免疫定性項目性能驗證

1、臨床免疫定性檢測臨床免疫定性檢測的性能驗證的性能驗證高速列車性能驗證高速列車性能驗證n空氣動力學空氣動力學n速度速度n車體轉(zhuǎn)向架運行車體轉(zhuǎn)向架運行n固定、懸掛的零部件強度固定、懸掛的零部件強度n穩(wěn)定性穩(wěn)定性n舒適感舒適感n故障率故障率n第第3頁頁測定系統(tǒng)測定系統(tǒng)方法學方法學操作程序操作程序校準品校準品儀器儀器試劑試劑測定系統(tǒng)的關鍵要素測定系統(tǒng)的關鍵要素醫(yī)學檢驗為什么需要醫(yī)學檢驗為什么需要“性能驗證性能驗證”？n評價檢測系統(tǒng)是否滿足臨床檢測和認評價檢測系統(tǒng)是否滿足臨床檢測和認可組織的要求（可組織的要求（ISO15189）；）；n驗證廠家提供的試劑參數(shù)能否在本實驗證廠家提供的試劑參數(shù)能否在本實驗室

2、得到重現(xiàn)。驗室得到重現(xiàn)。什么時候進行性能驗證什么時候進行性能驗證n使用新的檢測試劑或系統(tǒng)時；使用新的檢測試劑或系統(tǒng)時；n更換檢測試劑或系統(tǒng)時。更換檢測試劑或系統(tǒng)時。更換新的試劑或系統(tǒng)意義：更換新的試劑或系統(tǒng)意義：n更易于操作更易于操作n更高的檢測性能更高的檢測性能n更經(jīng)濟更經(jīng)濟n更能滿足實驗室測定要求更能滿足實驗室測定要求 一一. . 定性臨床應用與分類定性臨床應用與分類1 1、定性測定的臨床應用、定性測定的臨床應用免疫學測定免疫學測定：感染性疾病、腫瘤標志物：感染性疾病、腫瘤標志物核酸和基因檢測核酸和基因檢測微生物檢驗微生物檢驗細胞學檢驗細胞學檢驗寄生蟲檢驗寄生蟲檢驗2 2、定性實驗的臨床分

3、類、定性實驗的臨床分類篩查實驗：如便潛血、篩查實驗：如便潛血、TPTP診斷實驗：如微生物學培養(yǎng)與細菌鑒定診斷實驗：如微生物學培養(yǎng)與細菌鑒定確認實驗：對以上已做出的檢驗結(jié)果進行驗確認實驗：對以上已做出的檢驗結(jié)果進行驗證和確認證和確認3.3.幾個重要概念幾個重要概念n篩查試驗篩查試驗：臨床上篩查方法通常用于檢測整個人臨床上篩查方法通常用于檢測整個人群（或者人群中的特定群（或者人群中的特定部分部分）中）中特定指標特定指標的情況。的情況。例如對例如對需輸血患者需輸血患者樣本做樣本做HIV血清學試驗血清學試驗。 一般來說，這些用于篩查的定性試驗必須具有一般來說，這些用于篩查的定性試驗必須具有高敏感性以高

4、敏感性以確保真陽性確保真陽性結(jié)果的結(jié)果的檢出檢出。如果篩查試。如果篩查試驗的假陽性結(jié)果所造成的社會及經(jīng)濟后果不是非驗的假陽性結(jié)果所造成的社會及經(jīng)濟后果不是非常嚴重，這種低特異性可通過特異性較好的確認常嚴重，這種低特異性可通過特異性較好的確認試驗加以彌補。試驗加以彌補。CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline3.3.幾個重要概念幾個重要概念n診斷試驗診斷試驗：通常用于臨床懷疑某種特定疾病或通常用于臨床懷疑某種特定疾病或狀況是否存在的診斷狀況是否存在的診

