檢測(cè)方法驗(yàn)證和確認(rèn)程序

1、內(nèi)部文件標(biāo)題：SOP-QC-025-00檢測(cè)方法驗(yàn)證和確認(rèn)程序培訓(xùn)講義1 目的 PURPOSE本規(guī)程規(guī)定了XXXXXXX藥業(yè)有限公司檢測(cè)方法驗(yàn)證和確認(rèn)程序、格式和要求。2 范圍 SCOPE2.1 本規(guī)程適用于XXXXXXXX藥業(yè)有限公司QC實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)方法的確認(rèn)。2.2 本規(guī)程適用于美國(guó)藥典/國(guó)家處方集、歐洲藥典或其它藥典中記載的檢測(cè)方法，和來(lái)自于公司內(nèi)部或外部的已經(jīng)驗(yàn)證的檢測(cè)方法。2.3 本規(guī)程注重在鑒別、純度和含量的檢測(cè)方法。2.4 本規(guī)程將作為2.3提及的檢測(cè)方法驗(yàn)證的常規(guī)指引，也適用于最常用的檢測(cè)方法的驗(yàn)證，如：2.4.1 鑒別測(cè)試2.4.2 有關(guān)物質(zhì)和降解產(chǎn)物的含量的定量測(cè)試。2.4

2、.3 控制有關(guān)物質(zhì)和降解產(chǎn)物的限度測(cè)試。2.4.4 原料藥、起始物料、中間體及其他物料的含量測(cè)定。2.5 微生物和生物檢測(cè)方法不在本規(guī)程范圍內(nèi)。3 參考 REFERENCE3.1 ICH Q2(R1)分析方法驗(yàn)證的文本及方法學(xué)3.2 現(xiàn)行美國(guó)藥典<1225>藥典方法的驗(yàn)證3.3 現(xiàn)行美國(guó)藥典<1226>藥典方法的確認(rèn)3.4 ICHQ7原料藥的良好質(zhì)量管理規(guī)范（2000年11月）3.5 FDA行業(yè)指南“分析方法和方法驗(yàn)證”（2000年8月）4 職責(zé) RESPONSIBILITIES4.1 QC負(fù)責(zé)人或指定人員負(fù)責(zé)參與本規(guī)程的起草、審閱、修訂和更新。4.2 QA負(fù)責(zé)人或指定

3、人員負(fù)責(zé)本規(guī)程的審核和保證其被正確地、準(zhǔn)確地執(zhí)行。4.3 QC負(fù)責(zé)市售產(chǎn)品的檢測(cè)方法驗(yàn)證，確認(rèn)這些方法在實(shí)際條件下適用于本實(shí)驗(yàn)室的測(cè)試。4.4 QC負(fù)責(zé)人或指定人員負(fù)責(zé)審核確認(rèn)方案和確認(rèn)報(bào)告4.5 QC負(fù)責(zé)正確地記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。4.6 QC負(fù)責(zé)歸納數(shù)據(jù)、撰寫報(bào)告并遞交給QC負(fù)責(zé)人或指定人員審閱。4.7 QC、QA負(fù)責(zé)人或其指定人員負(fù)責(zé)審核并審計(jì)所有實(shí)驗(yàn)室相關(guān)文件及規(guī)程以確保其準(zhǔn)確和有效。4.8 質(zhì)量部負(fù)責(zé)批準(zhǔn)本規(guī)程及驗(yàn)證、確認(rèn)方案和驗(yàn)證、確認(rèn)報(bào)告。5 定義 DEFINITION5.1 檢測(cè)方法使用者使用檢測(cè)方法的部門、實(shí)驗(yàn)室或人員。5.2 系統(tǒng)適用性它是用來(lái)驗(yàn)證系統(tǒng)能滿足預(yù)期分析的測(cè)試。當(dāng)適用時(shí)

4、，系統(tǒng)適用性應(yīng)在方法用于檢測(cè)或分析樣品之前執(zhí)行。指定的數(shù)據(jù)，比如響應(yīng)值和保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）、拖尾因子、分離度和理論塔板等，將從重復(fù)進(jìn)樣得到。5.3 檢測(cè)方法指進(jìn)行檢測(cè)的方式，應(yīng)詳細(xì)描述進(jìn)行每個(gè)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)所必需的步驟。它可以包括：試劑、對(duì)照品及樣品溶液的配制，儀器的參數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制、計(jì)算公式的運(yùn)用、可接受標(biāo)準(zhǔn)等。5.4 檢測(cè)方法驗(yàn)證為了證明所使用的檢測(cè)方法（新的或改進(jìn)過(guò)的）與其預(yù)期目的相適應(yīng)而進(jìn)行的一系列實(shí)驗(yàn)。5.5 對(duì)照品和樣品溶液穩(wěn)定性用來(lái)評(píng)價(jià)對(duì)照品和供試品的穩(wěn)定性而進(jìn)行的檢測(cè)。5.6 原料藥任何用于藥品生產(chǎn)的物質(zhì)或混合物，并在藥品生產(chǎn)的過(guò)程中成為藥物的活性成分。這類物質(zhì)提供

