生菜中色素提取分離和含量測定PPT課件_第1頁
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1、目 錄 實驗?zāi)康膶嶒炂鞑膶嶒炂鞑?實驗原理實驗原理 實驗步驟實驗步驟注意事項注意事項 實驗分析及結(jié)果實驗分析及結(jié)果第1頁/共19頁實驗?zāi)康膶嶒炂鞑膶嶒灢牧霞皟x器藥品1.層析液配方:石油醚20ml +丙酮2ml +苯1ml2.天平 研缽 燒杯 量筒 濾紙 表面皿 剪刀 95%乙醇 漏斗 滴管 尼龍布 毛細(xì)管 1.學(xué)會葉綠素的提取分離和含量的測定2.了解葉綠素的性質(zhì)第2頁/共19頁實驗原理 綠葉中的葉綠體含有葉綠素,葉綠素可以溶于有機溶劑乙醇,丙酮等,所以可將色素提取出來,紙層析法是分離色素最簡單的方法,他的原理是利用混合色素各個物理,化學(xué)性質(zhì)的差別,以不同的程度分布于固定相和流動相中。由于他們的

2、移動速度不同,從而達到移動的目的。第3頁/共19頁實驗步驟1.稱取2g的新鮮生菜綠葉,剪碎,放在研缽中,加5ml乙醇,加入少許的石英砂一起研磨成漿,用尼龍布過濾后,該濾液即為葉綠素提取液。2.取一塊預(yù)先干燥處理過的定性濾紙,將它剪成長約10cm,寬約1cm的濾紙條。將濾紙條的一段剪去兩角,在此端距頂端1cm處用鉛筆畫一條細(xì)線,線要直,要勻,要細(xì)。3.畫濾液細(xì)線 用毛細(xì)管取少量濾液,沿鉛筆線均勻畫細(xì)線。濾液干后,重復(fù)劃線一兩次。4.分離光和色素,向燒杯中倒入3ml層析液,將濾紙條尖端朝下,斜靠內(nèi)壁,插入層析液,蓋上表面皿5.僅過幾分鐘后,觀察色素帶的情況,最上層的是胡蘿卜素,其次是葉黃素,再次是

3、葉綠素a,最后是葉綠素b第4頁/共19頁第5頁/共19頁第6頁/共19頁第7頁/共19頁第8頁/共19頁第9頁/共19頁 注意事項1.畫鉛筆線時,線要細(xì) 直 勻 2.分離光合色素時,濾液細(xì)線不要浸入液面以下,接觸到層析液,這是因為色素極易溶解在層析液中,導(dǎo)致色帶不清晰,影響實驗效果。3.分離光合色素時,要加蓋,減少有機溶劑的揮發(fā)。4.丙酮有毒性,在使用時,要遠離。第10頁/共19頁 1.取5g干凈的生菜葉,沸水2min,撈出來,冷卻。 2.將冷卻后的生菜葉放在研缽中搗碎,加入等體積的 95%的乙醇,攪拌浸取30min ,過濾,濾渣按照上法再用95%的乙醇浸取3 次,合并4次的浸提液,加入等體積 的石油醚,萃取10min,靜置,充分分層,分出醚相,下層醇相再用石油醚照上層萃取2次,合并3次石油醚萃取液,依次用60%,70%,80%的乙醇醇各洗滌一次最后用離子水洗滌三次。 3.水浴加熱石油醚,使石油醚揮發(fā),得到葉綠素固體 4.葉綠素質(zhì)量=裝有葉綠素固體的燒杯的質(zhì)量-空燒杯的質(zhì)量 葉綠素含量的測定實驗步驟第11頁/共19頁第12頁/共19頁第13頁/共19頁第14頁/共19頁第15頁/共19頁第16頁/共19頁實驗分析及結(jié)果綠葉質(zhì)量:5g 葉綠素干物質(zhì)的質(zhì)量:0.985g葉綠素的得率:0.985/5=0.197=19.7% 同比其他方法,這種葉綠素含量測定方法比較方便、準(zhǔn)確

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