn)行熱處理植物脫毒的溫度在 _85C _右。13. 配制螯合態(tài)鐵鹽需要的成分是 _FeSO 7fOLNQ-EDTA丄14. 培養(yǎng)基中有機(jī)態(tài)N素營(yíng)養(yǎng)主要是 硝態(tài)氮 和 銨態(tài)氮。15. 原生質(zhì)體的融合可實(shí)現(xiàn)_體細(xì)胞_的雜交,其融合的方式分為_(kāi)自發(fā)融合_和_誘導(dǎo)融合兩類。16. 從再生植株倍性來(lái)看,小抱子培養(yǎng)通常產(chǎn)生單倍體 植株,胚培養(yǎng)通常產(chǎn)生 二倍體 植株,_胚 乳培養(yǎng)
4、通常產(chǎn)生三倍體植株。17. 進(jìn)行植物組織培養(yǎng)最基本的前提條件是配置培養(yǎng)基。18. 離體葉片在誘導(dǎo)愈傷組織的培養(yǎng)基上培養(yǎng),一般從葉緣 或 葉脈 處容易發(fā)生愈傷組織。19. 某些生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗生素、酶類物質(zhì)遇熱不穩(wěn)定,對(duì)其滅菌時(shí)不能進(jìn)行高壓蒸汽滅菌,而要進(jìn)行12v1.0可編輯可修改過(guò)濾方法除菌。20配制培養(yǎng)基時(shí),一般先配制母液,其目的在于 使用方便和用量準(zhǔn)確_。21分生區(qū)域內(nèi)無(wú)維管束,病毒只能通過(guò) 胞間連絲 傳遞。22在無(wú)毒苗的組織培養(yǎng)中,外植體的大小與其成活率成正比而與脫毒效果成反比二、單項(xiàng)選擇題1、 ( C )可作為植物外植體的表面消毒劑是。A. 漂白粉和水B.次氯酸鈉溶液和聚乙二醇C.氯化
5、汞和新潔爾滅D.酒精和氯化鈉2、 ( B )大多數(shù)植物組織培養(yǎng)最適溫度一般為 C。 2C 2C 2C3、( A )在適宜的培養(yǎng)條件下,還可使愈傷組織長(zhǎng)期傳代生存下去,這種培養(yǎng)稱為 A .繼代培養(yǎng)B.再分化培養(yǎng)C.胚狀體培養(yǎng)D.馴化4、 ( B )大多數(shù)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基最適 pH為。B. C. D.、( A )外植體褐變的原因是。A. 外植體中的多酚氧化酶被激活,使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。B. 外植體中的琥珀酸脫氫酶被激活,使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。C. 外植體中的磷酸化酶被激活,使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。D. 外植體中的三磷酸腺苷酶被激活,使細(xì)胞的代謝發(fā)生變化。6植物組培初代接種易污染的可能原因BC_0
6、A材料過(guò)嫩B材料過(guò)老C接種材料過(guò)大D每瓶接種數(shù)量太少7. 影響培養(yǎng)基凝固程度因素有_AD。A瓊脂的質(zhì)量好壞;B高壓滅菌的時(shí)間;C高壓滅菌的溫度;D培養(yǎng)基的PH8. 愈傷組織不分化、生長(zhǎng)過(guò)旺、疏松,其原因有C_A糖的濃度過(guò)高B培養(yǎng)基的滲透壓過(guò)低 C生長(zhǎng)素和分裂素過(guò)高D生長(zhǎng)素和分裂素過(guò)低9. 有一種植物經(jīng)初代培養(yǎng)得到4株無(wú)菌苗,以后按每3 6天繼代增殖一次,每次增殖倍數(shù)為3倍, 年后繁殖苗有CA 3 X 410 株 B 4 X 312 株 C 4X 310 株 D 3X 4 12 株NAA (萘乙酸)、IBA (吲哚丁酸)、IAA(吲哚乙酸)、苯乙酸(PAA)、2,4- D10. 下列不屬于生長(zhǎng)素