5、藥物活性或其他的直接效應(yīng)應(yīng)用于診斷、治療、緩和、處理或預(yù)防疾病、或影響身體的機(jī)結(jié)構(gòu)或功能。5.7 鑒別測(cè)試鑒別試驗(yàn)旨在確認(rèn)樣品中的一種被測(cè)物的特性。通常將樣品的性質(zhì)（如光譜、色譜行為、化學(xué)反應(yīng)等）與參比對(duì)照品的性質(zhì)進(jìn)行比對(duì)。5.8 雜質(zhì)檢查指樣品中雜貨的定量檢測(cè)或限度檢測(cè)，兩種檢測(cè)均是為了準(zhǔn)確反映樣品的純度。定量試驗(yàn)所需驗(yàn)證的項(xiàng)目與限度試驗(yàn)相比是不同的。5.9 含量測(cè)定指測(cè)定樣品中被分析物的含量。5.10 專屬性指在可能存在某些干擾組分（如雜質(zhì)、降解物、基質(zhì)等）時(shí)，對(duì)被分析物準(zhǔn)確可靠測(cè)定的能力。5.11 精密度指在規(guī)定條件下對(duì)均質(zhì)樣品多次取樣進(jìn)行一系列檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果的接近程度（離散程度）。5.

6、12 重復(fù)性指在同樣的操作條件下，較短時(shí)間間隔內(nèi)的精密度。5.13 中間精密度指實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部條件改變，如：不同日期、不同分析者、不同儀器等情況下的精密度。5.14 重現(xiàn)性指不同實(shí)驗(yàn)室之間的精密度（合作研究，通常用于方法學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)化）。5.15 檢測(cè)限（LOD）指樣品中的被分析物能夠被檢測(cè)到的最低量，但不必要準(zhǔn)確定量。5.16 定量限（LOQ）指在適當(dāng)?shù)臏?zhǔn)確性和精密度下，能夠定量測(cè)定的樣品中被分析物的最低量。5.17 線性指在給定的范圍內(nèi)檢測(cè)結(jié)果與樣品中被分析物的濃度（量）成比例關(guān)系的能力。5.18 準(zhǔn)確度指真實(shí)值或認(rèn)可的參考值與測(cè)量值之間的相近程度。準(zhǔn)確度有時(shí)也稱真實(shí)度。5.19 范圍指樣品中被分

7、析物的濃度（量）上限和濃度（量）下限之間的一個(gè)區(qū)間，并已證實(shí)在此區(qū)間內(nèi)，該檢測(cè)方法具有適當(dāng)?shù)木芏?、?zhǔn)確性和線性。5.20 耐用性指在實(shí)驗(yàn)參數(shù)被故意地發(fā)生細(xì)小改變時(shí)，檢測(cè)不受影響的能力，用以說(shuō)明所驗(yàn)證的方法在正常使用時(shí)的可靠性。5.21 加標(biāo)向標(biāo)準(zhǔn)品、樣品或空白劑中加入已知量的已知物質(zhì)，用于確定檢測(cè)方法的性能或進(jìn)行儀器的校驗(yàn)。5.22 響應(yīng)因子分析物產(chǎn)生的信號(hào)與產(chǎn)生該信號(hào)的分析物的量的比值。5.23 可接受標(biāo)準(zhǔn)測(cè)試結(jié)果可接受的數(shù)值限度、范圍或其它合適的度量標(biāo)準(zhǔn)。5.24 相關(guān)系數(shù)（R）研究變量之間線性相關(guān)程度的量。5.25 信噪比（S/N）5.26 糾正與預(yù)防措施（CAPA）6 程序 RROC