5、斷性性定性試驗。例如各種微定性試驗。例如各種微生物培養(yǎng)就是用于檢查感染情況的診斷試驗。生物培養(yǎng)就是用于檢查感染情況的診斷試驗。 臨床上臨床上對治療的要求，對治療的要求，診斷試驗診斷試驗應應具有很具有很好的敏感性和特異性好的敏感性和特異性。如果診斷試驗后還進行。如果診斷試驗后還進行確認試驗，那么診斷試驗的特異性要求可以稍確認試驗，那么診斷試驗的特異性要求可以稍微降低。微降低。CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline3.3.幾個重要概念幾個重要概念n確認

6、試驗確認試驗：確認試驗用于驗證篩查試驗或者診確認試驗用于驗證篩查試驗或者診斷試驗結(jié)果。如果確診試驗證實了之前的檢測斷試驗結(jié)果。如果確診試驗證實了之前的檢測結(jié)果，臨床醫(yī)生即可作出診斷。確認試驗通過結(jié)果，臨床醫(yī)生即可作出診斷。確認試驗通過設計使其具有設計使其具有較高的特異性較高的特異性（有時甚至以犧牲（有時甚至以犧牲敏感性為代價）以及敏感性為代價）以及高陽性預測值高陽性預測值。免疫印跡免疫印跡試驗就是一種用于試驗就是一種用于HIV血清學試驗等篩查試驗血清學試驗等篩查試驗之后的確認試驗。之后的確認試驗。 3.3.幾個重要概念幾個重要概念n敏感性敏感性或陽性測定能力指數(shù)（或陽性測定能力指數(shù)（DI（）：

7、（）：可定義為一實驗對陽性標本測定后給出陽性結(jié)果的能力。 DI（）=真陽性/（真陽性+假陰性）100% n特異性特異性或陰性測定能力指數(shù)（或陰性測定能力指數(shù)（DI（）：（）：則為對陰性樣本測定給出陰性結(jié)果的能力 DI（）= 真陰性/（真陰性+假陽性）100% 3.3.幾個重要概念幾個重要概念n陽性預示值：陽性預示值：即測定為陽性的標本實際上為陽即測定為陽性的標本實際上為陽性的可能性。性的可能性。 =真陽性真陽性/（真陽性（真陽性+假陽性）假陽性）100%n陰性預示值陰性預示值:則為一份給出陰性結(jié)果的樣本實則為一份給出陰性結(jié)果的樣本實際上為陰性的可靠性。際上為陰性的可靠性。 = 真陰性真陰性/（

8、真陰性（真陰性+假陰性）假陰性）100%臨床診斷（金標準）臨床診斷（金標準）總計總計陽性陽性陰性陰性驗證方法驗證方法陽性陽性A AB BA+BA+B陰性陰性C CD DC+DC+D總計總計A+CA+CB+DB+DN N敏感度敏感度 = 100% = 100% A A/ /（A+CA+C） 特異性特異性 = 100% = 100% D D/ /（B+DB+D） 相關樣本的患病率相關樣本的患病率 = 100% = 100% （A+CA+C）/N/N陽性預測值（陽性預測值（PVPPVP） = 100% = 100% A A/ /（A+BA+B） 陰性預測值陰性預測值 （PVNPVN）= 100%=

9、100% D D/ /（C+DC+D） 方法效率（正確率）方法效率（正確率） = 100% = 100% （A+DA+D）/N/N “預示值”對臨床檢驗結(jié)果影響預示值對一個有預示值對一個有95%敏感性和敏感性和95%特異性的特異性的試劑檢測結(jié)果的影響（試劑檢測結(jié)果的影響（100,000人）人） 結(jié)結(jié) 果果 10%感染率感染率 1%感染率感染率 檢出檢出 (+)未檢出未檢出 () 檢出檢出(+) 未檢出未檢出() + 9,500 500 950 50 4,500 85,500 4,950 94,050敏感性敏感性(TP/TP+FN) 95% 95%特異性特異性(TN/TN+FP) 95% 95%

