高考生物(全國通用)總復(fù)習(xí)教師用書配套課件專題四生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用(選修一)

1、專題4生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用考綱考綱考情考情三年三年1414考高考指數(shù)：考高考指數(shù)：1.1.從生物材料中提取某些特定的成分從生物材料中提取某些特定的成分2.2.蛋白質(zhì)的提取和分離蛋白質(zhì)的提取和分離3.PCR3.PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用技術(shù)的基本操作和應(yīng)用4.DNA4.DNA的粗提取與鑒定的粗提取與鑒定三年三年考題考題20142014年年(3(3考考) )：山東：山東T34T34，江蘇，江蘇T16T16、T30T3020132013年年(9(9考考) )：山東：山東T34T34，江蘇，江蘇T4T4，江蘇，江蘇T22T22，廣東，廣東T28T28，北京北京T5T5，安徽，安徽T31T31，海南

2、，海南T30T30，四川，四川T4T4，四川，四川T10T1020122012年年(2(2考考) )：山東：山東T34T34，江蘇，江蘇T18T18考情考情播報(bào)播報(bào)1.1.考查內(nèi)容：主要考查考查內(nèi)容：主要考查DNADNA的粗提取與鑒定、的粗提取與鑒定、PCRPCR技術(shù)的應(yīng)用、技術(shù)的應(yīng)用、蛋白質(zhì)的提取和分離、植物有效成分的提取等知識(shí)。蛋白質(zhì)的提取和分離、植物有效成分的提取等知識(shí)。2.2.考查方式：通常以多知識(shí)點(diǎn)結(jié)合的方式考查綜合分析問題考查方式：通常以多知識(shí)點(diǎn)結(jié)合的方式考查綜合分析問題的能力，如考查植物有效成分的提取時(shí)，會(huì)結(jié)合微生物的培的能力，如考查植物有效成分的提取時(shí)，會(huì)結(jié)合微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

3、、植物組織培養(yǎng)等知識(shí)，考查蛋白質(zhì)的提取和分離養(yǎng)與應(yīng)用、植物組織培養(yǎng)等知識(shí)，考查蛋白質(zhì)的提取和分離時(shí)會(huì)結(jié)合微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用、酶的研究與應(yīng)用等知識(shí)。時(shí)會(huì)結(jié)合微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用、酶的研究與應(yīng)用等知識(shí)。3.3.考查題型：江蘇生物單科卷中多以選擇題的形式出現(xiàn)，廣考查題型：江蘇生物單科卷中多以選擇題的形式出現(xiàn)，廣東、四川卷中以選擇題的個(gè)別選項(xiàng)的形式出現(xiàn)，其他省份的東、四川卷中以選擇題的個(gè)別選項(xiàng)的形式出現(xiàn)，其他省份的理科綜合卷多以一道非選擇題的形式出現(xiàn)，屬中低檔題。理科綜合卷多以一道非選擇題的形式出現(xiàn)，屬中低檔題?！局R(shí)梳理】【知識(shí)梳理】一、一、DNADNA和蛋白質(zhì)技術(shù)和蛋白質(zhì)技術(shù)1.DNA1.DNA的粗

4、提取與的粗提取與鑒定：鑒定：(1)(1)基本原理：利用基本原理：利用DNADNA與與RNARNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在_方面的差異，提取方面的差異，提取DNADNA，去除其他成分。，去除其他成分。(2)DNA(2)DNA的粗提取原理。的粗提取原理。DNADNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaClNaCl溶液中溶液中_不同。不同。在在NaClNaCl溶液濃度為溶液濃度為_時(shí)，時(shí)，DNADNA的溶解度最小。的溶解度最小。DNADNA不溶于不溶于_溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精溶液。溶液，但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精溶液。物理和化學(xué)性質(zhì)物理和