8、EDURE6.1 檢測(cè)方法使用者應(yīng)該經(jīng)過(guò)培訓(xùn)，具有相應(yīng)的經(jīng)驗(yàn)和知識(shí)，以理解檢測(cè)方法并能夠執(zhí)行它。確認(rèn)應(yīng)當(dāng)由使用者執(zhí)行，其結(jié)果將為檢測(cè)方法能像預(yù)期的那樣地執(zhí)行增加信心。6.2 檢測(cè)方法確認(rèn)和驗(yàn)證的目的是說(shuō)明該方法適用于其擬定用途，它包括試驗(yàn)過(guò)程中計(jì)劃的、系統(tǒng)的和記錄的數(shù)據(jù)，以證明方法能滿足其擬定分析用途的要求。6.2.1 于藥典檢測(cè)方法，如果確認(rèn)不成功，并且經(jīng)藥典人員的協(xié)助也未能解決問(wèn)題，則可斷定此方法不適合在該實(shí)驗(yàn)室用于該樣品。然后，可能有必要按照藥典或相關(guān)法規(guī)開(kāi)發(fā)和驗(yàn)證一個(gè)替代的方法。6.2.2 確認(rèn)的要求應(yīng)該基于方法的復(fù)雜性和應(yīng)用此法的物質(zhì)的復(fù)雜性兩方面來(lái)進(jìn)行的評(píng)估。只有那些適合特定方法的

9、確認(rèn)特性才需要做評(píng)估。確認(rèn)程序的程度與層次取決于使用者的培訓(xùn)經(jīng)歷及經(jīng)驗(yàn)水平、方法種類和與其相關(guān)的設(shè)備/儀器、具體的方法步驟、和/或被測(cè)的物質(zhì)。6.2.3 除非有跡象表明基本藥典方法不適合檢測(cè)該樣品，日常執(zhí)行的基本藥典檢測(cè)方法無(wú)需確認(rèn)?；舅幍錂z測(cè)方法的例子包括但不限于，干燥失重、熾灼殘?jiān)?、多種濕化學(xué)方法比如酸度、簡(jiǎn)單儀器方法比如pH值測(cè)定等。6.2.4 檢測(cè)方法驗(yàn)證的進(jìn)行程度應(yīng)能反映檢測(cè)的目的和生產(chǎn)工藝所處的階段。6.2.5 非藥典檢測(cè)方法的建立和現(xiàn)行方法的改變必須進(jìn)行驗(yàn)證。6.2.6 SOP-QC-025/A01顯示了檢測(cè)方法驗(yàn)證的流程。6.3 在檢測(cè)臨床試驗(yàn)批次的樣品時(shí)，雖然檢測(cè)方法可能尚

10、未驗(yàn)證，但檢測(cè)方法須具有科學(xué)性。并應(yīng)顯示檢測(cè)方法的適用性。6.3.1 應(yīng)提供驗(yàn)證結(jié)果的表格概要（例如：專屬性、線性、范圍、準(zhǔn)確度、精密度、LOD和LOQ的結(jié)果或數(shù)值）。6.3.2 此時(shí)不需要提供完整的驗(yàn)證報(bào)告，可在放行檢測(cè)同時(shí)進(jìn)行分析方法驗(yàn)證。6.4 檢測(cè)方法確認(rèn)和驗(yàn)證方案6.4.1 在確認(rèn)或驗(yàn)證工作開(kāi)展前需有已經(jīng)批準(zhǔn)的確認(rèn)或驗(yàn)證方案。方案內(nèi)容應(yīng)包括但不限于下列項(xiàng)目：6.4.1.1 目的 PURPOSE應(yīng)包括：背景介紹和方法描述。6.4.1.2 范圍 SCOPE6.4.1.3 參考 REFERENE6.4.1.4 職責(zé) RESPONSIBILITIES6.4.1.5 定義 DEFINITION

11、6.4.1.6 方法學(xué)METHODOLOGY程序部分應(yīng)列出確認(rèn)特性。6.4.1.7 偏差 DEVIATION6.4.1.8 附件 ATTACHMENTS6.4.1.9 修訂歷史 DOCUMENT REVISE HISTORY6.4.2 確認(rèn)和驗(yàn)證中所有的原始記錄和得到的結(jié)果必須記錄在執(zhí)行方案或已編號(hào)的檢測(cè)記錄本上，以方便與其它文件的相互查詢。6.4.3 確認(rèn)和驗(yàn)證過(guò)程中若有偏差，需按偏差處理相關(guān)規(guī)程和調(diào)查方法相關(guān)規(guī)程執(zhí)行。6.4.4 檢測(cè)方法根據(jù)變化需決定是否要進(jìn)行再次驗(yàn)證，再次驗(yàn)證也需依據(jù)本SOP執(zhí)行，包括方案和報(bào)告的批準(zhǔn)。下列變化情況需進(jìn)行再次驗(yàn)證：6.4.4.1 相關(guān)指南變化，例如：IC

