對心血管起保護(hù)作用的天然藥物白藜蘆醇的研究概述

1、對心血管起保護(hù)的天然藥物白藜蘆醇的研究概述摘要:白藜蘆醇是一種具有重要生理活性的多酚類化合物。本文就天然藥物白藜蘆醇的理化性質(zhì)、主要資源來源、生物活性、提取、分析檢測及其在心血管保護(hù)方面的作用機(jī)制等進(jìn)行了全方面闡述，并對白藜蘆醇的發(fā)展前景進(jìn)行了展望。關(guān)鍵詞：白藜蘆醇；心血管保護(hù)；生物活性；提取檢測引言 白藜蘆醇(resveratrol，Res)具有芪類結(jié)構(gòu)的一種非黃酮類多酚化合物，它是植物受到應(yīng)激時(shí)自身合成的一種抗毒素1。分子式為C14H12O3，分子量為228.25，白藜蘆醇的純品外觀為無色針狀結(jié)晶，無味，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，溶解性順序大致為：丙酮>乙醇>甲醇>乙酸乙

2、酯>乙醚>氯仿；在366 nm的紫外光照射下產(chǎn)生紫色熒光，遇氨水等堿性溶液顯紅色，遇鎂的甲醇溶液顯粉紅色，并能和三氯化鐵一氰化鉀起顯色反應(yīng)；利用此性質(zhì)可以鑒定白藜蘆醇。在低溫、避光條件下較為穩(wěn)定，堿性環(huán)境中不穩(wěn)定 。熔點(diǎn)256258，升華溫度261。天然的白藜蘆醇有順反兩種結(jié)構(gòu)，自然界中主要以反式構(gòu)象存在，兩種結(jié)構(gòu)可以分別與葡萄糖結(jié)合，形成順式和反式白藜蘆醇糖苷，而順式和反式的白藜蘆醇糖苷在腸道中糖苷酶的作用下可以釋放出白藜蘆醇。在紫外光線照射下，反式白藜蘆醇能夠轉(zhuǎn)化為順式異構(gòu)體2白藜蘆醇及其糖苷分子式見圖1。圖1 白藜蘆醇及其糖苷分子式1 白藜蘆醇來源的主要資源植物白藜蘆醇( R

3、esveratrol) 及其衍生物主要存在于葡萄屬、蓼屬、花生屬、藜蘆屬21個(gè)科、31個(gè)屬的至少72種植物中，其中包括虎杖、決明、桑樹等常見的藥用植物，以及葡萄、花生等農(nóng)作物。目前天然白藜蘆醇的主要來源植物是葡萄Vitis、虎杖Polygonumcuspidatum和花生peanut。葡萄是葡萄科葡萄屬落葉藤本植物，我國長江流域以北各地均有種植。湖南、貴州等地野生及人工栽培的刺葡萄Vitis davidii Foex中的白藜蘆醇的含量比較高。白藜蘆醇在葡萄中的含量因品種的不同而有差異，含量差異也與土壤環(huán)境，栽培方法及病蟲害等因素有關(guān)，另外不同的部位含量也不同。葡萄中的白藜蘆醇主要存在于葡萄藤、

4、果皮與種子中，果肉中白藜蘆醇含量很少或幾乎沒有。白葡萄酒不含白藜蘆醇，這是因?yàn)榘灼咸丫圃诩庸み^程中沒有使用葡萄皮。一升紅葡萄酒大約包含0.2-5.5毫克白藜蘆醇。紅葡萄汁和西班牙玫瑰酒是其他的白藜蘆醇來源，含量從0.06-1.30毫克之間（150毫升）?；⒄萈olygonumcuspidatum屬蓼科蓼屬植物，是多年生灌木狀草本植物，主要分布于我國長江以南各省和湖北、四川等地?；⒄鹊母透o是提取天然白藜蘆醇的主要部位，天然白藜蘆醇主要以虎杖苷的形式存在于虎杖植物中，白藜蘆醇在植物中的含量很少，通過生物酵解的方法可以得到高含量的白藜蘆醇。其中，虎杖鮮根中的白藜蘆醇含量高于鮮莖，鮮葉中幾乎不含白

