第二章 提取分離-色譜法1

1、1 1、請敘述下列名詞：、請敘述下列名詞： 分配系數(shù)分配系數(shù)結(jié)晶結(jié)晶重結(jié)晶重結(jié)晶2 2、兩相溶劑萃取法的原理是、兩相溶劑萃取法的原理是 ， w wC CL L公式中，表示公式中，表示 ，w w表示表示 ， 表示表示 ，當混合物中有、兩種成分，當混合物中有、兩種成分 時，時， K KA A、K KB B值相差越大，分離效果越值相差越大，分離效果越 ， K KA A、K KB B值相差越小，則分離效果越，當值相差越小，則分離效果越，當 時，則時，則 。 3 3、中藥化學成分的主要分離方法有、中藥化學成分的主要分離方法有_、_、 _、_、_、_、_、 、 。 4 4、用結(jié)晶法純化固體物質(zhì)時，所選擇的

2、溶劑應(yīng)該、用結(jié)晶法純化固體物質(zhì)時，所選擇的溶劑應(yīng)該 是對欲純化成分熱時溶解度是對欲純化成分熱時溶解度_,_,冷時溶解度冷時溶解度_,_,而而 對雜質(zhì)的溶解度冷熱都對雜質(zhì)的溶解度冷熱都_或都或都_。 5 5、分餾法是利用混合物中各成分的、分餾法是利用混合物中各成分的_差異進行差異進行 分離的，適用于分離分離的，適用于分離_混合物?；旌衔?。 6 6、在濃縮的水提液中加入一定量乙醇，不能除去、在濃縮的水提液中加入一定量乙醇，不能除去 的成分是（的成分是（ ） A A淀粉淀粉 B B樹膠樹膠 C C黏液質(zhì)黏液質(zhì) D D蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) E E樹脂樹脂 7 7、結(jié)晶法的原理是（、結(jié)晶法的原理是（ ） A A

3、相似相溶相似相溶 B B溶解度差異溶解度差異 C C分配系數(shù)差異分配系數(shù)差異 D D溫度差異溫度差異 E E極性差異極性差異 第一章第一章 總論總論第三節(jié)第三節(jié) 色譜法色譜法1 1、簡述色譜法的作用，試說出其分類形式。、簡述色譜法的作用，試說出其分類形式。 2 2、記憶色譜法中常用的術(shù)語記憶色譜法中常用的術(shù)語 (相、固定相、流動相、支持劑相、固定相、流動相、支持劑)。 3 3、熟悉薄層吸附色譜的原理和色譜條件熟悉薄層吸附色譜的原理和色譜條件。 4 4、討論、分析、記憶吸附強度與被分離成分的極性、討論、分析、記憶吸附強度與被分離成分的極性 之間的相互關(guān)系。之間的相互關(guān)系。 5 5、熟記常見官能團

4、的極性大小順序熟記常見官能團的極性大小順序 【課堂目標課堂目標】：1. 1. 色譜法常用術(shù)語：相，固定相，流動相，支持劑色譜法常用術(shù)語：相，固定相，流動相，支持劑 2 2色譜法的分類色譜法的分類 3 3吸附色譜法的原理及色譜條件的選擇吸附色譜法的原理及色譜條件的選擇 4 4常見官能團極性大小順序常見官能團極性大小順序 【教學重點教學重點】：【教學難點教學難點】：1. 1. 色譜法常用術(shù)語：相，固定相，流動相，支持劑色譜法常用術(shù)語：相，固定相，流動相，支持劑 2 2吸附色譜法的原理及色譜條件的選擇吸附色譜法的原理及色譜條件的選擇 碳酸鈣碳酸鈣 （固定相）（固定相） 色素混合液色素混合液 石油醚石

