第三章藥物雜質(zhì)檢測技術(shù)

1、第三章 藥物雜質(zhì)檢查技術(shù)藥物雜質(zhì)檢查技術(shù)學(xué)習(xí)目標(biāo)1.掌握一般雜質(zhì)的檢查原理、方法及雜質(zhì)限量計(jì)算2.熟悉特殊雜質(zhì)的檢查方法3.了解藥物雜質(zhì)檢查的意義及藥物雜質(zhì)的來源及分類4.學(xué)會(huì)藥物中常見一般雜質(zhì)檢查和特殊雜質(zhì)檢查的操作導(dǎo)學(xué)情景導(dǎo)學(xué)情景 情景描述： 一天，小娟發(fā)現(xiàn)阿司匹林長毛了，小娟輕輕一抹，毛沒了，正打算把脫了小毛的藥片放入瓶里，恰好她表姐進(jìn)來了，看到此情景制止了小娟的行為，把長毛的藥片裝好，準(zhǔn)備交到藥店的過期或變質(zhì)藥品回收處。學(xué)前導(dǎo)語： 藥品在生產(chǎn)、貯存過程中由于各種因素影響，會(huì)發(fā)生變質(zhì)反應(yīng)，產(chǎn)生多種雜質(zhì)，這些雜質(zhì)不僅沒有治療作用，往往還對(duì)人體有害。第一節(jié) 雜質(zhì)的來源與雜質(zhì)檢查方法一、雜質(zhì)的

2、來源及分類雜質(zhì)（impurities）是指： 1. 有毒副作用的物質(zhì) 2. 本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì) 3. 本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)藥物的純度和化學(xué)試劑的純度的區(qū)別 前者主要從雜質(zhì)對(duì)用藥安全、有效性及藥物的穩(wěn)定性的影響方面考慮，后者是從雜質(zhì)可能引起的化學(xué)變化對(duì)試劑的使用范圍和使用目的的影響來考慮。藥品只有兩個(gè)等級(jí)：合格或不合格?；瘜W(xué)試劑有很多等級(jí)，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級(jí)純（GR）、分析純（AR）、化學(xué)純（CP）、色譜純、光譜純。1. 不能用化學(xué)試劑的規(guī)格代替藥品標(biāo)準(zhǔn)，不能將化學(xué)試劑當(dāng)做藥品直接用于臨床治療。（1）原料、反應(yīng)中間體及副

3、產(chǎn)物 （2）試劑、溶劑、催化劑類 （3）生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)2. 貯藏過程中產(chǎn)生 水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、聚合、潮解和發(fā)霉等 （二）藥物中雜質(zhì)的分類1.按雜質(zhì)的產(chǎn)生和分布特點(diǎn)分類（1）一般雜質(zhì) 自然界中分布廣泛容易引入的雜質(zhì) 氯化物 硫酸鹽 水分 重金屬等（2）特殊雜質(zhì) 特定藥物中產(chǎn)生，如阿司匹林中水楊酸 硫酸阿托品中莨菪堿。2.按雜質(zhì)作用特點(diǎn)分類（1） 信號(hào)雜質(zhì) （2） 有害雜質(zhì)3.按雜質(zhì)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)分類 分為無機(jī)雜質(zhì)和有機(jī)雜質(zhì)二、藥物雜質(zhì)限量與雜質(zhì)檢查方法（一）雜質(zhì)限量指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾（ppm）來表

4、示。限量檢查定義：不測定雜質(zhì)的含量，只檢查雜質(zhì)是否超過限量的方法。（二）藥物雜質(zhì)檢查方法（二）藥物雜質(zhì)檢查方法 對(duì)照法對(duì)照法 靈敏度法靈敏度法1.1. 比較法比較法1.對(duì)照法限量檢查法 （Limit Test）方法：取一定量待檢查雜質(zhì)的對(duì)照液與一定量供試品液在相同條件處理后，比較反應(yīng)結(jié)果，從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否超限。要求：遵循平行操作原則特點(diǎn)：不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量雜質(zhì)限量計(jì)算雜質(zhì)限量=雜質(zhì)的最大允許量/供試品量雜質(zhì)限量=標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度X標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積/供試品量L= CV/S 100%例1 對(duì)乙酰氨基酚中硫酸鹽的檢查：取本品2.0g，加水100ml，加熱溶解后，冷卻、過濾、取濾液25ml

5、，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液1.0ml（1ml相當(dāng)于100g的硫酸根）制成的對(duì)照液比較、濁度不得更大。求硫酸鹽的限量為多少？例2 丙磺舒中檢查重金屬：取丙磺舒1.0g，依法檢查，重金屬不得超過百萬分之十，應(yīng)取標(biāo)準(zhǔn)鉛液多少ml？（每ml相當(dāng)于10g的pb） 例3 檢查氯化鈉中砷鹽，規(guī)定取標(biāo)準(zhǔn)砷液2.0ml（1ml相當(dāng)于1ug的As）制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑，要求砷含量不得超過0.00004%。問應(yīng)取供試品多少克。例4 磷酸可待因中嗎啡檢查：取本品0.1g，加鹽酸溶液使溶解成5ml，加亞硝酸鈉試液2ml，放置15分鐘，加氨試液3ml，所顯顏色與嗎啡溶液【取無水嗎啡2.0ml，加鹽酸使溶解成100ml】5.0m

6、l，用同一方法制成的對(duì)照液比較，不得變深，問限量為多少？靈敏度法是以反應(yīng)的靈敏度來控制雜質(zhì)的限量。系指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)。特點(diǎn)：不需對(duì)照品。例：純化水中氯化物檢查，在50ml中純化水中加入硝酸5滴，及硝酸銀試液1ml，要求不得發(fā)生渾濁。氯化物的限量就是測定條件下不產(chǎn)生氯化銀的渾濁為限。比較法方法：取供試品一定量依法檢查，測定待檢雜質(zhì)的吸收度或旋光度等與規(guī)定的限量比較，不得更大。特點(diǎn)：準(zhǔn)確測定雜質(zhì)的吸收度或旋光度并與規(guī)定限量比較，不需要對(duì)照物。第二節(jié) 一般雜質(zhì)檢查 藥物中雜質(zhì)的檢查是利用藥物與雜質(zhì)之間性質(zhì)（包括物理、化學(xué)性質(zhì)）的不同，選擇適當(dāng)有效的方法進(jìn)行