12、H或藥典6.4.4.2 原料藥的合成工藝變化6.4.4.3 檢測(cè)方法和/或設(shè)備變化6.5 檢測(cè)方法確認(rèn)和驗(yàn)證報(bào)告Test Method Validation and verification Report6.5.1 確認(rèn)和驗(yàn)證方案完成后必須準(zhǔn)備相應(yīng)的方法確認(rèn)和驗(yàn)證報(bào)告，并由質(zhì)量部批準(zhǔn)生效。6.5.2 推薦的方法驗(yàn)證報(bào)告中可以包括下列內(nèi)容：6.5.2.1 總結(jié) SUMMARY OF RESULTS6.5.2.2 目的 PURPOSE6.5.2.3 范圍 SCOPE6.5.2.4 物料和設(shè)備 MATERIAL ANDEQUIPMENT6.5.2.5 方法METHOD6.5.2.6 結(jié)果和討論RES

13、ULTSAND DISCUSSIONS結(jié)果部分應(yīng)包括驗(yàn)證項(xiàng)目、可接受標(biāo)準(zhǔn)和結(jié)果等。6.5.2.7 偏差 DEVIATION任何偏差均應(yīng)進(jìn)行調(diào)查和報(bào)告。6.5.2.8 結(jié)論 CONCLUSTION6.5.2.9 建議 RECOMMENDATIONS6.5.2.10 參考 REFERENCE6.5.2.11 附件 ATTACHMENTS可以包括所有參與人員的資格或培訓(xùn)記錄、儀器校驗(yàn)證書(shū)、試劑檢驗(yàn)報(bào)告單、實(shí)驗(yàn)記錄，原始數(shù)據(jù)、圖譜和結(jié)果的一覽表等。6.5.2.12 修訂歷史 DOCUMENT REVISE HISTORY6.6 檢驗(yàn)方法確認(rèn)需確認(rèn)的特性通常所要求的確認(rèn)特性包括但不限于下表中提及的。表1

14、：進(jìn)行檢測(cè)方法確認(rèn)要求確認(rèn)的特性特性Characteristics分析方法的類型Type of analytical procedures鑒別Identification雜質(zhì)檢測(cè)Testing for impurities含量分析Assay定量檢測(cè)Quantitative test限度檢測(cè)Limit test含量/效價(jià)Content/Potency準(zhǔn)確度Accuracy-專屬性Specificity +-重復(fù)性Repeatability-+中間精密度Intermediate precision-+-+檢測(cè)限LOD+-+-定量限LOQ-系統(tǒng)適用性System suitability-注：-表明通

15、常不需評(píng)估的特性+表明通常需評(píng)估的特性缺乏該項(xiàng)目的分析方法，應(yīng)由其他分析方法來(lái)補(bǔ)充表明有些情況下需要6.7 檢測(cè)方法驗(yàn)證需驗(yàn)證的特性6.7.1 驗(yàn)證的程度取決于相應(yīng)的驗(yàn)證方案中規(guī)定的檢測(cè)的性質(zhì)及其用途。6.7.2 檢測(cè)方法驗(yàn)證常用的驗(yàn)證特性包括但不限于表2內(nèi)容。表2：檢測(cè)方法驗(yàn)證所需的驗(yàn)證特性特性Characteristics檢測(cè)方法類型Type of test methods鑒別Identification有關(guān)物質(zhì)和降解物測(cè)試Testing for related compounds and degradants含量（僅限測(cè)試）·Assay (measurement only)定量

16、測(cè)試Quantitative test限度測(cè)試Limit tests專屬性Specificity+線性Linearity-+-+范圍Range-+-+準(zhǔn)確度Accuracy-+-+精密度Precision重復(fù)性Repeatability-+-+中間精密度Intermediate precision-+-+重現(xiàn)性Reproducibility-檢測(cè)限LOD-+-定量限LOQ-+-耐用性Robustness-+-+系統(tǒng)適用性（如有）Systems Suitability (if any)+注：-表示該特性通常不需評(píng)估+表示該特性通常需評(píng)估當(dāng)一種檢測(cè)方法不能滿足專屬性的要求時(shí)，可由其他輔助檢測(cè)方法作