5、油醚 (流動相）流動相）1906年，年，Tsweet發(fā)現(xiàn)色譜分離現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)色譜分離現(xiàn)象 色譜柱色譜柱植物色素分離圖示植物色素分離圖示 1、歷史、歷史 3030年代年代 茨維特分離綠葉色素，產(chǎn)生固液吸附色譜茨維特分離綠葉色素，產(chǎn)生固液吸附色譜 4040年代年代 液液液分配色譜法液分配色譜法 、TLCTLC、紙色譜、紙色譜 5050年代年代 GCGC出現(xiàn)使色譜具備分離和在線分析功能出現(xiàn)使色譜具備分離和在線分析功能 6060年代年代 推出了色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（推出了色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MSGC-MS） 7070年代年代 HPLCHPLC出現(xiàn)使色譜分析范圍進一步擴大出現(xiàn)使色譜分析范圍進一步擴大 808

6、0年代年代 出現(xiàn)了超臨界流體色譜法、毛細管電泳法出現(xiàn)了超臨界流體色譜法、毛細管電泳法 9090年代年代 崛起的電色譜法，兼有毛細管電泳法與微崛起的電色譜法，兼有毛細管電泳法與微 微填充柱色譜法的優(yōu)點微填充柱色譜法的優(yōu)點 2121世紀世紀 色譜科學將在生命科學等的前沿發(fā)揮他不色譜科學將在生命科學等的前沿發(fā)揮他不可替代的重要作用可替代的重要作用 定義定義：。 原理原理：利用物質(zhì)在：利用物質(zhì)在固定相固定相和和流動相流動相中的中的親和力親和力不同，不同，使使混合物中的各組分分離。混合物中的各組分分離。 對比：以前學過的分離方法有：對比：以前學過的分離方法有： 1. 1. 是利用物質(zhì)是利用物質(zhì)溶解度的不

7、同溶解度的不同而進行分離。而進行分離。 2. 2. 是利用有機物是利用有機物進行分離。進行分離。 3. 3. 是利用組分在水相和有機相（互不相是利用組分在水相和有機相（互不相 溶）中的溶）中的而分離。而分離。 7.7.色譜法（層析法、色離法）色譜法（層析法、色離法）色譜法基本術(shù)語氣相氣相水相水相油相油相油油水水氧化鋁1 1、分離混合物、分離混合物：適用于分離的復(fù)雜化合物2 2、定量分離：、定量分離：可用于檢測混合物中各成分的含量3 3、鑒定化合物：、鑒定化合物：適于純物質(zhì)的鑒定（三）色譜法的用途（三）色譜法的用途 用途用途：色譜法已廣泛用于各個領(lǐng)域，是多組色譜法已廣泛用于各個領(lǐng)域，是多組分混合

8、物首選的分離分析方法。以中國藥分混合物首選的分離分析方法。以中國藥典典20052005版為例，一部收載中藥版為例，一部收載中藥11461146個品種，個品種，用薄層色譜進行鑒別或含量測定的有用薄層色譜進行鑒別或含量測定的有15231523項項，用高效液相色譜進行定量分析的有用高效液相色譜進行定量分析的有479479種種518518項，用氣相色譜進行檢測的有項，用氣相色譜進行檢測的有4747種。二部收種。二部收載的有載的有19671967，采用高效液相色譜法的品種有，采用高效液相色譜法的品種有848848，現(xiàn)在色譜法已形成一門專門的科學?，F(xiàn)在色譜法已形成一門專門的科學。 1按兩相分子的聚集狀態(tài)分

9、類按兩相分子的聚集狀態(tài)分類2按固定相的固定方式分類按固定相的固定方式分類3按分離機制分類按分離機制分類分配色譜分配色譜 吸附色譜吸附色譜 離子交換色譜離子交換色譜 空間排阻色譜空間排阻色譜 毛細管電詠法毛細管電詠法 毛細管電色譜法毛細管電色譜法 毛細管電泳毛細管電泳一、吸附色譜法一、吸附色譜法吸附力類型：主要吸附力類型：主要 物體表面作用力、氫鍵、絡(luò)合、靜電引力、范德華力等物體表面作用力、氫鍵、絡(luò)合、靜電引力、范德華力等水 以各種固體吸附劑為固定相，利用吸附劑對以各種固體吸附劑為固定相，利用吸附劑對 樣品中各成分樣品中各成分吸附能力不同吸附能力不同，及流動相對它們的，及流動相對它們的 解吸附能