10、陽性預示值陽性預示值TP/TP+FP 9500/9500+4500=67.9%950/950+4950=16%陰性預示值陰性預示值TN/TN+FN85500/85500+500=99.4%94050/94050+50=99.9%二二. .定性定性檢測系統(tǒng)的性能驗證檢測系統(tǒng)的性能驗證 驗證的內(nèi)容驗證的內(nèi)容: :1 1. .正確度（準確度）正確度（準確度）2.2.精密度精密度3.3.敏感性敏感性 4.4.特異性特異性 5.5.CUTOFFCUTOFF值驗證值驗證6.6.其他（需要時）其他（需要時）nEP15A2nEP17AnEP12nClinical Laboratory and Standard

11、s Institute (CLSI) 涉及免疫定性檢測評價方法標準涉及免疫定性檢測評價方法標準醫(yī)學實驗室精密度和準確度的確認醫(yī)學實驗室精密度和準確度的確認檢出限與定量限的評價檢出限與定量限的評價定性檢測評價定性檢測評價臨床實驗室標準化協(xié)會臨床實驗室標準化協(xié)會性能驗證前的準備性能驗證前的準備n應熟悉待驗證的試劑或系統(tǒng)應熟悉待驗證的試劑或系統(tǒng)n進行必要的培訓，包括進行必要的培訓，包括樣本的處理和儲存、樣本的處理和儲存、試劑的處理和儲存、合理的檢測方案、對結(jié)試劑的處理和儲存、合理的檢測方案、對結(jié)果合理的解釋以及系統(tǒng)的質(zhì)量控制果合理的解釋以及系統(tǒng)的質(zhì)量控制等。等。n制定質(zhì)量保證計劃制定質(zhì)量保證計劃n確

12、定患者樣本的數(shù)量及強弱（評價重復性）確定患者樣本的數(shù)量及強弱（評價重復性）n確定比較的方法確定比較的方法CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline性能驗證的合格標準從何而來？性能驗證的合格標準從何而來？n試劑盒說明書試劑盒說明書n國際和或國際標準國際和或國際標準性能驗證前樣本的準備性能驗證前樣本的準備n質(zhì)控品：使用商品化質(zhì)控物進行，包括陰質(zhì)控品：使用商品化質(zhì)控物進行，包括陰性和陽性。性和陽性。n樣本的采集和保存：采集時間、保存方式樣本的采集和保存：采集

13、時間、保存方式等必須保證一致性。等必須保證一致性。CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline方法比較方法比較用樣本數(shù)量用樣本數(shù)量n取決于評價者的目的。取決于評價者的目的。作為最低要求，檢作為最低要求，檢測要持續(xù)到至少用比較方法獲得測要持續(xù)到至少用比較方法獲得50個陽性個陽性樣樣本本。n并且至少用比較方法獲得并且至少用比較方法獲得50例陰性樣例陰性樣本本以以確定此種檢測方法的特異性。確定此種檢測方法的特異性。CLSI EP12-A2 User Proto

14、col for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline 1. 準確度驗證準確度驗證1）檢測已知值的檢測已知值的參考物質(zhì)參考物質(zhì) n室間質(zhì)評材料室間質(zhì)評材料 (衛(wèi)生部或者衛(wèi)生部或者CAP)n廠商提供的已賦值的參考材料廠商提供的已賦值的參考材料n分析用參考方法或決定方法定值的材料。分析用參考方法或決定方法定值的材料。2） 方法比較試驗：樣本數(shù)為方法比較試驗：樣本數(shù)為10-20個，兩種方法個，兩種方法同時測定同樣的樣品，用同時測定同樣的樣品，用KAPPA檢驗方法分析檢驗方法分析兩種方法檢測結(jié)果一致性兩種方法檢測結(jié)果