7、類的植物激素是_AC。A BA B NAA; C ZT; D - D611. 植物組織培養(yǎng)可用于: ABCD。A快速繁殖;B脫除病毒;C提高品質(zhì)12、誘導(dǎo)試管苗分化叢芽,培養(yǎng)基的調(diào)整應(yīng)D育種;BE減少品種(7合成植物生長(zhǎng)素 變異)都屬于生長(zhǎng)素類,有雙重效應(yīng),可以促進(jìn)生根、頂端優(yōu)勢(shì)。22不同器官對(duì)IAA敏感性:根 芽莖。v1.0可編輯可修改A加大生長(zhǎng)素的濃度B加大分裂素的濃度C加活性炭D降低鹽的濃度。13、下列不屬于MS中微量元素的鹽是ABD。A NH4NQ; B KNO; C ; D14、對(duì)生根培養(yǎng)不起作用的激素是:_A_A GA B IAA ; C NAA; D IBA15、 ( D )在下
8、列選項(xiàng)中,不需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的是d 。A、利用基因工程培育抗棉鈴蟲的棉花植株B、利用細(xì)胞工程技術(shù)培養(yǎng)“番茄一馬鈴薯”雜種植株C、利用花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株D利用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗,得到染色體數(shù)目加倍的植株16、 ( C )植物組織培養(yǎng)形成的愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng),又可以分化形成根、芽等器官,這一過(guò)程稱為。A、脫分化B、去分化 C、再分化 D、脫分化或去分化17、 ( B)下列哪種不是原生質(zhì)體分離所用的酶 _B。A、纖維素酶 B、淀粉酶C、果膠酶 D半纖維素酶18、 ( A )在花藥培養(yǎng)中下列哪種不是花粉的發(fā)育過(guò)程A 。A、營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育途徑B、生殖細(xì)胞發(fā)育途徑C 、胚狀體發(fā)育途徑
9、 D花粉均等分裂途徑19、 ( D )下列哪種在MS培養(yǎng)基中不起促進(jìn)生長(zhǎng)作用_D。A、氨基酸 B肌醇 C維生素 D瓊脂20、 ( B )下列技術(shù)培育出的新個(gè)體中,遺傳物質(zhì)只來(lái)源于一個(gè)親本的是 。 細(xì)胞組織培養(yǎng)細(xì)胞融合扦插誘導(dǎo)產(chǎn)生多倍體雜交育種轉(zhuǎn)基因工程A、B、C、 D21、 ( a ) 下列那種不是無(wú)性繁殖的器官 。A、種子B、枝條C、塊莖 D、塊根22、 ( b )植物離體保存的主要步驟是。離體培養(yǎng)物的保存離體培養(yǎng)與祛除病原物種質(zhì)離體收集遺傳穩(wěn)定性鑒定A、BC D 23、 ( c )原生質(zhì)體純化步驟大致有如下幾步。將收集到的濾液離心,轉(zhuǎn)速以將原生質(zhì)體沉淀而碎片等仍懸浮在上清液中為準(zhǔn),一般以5
10、00r/min離心15mi n。用吸管謹(jǐn)慎地吸去上清液。34v1.0可編輯可修改 將離心下來(lái)的原生質(zhì)體重新懸浮在洗液中(除不含酶外,其他成分和酶液相同),再次離心,去上清液, 如此重復(fù)三次。 將原生質(zhì)體混合液經(jīng)篩孔大小為 40100um的濾網(wǎng)過(guò)濾,以除去未消化的細(xì)胞團(tuán)塊和篩管、導(dǎo)管等雜 質(zhì),收集濾液。 用培養(yǎng)基清洗一次,最后用培養(yǎng)基將原生質(zhì)調(diào)到一定密度進(jìn)行培養(yǎng)。 一般原生質(zhì)體的培養(yǎng)密度為104 106/ ml。A、 B、 C、D、24、 (c ) 下列有關(guān)細(xì)胞全能性的含義,正確的是 。A、每個(gè)生物體內(nèi)的所有細(xì)胞都具有相同的功能B、生物體內(nèi)的任何一個(gè)細(xì)胞可以完成該個(gè)體的全部功能C、生物體的每一個(gè)
