實驗六+霉菌形態(tài)觀察

1、1學(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的基本方法2了解四類常見霉菌的基本形態(tài) 一、實驗?zāi)康囊?、實驗?zāi)康亩嶒炘矶?、實驗原理w 霉菌：霉菌：凡在營養(yǎng)基質(zhì)上形成絨毛狀、棉絮狀或蜘蛛網(wǎng)形的絲狀菌體的真菌，統(tǒng)稱為霉菌。霉菌包括分類學(xué)上許多不同綱或類的真菌，它們分別屬于藻狀菌綱、子囊菌綱、擔(dān)子菌綱和半知菌類。 霉菌可產(chǎn)生復(fù)雜分枝的菌絲體，分基內(nèi)菌絲和氣生菌絲，氣生菌絲生長到一定階段分化產(chǎn)生繁殖菌絲，由繁殖菌絲產(chǎn)生孢子。霉菌菌絲體（尤其是繁殖菌絲）及孢子的形態(tài)特征是識別不同種類霉菌的重要依據(jù)。 載玻片培養(yǎng)觀察法：載玻片培養(yǎng)觀察法： 用無菌操作將培養(yǎng)基瓊脂薄層置于載玻片上，接種后蓋上蓋玻片培養(yǎng)，霉菌即在載玻片和蓋玻片

2、之間的有限空間內(nèi)沿蓋玻片橫向生長。培養(yǎng)一定時間后，將載玻片上的培養(yǎng)物置顯微鏡下觀察。這種方法既可以保持霉菌自然生長狀態(tài)，還便于觀察不同發(fā)育期的培養(yǎng)物。三、實驗材料三、實驗材料1 1菌種菌種：黃曲霉、青霉、黑根霉和毛霉培養(yǎng)2-5d的馬鈴薯瓊脂平板培養(yǎng)物。2 2培養(yǎng)基培養(yǎng)基：土豆瓊脂或察氏瓊脂乳酸石炭酸棉蘭染液、碘液、酒精、蒸餾水等3 3儀器或其他用具儀器或其他用具：平皿，蓋玻片，U形玻棒，解剖刀，20%的甘油以及顯微鏡等。霉菌小培養(yǎng)霉菌小培養(yǎng)四、實驗步驟四、實驗步驟 1 1、培養(yǎng)小室的滅菌：、培養(yǎng)小室的滅菌：在平皿皿底鋪一張略小于皿底的圓濾紙片，再放一U形玻棒，其上放一潔凈載玻片和兩塊蓋玻片，蓋

3、上皿蓋，包扎后于121滅菌30min，烘干備用。 2 2、瓊脂塊的制作：、瓊脂塊的制作：取已滅菌的馬鈴薯瓊脂（或察氏瓊脂）培養(yǎng)基6-7ml注入另一塊滅菌平皿中，使之凝固成薄層。用解剖刀切成0.5-1cm2的瓊脂塊，并將其移至上述培養(yǎng)室中的載玻片上（每塊放兩片）。注意無菌操作3 3、接種：、接種：用尖細(xì)的接種針挑取很少量的孢子接種于瓊脂塊的邊緣上，用無菌鑷子將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上。接種量要少，盡可能將分散的孢子接種在瓊脂塊的邊緣上，否則培養(yǎng)后菌絲過于稠密影響觀察。4 4、培養(yǎng)、培養(yǎng)：現(xiàn)在平皿的濾紙上加3-5ml滅菌到20%的甘油（保持濕度），蓋上平皿，28培養(yǎng)。5 5、鏡檢、鏡檢：根據(jù)需要可以在

4、不同的培養(yǎng)時間內(nèi)取出載玻片置低倍鏡下觀察，必要時換高倍鏡觀察。a.a.觀察黑根霉菌絲情況和孢子情況（著重辨觀察黑根霉菌絲情況和孢子情況（著重辨認(rèn)認(rèn)匍匐菌絲、假根、包囊梗、孢子囊匍匐菌絲、假根、包囊梗、孢子囊）：）：根霉假根假根孢囊孢子（孢囊孢子（sporangiosporesporangiospore）b.b.觀察毛霉菌絲情況和孢子情況（著重辨觀察毛霉菌絲情況和孢子情況（著重辨認(rèn)認(rèn)孢囊梗、孢子囊孢囊梗、孢子囊）：）： c. c.觀察黃曲霉菌絲觀察黃曲霉菌絲分隔分隔情況和分生孢子著生情情況和分生孢子著生情況（著重辨認(rèn)況（著重辨認(rèn)足細(xì)胞、分生孢子梗和分生孢足細(xì)胞、分生孢子梗和分生孢子子）：）：黑曲

5、霉 足細(xì)胞足細(xì)胞d.d.觀察青霉菌絲觀察青霉菌絲分隔分隔和分生孢子著生情況和分生孢子著生情況（著重辨認(rèn)著重辨認(rèn)帚狀分支的分生孢子梗帚狀分支的分生孢子梗）：）： 青霉青霉菌落特征：菌落特征：霉菌的菌落大、疏松、干燥、不透明，多呈絨毛狀、絮狀或網(wǎng)狀等，菌體可沿培養(yǎng)基表面蔓延生長，由于不同的真菌孢子含有不同的色素，所以菌落可呈紅、黃、綠、青綠、青灰、黑、白、灰等多種顏色。五、實驗結(jié)果五、實驗結(jié)果繪四種霉菌的形態(tài)特征：繪四種霉菌的形態(tài)特征：黃曲霉：黃曲霉：有隔菌絲，外生孢子（分生孢子），有足細(xì)胞，頂囊，分生孢子梗青霉：青霉：有隔菌絲，外生孢子（分生孢子），為帚帚狀分生孢子穗狀分生孢子穗，初級小梗，次級小梗；黑根霉：黑根霉：無隔菌絲，內(nèi)生孢子（孢囊孢子），孢囊梗，匍匐枝和假根；毛霉：毛霉：無隔菌絲，內(nèi)生孢子（孢囊孢子），孢囊梗六、思考題六、思考題 w 1、你主要根據(jù)哪些形態(tài)特征來區(qū)分上述四種霉菌？ P46，（1）w 2、你認(rèn)為在顯微鏡下，細(xì)菌，放線菌，酵母菌和霉菌的主要區(qū)別是什么？P46，（2） w 1.1.鏡檢時，你如何區(qū)分放線菌的基內(nèi)菌鏡檢時，你如何區(qū)分放線菌的基內(nèi)菌絲和氣生菌絲？絲和氣生菌絲？P P42