7、檢查測定。藥典2015年版將一般雜質(zhì)的檢查方法收載于四部通則中，藥典正文中各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不再重復(fù)記敘這些方法，而是直接引用。一般雜質(zhì)檢查要求：1. 遵循平行操作原則（1）儀器的配對(duì)性 如納氏比色管應(yīng)配對(duì)，刻度線高低相差不超過2mm，砷鹽檢查時(shí)導(dǎo)氣管長度及孔的大小要一致。（2）對(duì)照品與供試品的同步操作2. 正確的取樣及供試品的稱量范圍 （1g不超過2%，1g不超過1% ）3. 正確的比色、比濁方法及檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時(shí)應(yīng)對(duì)供試管和對(duì)照管各復(fù)查二份 一、氯化物檢查法一）檢查原理（對(duì)照法） 利用氯化物在硝酸酸性條件下與硝酸銀試液作用，生產(chǎn)氯化銀白色渾濁，與一定量標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液在相同條件

8、下生成氯化銀渾濁比較，以判斷供試品中氯化物是否超過限量。二）操作方法（藥典附錄）1.供試液：除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml（溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50ml納氏比色管中，加水使成約40m1，搖勻，即得供試溶液。2.對(duì)照溶液：另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，搖勻，即得對(duì)照溶液。3.比濁：于供試溶液與對(duì)照溶液中，分別加入硝酸銀試液1.0m1，用水稀釋使成50m1，搖勻，在暗處放置5分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比濁。（三）注意事項(xiàng)標(biāo)

9、準(zhǔn)NaCl溶液 10ugCl/ml，50ml溶液中含5080ug的Cl所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液58ml。2. 反應(yīng)需在硝酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。 （1）加速AgCl渾濁的形成； （2）產(chǎn)生較好的乳濁； （3）避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。 3. 試劑：硝酸銀 4. 供試液和對(duì)照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀 5. 避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見光易分解。 6. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。 7.若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。 （1）內(nèi)消色法：分為兩等分量，一份加硝酸銀，出

10、現(xiàn)沉淀，過濾。再加標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉和水，作為對(duì)照溶液。 （2）外消色法：如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。 二、硫酸鹽檢查法檢查原理(對(duì)照法) 利用硫酸鹽在鹽酸酸性溶液中與氯化鋇生成白色渾濁，與一定量標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液在相同條件下與氯化鋇生成的渾濁比較，以判斷藥物中硫酸鹽是否超過限量。二）操作方法 取規(guī)定量的供試品，加水溶解使成約40ml（如溶液顯堿性，可滴加鹽酸使成中性）；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸2ml，搖勻，即得供試液。 另取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液，按同樣方法制成對(duì)照液 于供試液與對(duì)照液中，分別加入25%氯化鋇溶液5ml，用水

11、稀釋至50ml，搖勻，放置10min，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察、比較。三）注意事項(xiàng) 標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液:每1ml 相當(dāng)于0.1mg的SO42，50ml溶液中含0.10.5mg的SO42所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液1.05.0ml。 2. 反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜。3. 試劑：氯化鋇4. 供試液和對(duì)照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀 5. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。 四）干擾及排除加入鹽酸，排除碳酸離子等干擾。溫度太低，水浴加熱，加快渾濁產(chǎn)生。若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。供試

12、液不澄明，用成酸性的水洗過的濾紙過濾。 三、鐵鹽檢查法1. 原理 對(duì)照法 在鹽酸酸性溶液中，鐵鹽與硫氰酸銨生成紅色可溶解硫氰酸鐵配位離子，與標(biāo)準(zhǔn)液用同法處理，進(jìn)行比較，觀察顏色。2. 檢查方法 （藥典附錄） 除另有規(guī)定外，取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻（供試液及處理）；如顯色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對(duì)照溶液比較，即得。對(duì)照液：取各藥品項(xiàng)下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成25ml，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50m

13、g，用水稀釋使成35m1后，加30%硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成50ml，搖勻3. 測定條件 （1）標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液及對(duì)照液 用FeNH4(SO4)212H2O（硫酸鐵銨）配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液（加入硫酸防止Fe3+的水解），標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液10g Fe3+/ml，50ml溶液中含1050g的Fe3+顯色梯度明顯，一般取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.05.0ml （2）反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜。 （3）試劑：硫氰酸銨。加過量硫氰酸銨，使反應(yīng)向正反應(yīng)方向進(jìn)行 （4）檢查Fe2+和Fe3+ （5）鐵鹽檢查時(shí)，加氧化劑氧化Fe2+為Fe3+。加過硫酸銨可氧

14、化Fe2+為Fe3+，同時(shí)可防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。 加硝酸后加熱也可氧化Fe2+為Fe3+ （6）比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。 4. 干擾及排除 （1）為了提高靈敏度或供試管與對(duì)照管色調(diào)不一致時(shí)，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。 （2）干擾離子的影響（增加酸度，增加硫氰酸銨等 （3）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，需經(jīng)700800熾灼破壞處理后再依法檢查。四、重金屬（鉛）檢查法 重金屬主要指銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、銻、錫、鎳等，通常在實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉試液作用而顯色的金屬雜質(zhì)。重金屬可以影響藥物的穩(wěn)定性及安全性。重金屬的檢查以鉛的檢查最為代表。重金屬檢查藥典2