11、活細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能D生物體的每個(gè)細(xì)胞都經(jīng)過(guò)產(chǎn)生、分裂、分化、生長(zhǎng)、衰老、死亡的全過(guò)程25、 (d )下列不屬于活性炭在組織培養(yǎng)中的作用是。A、吸附有毒物質(zhì)B、減少褐變,防止玻璃化C、創(chuàng)造黑暗環(huán)境,增加培養(yǎng)基的通透性,利于根的生長(zhǎng)D增加培 養(yǎng)基 中的養(yǎng)分三、判斷題1、(V )胚狀體的維管組織與母體結(jié)構(gòu)和外植體的維管組織一般沒(méi)有聯(lián)系。2、(X )培養(yǎng)基當(dāng)中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例高時(shí),僅形成愈傷組織。3、( x )對(duì)植物器官或愈傷組織上分離出的單細(xì)胞(或小細(xì)胞團(tuán))進(jìn)行培養(yǎng),形成單細(xì)胞無(wú)性系或再 生植株的技術(shù)稱為植物組織培養(yǎng)技術(shù)。4 ( V )植物組織與細(xì)胞培養(yǎng)方法生產(chǎn)出藥品,農(nóng)藥,香
12、料,色素及食品添加劑。5、( X )超低溫保存是指在-100 C溫下使細(xì)胞代謝和生長(zhǎng)處于基本停止的狀態(tài),在適宜的條件下可迅 速繁殖,生出新的植株,并保持原來(lái)的遺傳特性。6、( X ) FAD法可顯示細(xì)胞內(nèi)脫氫酶的活性,脫氫酶使 FAD還原生成一種紅色的物質(zhì),作為檢驗(yàn)活細(xì) 胞的方法。7、( X )蔗糖可作為滲透性冰凍保護(hù)劑。8( X )方親本的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)分另一方親本的少量核物質(zhì)和全部細(xì)胞質(zhì)融合9、( V)有些植物對(duì)病毒極為敏感,一旦感染病毒就會(huì)在其葉片乃至全株上表現(xiàn)特有的病斑,把這種44v1.0可編輯可修改植物稱為病毒敏感植物或指示植物10( V )花藥和花粉培養(yǎng)可獲得單倍體植株。叫細(xì)胞質(zhì)雜
13、交。四、名詞解釋1、脫分化 有高度分化能力的植物組織或器官,產(chǎn)生愈傷組織 的過(guò)程。2、 愈傷組織 植物各器官的外植體在離體的條件下,經(jīng)細(xì)胞 脫分化(等一系列過(guò)程 改變了它們?cè)械?特性)而形成的一種能迅速增殖的不特定結(jié)構(gòu)和功能的細(xì)胞團(tuán),稱為愈傷組織。3、人工種子 是指將植物離體培養(yǎng) 產(chǎn)生的體細(xì)胞胚包埋在含有營(yíng)養(yǎng)成分和保護(hù)功能的物質(zhì)中,在適宜 的條件下發(fā)芽出苗的顆粒體。4、胚狀體在離體或活體條件下,通過(guò)體細(xì)胞經(jīng)原胚期、球形胚期、心形胚期、魚雷胚期和子葉期等階 段形成的胚叫體細(xì)胞胚狀體。5、 植物快速繁殖 利用離體培養(yǎng)技術(shù),將來(lái)自優(yōu)良植株的器官、組織和細(xì)胞 進(jìn)行離體培養(yǎng),在短期內(nèi) 獲得大量遺傳性一
14、致的個(gè)體的方法6、 看護(hù)培養(yǎng) 把單個(gè)細(xì)胞置于一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織(也稱看護(hù)愈傷組織,nursecalli )上培養(yǎng), 在愈傷組織和培養(yǎng)的細(xì)胞之間用一片濾紙相隔。這培養(yǎng)的單細(xì)胞長(zhǎng)出微小的細(xì)胞團(tuán)之后,再移至瓊脂培養(yǎng)基 上。7、 植物種質(zhì)保存利用天然或人工創(chuàng)造的適宜環(huán)境,使個(gè)體中所含有的遺傳物質(zhì)保持遺傳完整性,有 咼的活力,能通過(guò)繁殖將其遺傳特性傳遞下去。&連續(xù)培養(yǎng)是利用特別的培養(yǎng)容器 進(jìn)行大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的一種方式。連續(xù)培養(yǎng)過(guò)程中,不斷 注入新鮮培養(yǎng)基,排掉 等體積的用過(guò)的培養(yǎng)基,培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)得到不斷補(bǔ)充。9、馴化或煉苗:在移植之前必須對(duì)試管苗進(jìn)行提高其適應(yīng)能力的鍛煉,使植株生長(zhǎng)粗壯,增強(qiáng)小
