USP-51抗菌效力測試(翻譯)

1、877237b57b4ff6af2cfe115c842f87d2.pdf 第 1 頁，共 5 頁抗菌的效力測試抗菌防腐劑是實際被添加到有菌的劑量配方里的物質，使他們不受微生物滋長或是被無意中引進到生產(chǎn)過程中的微生物侵害。在無菌包裝多劑量配方的容器里，抗菌防腐劑被添加用來抑制由重復添加單劑量所引進的微生物的滋長?？咕栏瘎┎粦蛔鳛樵诹己蒙a(chǎn)操作中的替代方式使用，或僅是用來減少一個有菌產(chǎn)品的微生物群數(shù)量，或是在生產(chǎn)時控制多劑量的微生物量。在劑量表里抗菌防腐劑與添加的要求必需符合規(guī)定。所有有用的抗菌藥劑都是有毒物質。為了最大的保護使用者，防腐劑的含量應被有效地顯示在產(chǎn)品的最終包裝上，并應會處在一個

2、可能對人體有毒的水平線下。添加的抗菌防腐劑含量能夠被保持在一個最小的濃度，如果配方的活性成分具有一個固定的抗菌力?？咕男Я?，不管是產(chǎn)品里固有的或者是生產(chǎn)中添加的抗菌防腐劑，都必須在所有注入包裝的多劑量容器里或其它包含抗菌防腐劑的產(chǎn)品上顯示?？咕栏瘎┍仨毐伙@示在多劑量和口頭劑量型和給其它劑量型，如眼藥，耳藥，鼻藥，沖洗的和透析液。(看 Pharmaceutical Dosage Forms(a1151).本章提供的測試用來顯示抗菌保護的效力。添加的抗菌防腐劑必須顯示在標簽上。測試的效力和標準適用于一個產(chǎn)品在原有的、未打開過的經(jīng)由制造商銷售的容器里。產(chǎn)品分類產(chǎn)品分類 為了測試的目的，配制產(chǎn)品分

3、開為四個分類（看表 1）。抗菌效力的標準對于這些產(chǎn)品是一個管理的作用。Table 1.Compendial Product Categories 表 1: 配制藥品分類Category類類 別別Product Description產(chǎn)產(chǎn) 品品 概概 述述1針劑，其它非腸胃藥劑，包括乳劑、無菌耳用劑、鼻用劑和眼用劑含水的或其它介質的。2局部使用產(chǎn)品，含水的或其它介質，如未滅菌耳用劑產(chǎn)品、軟膏，包括那些涂在黏膜上的。3口服產(chǎn)品，除了以水為基底或其它的介質的解酸劑。4含水解酸劑。測試生物體使用以下微生物的培養(yǎng)基：白念珠菌（ATCC NO.10231）,黑曲霉菌（ATCC NO.16404）,大腸桿菌

4、（ATCC NO.8739）,綠膿桿菌(ATCC no.9027),和金黃色葡萄球菌( ATCC NO.6538). 在測試中使用活的微生物從原始的培養(yǎng)基移轉次數(shù)不得超過五次。為了測試的目的，移轉的定義是從一個已確定的培養(yǎng)877237b57b4ff6af2cfe115c842f87d2.pdf 第 2 頁，共 5 頁基移到一個新鮮的媒介里。所有的移轉均應被計算在內的。一旦有機體被以種子庫(seed-lot) 技術保存下來時，每個在新鮮媒介里冰凍的，融化的和再生的循環(huán)周期被認為是一次轉移。種子存儲技術將會被使用到培養(yǎng)的長期存儲中。從 ATCC 得到的培養(yǎng)基將會依照操作方向蘇醒。如果在液體培養(yǎng)基里

