感染的檢查與防治

1、2021-11-141第十章 病原微生物感染的檢查及防治原則第一節(jié) 細(xì)菌感染的檢查2021-11-142標(biāo)本的采集和送檢標(biāo)本的采集和送檢避免雜菌污染運(yùn)送注意保存不同期不同標(biāo)本用抗菌素以前采集病變明顯部位標(biāo)本必須新鮮2021-11-143一、細(xì)菌學(xué)診斷，病原菌的檢查程序一、細(xì)菌學(xué)診斷，病原菌的檢查程序藥物敏感試驗(yàn)直接涂片鏡檢分離培養(yǎng)生化試驗(yàn)血清學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)明明確確診診斷斷初步診斷初步診斷檢測(cè)核酸（雜交、pcr、dna指紋）其他檢測(cè)技術(shù)（測(cè)抗原）（檢測(cè)病原菌）2021-11-144原理原理二、血清學(xué)診斷二、血清學(xué)診斷 雙份血清標(biāo)本，恢復(fù)期血清中抗體效價(jià)比急性期血清中抗體效價(jià)升高4倍者方有意義種類

2、種類 標(biāo)本標(biāo)本凝集試驗(yàn)：沉淀試驗(yàn)：補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：中和試驗(yàn)： 肥達(dá)試驗(yàn)、外斐試驗(yàn)、顯微鏡凝集試驗(yàn)等梅毒vdrl、rpr試驗(yàn)等抗“o”試驗(yàn)等q熱柯克斯體抗體檢測(cè)等2021-11-145 將疫苗或類毒素接種于人體，使機(jī)體獲得免疫力的一種防治微生物感染的措施。第二節(jié) 細(xì)菌感染的免疫防治一、人工主動(dòng)免疫人工主動(dòng)免疫主要生物制品死疫苗活疫苗類毒素亞單位疫苗dna重組疫苗核酸疫苗治療性疫苗2021-11-146抗毒素細(xì)胞免疫制劑二、人工被動(dòng)免疫二、人工被動(dòng)免疫 注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白抗體，或細(xì)胞因子等免疫制劑，使機(jī)體獲得特異性免疫力主要生物制品抗菌血清胎盤球蛋白丙種球蛋白2021-11

3、-147區(qū)別要點(diǎn)區(qū)別要點(diǎn)人工主動(dòng)免疫人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫免疫物質(zhì)免疫物質(zhì)抗原抗原抗體或細(xì)胞因子等抗體或細(xì)胞因子等免疫出現(xiàn)時(shí)間免疫出現(xiàn)時(shí)間滿，滿，24周周快，立即快，立即免疫維持時(shí)間免疫維持時(shí)間長(zhǎng)，數(shù)年長(zhǎng)，數(shù)年數(shù)月數(shù)月短，短，23周周主要用途主要用途預(yù)防預(yù)防治療或緊急預(yù)防治療或緊急預(yù)防2021-11-148比較區(qū)別點(diǎn)區(qū)別點(diǎn)死疫苗死疫苗活疫苗活疫苗制劑特點(diǎn)制劑特點(diǎn)死，強(qiáng)毒株死，強(qiáng)毒株活減毒株活減毒株接種劑量與特點(diǎn)接種劑量與特點(diǎn)量較大，量較大，23次次 量較小，量較小，1次次保存及有效期保存及有效期易保存，約易保存，約1年年不易保存，不易保存，4數(shù)周數(shù)周免疫效果免疫效果較低，較低，維

4、持?jǐn)?shù)月維持?jǐn)?shù)月2年年較高，較高，維持維持35年甚至更長(zhǎng)年甚至更長(zhǎng)2021-11-149 第三節(jié)第三節(jié) 病毒感染的檢查病毒感染的檢查l標(biāo)本的采集與送檢標(biāo)本的采集與送檢 用于分離培養(yǎng)的標(biāo)本：用于分離培養(yǎng)的標(biāo)本： a a、采集急性期標(biāo)本、采集急性期標(biāo)本 b b、采集感染部位標(biāo)本、采集感染部位標(biāo)本 c c、冷藏、冷藏 血清學(xué)診斷的標(biāo)本：血清學(xué)診斷的標(biāo)本： 急性期和恢復(fù)期急性期和恢復(fù)期雙份血清雙份血清，-20-20保存保存2021-11-14102021-11-1411動(dòng)物接種動(dòng)物接種雞胚接種雞胚接種組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)器官培養(yǎng)移植培養(yǎng) 細(xì)胞培養(yǎng) 原代細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞培養(yǎng)傳代細(xì)胞培養(yǎng)2021-11-141

5、2常用的細(xì)胞培養(yǎng)類型名稱原代細(xì)胞培養(yǎng)恒河猴腎細(xì)胞培養(yǎng)， 人胚腎、 肺等細(xì)胞培養(yǎng)，雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)二倍體細(xì)胞株wi-38（人胚肺細(xì)胞株） ，hl-8（恒河猴胚細(xì)胞株）傳代細(xì)胞系hela 細(xì)胞，detroit 細(xì)胞（胸骨髓細(xì)胞系） ，chang c/i/l/k（人結(jié)膜 c，腸 i，肝 l 與腎k 細(xì)胞系） ，vero（綠猴腎細(xì)胞系） ，bhk-21（幼地鼠腎細(xì)胞系）2021-11-14132021-11-1414（二）病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的指標(biāo)（二）病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖的指標(biāo)1、cpe2、紅細(xì)胞吸附、紅細(xì)胞吸附正常細(xì)胞正常細(xì)胞病變細(xì)胞病變細(xì)胞2021-11-1415狂犬病毒包涵體（negri body）