10、力解吸附能力的不同，使各成分達到分離。的不同，使各成分達到分離。 紙屑、瓜子殼紙屑、瓜子殼磚頭、石塊磚頭、石塊結(jié)論：結(jié)論：吸附色譜的色譜條件吸附色譜的色譜條件固定相：吸附劑固定相：吸附劑流動相：展開劑流動相：展開劑被分離組分：被分離組分：1 1、吸附劑、吸附劑活度活度：分：分五五級級 （）強弱強弱一般：一般：或或選擇原則選擇原則：顆粒要細；有適宜的吸附力；不與成分反應(yīng)顆粒要細；有適宜的吸附力；不與成分反應(yīng)有機類有機類 淀粉、葡萄糖、聚酰胺、纖維素等淀粉、葡萄糖、聚酰胺、纖維素等 無機類無機類 氧化鋁、硅膠、活性炭、碳酸鈣、硅藻土等氧化鋁、硅膠、活性炭、碳酸鈣、硅藻土等 概念：概念：活化：一定條

11、件下，加熱吸附劑除去其中的水分，活化：一定條件下，加熱吸附劑除去其中的水分， 使其吸附力增強的過程。使其吸附力增強的過程。 脫活化：脫活化：常用吸附劑常用吸附劑硅膠：硅膠：適用于中性和酸性成分分離適用于中性和酸性成分分離氧化鋁：氧化鋁：商品氧化鋁分三種規(guī)格商品氧化鋁分三種規(guī)格活性炭：活性炭：非極性吸附劑非極性吸附劑聚酰胺：聚酰胺：高分子聚合物高分子聚合物極極 性性 吸吸 附附 劑劑硅硅 膠（膠（SiO2H2O）結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)：內(nèi)部內(nèi)部硅氧交聯(lián)結(jié)構(gòu)硅氧交聯(lián)結(jié)構(gòu)多孔結(jié)構(gòu)多孔結(jié)構(gòu) 表面表面有硅醇基有硅醇基氫鍵作用氫鍵作用吸附活性中心吸附活性中心 特性：特性： 1 1）與極性物質(zhì)或不飽和化合物形成氫鍵）與極

12、性物質(zhì)或不飽和化合物形成氫鍵 物質(zhì)極性物質(zhì)極性，吸附能力，吸附能力強極性吸附中心，不易洗脫強極性吸附中心，不易洗脫 吸附活性次序：活潑型吸附活性次序：活潑型 束縛型束縛型 游離型游離型 2 2）吸水）吸水失活失活 105 105110110O OC C烘干烘干3030分鐘分鐘( (可逆失水可逆失水)吸附力最大吸附力最大 500 500O OC C烘干烘干( (不可逆失水不可逆失水)活性喪失，無吸附力活性喪失，無吸附力適用：適合適用：適合酸性酸性或或中性中性物質(zhì)物質(zhì) 商品氧化鋁吸附劑分類及性能商品氧化鋁吸附劑分類及性能活活 性性 炭炭 典型的非極性吸附劑，對非極性物質(zhì)具有較強的親和能力，在 水溶