15、一致性.(比如比如HBV酶免法和發(fā)酶免法和發(fā)光法比對光法比對)選取選取4040份（份（2020份）樣本份）樣本, ,最好陰陽性各半最好陰陽性各半隨機盲法重新分號隨機盲法重新分號檢測樣本檢測樣本將所有檢測結(jié)果匯總填表將所有檢測結(jié)果匯總填表計算評價性能指標計算評價性能指標2. 精密度驗證精密度驗證1）批內(nèi)精密度批內(nèi)精密度:同一份樣本在同一批次內(nèi)平行重復檢同一份樣本在同一批次內(nèi)平行重復檢測測10次次.然后計算均值然后計算均值,SD和和CV.2）批間精密度批間精密度:同一份樣本連續(xù)檢測同一份樣本連續(xù)檢測10天天,每天平行每天平行檢測雙孔檢測雙孔.然后計算均值然后計算均值,SD和和CV. Note: N

16、ote: 用用S/COS/CO比值進行統(tǒng)計計算比值進行統(tǒng)計計算. . 最好選擇臨界值最好選擇臨界值, ,或弱陽性樣本或弱陽性樣本. .判斷標準判斷標準: :批內(nèi)批內(nèi)CVCV小于小于15%,15%,批間批間CVCV小于小于25%.25%.批內(nèi)重復性的驗證批內(nèi)重復性的驗證n高、中、低三個濃度的樣本，在一批檢測高、中、低三個濃度的樣本，在一批檢測內(nèi)，重復檢測內(nèi)，重復檢測20次（孔），計算所得次（孔），計算所得S/CO值的均值和值的均值和SD，計算批內(nèi)，計算批內(nèi)CV%。n判斷結(jié)論：應判斷結(jié)論：應試劑說明書所標明的批內(nèi)變試劑說明書所標明的批內(nèi)變異。異。ELISA的批內(nèi)變異的批內(nèi)變異CV%應應10%。批間

17、重復性批間重復性的驗證的驗證n高、中、低三個濃度的樣本，在高、中、低三個濃度的樣本，在10天以上時間天以上時間內(nèi)單次（孔或管）重復進行內(nèi)單次（孔或管）重復進行20批檢測，計算所批檢測，計算所得得S/CO值的均值和值的均值和SD，計算批間，計算批間CV%。n判斷結(jié)論：應判斷結(jié)論：應試劑說明書所標明的批間變異。試劑說明書所標明的批間變異。 ELISA的批間變異的批間變異CV%應應15%。3. 敏感性敏感性1）驗證方法）驗證方法: 取取10-20份已知真陽性的樣本，用常規(guī)檢測方法檢測，計份已知真陽性的樣本，用常規(guī)檢測方法檢測，計算檢測陽性的樣本占樣本總數(shù)的比例。算檢測陽性的樣本占樣本總數(shù)的比例。 2

18、）樣本來源）樣本來源:p臨床診斷的陽性病人血清；臨床診斷的陽性病人血清；p廠家提供的陽性對照；廠家提供的陽性對照；p決定性參考方法檢測陽性的樣本；決定性參考方法檢測陽性的樣本；以上陽性樣本來源緊張時，可以進行稀釋（如以上陽性樣本來源緊張時，可以進行稀釋（如2：3，3：4這樣稀釋）這樣稀釋） 4. 特異性特異性1）驗證方法驗證方法：選取選取20份正常健康人血清（一般取自份正常健康人血清（一般取自健康體檢者），計算其檢測陰性結(jié)果所占百分率健康體檢者），計算其檢測陰性結(jié)果所占百分率。 2）樣本來源樣本來源:體檢樣本體檢樣本,體檢者確認符合要求后即可體檢者確認符合要求后即可. NOTE:部分項目在健康