6、3.包涵體2021-11-1416巨細(xì)胞病毒包涵體4.免疫技術(shù)2021-11-1417（三）（三）病毒數(shù)量和感染性病毒數(shù)量和感染性測(cè)定測(cè)定1 1、蝕斑試驗(yàn)斑試驗(yàn)2 2、idid5050 或或 tcidtcid5050 病毒感染雞胚、動(dòng)物或細(xì)胞后，引起 50% 發(fā)生死亡或病變的最小量。 病毒感染單層細(xì)胞后，產(chǎn)生的局限性病灶，稱蝕斑，蝕斑是由一個(gè)感染性病毒體復(fù)制形成的，稱蝕斑形成單位，病毒懸液中的感染性病毒量以每毫升的蝕斑形成單位pfu來(lái)表示。2021-11-1418病毒的快速診斷病毒的快速診斷光鏡光鏡-包涵體電鏡電鏡免疫熒光免疫熒光elisa分子生物學(xué)技術(shù)分子生物學(xué)技術(shù)雜交southern bl

7、otpcrnorthern blot2021-11-1419檢測(cè)病毒抗原與抗體檢測(cè)病毒抗原與抗體 已知抗體測(cè)病毒感染脫落細(xì)胞或分泌物已知抗體測(cè)病毒感染脫落細(xì)胞或分泌物細(xì)胞中的細(xì)胞中的抗原抗原 已知抗原測(cè)血清中已知抗原測(cè)血清中抗體抗體測(cè)測(cè)igmigm，或動(dòng)態(tài)，或動(dòng)態(tài)測(cè)測(cè)iggigg（雙份血清）（雙份血清） 三、檢測(cè)病毒核酸三、檢測(cè)病毒核酸 pcrpcr試驗(yàn)試驗(yàn) 引物引物 核酸雜交試驗(yàn)核酸雜交試驗(yàn) 探針探針 基因芯片技術(shù)基因芯片技術(shù)2021-11-1420第四節(jié)病毒感染的防治第四節(jié)病毒感染的防治一、病毒感染的治療一、病毒感染的治療（一）藥物治療（一）藥物治療 1.1.核苷類藥物核苷類藥物 2.蛋白

8、酶抑制劑 3.3.天然藥物天然藥物（二）基因治療（二）基因治療 1.1.反義寡核脫氧核酸反義寡核脫氧核酸 2. 2. 核酶核酶（三）免疫治療2021-11-1421 1.1.核苷類藥物核苷類藥物（1 1）抑制病毒基因復(fù)制）抑制病毒基因復(fù)制 碘尿苷碘尿苷( (皰疹凈皰疹凈) )用異常嘧啶取代胸腺嘧啶用異常嘧啶取代胸腺嘧啶, ,眼眼皰疹病毒感染。也可滲入細(xì)胞皰疹病毒感染。也可滲入細(xì)胞dna,dna,故有毒性。故有毒性。 無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷( (啊昔洛韋啊昔洛韋) ) ，競(jìng)爭(zhēng)病毒復(fù)制酶。，競(jìng)爭(zhēng)病毒復(fù)制酶。（2 2）抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄）抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄 病毒唑病毒唑 2.蛋白酶抑制劑 “ “雞尾酒雞尾酒”

9、治療治療hivhiv，3tc3tc加蛋白酶抑制物加蛋白酶抑制物 3.3.天然藥物天然藥物 中草藥治療：黃芪、板藍(lán)根、大青葉中草藥治療：黃芪、板藍(lán)根、大青葉2021-11-1422 （二）基因治療（二）基因治療 1.1.反義寡核脫氧核酸反義寡核脫氧核酸( (反義反義dna)dna) 與病毒與病毒dnadna關(guān)鍵基因互補(bǔ)關(guān)鍵基因互補(bǔ) 反義寡核苷酸反義寡核苷酸( (反義反義rna)rna) 與病毒與病毒rnarna關(guān)鍵基因互補(bǔ)關(guān)鍵基因互補(bǔ) 2. 2. 核酶核酶 與病毒與病毒rnarna結(jié)合結(jié)合, ,切割降解靶切割降解靶rnarna （三）免疫治療 細(xì)胞因子：干擾素、細(xì)胞因子：干擾素、tnftnf、i