5、化學(xué)性質(zhì)溶解度溶解度0.140.14mol/Lmol/L酒精酒精(3)(3)主要步驟及注意事項(xiàng)：主要步驟及注意事項(xiàng)：實(shí)驗(yàn)材料的選取實(shí)驗(yàn)材料的選取破碎細(xì)胞破碎細(xì)胞 選用選用DNADNA含量相對(duì)較高的生物組織含量相對(duì)較高的生物組織動(dòng)物材料更容易動(dòng)物材料更容易加入蒸餾水可使加入蒸餾水可使_加入洗滌劑可加入洗滌劑可_加入加入NaClNaCl可可_紅細(xì)胞吸水破裂紅細(xì)胞吸水破裂瓦解細(xì)胞膜瓦解細(xì)胞膜溶解溶解DNADNA獲取含獲取含DNADNA的濾液的濾液過濾，取濾液過濾，取濾液去除濾液中的雜質(zhì)去除濾液中的雜質(zhì)DNADNA的析出的析出利用利用DNADNA不溶不溶于于_的原理的原理，析出，析出DNADNA。DN

6、ADNA的鑒定的鑒定 控制控制_的濃度去除雜質(zhì)的濃度去除雜質(zhì)利用嫩肉粉中的利用嫩肉粉中的_分解蛋白質(zhì)分解蛋白質(zhì)利用利用_使蛋白質(zhì)變性使蛋白質(zhì)變性方法：方法：DNADNA溶液中加入溶液中加入_試劑，沸水浴加熱試劑，沸水浴加熱5 min5 min現(xiàn)象：溶液變現(xiàn)象：溶液變_NaClNaCl溶液溶液蛋白酶蛋白酶高溫高溫冷卻的酒精溶液冷卻的酒精溶液二苯胺二苯胺藍(lán)色藍(lán)色2.2.多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNADNA片段：片段：(1)PCR(1)PCR原理。原理。DNADNA的熱變性：的熱變性：PCRPCR環(huán)境：環(huán)境：一定的一定的_中。中。緩沖溶液緩沖溶液變性變性冷卻冷卻PCRPCR條件條件過程控

7、制：控制過程控制：控制_使使DNADNA復(fù)制復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行。在體外反復(fù)進(jìn)行。DNADNA母鏈：母鏈：PCRPCR模板模板酶：酶：_引物：分別與引物：分別與_相結(jié)合相結(jié)合原料：四種原料：四種_Taq DNATaq DNA聚合酶聚合酶兩條模板鏈兩條模板鏈脫氧核苷酸脫氧核苷酸溫度溫度(2)PCR(2)PCR過程：過程：變性變性復(fù)性復(fù)性延伸延伸(3)PCR(3)PCR結(jié)果：兩引物間固定長(zhǎng)度的結(jié)果：兩引物間固定長(zhǎng)度的DNADNA序列呈序列呈_擴(kuò)增擴(kuò)增( (即即2n)2n)。條件：溫度上升到條件：溫度上升到 _ _ 以上以上實(shí)質(zhì)：雙鏈實(shí)質(zhì)：雙鏈DNA_DNA_為單鏈為單鏈條件：溫度下降到條件：溫度下降

8、到 _ _ 左右左右實(shí)質(zhì)：兩種實(shí)質(zhì)：兩種_與兩條單鏈與兩條單鏈DNADNA結(jié)合結(jié)合條件：溫度上升到條件：溫度上升到 _ _ 左右左右實(shí)質(zhì)：在實(shí)質(zhì)：在_的作用下，合成子鏈的作用下，合成子鏈9090解聚解聚5050引物引物7272Taq DNATaq DNA聚合酶聚合酶指數(shù)指數(shù)3.3.血紅蛋白的提取和分離：血紅蛋白的提取和分離：(1)(1)常用方法常用方法 (2)(2)實(shí)驗(yàn)步驟：樣品處理實(shí)驗(yàn)步驟：樣品處理( (紅細(xì)胞的洗滌紅細(xì)胞的洗滌_的釋放的釋放分離血分離血紅蛋白溶液紅蛋白溶液)粗分離粗分離_純度鑒定。純度鑒定。 _法：依據(jù)法：依據(jù)_的大小分離蛋白質(zhì)的大小分離蛋白質(zhì)_法：依據(jù)法：依據(jù)_、分子本身