19、體檢人群中陽性率也很高部分項目在健康體檢人群中陽性率也很高,此此類項目特異性驗證很難執(zhí)行類項目特異性驗證很難執(zhí)行,建議引用廠家說明書建議引用廠家說明書. 比如麻疹病毒比如麻疹病毒IgG,CP-IgG,MP-IgG等一系列病毒抗體等一系列病毒抗體IgG.因為很難因為很難確認體檢者既往是否有過感染史確認體檢者既往是否有過感染史,而而IgG抗體在體內(nèi)存留時間長抗體在體內(nèi)存留時間長.因此很因此很難收集到真正意義上的陰性樣本難收集到真正意義上的陰性樣本.特異性驗證（干擾）特異性驗證（干擾）n特定病原體以外感染性疾病患者的樣本。特定病原體以外感染性疾病患者的樣本。n含有干擾性物質(zhì)的樣本：類風濕因子（含有干

20、擾性物質(zhì)的樣本：類風濕因子（RF）陽性、含異嗜性抗體、溶血、脂血、高膽紅陽性、含異嗜性抗體、溶血、脂血、高膽紅素樣本。素樣本。n結(jié)果判斷：非特定病原體感染患者樣本均應結(jié)果判斷：非特定病原體感染患者樣本均應為陰性。含一定濃度干擾物質(zhì)的樣本檢測應為陰性。含一定濃度干擾物質(zhì)的樣本檢測應為陰性。為陰性。5. CUT-OFFCUT-OFF重復性重復性和測定下限驗證和測定下限驗證nCUT-OFF重復性驗證：樣本濃度應重復性驗證：樣本濃度應接近接近臨臨界值界值。不宜用陰性或強陽性樣本不宜用陰性或強陽性樣本。n批內(nèi)和批間變異驗證：高、中和低三個濃度批內(nèi)和批間變異驗證：高、中和低三個濃度（與試劑盒說明書中所述相

21、適應）（與試劑盒說明書中所述相適應）臨界點臨界點的定義的定義n同樣一份樣本，在多次重復實驗中各有同樣一份樣本，在多次重復實驗中各有50%的幾率獲得陽性或陰性的結(jié)果時該的幾率獲得陽性或陰性的結(jié)果時該分析物的濃度分析物的濃度。CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline臨界點（臨界點（CUT-OFF)CUT-OFF)與試劑盒判斷值與試劑盒判斷值（CUT-OFFCUT-OFF值）的區(qū)別值）的區(qū)別n這里的這里的臨界點臨界點指的是一個處于試劑檢測臨界指的是一個處于

22、試劑檢測臨界點的點的樣本濃度樣本濃度，其一旦確定，是不變的。，其一旦確定，是不變的。n試劑盒試劑盒CUT-OFF值值指的是一個指的是一個判斷判斷某一次測某一次測定結(jié)果的由定結(jié)果的由陰性和陽性陰性和陽性對照信號值按一定公對照信號值按一定公式計算出來的式計算出來的信號值信號值，每次測定都會有所差，每次測定都會有所差異。異。(1) CUT-OFF重復性驗證重復性驗證nCUT-OFF的重復性（同時包含測定下限的重復性（同時包含測定下限 的驗證）的驗證）n批內(nèi)變異的驗證批內(nèi)變異的驗證n批間變異的驗證批間變異的驗證驗證步驟驗證步驟n制備足夠制備足夠40次重復檢測的次重復檢測的3份樣本：份樣本：分別分別為處

23、于臨界濃度、高于臨界濃度為處于臨界濃度、高于臨界濃度20%和低和低于臨界濃度于臨界濃度20%的樣的樣本本。n重復檢測樣重復檢測樣本本40次，確定每一份樣次，確定每一份樣本本結(jié)果結(jié)果為陽性和陰性的百分比。為陽性和陰性的百分比。n評價臨界濃度是否準確？評價評價臨界濃度是否準確？評價+20至至-20%的濃度范圍的濃度范圍是否是否包含于、位于或者超包含于、位于或者超出這種方法的出這種方法的95%區(qū)間區(qū)間？CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved GuidelineC50C50是

