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文檔簡介

1、生物選修一基礎(chǔ)知識填空測試(1)1、 酵母菌的新陳代謝類型是 異氧兼性厭氧型 ,在生產(chǎn)果酒時的繁殖類型主要是 無氧呼吸 2、 在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中,起主要作用的是 葡萄皮攜帶的自然界的酵母 。3、 酵母菌發(fā)酵的最適溫度是 1825,原因是: 酵母菌體內(nèi)酶的活性最高,且有利于色素的溶解 ,發(fā)酵生產(chǎn)葡萄酒的過程中酵母菌進(jìn)行的細(xì)胞呼吸類型是 無氧呼吸 ;發(fā)酵過程中PH變化趨勢是 逐漸減小 。當(dāng)發(fā)酵產(chǎn)生的酒精量達(dá)到12-16時,發(fā)酵就會停止,原因是:營養(yǎng)物質(zhì)的消耗、PH的變化,更主要的是 酒精對酵母菌具有毒害作用 。4、 生產(chǎn)果醋的菌種是 醋酸菌 ,其新陳代謝的類型是 厭氧型 ,其最適生長溫度是

2、30-35 。5、 制作果酒時,葡萄應(yīng)先 沖洗 后 除去枝梗 ,目的是 避免去枝梗時引起葡萄破損,增加污染機(jī)會 。發(fā)酵瓶要用 體積分?jǐn)?shù)70%的酒精 消毒;裝汁時要留 1/3 的空間,目的是 先讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸快速繁殖 ;在由果酒制果醋的果醋中,注意控制 溫度 和 氧氣 ,原因是 醋酸菌的最適生長溫度為30-35且為好氧細(xì)菌 .6、 若用帶瓶蓋的發(fā)酵瓶制果酒時,需定時擰松瓶蓋的目的是 排除產(chǎn)生的二氧化碳 。發(fā)酵裝置有一排氣口,是通過長而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是 防止空氣中微生物的污染 ,果酒制作完成后可以用 ( 酸性)重鉻酸鉀 檢測酒精的生成,反應(yīng)呈 灰綠 色。7、根據(jù)教材P4操作提示

3、設(shè)計實驗步驟及裝置。充氣口作用 醋酸發(fā)酵時不斷充入空氣 ; 排氣口作用 排除酒精發(fā)酵產(chǎn)生的二氧化碳;出料口作用 取樣 。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是 防止空氣中微生物的污染 。使用該裝置制酒時,應(yīng)該關(guān)閉 充氣口 ;制醋時,應(yīng)將充氣口 連接充氣泵,不斷泵入氧氣 。高2013級生物基礎(chǔ)知識填空測試(2)1、 微生物培養(yǎng)基配制的原則有 目的要明確 、 營養(yǎng)要協(xié)調(diào) 、 PH要 適宜 、制好的培養(yǎng)基在分裝前都應(yīng)做 調(diào)PH 處理,要將已配制好的液體培養(yǎng)基制成固體培養(yǎng)基應(yīng)添加 凝固劑如瓊脂 ;培養(yǎng)基根據(jù)物理性質(zhì)來劃分為 固體 培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和 液體 培養(yǎng)基,在大規(guī)模的工業(yè)生產(chǎn)中一

4、般選用 液體 培養(yǎng)基、要鑒定分解尿素的細(xì)菌用的是 固體 培養(yǎng)基;根據(jù)化學(xué)成分分為 天然 培養(yǎng)基和 合成 培養(yǎng)基:根據(jù)其用途又分為 選擇 培養(yǎng)基和 鑒定 培養(yǎng)基。2、培養(yǎng)基的營養(yǎng)一般都含有:水、 碳源 、 氮源 和 無機(jī)鹽 ,還需要滿足微生物生長對 適宜PH 、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及 氧氣 的需求。3、獲得純凈培養(yǎng)基的關(guān)鍵是 防止外來雜菌的干擾 ,消毒的方法有 煮沸消毒 和 化學(xué)試劑消毒 。一般不包括殺死芽孢和孢子;對活體材料都應(yīng)選擇 化學(xué)試劑消毒,常用的滅菌方法有 灼燒滅菌 、 干熱滅菌 、 高壓蒸汽滅菌 ,包括殺死芽孢和孢子。4、芽孢于孢子的區(qū)別是 芽孢無繁殖能力,是一種抗逆環(huán)境的休眠體;孢子為無