17、補(bǔ)充。如果已經(jīng)評(píng)價(jià)了重現(xiàn)性，就不需要再評(píng)價(jià)中間精密度?；跈z測(cè)的性質(zhì)可能需要。依據(jù)所研究方法的類型，在開(kāi)發(fā)階段考慮評(píng)估耐用性。下述6.86.17對(duì)具體驗(yàn)證特性進(jìn)行逐個(gè)描述，以對(duì)每一種檢測(cè)方法的各種驗(yàn)證特性提供指導(dǎo)和/或建議。6.8 專屬性用于證明專屬性的方式取決與檢測(cè)方法的預(yù)期目的。一般一種檢測(cè)方法不太可能對(duì)某一特定的被分析物具有專屬性（完全辨別）。在這種情況下，推薦使用兩種或多種檢測(cè)方法的組合以達(dá)到所需的辨別程度。6.8.1 鑒別的專屬性試驗(yàn)6.8.1.1 合適的鑒別測(cè)試應(yīng)能區(qū)別出可能存在的結(jié)構(gòu)相似的化合物。6.8.1.2 通過(guò)對(duì)從含有被分析物的樣品中得到的正結(jié)果（可以通過(guò)與已知參比物比較）

18、，和對(duì)不含被分析物的樣品中得到的負(fù)結(jié)果來(lái)證明方法的分辨能力。6.8.1.3 對(duì)與分析物結(jié)構(gòu)相似或相近的物質(zhì)進(jìn)行鑒別試驗(yàn)，證明沒(méi)有得到正響應(yīng)。6.8.2 含量和雜質(zhì)檢查的專屬性試驗(yàn)6.8.2.1 可獲得的有關(guān)物質(zhì)和降解物l 對(duì)含量測(cè)定來(lái)說(shuō)，專屬性應(yīng)能辨別被分析物與有關(guān)物質(zhì)和降解產(chǎn)物。實(shí)際操作中可以在純物質(zhì)中加入適當(dāng)量的有關(guān)物質(zhì)和降解物，與未加有關(guān)物質(zhì)和降解物的樣品測(cè)定結(jié)果相比較，以證明其含量測(cè)定結(jié)果不受這些物質(zhì)的影響。l 對(duì)有關(guān)物質(zhì)測(cè)試，可以向原料藥中加入含有適當(dāng)量的有關(guān)物質(zhì)，通過(guò)證明這些有關(guān)物質(zhì)之間能相互分離，并也能與樣品基質(zhì)中其他組分分離，以此來(lái)證明測(cè)試方法的辨別能力。6.8.2.2 無(wú)法獲

19、得的有關(guān)物質(zhì)和降解物l 如果有關(guān)物質(zhì)或降解物的對(duì)照品不能得到，專屬性可以通過(guò)將含一定量的有關(guān)物質(zhì)或降解產(chǎn)物的樣品測(cè)定結(jié)果與另一種成熟的方法測(cè)定結(jié)果比較，例如與藥典方法或已經(jīng)驗(yàn)證的其他方法（獨(dú)立的方法）進(jìn)行比較。必要時(shí)，應(yīng)包括對(duì)強(qiáng)力破壞試驗(yàn)條件下（即光、熱、濕度、酸/堿破壞及氧化條件下）獲得的樣品的測(cè)定。l 對(duì)于含量，需要比較兩種方法的結(jié)果；對(duì)于雜質(zhì)檢查，需要比較雜質(zhì)的概況。l 峰的純度試驗(yàn)對(duì)顯示被測(cè)物色譜峰是單個(gè)還是多個(gè)成分是很有用的（如二極管陣列）。6.8.2.3 對(duì)色譜方法，應(yīng)用典型的色譜圖來(lái)證明專屬性，并在圖上恰當(dāng)?shù)貥?biāo)出每一種成分。其他分離技術(shù)也應(yīng)有類似的考慮。6.8.2.4 在色譜方法

20、中，應(yīng)在一定程度上考察臨界分離。對(duì)臨界分離，可用兩個(gè)洗脫程度最接近的化合物的分離度來(lái)證明其專屬性。6.9 線性 Linearity測(cè)試線性的目的是為了證明整個(gè)分析系統(tǒng)（包括檢測(cè)器和數(shù)據(jù)采集）有線性的響應(yīng)和/或在相應(yīng)的分析物濃度范圍內(nèi)直接成正比。6.9.1 線性關(guān)系是在檢測(cè)方法的范圍內(nèi)（見(jiàn)第6.10節(jié)）對(duì)方法進(jìn)行評(píng)價(jià)?？捎盟ㄗh的檢測(cè)方法，直接對(duì)原料藥（用標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液稀釋）進(jìn)行測(cè)定，以證明其線性。對(duì)于低濃度的溶液，可通過(guò)稀釋儲(chǔ)備液配制。6.9.2 線性應(yīng)通過(guò)目測(cè)一組信號(hào)與被分析物的濃度或含量做圖的關(guān)系來(lái)評(píng)價(jià)。6.9.2.1 如果有線性關(guān)系，可用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)方法對(duì)測(cè)試結(jié)果進(jìn)行評(píng)估，如用最小二乘法計(jì)算