24、否準確？是否準確？ 40次測試次測試 C501陽性結(jié)果陽性結(jié)果=27/40(67.5%)2陽性結(jié)果陽性結(jié)果（14-26）/40（35%-65%） 正確正確陽性結(jié)果陽性結(jié)果重復性重復性檢測總檢測總次數(shù)次數(shù)次數(shù)次數(shù)百分比百分比真正百分比真正百分比樣本的實際樣本的實際濃度濃度201050%30%-70%C30-C70402050%35%-65%1005050%40%-60%不同不同C50C50重復檢測次數(shù)與檢出重復檢測次數(shù)與檢出陽性數(shù)的關系陽性數(shù)的關系臨界點（臨界點（CUT-OFFCUT-OFF）的重復性指的是什么？）的重復性指的是什么？n是為正在是為正在評價評價的檢測的檢測試劑或系統(tǒng)試劑或系統(tǒng)建立

25、分建立分析物的臨界濃度析物的臨界濃度(C50)，并且確保臨界，并且確保臨界濃度濃度20%的范圍處于的范圍處于95%區(qū)間內(nèi)。區(qū)間內(nèi)。CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline如何獲得系統(tǒng)或試劑的如何獲得系統(tǒng)或試劑的“臨界點臨界點”n檢測試劑或系統(tǒng)的檢測試劑或系統(tǒng)的說明書可能會注明分析說明書可能會注明分析物的臨界濃度。物的臨界濃度。n如果臨界濃度如果臨界濃度未知未知，則則可以將陽性樣本進可以將陽性樣本進行一系列稀釋，然后將他們進行重復檢測行一系列稀釋，然后

26、將他們進行重復檢測以確定能夠獲得以確定能夠獲得50%陽性和陽性和50%陰性結(jié)陰性結(jié)果的那個稀釋度。這一稀釋度的分析物濃果的那個稀釋度。這一稀釋度的分析物濃度度即為即為臨界點臨界點。CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline(2) 測定下限的驗證測定下限的驗證n處于測定下限濃度（如臨界點濃度處于測定下限濃度（如臨界點濃度+20%）的樣本，重復檢測）的樣本，重復檢測20次，次，應至少有應至少有18次以上次以上(90%)為陽性為陽性反應。反應。重復性驗證的質(zhì)

27、量控制重復性驗證的質(zhì)量控制n質(zhì)控品：如方法學比較在質(zhì)控品：如方法學比較在10天內(nèi)完成，天內(nèi)完成，則每一批次都要則每一批次都要進行質(zhì)控進行質(zhì)控樣本檢測，樣本檢測，如出現(xiàn)失控，則當次檢測結(jié)果無效。如出現(xiàn)失控，則當次檢測結(jié)果無效。安排安排重新重新檢測以替換不合格的批次。實驗室要分析檢測以替換不合格的批次。實驗室要分析失失控的控的原因。不合格批次在原因。不合格批次在10天內(nèi)天內(nèi)不應超過不應超過1次或次或20天內(nèi)不超天內(nèi)不超過兩次過兩次。如若超出，所在實驗室應中止檢測工作并咨詢試。如若超出，所在實驗室應中止檢測工作并咨詢試劑制造商以確定原因并采取糾正措施。劑制造商以確定原因并采取糾正措施。n得出得出20

28、次重復次重復檢測檢測結(jié)果。如果方法比較研究超過結(jié)果。如果方法比較研究超過20天，天，則每一批次對每份對照樣本進行單次檢測，總計也提供則每一批次對每份對照樣本進行單次檢測，總計也提供20次結(jié)果。次結(jié)果。 CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline6.其他其他（1）同一項目不同檢測方法或儀器的比對）同一項目不同檢測方法或儀器的比對 適用范圍適用范圍:一個項目有兩種以上的方法或者兩一個項目有兩種以上的方法或者兩臺以上的儀器臺以上的儀器(包括同一型號的儀器包括