15、000收載了四種方法第一法：該法也稱硫代乙酰胺法第二法：熾灼殘?jiān)ǖ谌?硫化鈉法第四法 微孔濾膜法 第一法（也稱硫代乙酰胺法）1. 原理 對(duì)照法 適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。 CH3CSNH2 + H2O CH3CONH2+H2SPb2+ +H2S PbS +2H+ （PH3.5）2.操作方法 取25ml納氏比色管兩只，甲管中加入標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖溶液（pH3.5）2ml后，加水或規(guī)定的溶劑稀釋成25ml， 乙管中加入按各藥品項(xiàng)規(guī)定下的方法制成的供試液25ml； 再分別于甲、乙兩管中加入硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，比色。 3. 測定條件 （1 1）用）用硝酸鉛硝酸

16、鉛配制配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液（加硝酸防止加硝酸防止PbPb2+2+水解水解），），標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液1010 g Pbg Pb2+2+/ml/ml，適宜比色范圍為適宜比色范圍為27ml27ml溶液中含溶液中含10102020 g g的的PbPb2+2+，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液12ml12ml。 （2）本法用2ml pH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為33.5，此時(shí)硫化鉛沉淀較完全。 （酸度大，顏色淺甚至不顯色） （3）顯色劑：從ChP（1990）開始改用硫代乙酰胺做顯色劑 3. 干擾及排除干擾及排除 （1）供試

17、品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。 A. 外消色法：在對(duì)照管中加稀焦糖溶液或其他無干擾的有色溶液。 B. 內(nèi)消色法 C. 改用第四法，微孔濾膜過濾法 （2）若供試品中有）若供試品中有微量微量Fe3+存在，會(huì)氧化硫化氫生成存在，會(huì)氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸加入抗壞血酸Vc或鹽酸羥胺或鹽酸羥胺（0.51.0g）還原）還原Fe3+為為Fe2+，可消除干擾可消除干擾（3）若藥物本身能生成不溶性硫化物時(shí)，可加入掩蔽）若藥物本身能生成不溶性硫化物時(shí)，可加入掩蔽劑消除干擾。劑消除干擾。如如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽掩蔽Zn2+

18、后（后（生成生成穩(wěn)定配合物穩(wěn)定配合物），依第三法檢查（加入），依第三法檢查（加入硫化鈉硫化鈉）。）。第二法 熾灼殘?jiān)?適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機(jī)藥物。 1. 原理原理 對(duì)照法對(duì)照法 500600熾灼后的殘?jiān)?，?jīng)處理后，依一法檢查。 2. 操作方法 取熾灼殘?jiān)酉跛?，放冷，加鹽酸，加水，加氨水對(duì)酚酞顯示中性，再加醋酸鹽緩沖液，加水稀釋作為供試液。另根據(jù)規(guī)定配置標(biāo)準(zhǔn)液，用第一法檢查，可得。含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、含鈉及氟的有機(jī)藥物應(yīng)用鉑坩堝、石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶石英坩堝或硬質(zhì)玻璃蒸發(fā)皿（因可腐蝕瓷坩堝，帶入大量重金屬）。入大量重金屬）。第

19、三法 硫化鈉法 適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。 1. 原理 對(duì)照法 在氫氧化鈉堿性條件下，重金屬雜質(zhì)與硫化鈉生成有色硫化物，再與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液同法處理的顏色進(jìn)行比較，來判斷重金屬的含量。2. 測定條件 （1）NaOH堿性條件下堿性條件下（2）顯色劑：硫化鈉）顯色劑：硫化鈉 用于難溶于稀酸能溶于堿水的藥物。如巴比妥類。第四法 微孔濾膜法 適用于含25g重金屬雜質(zhì)及有色供試液的檢查。依一法檢查，微孔濾膜過濾后比較色斑。 （含量低，難以比色）五、砷鹽檢查法（一）古蔡法 1. 原理 對(duì)照法 鋅與酸生成新生態(tài)的氫，砷化氫遇HgBr2試紙生成黃色棕色的砷斑，與標(biāo)準(zhǔn)砷溶液

20、在相同條件下生成的砷斑比較2. 操作方法（1）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備 （2）標(biāo)準(zhǔn)砷斑制備（3）供試品砷斑制備（4）比色（5）結(jié)果判斷3. 注意事項(xiàng)（1）標(biāo)準(zhǔn)砷溶液（三氧化二砷）臨用新配（2）酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸5ml。 B. 碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，I-與反應(yīng)中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行； C. 氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生； D. 可抑制微量銻化氫的干擾，在實(shí)驗(yàn)條件下，100 gSb存在也不干擾測定。 （3）酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是：A. 還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度； （4）

21、醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花60mg裝管高度6080mm。 （5）鋅粒應(yīng)無砷）鋅粒應(yīng)無砷（6）砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)）砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察立即觀察4. 干擾及排除（1）供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時(shí)，加HNO3，使氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。 （2）供試品若為鐵鹽供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將，需先加酸性氯化亞錫試液，將Fe3+還原為還原為Fe2+。如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。（3）具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機(jī)藥物，要先行有機(jī)破壞后再進(jìn)行檢查。，要先行有機(jī)破壞后再進(jìn)行檢查。 常用的有機(jī)破

22、壞方法：常用的有機(jī)破壞方法： 堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法 酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作供試品需經(jīng)有機(jī)破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作（4）本法適用于不含Sb（銻）或含Sb量小于100g的供試品。 七、干燥失重測定法一）常壓干燥法 適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。操作：將供試品置相同條件已干燥至恒重的扁形稱量瓶中，精密稱定，于烘箱內(nèi)在規(guī)定溫度下干燥至恒重（連續(xù)兩次干燥后重量差在0.3mg以下），根據(jù)減失的量和取樣量計(jì)算供試品的干燥失重。注意事項(xiàng)：1.干燥溫度一般為105，干燥時(shí)間24小時(shí)，取出

23、于干燥器中冷卻至室溫稱重。2.第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。3.供試品平鋪于稱量瓶中，厚度不超過5mm，疏松物質(zhì)不超過10mm，顆粒大的需研細(xì)4.含結(jié)晶水的可提高干燥溫度。5.供試品易熔化的，可先在低溫下干燥，然后在規(guī)定溫度下干燥6.受熱易分解而達(dá)不到恒重的，采用一定溫度干燥一定時(shí)間減失的重量代表干燥失重。二）干燥劑干燥法適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品。將供試品置于干燥器內(nèi)，利用干燥器內(nèi)的干燥劑吸收供試品中的水分，干燥至恒重。干燥劑：硅膠、濃硫酸、P2O5 。三）減壓干燥法 適用于熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。 除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.