21、回歸線。6.9.2.2 由線性回歸估算所測(cè)得的數(shù)據(jù)本身有助于數(shù)學(xué)評(píng)價(jià)線性的程度。6.9.2.3 一些檢測(cè)方法無(wú)論經(jīng)過(guò)何種轉(zhuǎn)換都不顯示線性。在這種情況下，分析的響應(yīng)值應(yīng)用樣品中被分析物的濃度（含量）的適當(dāng)函數(shù)來(lái)表示。6.9.3 應(yīng)提交回歸線的相關(guān)系數(shù)、y軸上的截距、回歸線的斜率。還應(yīng)提交數(shù)據(jù)圖表。也可包括其他的統(tǒng)計(jì)參數(shù)。另外，分析真值與回歸線的偏差也有助于對(duì)線性作評(píng)價(jià)。6.9.4 為建立線性，建議至少用5個(gè)濃度。若用其他方法則應(yīng)證明其合理性。6.10 范圍6.10.1 特定的范圍一般是從線性研究中得到的，并由檢測(cè)方法期望的應(yīng)用目 的決定。6.10.2 范圍是通過(guò)檢測(cè)方法在指定的范圍內(nèi)或在范圍的極

22、限時(shí)都達(dá)到可接受程度的準(zhǔn)確性、精密度來(lái)建立的。6.10.3 應(yīng)考慮如下的最小規(guī)定范圍：6.10.3.1 對(duì)原料藥的含量測(cè)定：通常至少應(yīng)涵蓋測(cè)試濃度的80%120%內(nèi)；6.10.3.2 對(duì)于有關(guān)物質(zhì)測(cè)定：應(yīng)至少涵蓋有關(guān)物質(zhì)的報(bào)告限至標(biāo)準(zhǔn)的120%。6.10.3.3 對(duì)已知有異常功效的、有毒的或有意外藥理作用的有關(guān)物質(zhì)，其檢測(cè)限和定量限應(yīng)與該有關(guān)物質(zhì)必須被控制的水平相對(duì)應(yīng)。在研制階段進(jìn)行雜質(zhì)檢查方法驗(yàn)證時(shí)，有必要根據(jù)建議（可能）的限度來(lái)考慮范圍。6.10.3.4 如果用一個(gè)實(shí)驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行含量測(cè)定和純度檢查，且僅使用100%的標(biāo)準(zhǔn)，線性范圍應(yīng)至少涵蓋從雜質(zhì)的報(bào)告水平至含量標(biāo)準(zhǔn)的120%。6.11 準(zhǔn)確

23、度 應(yīng)在檢測(cè)方法規(guī)定的范圍內(nèi)建立準(zhǔn)確度。6.11.1 原料藥含量 Drug Substance Assay有多種方法可用于測(cè)定準(zhǔn)確度：6.11.1.1 用該檢測(cè)方法去測(cè)定已知純度的被分析物（例如：標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）；6.11.1.2 將建議采用的檢測(cè)方法的結(jié)果與另一種成熟的、準(zhǔn)確度已經(jīng)確定和/或定義了的檢測(cè)方法（獨(dú)立的方法）的結(jié)果相比較；6.11.1.3 準(zhǔn)確度可以在精密度、線性和專屬性建立后，推論而得。6.11.2 有關(guān)物質(zhì)（定量） 6.11.2.1 準(zhǔn)確度應(yīng)通過(guò)分析加入了已知量有關(guān)物質(zhì)的樣品的方式來(lái)評(píng)價(jià)。6.11.2.2 在不能獲得某種有關(guān)物質(zhì)和（或）降解產(chǎn)物的樣品情況下，可以考慮與另一種獨(dú)立的方

