高壓蒸汽滅菌

1、復(fù)習(xí)：復(fù)習(xí)：控制微生物生長的方法都有控制微生物生長的方法都有哪些？哪些？ 實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?實驗原理實驗原理 實驗器材實驗器材 實驗方法實驗方法 注意事項注意事項思考題思考題技能訓(xùn)練8高壓蒸汽滅菌v了解高壓蒸汽滅菌的基了解高壓蒸汽滅菌的基本原理及應(yīng)用范圍。本原理及應(yīng)用范圍。v 熟練掌握高壓蒸汽滅菌熟練掌握高壓蒸汽滅菌的操作方法。的操作方法。 一、實驗?zāi)康囊?、實驗?zāi)康膙 高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加熱滅高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加熱滅菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣

2、從排氣閥中驅(qū)盡，然后關(guān)閉待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關(guān)閉排氣閥，繼續(xù)加熱，此時由于蒸氣不能溢出，排氣閥，繼續(xù)加熱，此時由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌而增加了滅菌器內(nèi)的壓力，從而使沸點增高，得到高于器內(nèi)的壓力，從而使沸點增高，得到高于100的溫度，導(dǎo)的溫度，導(dǎo)致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達(dá)到滅菌的目的。v 在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排除是否完全極為重要，因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹除是否完全極為重要，因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹壓，所以，當(dāng)水蒸汽中含有空氣時，在同一壓力下，

3、含空氣壓，所以，當(dāng)水蒸汽中含有空氣時，在同一壓力下，含空氣蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。二、實驗原理二、實驗原理 滅菌鍋內(nèi)留有不同分量空氣時，壓力與溫度的關(guān)系滅菌鍋內(nèi)留有不同分量空氣時，壓力與溫度的關(guān)系壓壓 力力 數(shù)數(shù)全部空全部空氣排出氣排出時的溫時的溫度度 ()2/3空空氣排出氣排出時的溫時的溫度度()l/2空氣空氣排出排出時時的溫度的溫度 ()1/3空空氣排出氣排出時的溫時的溫度度 ()空氣全空氣全不排出不排出時的溫時的溫度度 ()MPakg/cm2 1b/in20.030.070.100.140.170.210.350.701.051.401.752.10

4、51015202530108.8115.6121.3126.2130.0134.610010911512112613094105112118124128901001091151211267290100109115121 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 培養(yǎng)皿、試管、三角瓶、移液管 手提式高壓蒸汽滅菌鍋等三、實驗器材三、實驗器材1. 加水加水：將內(nèi)層鍋取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水使水面與三角擱架相平為宜。 四、實驗方法四、實驗方法2.裝鍋裝鍋：放回內(nèi)層鍋，并裝入待滅菌物品。3. 3. 加蓋加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層鍋的，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層鍋的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相排氣槽內(nèi)。再

5、以兩兩對稱的方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。4.加熱、排氣加熱、排氣 打開放氣閥，同時接通電源，進(jìn)行加熱，待鍋內(nèi)水沸騰并有大量水蒸氣自放氣閥冒出時，維持3-5min以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣完全排盡后，關(guān)上放氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。5.保溫保壓保溫保壓 當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時，控制熱源，維持壓力至所需時間。 6.出鍋出鍋 滅菌所需的時間到后，關(guān)閉電源，讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表降至“0”時，打開放氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。7.保養(yǎng)保養(yǎng) 滅菌完畢取出物品后，將鍋內(nèi)余水倒出，以保持內(nèi)壁及內(nèi)膽干燥，蓋好鍋蓋。8.無菌檢查無菌檢查 將取出的滅菌培養(yǎng)基放入37溫箱培養(yǎng)24h，經(jīng)檢查若無雜菌生長，即可待用。 1切勿忘記加水，同時加水量不可過少，以防滅菌鍋燒干而引起炸裂事故。 2壓力一定要降到“0”時，才能打開排氣閥，開蓋取物。否則就會因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染，甚至灼傷操作者。 注意事項注意事項1高壓蒸汽滅菌開始之前，為什么要將鍋內(nèi)