5、藜蘆醇?；ㄉ置浠ㄉ瑢俚位坡浠ㄉ鷮僖荒晟荼局参?。原產(chǎn)于南美洲一帶，世界上栽培花生的國家有100多個(gè)，亞洲最為普遍，次為非洲，據(jù)中國有關(guān)花生的文獻(xiàn)記載栽培史約早于歐洲100多年。花生紅衣與仁中也含有相當(dāng)多的白藜蘆醇。研究證實(shí)煮熟的花生和紅葡萄的白藜蘆醇含量很相似。例如，一杯紅葡萄可以提供大約0.25-1.25毫克白藜蘆醇。而一杯煮熟的花生也能夠提供相同的數(shù)量。2 白藜蘆醇的生物活性2.1 心血管保護(hù)作用白藜蘆醇（resveratrol，RES）具有抗氧化、抗炎、抗增殖及抗衰老的作用。動(dòng)脈粥樣硬化是冠心病的主要病理基礎(chǔ)，“內(nèi)皮損傷反應(yīng)學(xué)說”認(rèn)為氧化應(yīng)激等因素?fù)p傷動(dòng)脈內(nèi)膜，誘導(dǎo)慢性炎癥-纖

6、維增生反應(yīng)，導(dǎo)致動(dòng)脈壁脂紋、粥樣斑塊及復(fù)合病變的形成。近年研究發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇可以通過多條信號通路對心血管系統(tǒng)產(chǎn)生保護(hù)效應(yīng)，達(dá)到抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用。那么其心血管保護(hù)機(jī)制就包含以下幾個(gè)方面。 2.1.1 抗炎作用 目前認(rèn)為，動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥反應(yīng)性疾病。白藜蘆醇的抗炎效應(yīng)已經(jīng)在多項(xiàng)動(dòng)物和人體研究中證實(shí)。白藜蘆醇可以干擾血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子等炎性介質(zhì)的釋放，調(diào)節(jié)多形核細(xì)胞的功能，抑制T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的活性。2.1.2 內(nèi)皮保護(hù)功能 內(nèi)皮功能紊亂是動(dòng)脈粥樣硬化的早期病變。白藜蘆醇可以增加內(nèi)皮一氧化氮合成，改善內(nèi)皮功能，這一作用與促進(jìn)內(nèi)皮型一氧化氮合成酶的表達(dá)或者提高其活性有關(guān)。2.1.3

7、抗氧化應(yīng)激損傷 白藜蘆醇是羥基過氧化物、金屬離子誘導(dǎo)的自由基和過氧化氫的清除劑。白藜蘆醇通過抑制煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶和髓過氧化物酶等促氧化基因的表達(dá)而減少氧自由基的產(chǎn)生。2.1.4 抗血小板聚集作用 血小板聚集在粥樣硬化病變血栓形成中具有關(guān)鍵作用，抗血小板治療是降低心肌梗死和中風(fēng)風(fēng)險(xiǎn)的重要措施。白藜蘆醇可抑制健康人的血小板聚集。對于阿司匹林抵抗的患者，上述抑制作用仍然存在。白藜蘆醇的抗血小板作用可能與內(nèi)皮源性的一氧化氮相關(guān)。2.1.5 調(diào)節(jié)血脂作用活體研究顯示白藜蘆醇降低甘油三酯、極低密度脂蛋白、低密度脂蛋白水平，減少低密度脂蛋白的氧化3。白藜蘆醇通過激活去乙?；窼IRT1，阻止前