9、大小、形狀、分子本身大小、形狀的不同分離蛋白質(zhì)的不同分離蛋白質(zhì)凝膠色譜凝膠色譜相對(duì)分子質(zhì)量相對(duì)分子質(zhì)量電泳電泳帶電性質(zhì)差異帶電性質(zhì)差異血紅蛋白血紅蛋白純化純化二、植物有效成分的提取二、植物有效成分的提取1.1.提取玫瑰精油實(shí)驗(yàn)：提取玫瑰精油實(shí)驗(yàn)：(1)(1)方法：方法：_法。法。(2)(2)實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：鮮玫瑰花鮮玫瑰花 _油水混合物油水混合物玫瑰油玫瑰油 除水除水 分離油層分離油層水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾加清水加入加入_加入24Na SO無水過濾NaClNaCl水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾2.2.提取橘皮精油的實(shí)驗(yàn)：提取橘皮精油的實(shí)驗(yàn)：(1)(1)方法：一般采用方法：一般采用_法。法。(2)(2)

10、實(shí)驗(yàn)流程：實(shí)驗(yàn)流程：石灰水浸泡石灰水浸泡漂洗漂洗_過濾過濾靜置靜置再次再次_橘皮油橘皮油壓榨壓榨壓榨壓榨過濾過濾3.3.胡蘿卜素的提?。汉}卜素的提?。?1)(1)胡蘿卜素的性質(zhì)胡蘿卜素的性質(zhì)(2)(2)胡蘿卜素的提取胡蘿卜素的提取(3)(3)胡蘿卜素胡蘿卜素的提取流程：的提取流程：胡蘿卜胡蘿卜粉碎粉碎_萃取萃取_濃縮濃縮胡蘿卜素胡蘿卜素(4)(4)胡蘿卜素的鑒定：胡蘿卜素的鑒定：_法。法。不溶于不溶于_微溶于乙醇微溶于乙醇易溶于易溶于_等有機(jī)溶劑等有機(jī)溶劑提取方法：提取方法：_法法石油醚最適宜作石油醚最適宜作_水水石油醚石油醚萃取萃取萃取劑萃取劑干燥干燥過濾過濾紙層析紙層析【速記卡片】【速記

11、卡片】1.DNA1.DNA的粗提取與鑒定：的粗提取與鑒定：(1)DNA(1)DNA的溶解性：的溶解性：DNADNA在在0.14 mol/L NaCl0.14 mol/L NaCl溶液中的溶解度最??；溶液中的溶解度最?。籇NADNA不溶于酒精溶液，而某些蛋白質(zhì)則溶于酒精溶液，據(jù)此也可使不溶于酒精溶液，而某些蛋白質(zhì)則溶于酒精溶液，據(jù)此也可使DNADNA和和蛋白質(zhì)分離。蛋白質(zhì)分離。(2)DNA(2)DNA的耐受性：的耐受性：DNADNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑都具有較好的耐受性。對(duì)酶、高溫和洗滌劑都具有較好的耐受性。(3)DNA(3)DNA的鑒定：的鑒定：DNADNA在沸水浴的條件下，遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色

12、。在沸水浴的條件下，遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色。2.PCR2.PCR技術(shù)：技術(shù)：(1)PCR(1)PCR原理：原理：PCRPCR反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中進(jìn)行，需提供反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中進(jìn)行，需提供DNADNA模板、模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物、四種脫氧核苷酸、耐熱的分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物、四種脫氧核苷酸、耐熱的DNADNA聚合酶。聚合酶。(2)PCR(2)PCR過程：通過控制溫度使過程：通過控制溫度使DNADNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行，每一個(gè)循環(huán)復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行，每一個(gè)循環(huán)包括變性包括變性復(fù)性復(fù)性延伸。延伸。3.3.血紅蛋白的提取和分離：血紅蛋白的提取和分離：(1)(1)凝