24、67kPa（20mmHg）以下。減壓干）以下。減壓干燥器或恒溫減壓干燥器燥器或恒溫減壓干燥器六、酸堿度檢查法溶劑：新沸冷水為溶劑，不溶于水的藥物可以用中性乙醇等有機(jī)溶劑溶解，或?qū)⑺幬锱c水混搖，使所含酸堿性雜質(zhì)溶解，濾過，取濾液檢查。一）酸堿滴定法原理： 在規(guī)定的指示液條件下，用規(guī)定濃度的酸或堿滴定液滴定供試品溶液中堿性或酸性雜質(zhì)，以消耗酸或堿滴定液的毫升數(shù)作為限度指標(biāo)。例：檢查氯化鈉的酸堿度 取本品5.0g，加水50ml溶解后，加溴麝香草酚藍(lán)指示液2滴，如顯黃色（示為酸性），加氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）0.10ml，應(yīng)變?yōu)樗{(lán)色；如顯藍(lán)色或綠色（示為堿性），加鹽酸滴定液（0.02mol

25、/L）0.20ml，應(yīng)變?yōu)辄S色。二）指示劑法原理：利用規(guī)定指示劑的變色pH范圍控制供試液中酸堿雜質(zhì)限量。例：純化水的酸堿度檢查取本品10ml，加甲基紅指示液2滴，不得顯色（控制酸度）；另取10ml，加溴麝香草酚藍(lán)指示液5滴，不得顯藍(lán)色（控制堿度），即純化水酸堿度控制在pH4.2-7.6.三）pH測定法采用電位法直接測定溶液的pH.,準(zhǔn)確度高，用于注射液等的檢查。第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查特殊雜質(zhì)是指該藥物的生產(chǎn)和貯存過程中，根據(jù)藥物的性質(zhì)、生產(chǎn)方法和工藝條件，有可能引入的雜質(zhì)。例：阿司匹林中游離的水楊酸；腎上腺素中的酮體；硫酸阿托品中的莨菪堿等。 藥物中特殊雜質(zhì)的檢查，主要是根據(jù)藥物和雜質(zhì)在物理和化

26、學(xué)性質(zhì)上的差異來進(jìn)行的，方法的專屬性十分關(guān)鍵：物理法：嗅味、顏色、溶解行為化學(xué)法：酸堿差異、氧化還原、雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生沉淀（顏色、氣體）等旋光法：比旋度、旋光度分光光度法：紫外、比色原子吸收、紅外等 色譜法：紙色譜、薄層色譜、高效液相色譜、氣相色譜物理法1.嗅味及揮發(fā)性差異（雜質(zhì)有特殊嗅味）例：乙醇中檢查雜醇油，將乙醇滴在無嗅清潔的濾紙上，待乙醇自然揮發(fā)后，不應(yīng)留有雜油醇異嗅；麻醉乙醚中檢查異嗅：取本品10ml，置瓷蒸發(fā)器中，使自然揮發(fā)，揮散完畢，不得有異味 例如：黃凡士林中異性有機(jī)物檢查：本品例如：黃凡士林中異性有機(jī)物檢查：本品2.0g,2.0g,直直火加熱無火加熱無 辛味。濃過氧化氫中不

27、揮發(fā)性雜質(zhì)檢查：辛味。濃過氧化氫中不揮發(fā)性雜質(zhì)檢查：10ml10ml水浴蒸水浴蒸 干殘?jiān)蓺堅(jiān)?5mg15mg2.2.顏色的差異（控制有色雜質(zhì)）顏色的差異（控制有色雜質(zhì)）參照溶液顏色檢查法。參照溶液顏色檢查法。例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的檢查：取本品例如：磺胺嘧啶中有色偶氮苯化合物的檢查：取本品2.0g2.0g，加，加NaOHNaOH試液試液10ml10ml，加水，加水25ml25ml，與黃色，與黃色3 3號(hào)比色液比號(hào)比色液比，不得更深不得更深。3.溶解行為差異（雜質(zhì)和藥物的可溶性不同）例，檢查硫酸鋇中的酸中溶解物：將供試品加稀鹽酸與純化水煮沸，濾除硫酸鋇后，濾液蒸干，遺留殘?jiān)坏贸^規(guī)

28、定限量。例，磺胺嘧啶中原料2-氨基嘧啶等堿性雜質(zhì)檢查：利用磺胺嘧啶溶于堿，雜質(zhì)不溶液堿，供試品加氫氧化鈉后澄清為合格?；瘜W(xué)法1.酸堿性差異例：苯巴比妥中檢查巴比妥酸：供試品加水煮沸，濾液加甲基橙指示液，不得顯紅色為合格。2.氧化還原性差異例：氯化鈉中碘化物的檢查：供試品中加淀粉混合液（硫酸、亞硝酸、淀粉）濕潤，日光下觀察，5分鐘內(nèi)不得顯藍(lán)色痕跡。酸堿性的差異酸堿性的差異 1.1.規(guī)定消耗滴定液體積規(guī)定消耗滴定液體積 例如己酸羥孕酮中正己酐、對(duì)甲苯磺酸檢查：例如己酸羥孕酮中正己酐、對(duì)甲苯磺酸檢查：(NaOH 0.02mol/L)(NaOH 0.02mol/L) 取本品取本品0.20g + 0.2