5、生長，細胞會通過離心法的方式被聚集成塊。懸浮在 1/20 容量的新鮮的液體培養(yǎng)基里，并添加一個同等容量的 20%（V/V 水里）的無菌的甘油。從表面到 10%的甘油液體培養(yǎng)基里可能得到在瓊膠培養(yǎng)基上的細胞生長。分配小部分的懸浮液到無菌的小瓶里。把小瓶子放在液化氮里或一個不超過-50 攝氏度的機械冷藏室里。當要求一個新鮮的種子存儲瓶時，它可能被移除和使用來給一系列的有效的培養(yǎng)菌做接種。這些有效的培養(yǎng)基到時可以被定期地（每天，當測試細菌和酵母時）使用來啟動接種培養(yǎng)基。媒介測試中所有媒介的使用，必須做促生長測試。在有機體測試下使用上面指定的測試微生物。接種體的準備準備測試，由最近再生的培養(yǎng)基的表面適

6、當?shù)慕臃N特定的微生物。接種培養(yǎng)基的描述請參考表 2，表 2 里的適合的培養(yǎng)基是黃豆-消化酪蛋白(soybean casein digest)或沙保羅氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。（ 參看Microbial Enumeration Tests (61)和 Absence of Specified Microorganism 62）為了獲得細菌和白色念珠菌(C.albicans)培養(yǎng)基，使用干凈的鹽水溶液(Saline TS ，注: 9 克氯化鈉溶于 1000 mL.的水)，清洗表面的生成物，把它收集在一個合適的容器里，并添加足夠的鹽水溶液以獲得一個每毫升大約 1108 cfu 的微生物計數(shù)。為了獲得黑曲霉

7、菌(A. niger)細胞，使用干凈的鹽水溶液含 0.05%的聚山梨醇酯 80(polysorbate 80)，并添加足夠的鹽水溶液來獲得一個大約 1108cfu 每毫升的計數(shù)?；蛘?，一個合適的液體的培養(yǎng)液（如，黃豆-消化酪蛋白液 soybean casein digest broth 或沙氏瓊脂培養(yǎng)液 sabouraud dextrose broth）可能生長出培養(yǎng)菌微生物并通過離心法得到細胞，然后以無菌的鹽水溶液清洗和重新懸浮以獲得一個大約 1108cfu 每毫升的微生物計數(shù)。（注意 預計的接種濃度可能通過濁度計測量來挑戰(zhàn)微生物。如果懸浮液沒有在兩個小時內被使用，請冷凍它）測出每個懸浮液的

8、每毫升的菌落數(shù)量，使用在 TABLE2 里的媒介和微生物的恢復培養(yǎng)期的情況來確認估計每毫升的原始 cfu。這個值可以用在測試中做接種尺寸的比對。細菌和酵母菌的懸浮液在 24 小時收獲期里應被使用，但真菌的準備可在冷凍情況下儲存 7 天。程序877237b57b4ff6af2cfe115c842f87d2.pdf 第 3 頁，共 5 頁測試可以在五個干凈的容器里操作，如果在每個容器里有足夠容量的產(chǎn)品且產(chǎn)品容器能被無菌地裝入（ 如，使用針和注射器穿過一個人造的橡膠瓶塞），或者在五個無菌的，加蓋的、尺寸合適的，能移轉產(chǎn)品的充足容量的細菌容器里。給每一個準備好的標準的接種體的容器做接種注射，并混合。接

9、種懸浮液的使用量在產(chǎn)品量的 0.5%到 1.0%之間。被添加到產(chǎn)品的測試細菌濃度（類型 1.2.3）到最終的測試準備濃度在接種之后是每毫升1105and 1106cfu 之間。對于類型 4 產(chǎn)品（解酸劑）測試準備的最終濃度在接種后是每毫升產(chǎn)品 1103到 1104cfu 之間。在每次測試準備的活的微生物的原始濃度是預計是基于每個標準接種體的微生物濃度，通過皿測法來預計的。在 22.52.5 的溫度下將容器接種。如表 3，在適當?shù)臅r間間隔里把每個容器做樣品標示。記錄下在每個間隔時間里出現(xiàn)的任何變化（參看 Microbial Limit Tests (61)下的程序） 。以平皿計數(shù)方式(plate

