微生物菌種的保藏

1、 菌種是從事微生物學(xué)及生命科學(xué)研究的基本材料. 微生物具有生命活力，在傳代過程中易發(fā)生變異甚至死亡，因此菌種保藏是一項(xiàng)重要的基礎(chǔ)工作，是微生物學(xué)基礎(chǔ)工作的一項(xiàng)重要內(nèi)容，也是藥品微生物工作中的一項(xiàng)常用技術(shù)。 工業(yè)微生物菌種保藏，是要使菌種生產(chǎn)能力和與生產(chǎn)工藝相適應(yīng)的優(yōu)良性狀保持穩(wěn)定，當(dāng)然做不到絕對(duì)不變，只是力求把這種衰退現(xiàn)象推遲減緩到最低限度。菌種菌種保藏1.低溫是保藏原理： 在作低溫保藏時(shí)，注意盡量不損傷細(xì)胞。在緩慢冷凍時(shí)，胞外基質(zhì)一般較快結(jié)冰而形成冰晶使基質(zhì)濃度增高，造成細(xì)胞水分外滲而大量脫水，可能使細(xì)胞死亡。如快速降溫，胞內(nèi)也很快形成冰晶，胞內(nèi)外滲透壓基本平衡，同時(shí)胞內(nèi)冰晶較小，對(duì)細(xì)胞及原

2、生質(zhì)膜的損傷也較小，菌株不易死亡，影響也較小。與低溫相關(guān)的保藏方法，如冷凍干燥法、超低溫保藏法等，都是利用低溫條件下細(xì)胞與環(huán)境的特殊平衡原理而設(shè)計(jì)的。低溫保藏法這是一種常用的簡(jiǎn)便方法。 一般的斜面孢子、液態(tài)孢子、斜面種子以及用麩皮、大米、小米或碎玉米制成的孢子，可以放在4冰箱內(nèi)保藏，這種溫度條件下不能使菌體進(jìn)入休眠，而僅是抑制微生物的生命活動(dòng)。 因此，保藏時(shí)間不宜過長(zhǎng)，一般不超過12個(gè)月為宜。 本方法雖然簡(jiǎn)便，但由于菌株處于較高的水平活性下，這對(duì)保藏株的生產(chǎn)性狀是不利的，因此，生產(chǎn)菌種一般不采用此法保藏。低溫定期移植法： 把培養(yǎng)好的斜面菌種放在低溫干燥處保存，定期移植，一般36個(gè)月移植一次(視菌種特征而定)。也可以用穿刺培養(yǎng)，定期移植法保藏細(xì)菌，其效果也較好。 穿刺培養(yǎng)是將含0.60.8的瓊脂培養(yǎng)基裝試管滅菌后直立冷凝后，用接種針尖挑取少量菌體，垂直刺入瓊脂培養(yǎng)基中心，放在適當(dāng)溫度下培養(yǎng)，待菌長(zhǎng)好后即可放低溫保存，此法較斜面保存有利，大腸桿菌可保藏2年以上不發(fā)生明顯變異。 甘油管保藏法：是利用微生物在甘油中生長(zhǎng)和代謝受到抑制的原理達(dá)到保藏目的。其方法是，將40%的甘油高壓蒸汽滅菌待用。將培養(yǎng)好的斜面菌種用無菌種用無菌水制成高濃度的菌懸液(108101