8、脂肪細(xì)胞的分化增殖，促進(jìn)白色脂肪動(dòng)員以及已分化脂肪細(xì)胞的分解。2.2 抗衰老 03年哈佛大學(xué)教授及其團(tuán)隊(duì)研究發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇可激活乙?；?，增加酵母菌的壽命，激發(fā)了人們對白藜蘆醇抗衰老研究的熱潮。Howitz等4發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇可以作為最強(qiáng)的沉默信息因子(SIRT1) 的激活劑，可模擬熱量限制( calorierestriction，CR) 抗衰老反應(yīng)，參與有機(jī)生物平均生命期的調(diào)控5CR是SIRT1的強(qiáng)誘導(dǎo)劑，能增加SIRT1在腦心腸腎肌肉和脂肪等器官組織中的表達(dá)，CR能夠引起延緩衰老和延長壽命的生理變化，最顯著可延長50%6到目前為止，有研究已經(jīng)證實(shí)白藜蘆醇具有能延長酵母線蟲果蠅及低等魚類壽命的功效

9、。 2.3 抗腫瘤、抗癌白藜蘆醇對鼠肝細(xì)胞癌7、乳腺癌8-8、結(jié)腸癌10、胃癌11、白血病12等多種腫瘤細(xì)胞均有顯著抑制作用。孟德平等13通過MTT法及流式細(xì)胞術(shù)證實(shí)了白藜蘆醇對黑色素瘤細(xì)胞有明顯的抑制作用報(bào)道顯示，白藜蘆醇可以提升癌癥放射性治療，發(fā)揮 1+12 的效果，有效抑制癌癥干細(xì)胞的作用14但迄今為止，由于白藜蘆醇抗腫瘤機(jī)制的復(fù)雜性，研究者們尚未對其作用機(jī)制達(dá)成共識。2.4 其他作用白藜蘆醇還具有抗菌、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)、抗喘等一些其他生物活性。由于白藜蘆醇所具有的各種生物活性，使得白藜蘆醇備受人們的追捧。3 白藜蘆醇的提取 目前，白藜蘆醇的制備方法主要有植物提取、化學(xué)合成和植物組織細(xì)胞

10、培養(yǎng) 等，植物提取的天然白藜蘆醇食用安全，這正符合人們對“綠色消費(fèi)”的要求 ， 因此，越來越多的學(xué)者主張從天然植物中提取。白藜蘆醇傳統(tǒng)的提取方法是有機(jī)溶劑提取法，但這種方法存在著對有效成 分損失大，周期長，工序多，提取率不高等缺點(diǎn)，因此近10年來，在植物有效成分的提取方面出現(xiàn)了許多新技術(shù)、新方法，如超臨界CO2 萃取技術(shù)、超聲波提取技術(shù)、微波萃取技術(shù)以及酶解技術(shù)等。3.1 有機(jī)溶劑提取法 傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑提取法有回流、滲漉及恒溫水浴 等 方 法 ， 提 取 的 溶 劑主要有甲醇、95乙醇、無水乙醇和乙酸乙酯等?；⒄劝邹继J醇含量的分析 測定中樣品的處理多采用此方法，姚寶書等15利用浸提法對葡萄皮渣

11、進(jìn)行浸提， 確定了乙酸乙酯提取多羥基芪類物質(zhì)的條件。俸靈林等16研究發(fā)現(xiàn)甲醇提取效果最好，提取率最高，且用 HPLC測定時(shí)，雜質(zhì)峰干擾少。但由于有機(jī)溶劑提取時(shí)間長，對熱不穩(wěn)定成分易被破壞，雜質(zhì)含量高，不易純化，萃取溶劑消耗 量大以及污染環(huán)境等缺點(diǎn)，許多學(xué)者都在研究開發(fā)新型提取方法。3.2 酶法提取 目前用于提取白藜蘆醇的酶主要有纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶等。李婷等17酶法提取白藜蘆醇，葡萄皮渣/纖維素酶為1 0001，在60 下酶解90 min，在乙酸乙酯中30浸提0.5 h，浸提2次，白藜蘆醇得率達(dá)到0.93 mg/g。錢時(shí)權(quán)等18用纖維素酶提取白藜蘆醇，其含量最高為0.680 mg/g。