13、液中的吸附力最強，在有機溶劑中吸附力較弱。溶劑的極性越小，活性炭的吸附力就小，成分越容易被洗脫活性炭吸附能力強弱芳香族化合物脂肪族化合物大分子化合物小分子化合物聚聚 酰酰 胺胺A:聚酰胺材料簡介：聚酰胺是由酰胺聚合而成的一類高 分子物質(zhì)，聚酰胺又稱錦綸、尼龍、種類繁多。色譜常 用的為錦綸6和錦綸66。 其單體物質(zhì)是已內(nèi)酰胺、 已二胺和已二酸。分子中的酰胺鍵是其結(jié)構(gòu)的重要部分。 酰胺鍵也是與其它極性鍵基團產(chǎn)生氫鍵的物質(zhì)基礎(chǔ)。 B:分離原理：氫鍵吸附原理 C:與聚酰胺可以形成氫鍵的基團：酚羥基、羰基、羧基CH2NO=CCH2CH2CH2CH2CH2NC=OCH2HHCH2NO=CCH2CH2CH2

14、CH2CH2NC=OCH2HHOOOH聚酰胺吸附原理示意圖（低沸點有機溶劑或混合溶劑系統(tǒng)）（低沸點有機溶劑或混合溶劑系統(tǒng)）注意：注意： 流動相的極性必須與分離組分的極性一致流動相的極性必須與分離組分的極性一致(1)(1)常用溶劑：氯仿、乙醚、石油醚常用溶劑：氯仿、乙醚、石油醚 或或B.A.WB.A.W溶劑系統(tǒng)（溶劑系統(tǒng)（BuOH:HAC:Water) BuOH:HAC:Water) ( 4 : 1 : 5 ) ( 4 : 1 : 5 )(2)流動相的選擇流動相的選擇 用硅膠或氧化鋁作色譜分離時，如用硅膠或氧化鋁作色譜分離時，如被測成分極被測成分極性較大，用活性較低的吸附劑，極性較大的沖洗性較大

15、，用活性較低的吸附劑，極性較大的沖洗劑劑；被測成分極性較小，選用活性較強的吸附劑，被測成分極性較小，選用活性較強的吸附劑，極性較小的沖洗劑極性較小的沖洗劑 2.2.流動相：流動相：（3 3）常用溶劑的極性）常用溶劑的極性 石油醚石油醚 環(huán)己烷環(huán)己烷 二硫化碳二硫化碳 四氯化碳四氯化碳 三氯乙烷三氯乙烷 苯苯 甲苯甲苯 二氯甲烷二氯甲烷 乙醚乙醚 氯仿氯仿 乙酸乙酯乙酸乙酯 正正丁醇丁醇 丙酮丙酮 乙醇乙醇 甲醇甲醇 吡啶吡啶 酸酸 水水 3 3、被分離組分的性質(zhì)（主要因素）、被分離組分的性質(zhì)（主要因素）影響化合物極性的因素：影響化合物極性的因素： 化合物分子母核大?。ㄌ紨?shù)多少）：化合物分子母核

16、大?。ㄌ紨?shù)多少）： 分子大、碳數(shù)多，極性?。环肿有?、碳分子大、碳數(shù)多，極性??；分子小、碳數(shù)少，極性大。數(shù)少，極性大。 (2) (2) 取代基極性大小：取代基極性大?。?在化合物母核相同或相近情況下，化合在化合物母核相同或相近情況下，化合物極性大小主要取決于取代基極性大小。物極性大小主要取決于取代基極性大小。 酸酚醇胺醛酮酯醚烯烷。酸酚醇胺醛酮酯醚烯烷。 分離組分的極性越大，吸附力越強分離組分的極性越大，吸附力越強 烷烴烷烴(-CH(-CH3 3、-CH-CH2 2-)-) 烯烴烯烴(-CH=CH-)(-CH=CH-) 醚類醚類(-OCH(-OCH3 3) ) 硝基化合物硝基化合物(-NO(-NO2 2) ) 二甲胺二甲胺(-(-N(CHN(CH3 3) )2 2) ) 酯類酯類(-COOR)(-COOR) C=O)(C=O) 醛類醛類(-(-CHO)CHO) 硫醇硫醇(-SH)(-SH) 胺類胺類(-NH(-NH2 2) ) 酰胺酰胺(-(-NHCOCHNHCOCH3 3) ) 醇類醇類(-OH)(-OH)