配制溶液的一般試驗(yàn)步驟

1、配制溶液的一般實(shí)驗(yàn)步驟配制溶液步驟因配置的溶液不同而有所不同，現(xiàn)舉兩個(gè) 例子：舉例 1：配置 0.05mol/L ，400mL NaOH 溶液的步驟： 要準(zhǔn)確配置氫氧化鈉的濃度，則要用容量瓶定容，實(shí)驗(yàn)室沒(méi) 有 400 毫升的容量瓶，則選用 500 毫升的容量瓶。 1.計(jì)算需要?dú)溲趸c的質(zhì)量：0.5L*0.05mol/L*40.01=1.000 克2.稱 1.000 克氫氧化鈉于燒杯中，加少量水溶解，然后倒入500 毫升容量瓶里，分 3 次洗燒杯，將溶液全部倒入容量瓶 里，最后用水稀釋至刻度線，搖勻，即，得到 0.05mol/L 的 氫氧化鈉溶液。如果不需要很準(zhǔn)確的話，可以直接用量筒量 400

2、毫升，稱的 時(shí)候只要稱 0.8 克就可以了。 舉例 2：配置 1.5mol/L 的稀硫 酸 200mL 步驟：第 1 步：計(jì)算：根據(jù) C1V1=C2V2 ，計(jì)算需要濃硫酸的體積； 第 2 步：量取，利用刻度吸管吸取需要濃硫酸的體積； 第 3 步：稀釋，將濃硫酸轉(zhuǎn)移到小燒杯中，加少量水稀釋； 第 4 步：轉(zhuǎn)移 , 待溶液溫度降低后，將燒杯中的硫酸轉(zhuǎn)移到 200mL 容量瓶中；第 5 步：洗滌，洗滌小燒杯，和轉(zhuǎn)移的時(shí)候用到的玻璃棒，至少三次，將洗滌的水一并轉(zhuǎn)移到容量瓶中；第 6 步：定容，加水定容到刻度線，在距離刻度線一厘米左 右改用膠頭滴管定容；第 7 步：搖勻 ,將溶液搖勻 ,如果液面下降也不

3、可再加水定容； 第 8 步：將配得的溶液轉(zhuǎn)移至試劑瓶中，貼好標(biāo)簽； 舉例 3：配制 500mL ，0.1mol/L 碳酸鈉溶液步驟及注意事項(xiàng) 所需 的儀器：燒杯、容量瓶、玻璃棒、膠頭滴管、分析天平、藥 匙、量筒步驟： 第一步：計(jì)算：所需碳酸鈉的質(zhì)量 =0.5*0.1*106=5.3 克； 第二步：稱量：在天平上稱量 5.3 克 碳酸鈉固體，并將它倒入小燒杯中； 第三步：溶解：在盛 有碳酸鈉固體的小燒杯中加入適量蒸餾水，用玻璃棒攪拌， 使其溶解； 第四步：移液：將溶液沿玻璃棒注入 500mL 容 量瓶中； 第五步：洗滌：用蒸餾水洗燒杯23次，并倒入容量瓶中； 第六步：定容：倒水至刻度線 12cm

4、處改用膠 頭滴管滴到與凹液面平直； 第七步：搖勻：蓋好瓶塞，上 下顛倒、搖勻； 第八步：裝瓶、貼簽； 誤差分析： 固體 藥品的稱量與液體藥品的量取是否準(zhǔn)確； 把溶液向容量瓶 中轉(zhuǎn)移，溶液灑了； 未洗滌燒杯和玻璃棒； 用待配液潤(rùn)洗 了容量瓶； 定容時(shí)水加多了或加少了； 定容時(shí)未平視刻度 線。仰視、俯視對(duì)溶液濃度有何影響？ 俯視刻度線，實(shí) 際加水量未到刻度線，使溶液的物質(zhì)的量濃度增大；仰視刻度線，實(shí)際加水量超過(guò)刻度線，使溶液的物質(zhì)的量濃度減小。市售鹽酸密度1.19,質(zhì)量分?jǐn)?shù)36%38%以37%計(jì)算：步驟： 1.計(jì)算：假若需要 2mol/L 的硫酸 100mL ，則需 37%濃硫酸 16.6mL；

5、計(jì)算過(guò)程如下：假設(shè)鹽酸 VmL ： （0.1L*2mol/L*36.5g/mol ）/37%=V/1.19V=16.59mL, 考慮到 量筒的精確度 0.1mL,故取16.6mL即可。2量?。?6.6mL 濃硫酸； 3.溶解：把 16.6mL 濃硫酸倒入已經(jīng)加入蒸餾水的 小燒杯中，用玻璃棒不斷攪拌。 4.轉(zhuǎn)移：待溶液冷卻后，將 溶液沿玻璃棒倒入 100 毫升的容量瓶中。5.洗滌： 再用少量蒸餾水洗滌燒杯和玻璃棒 2-3 次，并將全部洗液移入容量瓶 中。 6.定容：向容量瓶?jī)?nèi)加蒸餾水，當(dāng)液面接近刻度線 1-2 厘米處時(shí)，改用滴管滴加蒸餾水到一面恰好與刻度線相切。7 .搖勻：塞上瓶塞，反復(fù)顛倒容量