5、性生殖的細(xì)胞 5、純化大腸桿菌的原理是:在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成 單個細(xì)胞 ,使其生長成單個的菌落,其常用的方法有 平板劃線法 、 稀釋涂布平板法 ,要求無菌操作。6、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制備的過程有:計算 稱量溶化 滅菌 倒平板 。倒平板操作時需在 酒精燈火焰 附近操作,其原因是 防止空氣中雜菌污染 ,平板冷凝后要將平板倒置的原因是 防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基,造成污染 。7、 平板劃線法操作時,要對接種環(huán)進(jìn)行 灼燒 滅菌。a、第一次劃線前滅菌的目的是 避免接種環(huán)上的可能存在的微生物污染培養(yǎng)物 b、每次接種前都需要接種的目的是殺死殘留菌種,保證 殺死上次接種殘留的菌種 c、劃線結(jié)束滅菌的

6、目的是殺死殘留菌種避免 殘留的菌種污染環(huán)境和感染操作者 ,灼燒接種環(huán)后,要冷卻才能伸入菌種中以免 殺死菌種 ,劃線時最后區(qū)域不要與 第一區(qū)域 相連,最后結(jié)果是在 每個區(qū)域的末端 最容易獲得純凈的菌種。8、稀釋涂布平板法操作的注意事項:a、每支試管及9mL的水、移液管均需要 滅菌 ,其常用的方法是 高壓蒸汽滅菌 。操作時試管口和移液管應(yīng)在 離火焰1-2cm處 ,b、吸取 1 mL含菌的液體注入一支試管中,注意使注入的液體與水充分混勻 c、涂布平板時, 涂布器 用 70% 的酒精 消毒,取出時讓多余酒精在燒杯中滴盡。9、鑒定分解尿素細(xì)菌的方法:在以 尿素 為唯一氮源的培養(yǎng)基中注入 酚紅 ,若變 紅

7、 ,說明該細(xì)菌能分解尿素10、培養(yǎng)基滅菌成功的檢測方法(檢測培養(yǎng)基是否被污染的方法): 用空白培養(yǎng)基在適宜條件下培養(yǎng)一段時間觀察是否有菌落的生成 11、微生物的計數(shù)方法主要是 涂布平板法 ,每克樣品中的菌落數(shù) C/V×m 在用稀釋涂布平板法測定細(xì)菌數(shù)目時,每個稀釋濃度至少要涂布 3 個平板并取其菌落為 30-300 的平板進(jìn)行計數(shù)。高2013級生物基礎(chǔ)知識填空測試(3)1、 細(xì)胞分化是指相同細(xì)胞的后代在 形態(tài) 、 結(jié)構(gòu) 和 生理功能 上出現(xiàn)的 穩(wěn)定性 差異過程,其實質(zhì)是 基因的選擇性表達(dá) ,即同種生物體內(nèi)各個不同的體細(xì)胞中所含的 DNA 相同 , RNA 不同。2、 愈傷組織是通過

8、脫分化 形成的,其細(xì)胞排列 疏松無規(guī)則 ,高度 液泡化 ,呈 無定形 狀態(tài)的 薄壁 細(xì)胞3、植物組織培養(yǎng)的過程: 離體植物組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 去分化 叢芽 叢根 植物體 ,運用的原理是細(xì)胞的全能性,即每個體細(xì)胞含有 發(fā)育成完整植株所必需的全部 基因。4、影響植物組織培養(yǎng)的條件:材料:植物的種類、材料的 年齡 和 保存時間長短 等都會影響實驗結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇 未開花植株的莖上部新萌發(fā)的側(cè)枝 作材料。營養(yǎng):常用的培養(yǎng)基是 MS 培養(yǎng)基,其中含有的大量元素是 N、P、K、Ca、Mg 、S ,微量元素是 B、Mn、Cu、Fe、Mo、I、Co ,有機(jī)物是 甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、

9、蔗糖 等。激素:在培養(yǎng)基中需要添加 維生素 和 細(xì)胞分裂素 等植物激素,其 濃度 、 使用順序 、 用量的比例 等都影響結(jié)果。啟動細(xì)胞分裂、分化的關(guān)鍵性激素是 生長素、細(xì)胞分裂素 。 兩種激素按不同順序使用與實驗結(jié)果的關(guān)系:使用順序 實驗結(jié)果先使用生長素,后使用細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂,但細(xì)胞不分化 先使用細(xì)胞分裂素,后使用生長素 細(xì)胞即分裂也分化同時使用  分化頻率提高 兩種激素用量的比例與植物細(xì)胞發(fā)育的方向關(guān)系:生長素與細(xì)胞分裂素的比值植物發(fā)育的方向生長素與細(xì)胞分裂素的比值高 有利于根分化 生長素與細(xì)胞分裂素