12、酶法提取產(chǎn)品安全性高，生產(chǎn)條件溫和，但由于細(xì)胞壁成分復(fù)雜，選用單一的酶往往不能達(dá)到很高的提取效率，因此根據(jù)不同細(xì)胞壁成分選用合適的酶對提取率非常關(guān)鍵，但酶制劑價(jià)格昂貴，要實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，還有待研究。研究者在探究酶的固定化及培育高產(chǎn)酶的菌株的同時(shí)，也在探索微波、紅外等技術(shù)輔助酶解，提高酶解的效率。3.3 超臨界流體萃取超臨界流體具有選擇性高、快速、自動(dòng)化程度高和不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)。通常采用不易燃、性質(zhì)穩(wěn)定、無毒、不污染環(huán)境的CO2作為超臨界流體。但是白藜蘆醇在超臨界CO2中的溶解度不高。Berna等19研究了用于提取白藜蘆醇的超臨界流體的組成，即用乙醇CO2共溶劑提取白藜蘆醇，并得出最優(yōu)的混合比例

13、是共溶劑中含7.5%乙醇。張青松等20以葡萄皮渣為原料，7.5%乙醇為夾帶劑，38、13 MPa下萃取17 min白藜蘆醇的收率為0.087%。此外，Casas等21用含5%乙醇的乙醇CO2共溶劑超臨界萃取葡萄果渣中的白藜蘆醇。該法具有萃取和分離的雙重作用，無相變過程因而節(jié)能，工藝流程簡單，萃取效率高，產(chǎn)品質(zhì)量好，但需要高壓設(shè)備，設(shè)備投資大，流體中表面活性劑及夾帶劑的加入量及添加方式等理論指導(dǎo)缺乏，夾帶劑的回收及所導(dǎo)致的環(huán)境問題等有待進(jìn)一步研究。3.4 超聲波輔助提取超聲波輔助技術(shù)提取植物有效成分具有保持有效成分性質(zhì)、高效、省時(shí)等優(yōu)點(diǎn)。Cho等22從葡萄徑中提取白藜蘆醇，乙醇/水80:20作為

14、提取試劑，超聲頻率48 kHz，與傳統(tǒng)提取相比，白藜蘆醇含量與回收率均有很大提高。林軼等23用40%的乙醇，超聲104 W處理30 min，白藜蘆醇的提取率3.50 mg/g。錢時(shí)權(quán)等24用纖維素酶與超聲波結(jié)合法，從山葡萄渣中提取白藜蘆醇，效果均很好。此外，有研究者在超聲波和環(huán)糊精的輔助下，使純水成為提取溶劑，即找到了一種綠色提取方法。超聲波輔助技術(shù)在生物活性物質(zhì)的提取上得到了廣泛應(yīng)用，但該方法僅適合實(shí)驗(yàn)室操作，工業(yè)生產(chǎn)上提取罐容積過大，易形成超聲空白區(qū)，且超聲功率難以和大的容積相匹配。超聲與微波、復(fù)合酶及表面活性劑的聯(lián)用提取是將來很好的研究方向。4 白藜蘆醇的分析檢測白藜蘆醇的分析檢測方法主

15、要為高效液相色譜法、色譜質(zhì)譜法、毛細(xì)管電泳法、薄層掃描色譜法及一些其它方法等。4.1 高效液相色譜法( High performance liquid chromatography，HPLC) 由于白藜蘆醇的極性較小，分析檢測上普遍采用反相高效液相色譜進(jìn)行分析，色譜柱常用 Lichrospher C18、 Hypersil C18、Eclipse XDB C18等 ,流動(dòng)相常用乙睛 -水 、乙睛 - 冰乙酸和乙睛 - 磷酸等 ,檢測器常用紫外 、 二級管陣列 、 電化學(xué)和熒光掃描檢測器等。由于白藜蘆醇的順 、反異構(gòu)體具有不同的線性 ,所以在用高效液相色譜進(jìn)行定量時(shí) ,需要順 、反異構(gòu)體的兩個(gè)標(biāo)

