HPLC法測定蘭索拉唑片在人體內(nèi)藥動學(xué)探究

1、hplc法測定蘭索拉哩片在人體內(nèi)藥動學(xué)探究【摘要】目的采用hplc法測定和研究人體血漿中 蘭索拉哇的濃度和藥動學(xué)。方法采用c18柱色譜柱、流動 相甲醇-乙惰-水流速為2ml - min-k進樣量20ul、內(nèi)標(biāo)物 奧美拉哇進行檢測。結(jié)果蘭索拉哩與峰面積比值的線性關(guān) 系良好(r=0.9998),提取回收率為95. 63%0結(jié)論hplc法 可適用于蘭索拉哩片人體血藥濃度的檢測，穩(wěn)定性較高，檢 測結(jié)果理想?！娟P(guān)鍵詞】hplc檢測法；高效液相色譜法；藥物動力 學(xué)doi： 10.3969/j. issn. 1004-7484 (x) .2013. 06. 564 文 章編號：1004-7484 (2013

2、) -06-3319-01蘭索拉哇作為一種新型的質(zhì)子泵抑制劑類的抗胃酸分 泌藥物，藥物通過血液進入患細胞壁之后，在酸性條件之下,藥物被活化，同時與質(zhì)子泵h+-k+-atp酶的藐基相結(jié)合1, 具有高度選擇性的阻滯催化胃酸分泌過程的h+-k+-atp酶， 由多種化學(xué)介質(zhì)造成的胃酸分泌進行抑制，蘭索拉哇在臨床上主要用于治療十二指腸潰瘍、潰瘍和反流性食管炎等疾病，其療效甚佳，同時對幽門螺旋桿菌的抑制效果甚佳，還 能保護和促進胃黏膜的有效愈合。根據(jù)藥物學(xué)分析，蘭索拉 哇療效持續(xù)時間較長、不良反應(yīng)較少、治療夜間的反酸效果 甚好，已經(jīng)廣泛使用于臨床治療2。本文以hplc測定法對 蘭索拉哇片人體內(nèi)的血藥濃度進

3、行研究分析，現(xiàn)將其報道如 下。1儀器和試藥1. 1儀器 高效液相色譜儀(agilent 1100)o1.2試藥 選擇沈陽藥大藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)的蘭索 拉p坐片，批號為200904114,規(guī)格為15mg/片；參比制劑： 選擇天津武田藥品有限公司生產(chǎn)的蘭索拉哩口崩片，批號為 0406,分裝批號為080402,規(guī)格為15mg/片。由沈陽藥大藥 業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)提供的蘭索拉哩對照品，批號為 100708-200602,檢測的純度為99. 0%以上；由沈陽圣元藥 業(yè)有限公司生產(chǎn)并提供的奧美拉呢對照品，批號為 100456-200602,檢測的純度為99. 0%以上。色譜純：甲醇 和乙睛；分析純：乙瞇

4、、二氯甲烷和無水碳酸鈉；水：自制 的重蒸水。2方法和結(jié)果2. 1色譜條件選用由大連中匯達提供的ods c18柱為 色譜柱，型號為152mmx4. 7mm, 5um；以甲醇-乙睛-水為流 動相，之比例為16： 27： 54；規(guī)定的流速為2mlmin-1； 規(guī)定色譜柱的溫度為(38-40) °c；檢測的波長為286mm；進 樣量規(guī)定為20ulo2.2溶液的制備 第一，標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。稱取適量的蘭 索拉哩對照品，采用甲醇進行溶解，將標(biāo)準(zhǔn)系列溶液制備成 為濃度為0. 1、0. 25、1、5、10和20ug ml-1的蘭索拉口坐 標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。第二，制備內(nèi)標(biāo)溶液。稱取適量的奧美拉口坐 對照品，仍

5、然采用甲醇進行溶解，將內(nèi)標(biāo)溶液的濃度配置成 為 5ug ml-lo2.3血漿樣品預(yù)處理取10ml塞玻璃試管，精確稱取100ul內(nèi)標(biāo)溶液，于409空氣流下，將溶劑吹干，再依次加 a 500ul血漿樣品，200ul堿化試劑，萃取3ml乙瞇-二氯甲 烷，比例為3： 2,混合3min之后，以4000r - min-1的速度 離心5min,取出上層有機相，于4(tc空氣流下將有機相吹 干，再加入100ul流動相，超聲2min之后，混勻lmin,再 將液體轉(zhuǎn)移至eppendorf試管內(nèi)，以15000r min-1的速度 離心5min,取出20ul上清液并進樣。2.4介質(zhì)效應(yīng)試驗精密稱取適量的蘭索拉哩標(biāo)準(zhǔn)溶

6、液，置于10ml的具塞試管內(nèi)，將其制備成為濃度分別為0. 1、 0. 5和1. oug - ml-1的蘭索拉哇溶液，于溶液內(nèi)加入30%的 乙睛，促使其總體的面積成為300ul,稱取出20ul進樣分析。 再稱取iml空白血漿放置于10ml具塞試管內(nèi)，在試管內(nèi)分 別加入標(biāo)準(zhǔn)液，將其濃度制備為0.1、0.5和l.oug - ml-1 的蘭索拉哩，按照“2.3”的步驟進行處理，并取出20ul行 進樣分析。其結(jié)果顯示，色譜條件不僅能保證樣品與內(nèi)源性 物質(zhì)和代謝物的完全分離，還能有效研究蘭索拉呢的藥動學(xué) 以及對臨床使用的檢測4。在此條件下，觀察其色譜峰的 峰型顯示最好，且血漿中雜志的不干擾測定方法具有較強

7、的 專屬性。最終得出蘭索拉哩的保留時間為15. 7min,且內(nèi)標(biāo) 物的保留時間為7. 7mino2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線及其最低監(jiān)測限 稱取iml的空白血漿， 分別加入適量的蘭索拉吐標(biāo)準(zhǔn)液，將其濃度制備成為0. 05、 0.1、0.2、0.4、0.8和1. 6ugml-1的系列對照品溶液，分 別加入20ul的內(nèi)標(biāo)液，之內(nèi)步驟均按照“2.3”的方法處理, 然后取出20ul行進樣分析。以蘭索拉陝與內(nèi)標(biāo)峰面積之比 為縱坐標(biāo)、濃度為橫坐標(biāo)，根據(jù)其制作成為標(biāo)準(zhǔn)曲線，從而 得出回歸方程式，y=-7. 55x10-4x+0. 126 (r=0. 9998)o 其 結(jié)果顯示，0. 05-1. 62ug - ml-1蘭索拉哇與峰面積比值的線 性關(guān)系顯不良好，定量下限為52mg ml-1 o2.6回收率及其緊密度試驗 按照“2.5”血漿樣品的 處理方法，將血漿樣品分別制備成為0. 1、0.5、l.ougml-1 各5份，再按照“2.1”色譜條件進樣檢測，并詳細記錄好 峰面積。根據(jù)其標(biāo)準(zhǔn)曲線詳細計算出血漿中蘭索拉哇的濃 度，檢測出的精密度和回收率，見表1。2.7血漿樣品的穩(wěn)定性試驗 分別稱取