10、的比值低有利于芽分化 生長素與細(xì)胞分裂素的比值適中促進(jìn)愈傷組織形成 環(huán)境條件: PH 、 溫度 、光等環(huán)境條件。菊花組培所需PH為 5.8 ,溫度為 18-22 ,光照條件為每日用日光燈照射 12h 。5、 被子植物花粉發(fā)育是小孢子母細(xì)胞經(jīng)歷 小孢子四分體時期 、單核期、 雙核期 ,其中單核期又分為 單核居中期 和 單核靠邊期 ; 雙核期 又包括花粉管細(xì)胞核和 生殖細(xì)胞核 ,精子的形成過程包括的分裂方式有 減數(shù)分裂 和 有絲分裂 。6、 花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑: 花粉 脫分化 胚狀體 分化 叢芽 誘導(dǎo) 生根 植物體 、 花粉 脫分化 愈傷組織 分化 叢芽 誘導(dǎo) 生根

11、 植物 兩種途徑 沒有 (有或者沒有)絕對的界限,主要取決于培養(yǎng)基中 激素的種類和比例 。7、 花藥培養(yǎng)得到的是 單倍體 植株,其特點是 植株矮小,抗逆性差,不育 ,若要得到可育的植株采取的方法是 用秋水仙素處理植株 ,這種方法和單倍體育種相結(jié)合,具有 明顯縮短育種年限 的優(yōu)點。8、 花藥培養(yǎng)的原理是: 細(xì)胞全能性 ,即, 花藥細(xì)胞含有發(fā)育成完整植株所必需的全部基因,其實驗流程包括 材料的選取 、 材料的消毒 、 接種 、 培養(yǎng) 和 移栽 ,一般選擇 單核期 的花藥,鑒定常用的方法有 醋酸洋紅法 、 焙花青-鉻礬法 ;在材料的消毒這個步驟當(dāng)中,其具體的操作是:花蕾用 體積分?jǐn)?shù)70%的酒精 浸泡

12、30s 無菌水 中清洗 無菌吸水紙吸干表面的水分 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0.1%的 的 氯化汞 溶液中2-4min 無菌水沖洗3至5次; 在整個培養(yǎng)的過程當(dāng)中,光照是如何控制的? 開始不需要光照,幼小植株形成后需要光照 。 。高2013級生物基礎(chǔ)知識填空測試(4)1.果膠 是植物 細(xì)胞壁 及 胞間層 的主要組成成分之一,由 半乳糖醛酸 聚合而成的一種高分子化合物,不溶于 水 。2果膠酶(1)果膠酶的作用是分解 果膠 變成可溶性的 半乳糖醛酸 。 (2)果膠酶不是特指某一種酶,而是分解 果膠 的一類酶的總稱,包括 多聚半乳糖醛酸 酶、 果膠分解 酶和 果膠酯 酶等;果膠酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),也能被蛋白酶水

13、解掉; (3)膠酶具有酶的通性:只改變反應(yīng) 速率 ,不改變反應(yīng)的平衡點。 二、酶的活性與影響酶活性的因素1 酶的活性是指酶 催化 一定化學(xué)反應(yīng)的能力,其高低用一定條件下酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的 反應(yīng)速率 來表示。酶反應(yīng)速度用 單位時間 內(nèi), 單位體積 中反應(yīng)物 的 減少量 或產(chǎn)物的 生成量 表示。2 影響酶活性的因素常提的是 溫度 、 PH 和酶的抑制劑等。低溫只 抑制 是酶的活性,在一定范圍內(nèi)升高溫度酶的活性會 恢復(fù) ,高溫、過酸、過堿對酶活性的影響 是 不可逆 (可逆或不可逆),即再降低溫度或恢復(fù)到最適PH,酶的活性 不再恢復(fù) 。3. 探究溫度和pH對酶活性的影響及探究果膠酶用量的兩個實驗