16、準(zhǔn)樣品 。王琴飛等25采用超聲處理輔助提取HPLC直接進(jìn)樣梯度洗脫的方式，建立了一種快速提取檢測葡萄葉片中白藜蘆醇( Resveratrol) 云杉苷( piceide) -葡 萄 素( -viniferin) -葡 萄 素( -viniferin) 紫檀芪( pterostilbene) 5種芪化物同時(shí)檢測的液相方法，獲得了滿意的結(jié)果。應(yīng)用高效液相色譜熒光檢測法建立了一種快速 靈敏適用于分離和測定水果中順，反白藜蘆醇及白藜蘆醇苷定量分析的方法，此法已得到較好的應(yīng)用。 4.2 色譜質(zhì)譜法白藜蘆醇是二苯乙烯類化合物，與其衍生物結(jié)構(gòu)非常近，對其分析鑒定，一種測定方法難以滿足精度和靈敏度特殊要求，因

17、此色質(zhì)聯(lián)用技術(shù)成為分析該類化合物的一種重要的方法。Philippe等26發(fā)現(xiàn)GC/MS法可以同時(shí)測定樣品中順式和反式結(jié)構(gòu)的白藜蘆醇，但是在進(jìn)樣前需用N,O-雙三甲基硅烷基-三氟乙酞胺(BSTFA)試劑對樣品進(jìn)行衍生化處理。Dominguez等27比較了紫外吸收與質(zhì)譜在測定白藜蘆醇含量時(shí)的不同條件，反式和順式白藜蘆醇在紫外吸收法測定時(shí)波長分別為280 nm和305 nm，而質(zhì)譜測定時(shí)分別為m/z 228和m/z 238。Montes等28用氣質(zhì)聯(lián)用法測定白藜蘆醇，檢出限低至0.8 ng/mL。Huang等采用HPLCMS測定了24種水果的順、反式白藜蘆醇及其糖苷，證明了該方法能快速準(zhǔn)確的測定。該

18、方法簡化了試驗(yàn)的預(yù)處理步驟，可以對順、反式兩種白藜蘆醇同步測定，且樣品用量少，所用時(shí)間短，檢測限很低。但用該法測定的反式 白藜蘆醇偏低，順式白藜蘆醇偏高，色譜分離時(shí)產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)會導(dǎo)致測定結(jié)果的穩(wěn)定性和重現(xiàn)性比較差，且設(shè)備較昂貴。4.3 毛細(xì)管電泳 與高效液相色譜法比，毛細(xì)管電泳分離柱效更高，速度更快，消耗更低，樣品用量更少。毛細(xì)管電泳能同時(shí)分離和檢測白藜蘆醇順、反異構(gòu)體。劉芳華等29采用毛細(xì)管電泳電化學(xué)檢測法測定了白藜蘆醇，在優(yōu)化條件下，被測物濃度與峰電流在3個(gè)數(shù)量級范圍內(nèi)呈良好線性，檢出限為1×10-7g/mL。陳憲等30采用毛細(xì)管電泳安培檢測法同時(shí)測定白藜蘆醇及其糖苷，兩待測物

19、在最佳分離條件時(shí)12 min以內(nèi)能夠完全分離，檢出限分別為1.6×10-7，2.3×10-7mol/L。李利軍等31用電堆積非水毛細(xì)管電泳法同時(shí)測定虎杖中的大黃素、白藜蘆醇及其糖苷，在最佳條件下，證明了該法重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度均較好。毛細(xì)管電泳法分離能力比高效液相色譜差。將其與電化學(xué)法、安培檢測法等方法聯(lián)合使用，是檢測中的一個(gè)發(fā)展趨勢。因此開發(fā)高準(zhǔn)確性、高靈敏度的檢測器仍是該技術(shù)的研究熱點(diǎn)。4.4 薄層掃描色譜法( Thin layer scanning chromatography，TLC)周國海等32以硅膠G為薄層吸附劑，三氯甲烷丙酮醋酸水( 440.50.2) 為展開劑，對