24、法測(cè)得的結(jié)果相比較。6.11.2.3 應(yīng)明確單個(gè)或總的有關(guān)物質(zhì)是如何測(cè)定，例如：在任何情況下，可用與主要被分析物所占的重量百分比或面積百分比。6.11.3 建議的數(shù)據(jù)6.11.3.1 準(zhǔn)確度的評(píng)價(jià)應(yīng)至少涵蓋所規(guī)定的線性范圍的3種濃度水平的、不少于9次的測(cè)定（例如：按完整檢測(cè)步驟對(duì)3種濃度分別測(cè)定3次）。6.11.3.2 加入已知量的原料藥或有關(guān)物質(zhì)：回收率應(yīng)報(bào)告百分回收率（與已知加入量的結(jié)果進(jìn)行比較）。6.11.3.3 用檢測(cè)方法分析已知純度的樣品（標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)）：回收率應(yīng)報(bào)告測(cè)得的平均值與可接受的真實(shí)值之間的差異及其置信區(qū)間。6.11.3.4 將檢測(cè)方法與另一種已良好定性的方法（參照方法）進(jìn)行比

25、較：回收率應(yīng)報(bào)告測(cè)得的平均值與用參照方法測(cè)得的結(jié)果之間的差異及其置信區(qū)間。6.12 精密度 Precision精密度包括重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。6.12.1 重復(fù)性Repeatability6.12.1.1 至少測(cè)試6份100%濃度的樣品溶液或9份覆蓋方法規(guī)定范圍的樣品溶液。6.12.1.2 推薦使用真實(shí)樣品，并對(duì)每個(gè)重復(fù)分析進(jìn)行完全的測(cè)試。6.12.1.3 可用有代表性的樣品進(jìn)行含量的重復(fù)性測(cè)試。6.12.1.4 如果是有關(guān)物質(zhì)測(cè)試，僅在無(wú)法得到含某種有關(guān)物質(zhì)的樣品時(shí)可向樣品中加入有關(guān)物質(zhì)?；蛘?，可使用強(qiáng)制降解樣品或未加樣的原料藥樣品。6.12.2 中間精密度6.12.2.1 應(yīng)確定隨機(jī)

26、事件對(duì)檢測(cè)方法精密度的影響。6.12.2.2 影響因素通常指不同的日期、不同的分析員、不同的設(shè)備等，這些因素不需要進(jìn)行單獨(dú)的評(píng)估。6.12.2.3 中間精密度可在影響因素變化時(shí)重復(fù)測(cè)試得到。6.12.2.4 不需要單獨(dú)考慮這些影響。（例如：可通過(guò)2名分析員在不同的日期或用不同的設(shè)備重復(fù)重復(fù)性或線性或準(zhǔn)確度試驗(yàn)，以得到精密度）。6.12.3 重現(xiàn)性 重現(xiàn)性通過(guò)在不同實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行測(cè)試的平均值進(jìn)行評(píng)估。6.12.4 建議的數(shù)據(jù)在研究每一種精密度時(shí)，都應(yīng)報(bào)告標(biāo)準(zhǔn)偏差、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（變異系數(shù)）和置信區(qū)間。6.13 檢測(cè)限和定量限6.13.1 檢測(cè)限的測(cè)定是通過(guò)對(duì)一系列已知濃度分析物的樣品進(jìn)行分析，并以能

27、可靠地測(cè)得被分析物的最小量來(lái)建立。6.13.2 定量限的測(cè)定一般通過(guò)對(duì)一系列含有已知濃度被分析物的樣品分析，在準(zhǔn)確度和精密度都符合要求的情況下，來(lái)確定被分析物能被定量測(cè)得的最小量。6.13.3 根據(jù)信噪比（S/N）測(cè)定6.13.3.1 該方法僅適用于出現(xiàn)基線噪音的檢測(cè)方法，例如色譜法。6.13.3.2 信噪比的測(cè)定是通過(guò)比較含有已知低濃度被分析物的樣品與空白樣品的測(cè)定信號(hào)，來(lái)建立檢測(cè)限和定量限。6.13.3.3 對(duì)于估計(jì)LOD，信噪比在3：1或2：1之間通常是可接受的；對(duì)于估計(jì)LOQ，典型的信噪比為10：1。6.13.4 根據(jù)響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差和斜率6.13.4.1 該方法適用于滴定、紫外和原子吸

