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文檔簡介
1、酶標(biāo)儀軟件操作步驟一 .軟件運行前的連接酶標(biāo)儀插上電源, 和電腦連接好后, 打開電腦和酶標(biāo)儀開關(guān),酶標(biāo)儀至少穩(wěn)定15min 后開始讀數(shù),效果比較好。注意,當(dāng)酶標(biāo)儀處于power on的狀態(tài)時,不要手動打開酶標(biāo)板室和比色皿室的門,以免紫外輻射的傷害或者儀器的損傷。二軟件的運行1. 打開桌面快捷方式運行軟件,出現(xiàn)Log on To SkanIt software的界面。2.use name 默認(rèn)為“ admin”, password 為空3. 點 OK進入界面, New session- 新建任務(wù)程序, Open session- 打開已有程序。4. 在界面上方的setting中選擇Instrum
2、ent,出現(xiàn)Instrumentsetting的界面,在Instrument中選中Multiskan spectrum on COM,Themo Electron。點擊右側(cè)的setup,在serial number中輸入1500-850 ,然后點擊OK。再點擊Defaultinstrument右邊的connect,即可設(shè)定好連接。然后點擊close 關(guān)閉窗口。三 New session操作1新建任務(wù)程序:點擊 new session 進入 protocoloptions界面,在 sessionname中輸入新的程序名稱點擊next進入platelayoutoptions界面,在selectpl
3、atetemplate中選擇所需模板類型(一般96 孔板選擇use default,比色皿選擇 cuvette ,其他的可以選擇相應(yīng)的類型)輸入 plate layout name(系統(tǒng)默認(rèn)的與session name 相同 )點擊 next 進入 Definition done界面,在select location中選擇任務(wù)程序所要保存的目的文件夾(該界面可進行新建,重命名及刪除文件夾操作)點擊 finish完成新建,進入程序操作主界面(主要有三大塊: platelayout用于模板區(qū)域選擇,protocol用于程序編輯, results用于數(shù)據(jù)處理)。2.plate layout對模板區(qū)域
4、進行選取點擊wizard進入選取模板區(qū)域操作界面fillwizard(任務(wù)類型type有: blank空白,calibrator標(biāo)準(zhǔn)蛋白 ,control對照,empty空白,unkown 一般為樣品 )。在右邊模板中選取開始點位置,即紅圓點 所在位置。選取方向,在Filling order中可通過箭頭 設(shè)定。對于 blank ,在 No.of replicates中填寫好重復(fù)數(shù),選擇好開始位點和方向,點擊Add 可完成。對于 calibrator,在 No.of calibrators中填寫標(biāo)準(zhǔn)蛋白的個數(shù),在No.of replicates中填寫好重復(fù)數(shù),選擇好開始位點和方向。如 有濃度梯度
5、,可選擇 Generate series 進行設(shè)置。例如,取 7 個濃度蛋白做標(biāo)準(zhǔn)曲線, 稀釋倍數(shù)分別為20,40,80,160,320,640,1320,每個濃度重復(fù)兩次,則在 No.of calibrators中填寫 7,在 No.of replicates 中填寫 2,選擇好開始位點和方向。然后選中 Generate series ,出現(xiàn) conventions 的界面,在 Initial value 中填寫 20,在 operators 中選擇 Multiply ,step by 中填寫 2,點擊ok。對于control,操作基本和calibrators相似。對于Empty 操作基本和
6、blank相似。對于unknown,填寫好No.of replicates, No.of unknowns并選擇好開始位點和方向,點擊Add 即可完成。第一塊板填滿后,有時會自動進入第二塊板的編輯,注意看Fill wizard的模板下方的current plate,如果顯示為2/2 , 則可以直接關(guān)掉窗口,模板區(qū)域即可編好。標(biāo)注:對于單一型任務(wù)可先選取全模板【即在No.of unkown選項中設(shè)為模板最大孔數(shù)】 ,然后對不要的區(qū)域進行刪除。對于非blank和empty型任務(wù),若有濃度差,可勾選generateseries,然后進行設(shè)定:series為有規(guī)則的濃度差,multiplevalues