29、0g + 中性乙醇中性乙醇 + + 溴麝香草酚藍(lán)溴麝香草酚藍(lán) 微藍(lán)色微藍(lán)色0.50ml0.50ml 2. 2.pHpH法法 例如乙琥胺中例如乙琥胺中2-2-甲基甲基-2-2-乙基丁二酸檢查：乙基丁二酸檢查：0.01g/ml pH3.00.01g/ml pH3.04.5.4.5. 3. 3.指示劑法指示劑法 例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲檢查：其水溶液不得使甲基橙顯紅例如苯巴比妥中苯基丙二酰脲檢查：其水溶液不得使甲基橙顯紅 色。色。氧化還原性的差異氧化還原性的差異 例如：例如：NaCl中中I-和和Br-檢查檢查EOCl/2Cl- =+1.3595V EOBr/2Br- =+1.065V EOI/2I

30、- =+0.5345V ,因此因此+NaNO2+H2SO4+淀粉顯藍(lán)色淀粉顯藍(lán)色 再例如：鹽酸嗎啡中阿樸嗎啡的檢查：后者可被碘氧化生成水溶性再例如：鹽酸嗎啡中阿樸嗎啡的檢查：后者可被碘氧化生成水溶性 綠色化綠色化 合物。因此合物。因此ChP規(guī)定：本品規(guī)定：本品50mg +4mlH2O+1dI2 + 5ml乙醚乙醚 乙醚層不得顯紅色；水層不得顯綠色。乙醚層不得顯紅色；水層不得顯綠色。3. 3.雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生沉淀雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生沉淀氯化鈉中檢查鋇鹽氯化鈉中檢查鋇鹽藥物中草酸鹽的檢查藥物中草酸鹽的檢查4. 4.雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生顏色雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生顏色5. 5.雜質(zhì)與一定試劑產(chǎn)生氣體雜質(zhì)與一

31、定試劑產(chǎn)生氣體藥物中微量藥物中微量硫化物硫化物：酸性條件下放出：酸性條件下放出H H2 2S S氣體，與醋酸鉛氣體，與醋酸鉛試紙形成棕色硫斑，與標(biāo)準(zhǔn)硫斑比較。試紙形成棕色硫斑，與標(biāo)準(zhǔn)硫斑比較。氰化物檢查氰化物檢查（改進(jìn)普魯士藍(lán)法，氣體擴(kuò)散三硝基苯酚鋰法（改進(jìn)普魯士藍(lán)法，氣體擴(kuò)散三硝基苯酚鋰法）雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生沉淀 例一、間苯二酚中鄰苯二酚檢查：后者例一、間苯二酚中鄰苯二酚檢查：后者+Pb(Ac)2 白色白色 ChP規(guī)定：本品規(guī)定：本品0.5g+10mlH2O+2d稀醋酸稀醋酸+0.5ml Pb(Ac)2 不得發(fā)生混濁，即為合格。不得發(fā)生混濁，即為合格。 例二、硝

32、酸毛果蕓香堿中其他生物的檢查：后者例二、硝酸毛果蕓香堿中其他生物的檢查：后者+氨水氨水+K2Cr2O7 ChP規(guī)定：本品規(guī)定：本品0.2g+20mlH2O兩份；兩份；I份份+數(shù)滴氨試液；另數(shù)滴氨試液；另 1份份+數(shù)滴數(shù)滴K2Cr2O7試液試液 ，均不得發(fā)生混濁。，均不得發(fā)生混濁。雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生顏色 例一、鹽酸普萘洛爾中游離例一、鹽酸普萘洛爾中游離-萘酚檢查：利用后者可與重氮鹽萘酚檢查：利用后者可與重氮鹽 發(fā)生重氮化發(fā)生重氮化- -偶合反應(yīng)，生成偶氮染料。偶合反應(yīng)，生成偶氮染料。 ChP規(guī)定：供試品規(guī)定：供試品20mg+乙醇與乙醇與10%NaOH液各液各2ml+

33、重氮苯重氮苯 磺酸磺酸試液試液1ml,1ml,放置放置3min3min；如顯色，與；如顯色，與0.3ml -0.3ml -萘萘 酚對(duì)照液（酚對(duì)照液（20g/ml)20g/ml)比較不得更深。比較不得更深。 例二、碘他拉酸中氨基化合物的檢查：利用重氮化例二、碘他拉酸中氨基化合物的檢查：利用重氮化- -偶合反應(yīng)偶合反應(yīng) ChP規(guī)定：供試品規(guī)定：供試品2.5mg/ml經(jīng)經(jīng)重氮化重氮化- -偶合反應(yīng)后，在波長偶合反應(yīng)后，在波長 485nm485nm測得測得A A 0.250.25雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體雜質(zhì)與一定試劑反應(yīng)產(chǎn)生氣體 ChP附錄中收載氰化物的兩種檢查方法：附錄中收載氰化物的兩種檢查方法：

34、第一法第一法：改進(jìn)普魯士藍(lán)法：改進(jìn)普魯士藍(lán)法 原理：原理：CN- + 酒石酸酒石酸 HCN Fe(CN)64- Fe4Fe(CN)6第二法第二法：氣體擴(kuò)散：氣體擴(kuò)散-三硝基苯酚鋰法三硝基苯酚鋰法 原理：原理：HCN擴(kuò)散進(jìn)入三硝基苯酚鋰試液，生成異紅紫酸鹽，在擴(kuò)散進(jìn)入三硝基苯酚鋰試液，生成異紅紫酸鹽，在 500nm波長處測定吸收度。波長處測定吸收度。Fe2+Fe3+藥物經(jīng)有機(jī)破壞后檢查雜質(zhì)藥物經(jīng)有機(jī)破壞后檢查雜質(zhì) 某些環(huán)狀有機(jī)藥物在生產(chǎn)中可能引入磷、硫、鹵素及硒等雜某些環(huán)狀有機(jī)藥物在生產(chǎn)中可能引入磷、硫、鹵素及硒等雜 質(zhì)，質(zhì)， 這些雜質(zhì)與有機(jī)分子中的碳原子以共價(jià)鍵結(jié)合，需進(jìn)行有機(jī)這些雜質(zhì)與有機(jī)分