15、苗體質(zhì) 以提高移苗成活率。同時(shí)進(jìn)一步將瓶?jī)?nèi)植物打開(kāi)進(jìn)行煉苗。使試管苗慢慢適應(yīng)外界環(huán)境。這個(gè)過(guò)程叫做馴化 或煉苗。有瓶煉和盤煉,移栽方式有容器移栽和大田移栽。五、簡(jiǎn)答題(一)、某培養(yǎng)基的配方是 M群BA mg/L + mg/L + IBA mg/L+ %蔗糖+%瓊脂粉。MS母液的濃度分別 是:大量元素50倍,微量元素100倍,鐵鹽20倍,有機(jī)物100倍;BA母液濃度mg/ml ,NAA母液濃度ml, IBA母液濃度ml。要配制800ml該培養(yǎng)基,需要吸取各種母液各多少 ml分別稱取蔗糖、瓊脂粉各多少克(要 求寫出計(jì)算步驟)BA=* 仁大量元素:800/50=16ml55v1.0可編輯可修改NAA
16、=*=4mlIBA=*1/=4ml蔗糖=800*%=20g瓊脂粉=800*%=Ms綠色書23頁(yè)表(二)、如何減輕試管苗玻璃化現(xiàn)象如何防止外植體的真菌污染1. (第四章21頁(yè))(1)利用固體培養(yǎng)方法,增加瓊脂濃度,降低培養(yǎng)基中的滲透勢(shì),造成細(xì)胞吸水阻 遏?;蛱岣吲囵B(yǎng)基中蔗糖含量或加入滲透劑,減少培養(yǎng)基中植物材料可獲得的水分,這也可以抑制玻璃化的 發(fā)生。(2) 適當(dāng)降低培養(yǎng)基中的細(xì)胞分裂素和赤霉素的濃度?;蛘?,適當(dāng)增加培養(yǎng)基中Ca Mg Mn K、P、 Fe、Cu Zn元素含量,降低N和CL元素比例,特別是降低胺態(tài)氮的濃度,提高硝態(tài)氮量。(3) 增加自然光照。因?yàn)樽匀还庵械淖贤饩€能促進(jìn)試管苗成熟。
17、(4)改善培養(yǎng)器皿的氣體交換狀態(tài)封口膜(5)在培養(yǎng)基中添加其他物質(zhì)。如添加馬鈴薯汁可降低油菜的玻璃苗的產(chǎn)生頻率。2. (第三章11頁(yè))在接種前要求無(wú)菌室內(nèi)做到用空氣循環(huán)過(guò)濾裝置使空氣過(guò)濾滅菌或通過(guò)紫外線照射滅菌外,再利用超凈工作臺(tái)接種前,應(yīng)開(kāi)機(jī)15min以達(dá)到空氣的充分過(guò)濾滅菌。而且接種時(shí)嚴(yán)格操作,如在接種前去掉橡皮筋, 打開(kāi)棉塞時(shí)動(dòng)作要輕及去掉瓶塞后瓶子應(yīng)拿成斜角,最好瓶口放在酒精火焰的前方等等。(三)、簡(jiǎn)答出一般莖段是怎樣選材消毒和接種的選材:較幼嫩的材料,器官的生理狀態(tài)和發(fā)肓年齡,外植體的大小為-(第三章3頁(yè))消毒:自來(lái)水較長(zhǎng)時(shí)間沖洗+70%S精浸泡植物種+無(wú)菌水沖洗23次+2%10%N
18、aCIO%HgCI2 12min+無(wú)菌水沖洗3次。(第三章5頁(yè))接種:左手拿三角瓶或果醬瓶,用右手輕輕取下封口膜或蓋子將三角瓶或果醬瓶的口靠近酒精燈火焰,瓶口稍微傾斜,這樣瓶口外部在火焰上旋轉(zhuǎn)灼燒數(shù)秒鐘,后用鑷子將外植體送入瓶中。(第四章4頁(yè))六、論述題為什么莖尖培養(yǎng)可獲得無(wú)特定病毒植株怎樣獲得無(wú)特定病毒的試管苗獲得的無(wú)病毒苗用一種方法鑒定 其真的無(wú)特定病毒的植株66v1.0可編輯可修改1).感染病毒植株的體內(nèi)病毒的分布并不均勻,病毒的數(shù)量隨植株部位及年齡而異,越靠近莖頂端區(qū) 域的病毒的感染深度越低,生長(zhǎng)點(diǎn)則幾乎不含或含病毒很少。2) . 1. 了解植物攜帶何種病毒,病毒在體內(nèi)的分布位置2.母體植株的選擇和預(yù)處理3.莖尖的剝離4. 脫毒效果檢測(cè)3) .取培養(yǎng)植株的葉片置于研缽中,加入少量的水和等量的L磷酸緩沖液(pH ),磨成勻獎(jiǎng),將其 涂抹在指示植株葉片上,在指示植物的葉片撒上金剛砂,通過(guò)輕輕摩擦使汁浸入
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