7、為不規(guī)則的濃度差。有規(guī)則的可通過運算公式,系統(tǒng)直接算出,無規(guī)則的通過鍵盤輸入,點擊add 進行添加。3. 編輯程序選好所用模板區(qū)域后,點擊protocol進入程序編輯界面。在 protocol properties所屬框內(nèi)的execution order選項中選中數(shù)據(jù)讀取路徑(共有四種,第一種一般為常用路徑,一次讀四個孔)。在 Settle delay選項中設(shè)定讀數(shù)時間間隔。一般比色皿不需要讀數(shù)時間間隔,設(shè)置為零即可,對于測量板而言,由于板在移動過程中液體表面共振波的影響,需要穩(wěn)定一段時間, 一般設(shè)置為5s in a6-wellplate ,300msin a 96-wellplate ,&l
8、t;20msin a 384-wellplate 。在 steps 所屬框內(nèi)空白處或選中程序單擊鼠標(biāo)右鍵得到應(yīng)用程序子菜單。在子菜單中選取你所要運行的程序(如常用的程序有photometric ,photometric-scanning,Incubate 和 shake 等),并在該程序的選項中設(shè)定你所需的參數(shù)。 一般測蛋白含量選擇 photometric ,在 wavelength 中設(shè)置好波長即可。所有程序編寫好后, 在 session 中點擊 save 保存好模板程序,不保存將無法運行上面所設(shè)的模板程序。4測讀數(shù)據(jù)在Execution所屬框內(nèi)點擊connect鏈接機器, 鏈接過程中會出現(xiàn)
9、機器狀態(tài) 列表窗口,無異常后點Close 關(guān)閉 。在 Execution所屬框內(nèi)點擊run plate out彈出酶標(biāo)板載板,把酶標(biāo)板底部擦干后放上去后,確保平穩(wěn)后點擊run platein ,等酶標(biāo)板進去。在 Execution所屬框內(nèi)點擊Execute session 按鈕運行所設(shè)程序,彈出 Run name窗口, 點擊 Ok確認(rèn)運行。 接著會出現(xiàn)讀數(shù)窗口,不要關(guān)閉讀數(shù)窗口, 讀數(shù)完畢后窗口會自動消失, 并彈出酶標(biāo)板載板。注:以前,無法進行人工讀板,這是因為機器序列號的設(shè)置不對,要仔細(xì)查看機器上的機器序列號,將正確的序列號填入操作軟件中的設(shè)置中。5數(shù)據(jù)分析及保存儀器讀數(shù)完畢后, 系統(tǒng)自動進
10、入Results操作界面,在 Result界面所屬框中,可對所得數(shù)據(jù)進行分析。在 Result所屬框中, 單擊要分析數(shù)據(jù)的程序,如測蛋白一般選擇的 photometric,點鼠標(biāo)右鍵得到數(shù)據(jù)分析方法主菜單。選擇要分析的方法,測蛋白選擇QuantitativeCurve Fit ,出現(xiàn) Parameters ,Graph,Table ,List 可以點擊查看結(jié)果。如果需要標(biāo)準(zhǔn)曲線,則在Graph 的曲線圖中單擊右鍵選擇Toolbar ,圖標(biāo)上方會出現(xiàn)一系列圖標(biāo),點擊Copy to clipboard選擇 As a Bitmap ,將其粘貼在新建word 文檔中并保存。點擊 Result左側(cè)圖標(biāo)框
11、中選擇Export ,在 Parameters 中的select items to report中選擇要保存的內(nèi)容,一般選擇layout ,Photometric , Quantitative Curve Fit,然后點擊Add,在;右邊的 Report items 中出現(xiàn)所選擇的內(nèi)容。在 Afterexecution中選中 Save to file,通過右下方的Browse選擇要保存的文件。注意此次操作可能沒有保存到目的文件夾。必須進行以下步驟。點擊上方的Report 可看見結(jié)果, 點擊 Save 選擇所要保存到的目的文件夾。 并檢查是否所有要保存的數(shù)據(jù)都已經(jīng)保存到相應(yīng)文件夾中。三 Open session操作若要運行或查看已有的程序,在登錄界面點擊Open session,打開程序所在文件夾,單擊所要運行或查看的程序(提示:在該界面中
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