20、虎杖各部位白藜蘆醇的含量測定進(jìn)行了方法學(xué)考察。舒友琴等33首次采用聚酰胺薄膜作固定相，苯甲醇甲酸( 1051) 為展開劑，利用熒光掃描法定量分析測定了虎杖白藜蘆醇4種異構(gòu)體，且與硅膠作固定相的薄層掃描色譜法相比，測定靈敏度提高了近100倍，此法也可應(yīng)用于其他樣品中的白藜蘆醇及其異構(gòu)體測定。4.5 其他方法白藜蘆醇的順反異構(gòu)體由于具有不同的吸收光譜，對火焰離子檢測器或電子捕獲檢測器的響應(yīng)不同，因此具有不同的線性特征，但白藜蘆醇順反異構(gòu)體的示波特性相同，因此利用二次微分簡易示波伏安法對白藜蘆醇進(jìn)行測定時(shí)只需反式白藜蘆醇標(biāo)準(zhǔn)樣品便可測其總量，且無需考慮樣品保存條件等問題。張寒俊等34探討了干紅葡萄酒

21、中白藜蘆醇熒光光譜檢測的最佳條件，其激發(fā)波長和發(fā)射波長分別為346 nm和384 nm，檢出限為8.14×1010mol L1。5 展望隨著人們生活水平的不斷提高，對保健品的需求日益增加，人們對白藜蘆醇的研究還需進(jìn)一步深入。白藜蘆醇的天然野生資源匱乏與市場的需求仍然存在著較大的差距，可通過對白藜蘆醇資源植物進(jìn)行人工栽培、育種或?qū)で笮碌母缓邹继J醇的天然來源的手段，得到更滿意的高含量白藜蘆醇新品種。但植物提取技術(shù)面臨成本高、得率低和植物資源有限等問題，故尋找反應(yīng)條件溫和、原料成本低操作相對簡單的白藜蘆醇人工轉(zhuǎn)化與合成方法有著十分重要的意義。采用物理法（微波和超聲等）與有機(jī)溶劑的結(jié)合及復(fù)

22、合酶與有機(jī)溶劑的結(jié)合等方法來提取白藜蘆醇，以HPLCMS法或HPLC熒光法等檢測法的聯(lián)合使用來檢測白藜蘆醇，可以獲得更多更高純度的白藜蘆醇產(chǎn)品。如今，很多保健品生產(chǎn)企業(yè)都非?？春冒邹继J醇的功能性，它作為終端產(chǎn)品的應(yīng)用面有望不斷拓寬，并且白藜蘆醇被加入從低度酒向功能性的膳食補(bǔ)充劑的機(jī)會也越來越多。隨著白藜蘆醇藥理作用逐漸被認(rèn)識，白藜蘆醇的開發(fā)將形成各種相關(guān)產(chǎn)業(yè)鏈，以實(shí)現(xiàn)人們對保健品的新要求，白藜蘆醇將會更加廣泛 更安全地應(yīng)用到各個(gè)領(lǐng)域當(dāng)中。參考文獻(xiàn)：1 趙克森. 白藜蘆醇的一般生物學(xué)作用J國外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生分冊，2002，29(6) :374-376.2 SiemannEH,CreasyLL.Conc

23、entrationof thephytoalex-in resveratrol inwineJAmJEnolviticulture,1992,43(1) :3 朱立賢，金征宇白藜蘆醇苷對高脂血癥大鼠血脂代謝的影響及其抗氧化作用J. 中成藥，2006，（8）：260-261.4 Kang SS，Cuendet M，Endringer DC，et al. Synthesis and biological evaluation of a library of resveratrol analogues asinhibitors of COX-1，COX-2 and NF -kB J. Bioorg

24、MedChem，2009，17：1044-1054.5 Klinge CM，Blankenship KA，Risinger KE，et al. Resveratroland estradiol rapidly activate MAPK signaling through estrogen receptors alpha and beta in endothelial cells J. JBiol Chem，2005，280：7460-7468.6 Silan C. The effects of chronic resveratrol treatment on vascular respons

