AML患者化療后通過NGS進行連續(xù)MRD監(jiān)測的臨床意義探索

1、AML患者化療后通過NGS進行連續(xù)MRD監(jiān)測的臨床意義探索急性髓系白血病大部分急性髓系白血?。ˋML）患者可以達到細胞形態(tài)學完全緩解（CR），但是，約有50的患者最終會復發(fā)，這表明存在常規(guī)形態(tài)學檢查無法發(fā)現(xiàn)的微小殘留?。∕RD）。通過多參數流式細胞術（MFC）或定量聚合酶鏈反應（PCR）檢測的MRD水平已被認為是AML患者的獨立預后因素。首次緩解后，MRD持續(xù)維持較高水平或不斷升高，即預示復發(fā)。MRD監(jiān)測可為AML患者提供實時、個性化的生存預測方法。二代測序（NGS）可以同時檢測各種突變，并適用于大部分AML患者，但是將其用于MRD監(jiān)測的臨床意義需要進一步闡明。最近一項研究表明，在誘導化療后，

2、除潛質未定的克隆性造血（CHIP）的常見突變(包括DNMT3A，TET2和ASXL19DTA突變)以外的其他突變體NGSMRD對AML患者復發(fā)率和總生存期（OS）產生了影響，且可預測在異基因造血干細胞移植（HSCT）前或后的預后。歐洲白血病網（ELN）MRD工作組為通過MFC和PCR監(jiān)測不同分子靶標的MRD監(jiān)測推薦了最佳時間點。例如，PML-RARA或RUNX1-RUNX1T1使用實時定量PCR進行MRD監(jiān)測最重要的時間點是鞏固治療結束時，NPM1突變使用實時定量PCR進行MRD監(jiān)測最重要的時間點是在化療2個周期后。治療后NGSMRD檢測的恰當時間點仍需明確。研究者假設在不同時間點檢測NGSM

3、RD可能具有不同的預后影響和臨床意義。因此，研究者探討了在誘導化療后首次達到完全緩解（CR1）和首次鞏固化療后，NGSMRD對患者預后的臨床意義。研究發(fā)現(xiàn)上述時間點的NGSMRD均為AML患者的獨立預后因素。研究方法研究納入了國立臺灣大學醫(yī)學院的335例初診非M3AML的成人患者（這些患者具有足夠的冷凍保存的骨髓標本）。所有患者均達到了2017年ELN推薦定義的形態(tài)學CR，經過標準誘導化療后，接受2-4個療程的緩解后化療（使用大劑量阿糖胞苷聯(lián)合或不聯(lián)合蒽環(huán)類藥物）。該研究不包括CR伴血液學不完全恢復的患者。該隊列的中位隨訪時間為8.8年（范圍：0.3-23.3年）。研究結果DNMT3A、TET

4、2和ASXL1（DTA）突變MRD對預后的影響在335例患者中，有303例（90.4）具有至少1個基因突變。據報道，與CHIP相關的基因突變作為MRD靶標對預后的影響很小。在該研究中，在最初攜帶基因突變的303例患者中，歸因于DTA突變的MRD的VAF值遠高于其他突變。在第一個和第二個時間點歸因于DTA突變的MRD患者與MRD陰性的患者具有相似的CIR和RFS，并且比那些非DTAMRD患者具有更好的結局。但是，僅具有DTAMRD的患者的OS劣于MRD陰性的患者，但與非DTAMRD患者的OS相似。這可能歸因于僅具有DTAMRD的患者與MRD陰性的患者相比年齡更大（中位年齡為47.7歲vs38.0

5、歲，第一個時間點：P=0.001；中位年齡為49.0歲vs38.0歲，第二個時間點P在多變量Cox比例風險回歸分析中，考慮到年齡和其他重要的臨床因素后，分別在第一個和第二個時間點僅發(fā)生DTA突變的患者的CIR、RFS和OS值與MRD陰性的患者相似。因此，在以下有關MRD的臨床意義的分析中，研究者排除了DTA突變。此外，在診斷時僅存在DTA突變的患者被認為對MRD評估沒有意義，因此被排除在外（n=12）。CR1和首次鞏固化療后的MRD水平排除DTA突變后，有135例（46.4）患者在第一時間點通過NGS進行MRD檢測，VAF在0.07-43.57之間，84例（28.9）患者在第二時間點通過NGS

6、進行MRD檢測，VAF在0.09-37.39之間。具有臨床特征的NGSMRD和預后的關系在第一個或第二個時間點可檢出MRD的患者年齡較大，且攜帶RUNX1突變的頻率更高，但出現(xiàn)inv（16）和CEBPA雙重突變的情況較少。在任一時間點均可檢測到MRD的患者具有較高的CIR（P研究者推測在不同時間點檢測NGSMRD可能產生不同的預后價值。為了闡明不同時間點檢測NGSMRD對預后影響，將MRD分為在第一個時間點（MRD1st）和在第二個時間點（MRD2nd）檢測到的MRD?？蓹z測的MRD1st和MRD2nd均與高齡（P均為0.001）和較高的復發(fā)率（P分別為0.003和1st和MRD2nd患者具有

7、更高的CIR（P分別為0.004和在多變量Cox比例風險回歸中，在單因素分析中納入具有預后意義的因素后，MRD1st是CIR（HR：1.739；95CI：1.223-2.473；P=0.002）、RFS（HR：1.656；95CI：1.196-2.294；P=0.002）和OS（HR：1.545；95CI：1.068-2.233；P=0.021）的獨立預后因素。MRD2nd是CIR（HR：2.206；95CI：1.525-3.190；P1st相比，HR更高，P值更低。連續(xù)NGSMRD監(jiān)測對預后的影響研究者評估了在第一時間點和第二時間點的MRD不同狀態(tài)與臨床預后的關系。147例（50.5）患者同

8、時在第一時間點和第二時間點MRD均為陰性；60例（20.6）患者在第一時間點MRD陽性，在第二時間點MRD陰性；9例（3.1）患者在第一時間點MRD陰性，在第二時間點MRD陽性；75例（25.8）患者在第一時間點和第二時間點MRD均為陽性。接受1周期標準鞏固化療后，94.2（147/156）的MRD1st陰性患者仍為MRD2nd陰性，44.4的MRD1st陽性患者為MRD2nd陰性。關于臨床預后，與MRD2nd陽性患者相比，MRD2nd陰性患者（無論MRD1st狀態(tài)陰性或陽性）具有較低的CIR和較長的RFS和OS。就CIR（P=00.119）、RFS（P=0.204）和OS（P=0.808）而言，MRD1st陰性MRD2nd陽性和MRD1st陽性MRD2nd陽性的患者的預后相似且較差。然而，一旦MRD1st陽性患者達到MRD2nd陰性，其預后與MRD1st陰性MRD2nd陰性患者相似且均較好（CIP：P=0.140，RFS：P=0.231，OS：P=0.188），且與MRD1st陽性MRD2nd陽性的患者相比，就CIR（P=0.032）、RFS（P=0.009）和OS（P=0.031）而言，具