非小細胞肺癌患者外周血SurvivinmRNA表達和臨床意義

1、非小細胞肺癌患者外周血survivin mrna表達和臨床意義【摘要】目的 通過對非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer, nsclc)患者外周血生存素(survivin) mrna 的檢測；探討其對nsclc診斷的臨床價值和意義。方法采 用逆轉錄聚合酶鏈反應法(rt-pcr)檢測55例非小細胞肺 癌患者、60例對照組的外周血survivin mrna的表達情況。 結果survivin mrna在nsclc組的陽性率顯著高于對照組 (p0. 05)。結論 外周血survivin可作為早期輔助診斷nsclc 及微轉移的一個有價值的腫瘤標志物?！娟P鍵詞】survivin

2、 mrna；外周血；rt-pcr；非小細 胞肺癌doi： 10.3969/j. issn. 1004-7484 (x)2013.06. 053 文 章編號：1004-7484 (2013) -06-2913-01肺癌目前是全世界發(fā)病率、死亡率最髙的惡性腫瘤，其 中非小細胞肺癌占80-85%11,但目前缺乏特異且敏感的早 期病變的診斷指標。外周血中腫瘤標志物的檢測有助于發(fā)現 常規(guī)方法不能發(fā)現的存活于血循環(huán)中的微小腫瘤細胞灶。本 研究旨在通過rt-pcr方法檢測nsclc患者外周血中 survivin mrna的表達情況，探求nsclc早期診斷、早期血 道微轉移檢測的特異、敏感指標，為臨床應用提供

3、理論和實 驗依據。1材料和方法1. 1實驗對象 選擇2010年4月至2011年2月大連醫(yī) 科大學附屬第一醫(yī)院收治的相關患者。惡性腫瘤組55例： 男性31例，女性24例，年齡30-77歲；其中腺癌40例， 鱗癌14例，大細胞癌1例。所有病例均經病理檢查證實。 患者采血前均未行化療或放療。對照組包括肺部良性病變組 30例：男性18例，女性12例，年齡23-74歲；其中肺炎 19例，肺結核球4例，炎性假瘤7例。正常健康對照組30 例：男性15例，女性15例，年齡21-69歲，均無心、肝、 肺等器質性疾病史。1. 2方法1. 2. 1 引物合成 在 gene bank 查找 survivin mrna

4、、3 -actin mrn （內參）基因序列，引物由大連寶生物公司合 o1.2.2標本采集及total rna的提取用枸椽酸鈉抗凝 經去酶處理的采血管，取患者晨空腹肘靜脈血2. 0ml淋巴細胞分層液分離核細胞，rnaiso plus細胞裂解液 裂解，氯仿，異丙醇進一步抽提總rna。總rna用紫外分光 光度計定量，并行1%瓊脂糖凝膠電泳鑒定，加入適量 rnase-free滅菌水分裝-80°c保存?zhèn)溆谩?.2.3 rt-pcr 逆轉錄反應條件 42°c30min、95°c5min、5°c5mino在pcr反應儀中進行。反應產物-2(tc保存?zhèn)溆?。pcr擴增反應條件94°c5min,變性94°c30s, 72°c延伸lniin, 共進行30個循環(huán)，最后72°c延伸5min. , survivin mrna復 性 62°c30s, p-