25、iveness of streptozotocin-induced diabetic ratsJ. Biol Pharm Bull，2008，31：897-902.7 Spanier G，Xu H，Xia N，et al. Resveratrol reduces endothelial. oxidative stress by modulating the gene expression of superoxide dismutase 1（SOD1），glutathione peroxidase 1（GPx1）and NADPH oxidase subunit（Nox4）J. JPhysiol

26、 Pharmacol，2009，60（Suppl 4）：111-116.8 Dolinsky VW，Chan AY，Robillard Frayne I，et al. Resveratrol prevents the prohypertrophic effects of oxidativestress on LKB1J. Circulation，2009，119：1643-1652.9 Li Y，Cao Z，Zhu H. Upregulation of endogenous antioxidants and phase 2 enzymes by the red wine polyphenol，

27、resveratrol in cultured aortic smooth muscle cells leads tocytoprotection against oxidative and electrophilic stressJ.Pharmacol Res，2006，53：6-15.10 Xia N，Daiber A，Habermeier A，et al. Resveratrol reversesendothelial nitric -oxide synthase uncoupling inapolipoprotein E knockout miceJ. J Pharmacol Exp

28、Ther，2010，335：149-154.11 Csiszar A，Smith K，Labinskyy N，et al. Resveratrol attenuates TNF -alpha - induced activation of coronary arterialendothelial cells：role of NF -kappaB inhibition J. Am JPhysiol Heart Circ Physiol，2006，291：H1694-1699.12 Csiszar A，Labinskyy N，Podlutsky A，et al. Vasoprotectiveeff

29、ects of resveratrol and SIRT1：attenuation of cigarettesmoke-induced oxidative stress and proinflammatory phenotypic alterations J. Am J Physiol Heart Circ Physiol，2008，294：H2721-H2735.13 Petrovski G，Gurusamy N，Das DK. Resveratrol in cardiovascular health and disease J. Ann N Y Acad Sci，2011，1215：22-

30、33.14 Gurusamy N，Ray D，Lekli I，Das DK. Red wine antioxidant resveratrolmodified cardiac stem cells regenerate infarcted myocardium J. J Cell Mol Med，2010，14：2235-2239.15 姚寶書，齊威從葡萄皮渣中提取白藜蘆醇的研究 J .天津輕工業(yè) 學(xué)院學(xué)報(bào)，1999( 4 )：815.16 俸靈林,鄭昕.包文芳，等.RP HPLC法同時(shí)測定虎杖中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷 的含 量 J 、天然產(chǎn)物研究與開發(fā).2004，16 ( 6 )：5 3 45

31、3817 李婷,李勝,張青松，等酶法提取葡萄皮渣中白藜蘆醇工藝研究J食品科學(xué)，2008,29(12)：194197.18 錢時(shí)權(quán)，石亞中，伍亞華，等纖維素酶對山葡萄渣中白藜蘆醇提取的影響J食品與發(fā)酵工業(yè)，2011, 37(3): 207209.19 Berna A, Chafer A, Monton J B. High-pressure solubility data ofthe system resveratrol(3)+ethanol (2) +CO2(1) J. J. Supercrit Fluid,2001( 19): 133139.20 張青松,李勝, 方艷，等. CO2超臨界萃取葡

32、萄皮渣中白藜蘆醇的研究J.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2009, 44(6): 128131.21 Casas L, Mantell C, Rodriguez M, et al. Extraction of resveratrolfrom the pomace of Palomino finograpes by supercritical carbon dioxideJ. J. Food Eng., 2010(96): 304308.22 Cho Y J, Hong J Y, Chun H S, et al. Ultrasonication-assisted extraction of resveratrol from grapesJ. J. Food Eng., 2006(77): 725730.23 林軼，佟少明，王玉國，等超聲波法提取葡萄皮中白藜蘆醇J安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)，2008, 14(23): 4344.24 錢時(shí)權(quán)，石亞中，伍亞華，等纖維素酶超聲波輔助有機(jī)溶劑提取山葡萄渣中的白藜蘆醇的研究J食品工業(yè)科技，2012, 33(3):210213.25 王琴飛，馬麗艷，黃綿佳. 高效液相色譜法測定