10、l-12il-12等等2021-11-1423 策略：阻斷病毒復(fù)制周期中策略：阻斷病毒復(fù)制周期中吸附穿入吸附穿入、 脫殼脫殼、核酸復(fù)制核酸復(fù)制、或、或裝配釋放裝配釋放 任一環(huán)節(jié)，從而抑制病毒復(fù)制任一環(huán)節(jié)，從而抑制病毒復(fù)制 要求：抗病毒藥物能穿入細(xì)胞選擇性地要求：抗病毒藥物能穿入細(xì)胞選擇性地 抑制病毒復(fù)制又不損傷宿主細(xì)胞抑制病毒復(fù)制又不損傷宿主細(xì)胞 1 1、阻斷吸附、阻斷吸附 特異免疫球蛋白特異免疫球蛋白中和抗體中和抗體 如：乙腦病毒包膜抗原的單抗如：乙腦病毒包膜抗原的單抗2021-11-1424 可溶性的病毒受體可溶性的病毒受體 如：如：hiv hiv 用可溶性用可溶性cd4 cd4 （不理想

11、）（不理想） 2 2、抑制脫殼、抑制脫殼 如：金剛烷胺，用于流感病毒的防治如：金剛烷胺，用于流感病毒的防治 （副作用大）（副作用大） 3 3、抑制核酸復(fù)制、抑制核酸復(fù)制 a.a.核苷類化合物核苷類化合物( (最早用于臨床治療最早用于臨床治療) ) 用異常嘧啶取代胸腺嘧啶用異常嘧啶取代胸腺嘧啶 如如: :碘尿苷碘尿苷( (皰疹凈皰疹凈),),眼皰疹病毒感染眼皰疹病毒感染 2021-11-1425 也可滲入細(xì)胞也可滲入細(xì)胞dna,dna,故有毒性故有毒性 無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷無(wú)環(huán)鳥(niǎo)苷( (啊昔洛韋啊昔洛韋) ) 毒性作用小毒性作用小 b.b.抗病毒基因治療抗病毒基因治療 反義寡核脫氧核酸反義寡核脫氧核酸( (

12、反義反義dna)dna) 與病毒與病毒dnadna關(guān)鍵基因互補(bǔ)關(guān)鍵基因互補(bǔ) 反義寡核苷酸反義寡核苷酸( (反義反義rna)rna) 與病毒與病毒rnarna關(guān)鍵基因互補(bǔ)關(guān)鍵基因互補(bǔ) 核酶核酶 與病毒與病毒rnarna結(jié)合結(jié)合, ,切割降解靶切割降解靶rna rna 2021-11-1426 c.c.病毒蛋白酶抑制物病毒蛋白酶抑制物 病毒蛋白酶病毒蛋白酶: :病毒復(fù)制病毒復(fù)制 轉(zhuǎn)錄后剪接、加工轉(zhuǎn)錄后剪接、加工 如：如：“雞尾酒雞尾酒”治療治療hivhiv 3tc 3tc加蛋白酶抑制物加蛋白酶抑制物 d.d.細(xì)胞因子：干擾素、細(xì)胞因子：干擾素、tnftnf、il-12il-12等等 4 4、疫苗治

13、療、疫苗治療 如：乙肝、如：乙肝、hivhiv、狂犬病疫苗、狂犬病疫苗 5 5、中草藥治療：黃芪、板藍(lán)根、大青葉、中草藥治療：黃芪、板藍(lán)根、大青葉 2021-11-1427 二、病毒感染的預(yù)防二、病毒感染的預(yù)防（一）人工主動(dòng)免疫（一）人工主動(dòng)免疫（artificial active immunityartificial active immunity） 定義：是將疫苗或類毒素接種于人體，使定義：是將疫苗或類毒素接種于人體，使 機(jī)體產(chǎn)生獲得性免疫力，抵抗微生機(jī)體產(chǎn)生獲得性免疫力，抵抗微生 物感染，主要用于預(yù)防。物感染，主要用于預(yù)防。 2021-11-1428 制劑：制劑： 1 1）死疫苗死疫苗：

14、選用免疫原性強(qiáng)的病原，：選用免疫原性強(qiáng)的病原， 經(jīng)人工大量培養(yǎng)后，用理化方法經(jīng)人工大量培養(yǎng)后，用理化方法 殺死或滅活。殺死或滅活。 2 2）活疫苗活疫苗：用減毒的或無(wú)毒力的活：用減毒的或無(wú)毒力的活 病原體制成病原體制成 3 3）類毒素類毒素：細(xì)菌外毒素經(jīng)：細(xì)菌外毒素經(jīng)0.3%-0.4%0.3%-0.4% 甲醛處理獲得甲醛處理獲得2021-11-1429 4)4)基因工程疫苗基因工程疫苗: :重組重組dnadna表答的病原蛋白表答的病原蛋白 5)5)核酸疫苗核酸疫苗:dna:dna和和rnarna疫苗疫苗, ,由載體和編碼由載體和編碼 病原體某種抗原的病原體某種抗原的cdnacdna或或 mrnamrna組成組成 6)6)其它其它: :合成肽疫苗、抗獨(dú)特型疫苗等合成肽疫苗、抗獨(dú)特型疫苗等2021-11-1430（二）人工被動(dòng)免疫（二）人工被動(dòng)免疫（artificial passive immunizationartificial passive immunization） 定義：定義： 注 射 含 有 特 異 性 抗 體 的 免 疫 血 清注 射 含 有 特 異 性 抗