28、收光譜法等。6.13.4.2 檢測(cè)限和定量限判定方法如下：LOD =3.3/SLOQ =10/S以上公式中，是響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差，S是校正曲線的斜率。斜率S可從被分析物的校正曲線來(lái)估算，的值可用下面的方法估算：a) 基于空白的標(biāo)準(zhǔn)差，通過(guò)分析適當(dāng)數(shù)量的空白樣品，然后計(jì)算其響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差，測(cè)出分析背景響應(yīng)值的大小。b) 基于校正曲線，研究含有檢測(cè)限或定量限范圍內(nèi)的被分析物的樣品以得到特定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸線的剩余標(biāo)準(zhǔn)差或回歸線的y軸截距標(biāo)準(zhǔn)偏差都可作為標(biāo)準(zhǔn)偏差。6.13.5 建議的數(shù)據(jù)6.13.5.1 必須提供檢測(cè)限/定量限和測(cè)定檢測(cè)限/定量限的方法。6.13.5.2 如果檢測(cè)限是根據(jù)信噪比得來(lái)的，應(yīng)

29、提供相關(guān)的色譜圖作為證明。6.13.5.3 如果是通過(guò)計(jì)算或外推法得到檢測(cè)限的估算值，可對(duì)一系列接近或等于檢測(cè)限度樣品的逐個(gè)檢測(cè)來(lái)論證這一估算值。6.13.5.4 可通過(guò)分析適當(dāng)數(shù)量，已知濃度的接近或等于定量限的樣品來(lái)證明定量限。6.14 耐用性 需測(cè)試此參數(shù)的方法包括含量和純度。6.14.1 依據(jù)所研究的檢測(cè)方法的類型，應(yīng)在開(kāi)發(fā)檢測(cè)方法階段評(píng)估耐用性。6.14.1.1 與所描述的方法比較，以一系列變動(dòng)的條件來(lái)分析相應(yīng)的溶液進(jìn)行評(píng)估。6.14.1.2 通過(guò)分析一系列被處理過(guò)的試液來(lái)評(píng)估。6.14.2 耐用性評(píng)估的結(jié)果應(yīng)是建立一系列的系統(tǒng)適用性參數(shù)（如分離度試驗(yàn)），以確保在任何時(shí)候使用該檢測(cè)方法

30、都是有效的。6.14.3 應(yīng)展示典型的圖譜。6.14.4 對(duì)于液相色譜，典型的變量是流動(dòng)相的pH、溫度和流速、流動(dòng)相的組成、不同批號(hào)或不同供應(yīng)商的色譜柱等。6.14.5 對(duì)于氣相色譜，典型的變量是不同批號(hào)或不同供應(yīng)商的色譜柱、溫度和流速。6.14.6 如果樣品制備時(shí)需過(guò)濾，應(yīng)證明過(guò)濾前后樣品的一致性。6.14.7 如果樣品需要超聲和/或混合時(shí)，應(yīng)評(píng)估樣品制備時(shí)的超聲和/或混合時(shí)間。6.14.8 當(dāng)溶液放置時(shí)間超過(guò)24小時(shí)或指定時(shí)間時(shí)，應(yīng)評(píng)估檢測(cè)方法的分析物的溶液穩(wěn)定性。6.15 穩(wěn)定性指示性質(zhì) 6.15.1 在對(duì)穩(wěn)定性指示方法進(jìn)行驗(yàn)證時(shí)應(yīng)評(píng)估穩(wěn)定性指示方法（強(qiáng)制降解），應(yīng)包括表3中列出的空白劑

31、、活性成分和配方顆粒的強(qiáng)迫降解條件。表3：穩(wěn)定性指示分析的強(qiáng)降解條件處理Treatment極端強(qiáng)降解條件Extreme stressed condition酸Acid樣品/2N HCl，回流4小時(shí)Sample/2N HCl, reflux 4 hours堿Base樣品/2N NaOH，回流4小時(shí)Sample/2N NaOH, reflux 4 hours氧化劑Oxidative樣品/3% H2O2/室溫，24小時(shí)Sample/3% H2O2/room temperature, 24 hours熱Thermal樣品/干燥/烘箱內(nèi)105加熱，5天Sample/dry/heat in oven at

32、 105, 5 days熱/濕度Thermal/Humidity樣品/頂空濕度飽和（MSH）/烘箱內(nèi)90，48小時(shí)Sample/ Moisture Saturated Headspace/ oven at 90, 48 hours濕度Humidity樣品/干燥器內(nèi)加水/室溫，5天Sample/desiccators with water/room temperature, 5 days陽(yáng)光測(cè)試Sun test樣品/UV/5天Sample/UV/5 days光穩(wěn)定性Photo stability樣品/干燥/UV下5天Sample/dry/under UV, 5 days樣品溶液/UV下，5天，無(wú)色燒瓶Sample solution/ under UV, 5 days, clear flask樣品溶液/UV下，5天，棕色燒瓶Sample solution/ under UV, 5 days, amber flask6.15.2 按