35、子中的碳原子以共價(jià)鍵結(jié)合，需進(jìn)行有機(jī)破壞后檢查，各國藥典所采用的方法為破壞后檢查，各國藥典所采用的方法為氧瓶燃燒法氧瓶燃燒法。 旋光法具有旋光活性的藥物，測定旋光度或比旋度來控制具有旋光活性的藥物，測定旋光度或比旋度來控制雜質(zhì)限量。雜質(zhì)限量。 例如：硫酸阿托品中莨菪堿的檢查：本品溶液例如：硫酸阿托品中莨菪堿的檢查：本品溶液(50mg/ml)(50mg/ml)- 0.4- 0.4分光光度法由于藥物和雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不同，對(duì)光吸收的性質(zhì)就有差異，由于藥物和雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不同，對(duì)光吸收的性質(zhì)就有差異，因此，利用雜質(zhì)與藥物對(duì)光選擇性吸收的差異，檢查因此，利用雜質(zhì)與藥物對(duì)光選擇性吸收的差異，檢查藥物所含雜質(zhì)。藥物

36、所含雜質(zhì)。一）紫外分光光度法一）紫外分光光度法二）比色法二）比色法三）原子吸收分光光度法三）原子吸收分光光度法四）紅外分光光度法四）紅外分光光度法一）紫外分光光度法原理：原理：利用紫外分光光度法檢查雜質(zhì)限量，通常是利用紫外分光光度法檢查雜質(zhì)限量，通常是采用采用檢查雜質(zhì)吸收度檢查雜質(zhì)吸收度的方法。的方法。配制一定濃度的供試品溶液，選擇在配制一定濃度的供試品溶液，選擇在藥品無吸收而藥品無吸收而雜質(zhì)有吸收的波長處雜質(zhì)有吸收的波長處測定吸收度，規(guī)定測得得測定吸收度，規(guī)定測得得吸吸收度不得超過某一限制收度不得超過某一限制。地蒽酚地蒽酚（二羥基蒽醌）（二羥基蒽醌）432n432nm m地蒽酚基本無吸收地蒽

37、酚基本無吸收二羥基蒽醌最大吸收二羥基蒽醌最大吸收規(guī)定：規(guī)定：0.01%0.01%的供試溶液在的供試溶液在432nm432nm處的處的A 0.12A 0.12 再如：苯丙醇中苯丙酮的檢查：再如：苯丙醇中苯丙酮的檢查：可利用供試液可利用供試液的吸收度比來控制雜質(zhì)的吸收度比來控制雜質(zhì); ;純品苯丙醇純品苯丙醇A A247nm247nm/A/A258nm258nm= 0.59; = 0.59; 99.5% 99.5% 時(shí)時(shí)A A247nm247nm/A/A258nm258nm= 0.79;= 0.79; 因此規(guī)定供試品因此規(guī)定供試品A A247nm247nm/A/A258nm258nm 0.79; 0

38、.79; 即所含即所含苯丙酮苯丙酮0.5%.0.5%.二）比色法原理：原理：對(duì)照法對(duì)照法目視比色目視比色分光光度計(jì)分光光度計(jì)測定吸收度測定吸收度后進(jìn)行比較后進(jìn)行比較三）原子吸收分光光度法原理：原理：是利用待測元素?zé)舭l(fā)出的特征譜線通過供試是利用待測元素?zé)舭l(fā)出的特征譜線通過供試品蒸汽時(shí)，被蒸汽中待測元素的基態(tài)原子所吸收品蒸汽時(shí)，被蒸汽中待測元素的基態(tài)原子所吸收，通過測定輻射光強(qiáng)度減弱的程度通過測定輻射光強(qiáng)度減弱的程度可求出供試品可求出供試品中待測元素的含量。通常借中待測元素的含量。通常借比較標(biāo)準(zhǔn)品和供試品比較標(biāo)準(zhǔn)品和供試品的吸收度的吸收度，求得樣品中待測元素的含量。，求得樣品中待測元素的含量。儀器

39、儀器原子吸收分光光度計(jì)。原子吸收分光光度計(jì)。光源：待測元素作為陰極的空心陰極燈光源：待測元素作為陰極的空心陰極燈原子化器：霧化器和燃燒燈構(gòu)成，作用是產(chǎn)生原子原子化器：霧化器和燃燒燈構(gòu)成，作用是產(chǎn)生原子蒸汽蒸汽單色器：單色器：檢測器：檢測器：特點(diǎn)：特點(diǎn)：靈敏度高，專屬性強(qiáng)，主要用于金屬元素的測定。靈敏度高，專屬性強(qiáng)，主要用于金屬元素的測定。方法：方法：取供試品按規(guī)定配制成取供試品按規(guī)定配制成供試液供試液B B；另取等量供試品；另取等量供試品，加入限量的待測元素溶液，制備成對(duì)照液加入限量的待測元素溶液，制備成對(duì)照液A A。先將。先將A A液噴入火焰，調(diào)節(jié)儀器使具有合適讀數(shù)液噴入火焰，調(diào)節(jié)儀器使具有

40、合適讀數(shù)a a；在相同條件；在相同條件下，噴入供試液下，噴入供試液B B，記錄讀數(shù)，記錄讀數(shù)b b。b b相當(dāng)于供試品溶液中相當(dāng)于供試品溶液中待測元素的含量，待測元素的含量，a-ba-b相對(duì)于對(duì)照溶液中加按限量加入相對(duì)于對(duì)照溶液中加按限量加入的待測元素的量的待測元素的量。當(dāng)當(dāng)b(a-b)b b （a-ba-b）時(shí)，表示供試品中所含時(shí)，表示供試品中所含雜質(zhì)元素超過限量，為不合格。雜質(zhì)元素超過限量，為不合格。限量檢查時(shí)：對(duì)照品液限量檢查時(shí)：對(duì)照品液 = = 供試品供試品 + + 限量限量- - a a 供試品液供試品液 = -= - b b 符合規(guī)定符合規(guī)定時(shí)時(shí) b b (a-b); b (a-b

