志賀氏菌檢驗(yàn)方法

1、志賀氏菌檢驗(yàn)方法志賀氏菌簡(jiǎn)介志賀氏菌簡(jiǎn)介 志賀氏菌檢驗(yàn)志賀氏菌檢驗(yàn) 12生物學(xué)性狀 志賀氏菌為革蘭氏陰性桿菌，菌體短小，長(zhǎng)約2-3 m ,寬0.5-0.7 m。不形成芽胞，無莢膜，無鞭毛，有菌毛 。為兼性厭氧菌，在有氧和無氧條件下均能生長(zhǎng)；最適生長(zhǎng)溫度為 36，最適ph為7.27.4；36培養(yǎng)18-24小時(shí)后菌落呈圓形、微凸、光滑濕潤(rùn)、無色、半透明、邊緣整齊，直徑約2mm，宋內(nèi)氏菌菌落一般較大，較不透明，并常出現(xiàn)扁平的粗糙型菌落。在液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長(zhǎng)，無菌膜形成。 致病因素 志賀氏菌的致病因素包括侵襲力、內(nèi)毒素，外毒素。志賀氏菌的菌毛能粘附于回腸末端和結(jié)腸粘膜的上皮細(xì)胞表面，繼而在侵襲

2、蛋白作用下穿入上皮細(xì)胞內(nèi)，一般在粘膜固有層繁殖形成感染灶。各型痢疾桿菌都具有強(qiáng)烈的內(nèi)毒素。志賀氏菌a群型及部分ii型菌株還可產(chǎn)生外毒素，稱志賀氏毒素。 志賀氏菌屬（shigella）是人類細(xì)菌性痢疾最為常見的病原菌。細(xì)菌性痢疾是最常見的腸道傳染病,夏秋兩季患者最多。 可經(jīng)由食物，水，日常接觸，蒼蠅等傳播。抵抗力抵抗力 志賀氏菌屬在外界環(huán)境中的生存力，對(duì)理化因素的抵抗力較其他腸道桿菌為弱，對(duì)酸敏感 。 一般在潮濕土壤中能存活34天，37水中存活20天，在糞便內(nèi)（室溫）存活11天。日光直接照射30分鐘，56-6010分即被殺死，對(duì)高溫和化學(xué)消毒劑很敏感，1%石炭酸中15-30分鐘即被殺死，對(duì)氯霉素

3、、磺胺類、鏈霉素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。志賀氏菌檢驗(yàn)流程圖36 ，6 h8 h41.5 ， 16 h20 h厭氧培養(yǎng)xld瓊脂mac瓊脂或志賀氏菌顯色培養(yǎng)基36 ，20 h48 h挑取可疑菌落tsi，葡萄糖半固體， 營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面血清學(xué)分型生化鑒定志賀氏菌屬分群及分型結(jié)果報(bào)告 檢樣 25 g（或25 ml）樣品+ 志賀氏菌增菌肉湯225 ml 檢樣25 g（或25 ml）樣品+gn增菌液225 mlxld瓊脂平板志賀氏菌志賀氏菌沙門氏菌沙門氏菌菌落呈粉紅色，帶或不帶黑色中心，有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心，或呈現(xiàn)全部黑色的菌落；有些菌株為黃色菌落，帶或不帶黑色中心。 粉紅色至無色，半透明、光滑

4、、濕潤(rùn)、圓形、邊緣整齊或不齊，直徑1 mm2 mm。 麥康凱瓊脂平板麥康凱瓊脂平板無色至淺粉紅色，半透明、光滑、濕潤(rùn)、圓形、邊緣整齊或不齊，直徑2 mm3 mm。 培養(yǎng)物中出現(xiàn)下述情況之一者即可棄去： a）在三糖鐵瓊脂斜面上呈蔓延生長(zhǎng)； b）發(fā)酵乳糖或蔗糖的； c）不分解葡萄糖和只生長(zhǎng)在半固體表面的； d）產(chǎn)氣的（福氏志賀氏菌6型可產(chǎn)生少量氣體）； e）產(chǎn)生硫化氫的； f）有動(dòng)力的培養(yǎng)物 2志賀氏菌 3沙門氏菌 4大腸桿菌 血清學(xué)分型血清學(xué)分型 凡疑為志賀氏菌，挑取營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面上的培養(yǎng)物，做玻片凝集試驗(yàn)。 先用4種志賀氏菌多價(jià)血清檢查，如果由于k抗原的存在而不出現(xiàn)凝集，應(yīng)將菌液煮沸后再檢查； 如果呈現(xiàn)凝集，則用a1、a2、b群多價(jià)和d群血清分別試驗(yàn)。如系b群福氏志賀氏菌，則用群和型因子血清分別檢查。福氏志賀氏菌各型和亞型的型和群抗原見附表。可先用群因子血清檢查，再根據(jù)群因子血清出現(xiàn)凝集的結(jié)果，依次選用型因子血清檢查。 4種志賀氏菌多價(jià)血清不凝集的菌株，可用鮑氏多價(jià)1、2、3分別檢查，并進(jìn)一步用115各型因子血清檢查。如果鮑氏多價(jià)血清不凝集，可用痢疾志賀氏菌312型多價(jià)血清及各型因子血清檢查。進(jìn)一