14、都要注意實驗的基本原則: 對照 原則和 單一變量 原則,理解實驗中溫度梯度或pH梯度的變化在分析問題時也要用 單一變量 原則分析。在兩個實驗中,自變量分別是 溫度和PH的差異 ,因變量是 果汁澄清度 或者是 果汁的體積 。除了酶的用量以外,影響該實驗的因素還有:溫度、PH、 恒溫水浴時間(或過濾時間) 、和果泥的用量。高2013級生物基礎(chǔ)知識填空測試(5)一凝膠色譜法(1)概念:凝膠色譜法也稱作_分配色譜法_,是根據(jù)_相對分子質(zhì)量大小_分離蛋白質(zhì)的有效方法。(2)原理:大多數(shù)凝膠是由_多糖類化合物_構(gòu)成的小球體,內(nèi)部有許多貫穿的通道,當(dāng)不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時,相對分子質(zhì)量較小 的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入

15、凝膠內(nèi)部的通道,路程_較長_,移動速度_較長_;而_相對分子質(zhì)量較大_的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道,只能在_凝膠外部_移動,路程_較短_,相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)因此得以分離,即分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)、分子質(zhì)量中等的蛋白質(zhì)和分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)洗脫出來的先后順序為 分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)最先洗脫出來、分子質(zhì)量中等的蛋白質(zhì)第二洗脫出來,分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)最后被洗脫出來 。二緩沖溶液(1)作用:在一定范圍內(nèi),緩沖溶液能抵制_外界酸和堿_對溶液_PH_的影響,維持pH基本不變。(2)配制:通常由_1-2_種緩沖劑溶解于水中配制而成,調(diào)節(jié)緩沖劑的_使用比例 就可以制得 不同PH范圍內(nèi)的 緩沖液。 三電泳(1)

16、概念:帶電粒子在 電場 的作用下發(fā)生 遷移 的過程。(2)原理:許多重要的生物大分子,如_多肽_、_核酸_等都具有_可解離_的基團(tuán),在一定pH下,這些基團(tuán)會帶上_正電_或_負(fù)電_。在電場的作用下,這些帶電分子會向著_與其所帶電荷相反的電極_移動。電泳利用了分離樣品中各種分子_帶電性質(zhì)差異_以及分子本身的_大小_、_性狀的_不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的_遷移速率_,從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。四蛋白質(zhì)提取分離一般分為_紅細(xì)胞的洗滌_、_血紅蛋白的釋放_、_分離血紅蛋白、_透析_。五實驗操作I樣品處理 實驗選取的是 哺乳動物成熟 紅細(xì)胞為材料,原因是 沒有細(xì)胞核及其它較多的細(xì)胞器 , 血紅蛋白由_

17、4條_肽鏈組成,包括兩個_-肽鏈_和兩個_-肽鏈_。每條肽鏈環(huán)繞一個_亞鐵血紅素_基團(tuán),此基團(tuán)可攜帶_一分子氧_或_一分子二氧化碳_。血紅蛋白因含有血紅素而呈現(xiàn)_紅色_。(1)紅細(xì)胞的洗滌 目的:去除雜蛋白。方法:_低速_離心,如500 r·min離心2 min,然后用膠頭吸管吸出上層透明的_黃色血漿_,將下層_暗紅色_的紅細(xì)胞液體倒入_燒杯_,再加入_五倍體積_ _的生理鹽水,緩慢攪拌_10min_ _,低速短時間離心,如此重復(fù)洗滌_3_ _次,直至上清液中沒有_黃色_,表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。 (2)血紅蛋白的釋放:將洗滌好的紅細(xì)胞倒入燒杯中,加_蒸餾水_到原血液的體積,再加40的

18、_甲苯_,置于_磁力攪拌器_上充分?jǐn)嚢?0 min。該步驟的目的使紅細(xì)胞破裂,釋放血紅蛋白 。 (3)分離血紅蛋白溶液:將攪拌好的混合液離心后可觀察到試管中溶液分為4層。第1層:_無色透明_ 的甲苯層第2層:_脂溶性物質(zhì)_的沉淀層_白色_ _薄層固體第3層:_血紅蛋白_的水溶液_紅色透明_透明第4層:其他雜質(zhì)的_暗紅色_色沉淀物 將液體用_濾紙_過濾,除去_脂溶性沉淀層_,于_分液漏斗_中靜置片刻后,分出下層的_紅色透明_液體。(4)透析過程:取1 mL的_血紅蛋白_溶液裝入_透析袋_ _中,將其放入盛有300 mL的20 mL·L的_磷酸緩沖液_中(pH = _7.0_),透析12