10、 count)在適當?shù)臅r間間隔里計算出現(xiàn)的 cfu 數(shù)。使用特定的抗菌劑做為鈍化劑（中和劑）或是適當?shù)南♂屃縼碜銎矫笥嫈?shù)。在表 2 中規(guī)定出培養(yǎng)基與不同菌種的各種接種狀況與驗收時間。在開始測試時使用每毫升多少CFU 來計算濃度，在適當?shù)拈g隔測試對每個微生物計算每毫升 CFU 濃度的 log10 值的變化，并表述以 log為單位的減少變化量。Table 2.Culture Conditions for Inoculum Preparation 接種體準備的培養(yǎng)基Organism微生物Suitable Medium 適合的培養(yǎng)基IncubationTemperature接種溫度Inoculum I

11、ncubation Time接種時間Microbial Recovery Incubation Time驗收時間Escherichia coli 大腸桿菌(ATCC No.8739)SoybeanCasein Digest Broth;黃豆-消化酪蛋白液SoybeanCasein Digest Agar黃豆-消化酪蛋白基32.52.518 to 24hours18 至 24 小時3 to 5days3 至 5 天Pseudomonas aeruginosa 綠膿桿菌(ATCC No.9027)SoybeanCasein Digest Broth;黃豆-消化酪蛋白液SoybeanCasein D

12、igest Agar黃豆-消化酪蛋白基32.52.518 to 24hours18 至 24 小時3 to 5days3 至 5 天Staphylococcus aureus金黃色葡萄球菌 SoybeanCasein Digest Broth;黃豆-消化酪蛋白液32.52.518 to 24hours18 至 24 小時3 to 5days3 至 5 天877237b57b4ff6af2cfe115c842f87d2.pdf 第 4 頁，共 5 頁Organism微生物Suitable Medium 適合的培養(yǎng)基IncubationTemperature接種溫度Inoculum Incubat

13、ion Time接種時間Microbial Recovery Incubation Time驗收時間(ATCC No.6538)SoybeanCasein Digest Agar黃豆-消化酪蛋白基Candida albicans 白念珠菌(ATCC No.10231)Sabouraud Dextrose Agar;沙氏瓊脂培養(yǎng)基Sabouraud Dextrose Broth沙氏瓊脂培養(yǎng)液22.52.544 to 52hours44 到 52 小時3 to 5days3 至 5 天Aspergillus niger 黑曲霉菌(ATCC No.16404)Sabouraud Dextrose A

14、gar;沙氏瓊脂培養(yǎng)基Sabouraud Dextrose Broth沙氏瓊脂培養(yǎng)液22.52.56 to 10days6 至 10 天3 to 7days3 至 7 天抗菌效力標準抗菌效力的要求如 Table 3 下規(guī)定的標準（參看 significant figures and tolerances under general notices）。增加值不高于現(xiàn)行測量值的 0.5 log10 單位的可視為沒有增加。測試微生物的標準For Category 1 Products 對第一類產(chǎn)品Bacteria: 細菌7 天里的原始計數(shù)量不少于 1.0 log 的減少量，在 14 天里原始計數(shù)量不

15、少于 3.0 log 的減少量，在 14 天-28 天里計數(shù)量不增加。Yeast and Molds:酵母和霉菌原始計數(shù)量在 7 天，14 天，28 天里沒有增加。For Category 2 Products 對第二類產(chǎn)品Bacteria:細菌Not less than 2.0log reduction from the initial count at 14days,and no increase from the 14dayscount at 28days.Yeast and Molds:酵母和霉菌No increase from the initial calculated count at 14and 28days.For Category 3 Products 對第三類產(chǎn)品Bacteria:細菌Not less than 1.0log reduction from the initial count at 14days,and no increase from the 14dayscount at 28days.Yeast and Molds:酵母和霉菌No increa