29、同一型號的儀器)同時檢同時檢測測,需要進行一致性比對。需要進行一致性比對。 （注：定量檢測中（注：定量檢測中,報告單位不同的不需要比報告單位不同的不需要比對）對）首次比對選取首次比對選取40份份(20)樣本樣本,最好陰陽性各半最好陰陽性各半隨機每隨機每8份分成一組份分成一組兩種方法兩種方法(或兩臺儀器或兩臺儀器)每天平行檢測一組樣本每天平行檢測一組樣本將所有檢測結(jié)果匯總將所有檢測結(jié)果匯總Kappa檢驗檢驗,評價一致性評價一致性 新鮮患者血清陰性新鮮患者血清陰性2 2例，陽性例，陽性3 3例，陽性例，陽性包含有包含有S/COS/CO高、中、低值，用新舊批號試高、中、低值，用新舊批號試劑檢測。劑檢

30、測。 低值避開低值避開“灰區(qū)灰區(qū)” 夾心法：夾心法：S/COS/CO低值低值1.21.23 3 競爭法：競爭法：S/COS/CO低值低值0.40.40.60.6 判斷標準：符合率為判斷標準：符合率為100%100%為可接受。為可接受。（2）更換批號的簡易比對：）更換批號的簡易比對：（3）編制性能驗證的）編制性能驗證的SOP理想的操作方法：理想的操作方法：操作中影響測定結(jié)果的關鍵環(huán)節(jié)已知；操作中影響測定結(jié)果的關鍵環(huán)節(jié)已知；具有可操作性的具有可操作性的SOP。怎樣編寫怎樣編寫 SOP？XXX單位XXX實驗室XXX標準操作程序編號：啟用日期：版本：第 頁 共 頁一目的：二適用范圍：三職責或責任人：四

31、（方法原理）五（檢測設備和試劑）六（所需的環(huán)境條件）七操作步驟： 1 2 3 。 八、本操作程序變動程序：九、相關的文件十、相關的記錄表格和報告編寫人審核人批準人 （4）試劑的性能驗證）試劑的性能驗證 （定性）（定性）n重復性和準確性重復性和準確性n測定下限測定下限(Detection limit) （定性）（定性）n批內(nèi)變異批內(nèi)變異(10%)和批間變異和批間變異( 15-25%)n “鉤狀鉤狀”效應效應(Hook effect)n變異體的檢測能力變異體的檢測能力(如：如：HBsAg)n臨床敏感性和特異性臨床敏感性和特異性n抗干擾能力抗干擾能力三三. 性能驗證的注意事項性能驗證的注意事項1.方

32、法比較方法比較持續(xù)時間持續(xù)時間n1020天。CLSI EP12-A2 User Protocol for Evaluation of Qualitative Test Performance; Approved Guideline2.數(shù)據(jù)收集的檢查數(shù)據(jù)收集的檢查 n每次實驗，應立即記錄所有原始檢測數(shù)據(jù)每次實驗，應立即記錄所有原始檢測數(shù)據(jù)并復核，以早期發(fā)現(xiàn)分析系統(tǒng)及人為誤差并復核，以早期發(fā)現(xiàn)分析系統(tǒng)及人為誤差的來源。的來源。n一旦發(fā)現(xiàn)某些結(jié)果是由可解釋的誤差引起一旦發(fā)現(xiàn)某些結(jié)果是由可解釋的誤差引起的，則應將其記錄下來，同時，這些結(jié)果的，則應將其記錄下來，同時，這些結(jié)果不能用于數(shù)據(jù)分析。不能用于數(shù)據(jù)分析。n如不能確定誤差產(chǎn)生的原因，則保留原始如不能確定誤差產(chǎn)生的原因，則保留原始結(jié)果結(jié)果。3.不一致結(jié)果的處理不一致結(jié)果的處理n如果如果比較方法不是比較方法不是100%準確，可以準確，可以用用“金標準金標準”“”“參考方法參考方法”來檢測在來檢測在檢測和比較方法間產(chǎn)生差異的樣本檢測和比較方法間產(chǎn)生差異的樣本。CLSI