6、瓶數(shù)次，使瓶?jī)?nèi)的溶液均 勻，此時(shí)可以把溶液倒入到試劑瓶中貼標(biāo)簽保存。完成配制 過(guò)程 容量瓶的使用六忌：1.忌用容量瓶進(jìn)行溶解（體積不準(zhǔn)確） 2.忌直接往容量瓶倒液（灑到外面）3.忌加水超過(guò)刻度線（濃度偏低） 4.忌讀數(shù)仰視或俯視（仰視濃度偏低， 俯視濃度偏高） 5.忌不洗滌玻璃棒和燒杯（濃度偏低）6.忌標(biāo)準(zhǔn)液存放于容量瓶 （容量瓶是量器， 不是容器） 1 mol/L 的氫氧化鈉溶液 250mL ，完成下列步驟： 用天平稱取氫 氧化鈉固體 /克。 將稱好的氫氧化鈉固體放入燒杯中加少 量蒸餾水將其溶解，待完全溶解后將溶液沿玻璃棒移入 250mL 的容量瓶中。 用少量蒸餾水沖洗 23 次，將沖洗液移

7、入容量瓶中，在操作過(guò)程中不能損失點(diǎn)滴液體，否則會(huì) 使溶液的濃度偏低。向容量瓶?jī)?nèi)加水至刻度線12cm時(shí)，改用膠頭滴管小心地加水至溶液凹液面與刻度線相切， 若加水超過(guò)刻度線， 會(huì)造成溶液濃度偏低應(yīng)該重新配制。 最后蓋好瓶蓋， 搖勻，將配好的溶液移入試劑瓶中貼好標(biāo)簽。 常用貯液與溶液1mol/L 亞精胺( Spermidine )： 溶解 2.55g 亞精胺于足量的 水中，使終體積為10mL。分裝成小份貯存于-20 C。 1mol/L 精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中，使終體積 為 10mL 。分裝成小份貯存于 -20C。 10mol/L 乙酸胺(ammoniumacetat

8、e):將77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至 1L 后，用 0.22um 孔徑的濾膜過(guò)濾除菌。 10mg/mL 牛 血清蛋白 (BSA )：加 100mg 的牛血清蛋白 (組分 V 或分子生 物學(xué)試劑級(jí)，無(wú) DNA 酶)于 9.5mL 水中(為減少變性，須 將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白) ，蓋好蓋后，輕輕 搖動(dòng)，直至牛血清蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水 定容到 10ml ，然后分裝成小份貯存于 -20C。 1mol/L 二硫蘇 糖醇( DTT )：在二硫蘇糖醇 5g 的原裝瓶中加 32.4mL 水， 分成小份貯存于-20C,或轉(zhuǎn)移100mg的二硫蘇糖醇 至微量離心管，加 0.65

9、mL 的水配制成 1mol/L 二硫蘇糖醇溶 液。8mol/L 乙酸鉀(potassiumacetate):溶解 78.5g 乙酸鉀 于足量的水中， 加水定容到 100mL 。 1mol/L 氯化鉀 ( KCl )： 溶解 7.46g 氯化鉀于足量的水中，加水定容到 100mL 。3mol/L乙酸鈉（sodiumacetate）:溶解40.8g的三水乙酸鈉于 約90mL水中，用冰乙酸調(diào)溶液的 pH至5.2，再加水定容到 100mL。 0.5mol/L EDTA: 配制等摩爾的 Na2EDTA 和 NaOH 溶液（0.5mol/L ），混合后形成EDTA的三鈉鹽?；蚍Q取186.1g 的Na2ED

10、TA 2H2O和20g的NaOH，并溶于水中，定容至1L。 1mol/L HEPES : 將 23.8gHEPES 溶于約 90mL 的水中， 用NaOH調(diào)pH （6.88.2）,然后用水定容至 100ml。1mol/L HCl :力口 8.6ml 的濃鹽酸至 91.4ml 的水中。25mg/ml IPGT :溶解250mg的IPGT （異丙基硫代-3 -D-半乳糖苷）于10ml 水中，分成小份貯存于 -20 C。 1mol/LMgCI2:溶解20.3g MgCI2 6H2O于足量的水中，定容到100mL。100mmol/LPMSF :溶解174mg的PMSF （苯甲基磺酰氟）于足量的異 丙醇

11、中，定容到10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹或貯 存于-20°Co 20mg/mL 蛋白酶 K （ proteinase K）:將 200mg 的蛋白酶 L 加入到 9.5mL 水中，輕輕搖動(dòng)，直至蛋白酶 K 完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到 10ml，然后分裝成小 份貯存于-20 Co 10mg/mL R-nase （無(wú) D-Nase） （ D-Nase freeR-Nase）:溶解 10mg 的胰蛋白 RNA 酶于 1mL 的 10mmol/L 的乙酸鈉水溶液中（pH5.0）o溶解后于水浴中煮沸15min ,使 DNA 酶失活。用 1mol/L 的 Tris HCl 調(diào) p

12、H 至 7.5,于-20C 貯存。（配制過(guò)程中要戴手套）5mol/L氯化鈉（NaCl）:溶 解 29.2g 氯化鈉于足量的水中， 定容至 100mL 。 10N 氫氧化 鈉（NaOH ）:溶解400g氫氧化鈉顆粒于約 0.9L水的燒杯中（磁力攪拌器攪拌） ，氫氧化鈉完全溶解后用水定容至 1L。10% SDS （十二烷基硫酸鈉）：稱取100gSDS慢慢轉(zhuǎn)移到約 含 0.9L 的水的燒杯中， 用磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。 用 水定容至1L。2mol/L山梨（糖）醇（Sorbitol）:溶解36.4g 山梨（糖）醇于足量水中使終體積為 100mL。100%三氯乙酸（TCA）:在裝有500gTCA的試劑瓶中加入 100mL水，用 磁力攪拌器攪拌直至完全溶解。 （稀釋液應(yīng)在臨用前配制） 2.5%X - gal （5-溴4氯-3-吲哚B -半乳