41、); b (a-b)(a-b)不合格不合格。例：例：肝素鈉中檢查鉀鹽：肝素鈉中檢查鉀鹽：取本品取本品0.10g0.10g，置，置100ml100ml量瓶中，加水溶解并稀釋置刻度，搖勻，即為量瓶中，加水溶解并稀釋置刻度，搖勻，即為供供試品溶液試品溶液B B；另取標(biāo)準(zhǔn)氯化鉀溶液另取標(biāo)準(zhǔn)氯化鉀溶液5ml5ml，置，置50ml50ml量瓶中，加量瓶中，加B B溶液稀釋至刻度線，搖溶液稀釋至刻度線，搖勻，作為勻，作為對(duì)照液對(duì)照液A A。在在766.5nm766.5nm波長處測定波長處測定a a和和b b，如果，如果b(a-b)b(a-b)則肝素鈉中鉀鹽含量合格。則肝素鈉中鉀鹽含量合格。原子吸收原子吸收

42、766.5nm測定測定ba則應(yīng)則應(yīng)b a- b四）紅外分光光度法原理：原理：某些多晶型藥物由于某些多晶型藥物由于晶型不同晶型不同，某，某些化學(xué)鍵的鍵長、鍵角發(fā)生不同程度的些化學(xué)鍵的鍵長、鍵角發(fā)生不同程度的變化，可導(dǎo)致變化，可導(dǎo)致紅外吸收光譜中某些特征紅外吸收光譜中某些特征帶頻率，峰形和強(qiáng)度出現(xiàn)顯著差異帶頻率，峰形和強(qiáng)度出現(xiàn)顯著差異。特點(diǎn)：特點(diǎn)：主要用于藥物中無效或低效主要用于藥物中無效或低效晶型檢查晶型檢查。例：例：無味氯霉素混懸劑中無味氯霉素混懸劑中A A晶型的檢查、甲苯咪唑晶型的檢查、甲苯咪唑中中A A晶型檢查晶型檢查 A A 晶型晶型 C C 晶型晶型 在在640cm640cm-1 -1

43、 有強(qiáng)吸收有強(qiáng)吸收 吸收很弱吸收很弱 在在662cm662cm-1 -1 吸收很弱吸收很弱 有強(qiáng)吸收有強(qiáng)吸收 662cm662cm-1-1 640cm 640cm-1 -1 662cm662cm-1-1 640cm 640cm-1 -1 對(duì)照品對(duì)照品+10%A+10%A晶型晶型 D D2 2 D D1 1 供試品供試品 D D2 2 D D1 1 10%10% R = D R = D1 1/D/D2 2 R = DR = D1 1/D/D2 2甲苯咪唑中A晶型檢查色譜法色譜法可以色譜法可以利用藥物與雜質(zhì)的吸附或分配利用藥物與雜質(zhì)的吸附或分配性質(zhì)的差異，將它們分離、檢測性質(zhì)的差異，將它們分離、檢

44、測，因而，因而廣泛應(yīng)用于藥物的雜質(zhì)檢查中。廣泛應(yīng)用于藥物的雜質(zhì)檢查中。色譜法檢查特殊雜質(zhì)的方法有：色譜法檢查特殊雜質(zhì)的方法有：紙色譜法、薄層色譜法，高效液相色譜法，氣相色譜法紙色譜法、薄層色譜法，高效液相色譜法，氣相色譜法。 一）紙色譜法（紙層析法，一）紙色譜法（紙層析法，PC)PC) 常用于常用于極性大極性大的藥物的分離、分析，如地高辛中的的藥物的分離、分析，如地高辛中的有關(guān)雜質(zhì)的檢查。有關(guān)雜質(zhì)的檢查。方法：方法：取一定量的供試品溶液及雜質(zhì)限量對(duì)照液，于同一色譜濾取一定量的供試品溶液及雜質(zhì)限量對(duì)照液，于同一色譜濾紙上點(diǎn)樣，展開，處理后比較雜質(zhì)斑點(diǎn)的個(gè)數(shù)、顏色紙上點(diǎn)樣，展開，處理后比較雜質(zhì)斑點(diǎn)

45、的個(gè)數(shù)、顏色或熒光強(qiáng)度等，從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否符合或熒光強(qiáng)度等，從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否符合限量規(guī)定。限量規(guī)定。例：地高辛中檢查洋地黃毒苷例：地高辛中檢查洋地黃毒苷分別點(diǎn)加供試品溶液及洋地黃毒苷對(duì)照品溶液于同一色譜分別點(diǎn)加供試品溶液及洋地黃毒苷對(duì)照品溶液于同一色譜濾紙上，以新制的甲酰胺飽和的二甲苯濾紙上，以新制的甲酰胺飽和的二甲苯- -丁酮溶液上行丁酮溶液上行展開，展開，120120烘干、放冷、噴新配制的三氯醋酸烘干、放冷、噴新配制的三氯醋酸- -氯仿溶氯仿溶液，再于液，再于100100烘干后，在烘干后，在365nm365nm紫外燈光下檢視，供紫外燈光下檢視，供試品溶液所顯斑點(diǎn)的熒