19、 h。原理:透析袋能使 小分子 自由進(jìn)出,而將 大分子 保留在袋內(nèi)。目的:可以除去 樣品中分子量較小的雜質(zhì) ,或用于 更換樣品的緩沖液 測定( 蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量 )通常用十二烷基硫酸鈉(SDS)聚丙稀酰胺凝膠電泳蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶靜電荷的多少以及分子的大小等因素。為了消除靜電荷對遷移率的影響可以在凝膠中加入( SDS )。SDS能使蛋白質(zhì)發(fā)生完全變性。由幾條肽鏈組成的蛋白質(zhì)復(fù)合體在SDS的作用下會解聚成單條肽鏈,因此測定的結(jié)果只是( 單條肽鏈的分子量 )。SDS能與各種蛋白質(zhì)形成蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物,SDS所帶負(fù)電荷的量大大超過了蛋白質(zhì)分子原有電荷量。因而掩蓋了不同種

20、蛋白質(zhì)間的電荷差別,使電泳遷移率完全取決于( 分子的大小 )。凝膠色譜操作(1)凝膠色譜柱的制作 柱底部的制作 a選擇合適的橡皮塞,中間打孔。 b在橡皮塞頂部切出鍋底狀_凹穴_,在0.5 mL的_移液管_頭部切下_5cm_長的一段,插入橡皮塞孔內(nèi),上部不得超出橡皮塞的凹穴底面。 c剪尼龍網(wǎng)小圓片覆蓋在_橡皮塞的凹穴上 。用_大小合適的100目_的尼龍紗將橡皮塞_上部 包好,插到玻璃管一端。 d色譜柱下端用移液管頭部作_出口部位_ _,連接一細(xì)的_尼龍管_,并用_ 螺旋夾 控制尼龍管的_打開_與_關(guān)閉_,另一端放入收集_色譜流出液_的收集器內(nèi)。 柱頂部的制作:插入安裝了玻璃管的橡皮塞。(2)凝膠

21、色譜柱的裝填 填充材料:交聯(lián)葡聚糖凝膠。 方法:凝膠用_蒸餾水_充分溶脹后,配成_凝膠懸浮液_,在與色譜柱下端連接的尼龍管打開的情況下,一次性緩慢倒入_色譜柱內(nèi)_。注意色譜柱內(nèi)不能有 氣泡 存在,一旦發(fā)現(xiàn),色譜柱必須 重裝 裝填完后,立即連接_緩沖液洗脫瓶_,在_約50cm_高的操作壓下,用300 mL的20 mol·L的磷酸緩沖液充分_洗滌_平衡凝膠12 h,使凝膠裝填_緊密_。(3)樣品的加入和洗脫 加樣前:打開流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的_緩沖液_下降到與_凝膠面_平齊,關(guān)閉出口。 加樣:用_吸管_將1 mL_透析后的樣品_的樣品加到色譜柱的_頂端_。 加樣后:打開_下端出口_,使

22、樣品滲入凝膠床內(nèi),等完全進(jìn)入后,關(guān)閉下端出口。小心加入緩沖液到_適當(dāng)高度_,連接緩沖液洗脫瓶,打開下端出口,進(jìn)行洗脫,待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時,用試管收集流出液,每_5ml_收集一管,連接收集。 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳判斷 純化 的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求,需要進(jìn)行蛋白質(zhì)的鑒定。在血紅蛋白的分離中,其分離成功的標(biāo)志 紅色區(qū)帶均勻一致的移動 。高2013級生物基礎(chǔ)知識填空測試(6)1. 胡蘿卜素是 橘黃色晶體,化學(xué)性質(zhì)比較 穩(wěn)定,不溶于水,微溶于 乙醇,易溶于 石油醚 等有機(jī)溶劑。根據(jù)雙鍵的數(shù)目可以將胡蘿卜素劃分為、三類。-胡蘿卜素 是其中最主要的組成成分。與-胡蘿卜素化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的胡蘿卜素約有100多種,它們大多存在于蔬菜中。 胡蘿卜 等蔬菜是提取天然-胡蘿卜素的原料。2.工業(yè)生產(chǎn)上,提取天然-胡蘿卜素的方法主要有三種,一是從 植物中 中提取,二是從 大面積養(yǎng)殖的巖藻 中獲得,三是利用 微生物的發(fā)酵 生產(chǎn)。本課題所提供的方法只能提取胡蘿卜素的 混合物 ,若要獲

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