46、光強(qiáng)度與對(duì)照液的斑點(diǎn)比較，試品溶液所顯斑點(diǎn)的熒光強(qiáng)度與對(duì)照液的斑點(diǎn)比較，不得更強(qiáng)。不得更強(qiáng)。特點(diǎn)：紙色譜展開時(shí)間長，斑點(diǎn)較為擴(kuò)散特點(diǎn)：紙色譜展開時(shí)間長，斑點(diǎn)較為擴(kuò)散，應(yīng)用不如，應(yīng)用不如TLCTLC廣泛。廣泛。二）薄層色譜法二）薄層色譜法在特殊雜質(zhì)檢查中應(yīng)用很多，具有靈敏（在特殊雜質(zhì)檢查中應(yīng)用很多，具有靈敏（ugug）、簡便、快）、簡便、快速、不需特殊設(shè)備的優(yōu)點(diǎn)。速、不需特殊設(shè)備的優(yōu)點(diǎn)。1. 1.在一定供試品和檢測條件下，在一定供試品和檢測條件下，不允許有雜不允許有雜質(zhì)色斑質(zhì)色斑，是，是利用顯色劑對(duì)雜質(zhì)的最小檢利用顯色劑對(duì)雜質(zhì)的最小檢出量出量控制其限量。（需要顯示劑，不需控制其限量。（需要顯示劑

47、，不需要對(duì)照）要對(duì)照）例：馬來酸噻嗎洛爾中檢查有關(guān)雜質(zhì)例：馬來酸噻嗎洛爾中檢查有關(guān)雜質(zhì)取本品，加甲醇制成每取本品，加甲醇制成每mlml含含25mg25mg的溶液，吸取上液的溶液，吸取上液5l5l，點(diǎn)于硅膠點(diǎn)于硅膠G G薄層板上，以二氯甲烷薄層板上，以二氯甲烷- -甲醇甲醇- -濃氨溶液為展?jié)獍比芤簽檎归_劑，展開后，晾干，在飽和的碘蒸氣中顯色，除主開劑，展開后，晾干，在飽和的碘蒸氣中顯色，除主斑點(diǎn)外，不得顯其他斑點(diǎn)。斑點(diǎn)外，不得顯其他斑點(diǎn)。2. 2.選用實(shí)際存在的雜質(zhì)作為對(duì)照品選用實(shí)際存在的雜質(zhì)作為對(duì)照品（待檢雜質(zhì)是明確的，具備該雜質(zhì)對(duì)照品（待檢雜質(zhì)是明確的，具備該雜質(zhì)對(duì)照品）方法：方法：取一定

48、取一定濃度已知雜質(zhì)的對(duì)照液濃度已知雜質(zhì)的對(duì)照液和供和供試液，分別點(diǎn)加在同一薄層板上，展開試液，分別點(diǎn)加在同一薄層板上，展開和定位后檢查，供試品所含該雜質(zhì)的斑和定位后檢查，供試品所含該雜質(zhì)的斑點(diǎn)，不得超過相應(yīng)的雜質(zhì)對(duì)照斑點(diǎn)。點(diǎn)，不得超過相應(yīng)的雜質(zhì)對(duì)照斑點(diǎn)。雜質(zhì)限量計(jì)算：雜質(zhì)限量計(jì)算：假設(shè)供試液濃度為假設(shè)供試液濃度為0.10gml-1，對(duì)照品（雜，對(duì)照品（雜質(zhì)）溶液濃度為質(zhì)）溶液濃度為0.50 mgml-1，點(diǎn)樣量均，點(diǎn)樣量均為為5l： L=（0.505/0.11035）1000.5 例：枸櫞酸乙胺嗪中檢查例：枸櫞酸乙胺嗪中檢查N-N-甲基哌嗪甲基哌嗪取供試品，加甲醇制成每取供試品，加甲醇制成每m

49、lml含含50mg50mg的溶液，作為的溶液，作為供試品供試品溶液溶液；另?。涣砣-N-甲基哌嗪對(duì)照品，加甲醇制成每甲基哌嗪對(duì)照品，加甲醇制成每mlml含含50g50g的溶液，作為的溶液，作為對(duì)照品溶液對(duì)照品溶液。吸供試液和對(duì)照品溶液各吸供試液和對(duì)照品溶液各10l10l，分別點(diǎn)加于同一于硅膠，分別點(diǎn)加于同一于硅膠G G薄層板上，以氯仿薄層板上，以氯仿- -甲醇甲醇- -氨溶液展開，晾干，在飽和的氨溶液展開，晾干，在飽和的碘蒸氣中顯色，供試品溶液如顯與對(duì)照品相應(yīng)的雜質(zhì)碘蒸氣中顯色，供試品溶液如顯與對(duì)照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)比較，不得更深斑點(diǎn)，其顏色與對(duì)照品溶液的主斑點(diǎn)比較

50、，不得更深。其雜質(zhì)限量為。其雜質(zhì)限量為0.1%0.1% 1 21供試液供試液2雜質(zhì)對(duì)照品雜質(zhì)對(duì)照品液液 例如例如: :鹽酸左旋咪唑中檢查鹽酸左旋咪唑中檢查 硅膠硅膠G G 2,3- 2,3-二氫二氫-6-6-苯基咪唑苯基咪唑2,1-b2,1-b噻唑鹽噻唑鹽 苯苯: :甲醇甲醇: :冰冰HACHAC 樣品樣品 對(duì)招品對(duì)招品。3. 3.選用可能存在的某種物質(zhì)作為雜質(zhì)對(duì)照品選用可能存在的某種物質(zhì)作為雜質(zhì)對(duì)照品（雜質(zhì)未確認(rèn)或不止一種，推斷可能的雜質(zhì)，具有該雜質(zhì)（雜質(zhì)未確認(rèn)或不止一種，推斷可能的雜質(zhì)，具有該雜質(zhì)的對(duì)照品）的對(duì)照品）例：地塞米松磷酸鈉中檢查其他甾體例：地塞米松磷酸鈉中檢查其他甾體地塞米松作為對(duì)照品地塞米松作為對(duì)照品供試液：每供試液：每mlml含含20mg20mg，對(duì)照品：每對(duì)照品：每mlml含含0.2mg0.2mg處理后，檢查：供試品如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得多于處理后，檢查：供試品如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，不得多于2 2個(gè)，其個(gè)，其顏色與對(duì)