13、膠色譜法：根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。凝膠色譜法：根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。(2)(2)電泳法：利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本電泳法：利用待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)身的大小、形狀的不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實(shí)現(xiàn)樣品中各種分子的分離。樣品中各種分子的分離。 4.4.植物有效成分的提?。褐参镉行С煞值奶崛。?1)(1)植物芳香油的提取方法：壓榨法、蒸餾法和萃取法等。植物芳香油的提取方法：壓榨法、蒸餾法和萃取法等。(2)(2)芳香油的性質(zhì)：不溶于水，易溶于有

14、機(jī)溶劑，因此可用有機(jī)溶劑芳香油的性質(zhì)：不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑，因此可用有機(jī)溶劑作為提取劑來提取芳香油。作為提取劑來提取芳香油。(3)(3)胡蘿卜素的性質(zhì)：是橘黃色結(jié)晶，從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，常胡蘿卜素的性質(zhì)：是橘黃色結(jié)晶，從胡蘿卜中提取胡蘿卜素，常用親脂用親脂( (水不溶水不溶) )性有機(jī)溶劑性有機(jī)溶劑( (或有機(jī)溶劑或有機(jī)溶劑) )作萃取劑。作萃取劑。(4)(4)胡蘿卜素的提取方法：萃取法。胡蘿卜素的提取方法：萃取法。(5)(5)胡蘿卜素的鑒定：紙層析法，在鑒定過程中需要用標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)照。胡蘿卜素的鑒定：紙層析法，在鑒定過程中需要用標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)照?？键c(diǎn)一考點(diǎn)一DNADNA和蛋白質(zhì)技術(shù)和蛋白質(zhì)

15、技術(shù)1.DNA1.DNA與蛋白質(zhì)在物理化學(xué)性質(zhì)方面的差異：與蛋白質(zhì)在物理化學(xué)性質(zhì)方面的差異：比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目DNADNA蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)溶溶解解性性2 mol/L NaCl2 mol/L NaCl溶液中溶液中溶解溶解析出析出0.14 mol/L0.14 mol/LNaClNaCl溶液中溶液中析出析出溶解溶解酒精溶液中酒精溶液中析出析出溶解溶解比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目DNADNA蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)耐耐受受性性蛋白酶蛋白酶無影響無影響水解水解高溫高溫8080以上以上變性變性不能忍受不能忍受60608080的高溫的高溫鑒定方法鑒定方法在沸水浴條件下與在沸水浴條件下與二苯胺反應(yīng)呈藍(lán)色二苯胺反應(yīng)呈藍(lán)色與雙縮脲試劑與雙縮脲

16、試劑反應(yīng)呈紫色反應(yīng)呈紫色2.2.比較細(xì)胞內(nèi)比較細(xì)胞內(nèi)DNADNA復(fù)制與體外復(fù)制與體外DNADNA擴(kuò)增擴(kuò)增(PCR)(PCR)：項(xiàng)目項(xiàng)目DNADNA復(fù)制復(fù)制PCRPCR不不同同點(diǎn)點(diǎn)場(chǎng)所場(chǎng)所細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞外細(xì)胞外能量能量ATPATP提供能量提供能量不需不需ATPATP提供能量提供能量酶酶解旋酶、解旋酶、DNADNA聚合酶聚合酶耐高溫的耐高溫的TaqDNATaqDNA聚合酶聚合酶是否有是否有轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄伴有轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生引物伴有轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)生引物無轉(zhuǎn)錄，需加入無轉(zhuǎn)錄，需加入兩種引物兩種引物項(xiàng)目項(xiàng)目DNADNA復(fù)制復(fù)制PCRPCR不不同同點(diǎn)點(diǎn)特點(diǎn)特點(diǎn)邊解旋邊復(fù)制，邊解旋邊復(fù)制，半保留復(fù)制半保留復(fù)制體外迅速擴(kuò)增體

17、外迅速擴(kuò)增循環(huán)次數(shù)循環(huán)次數(shù)受生物體自身控制受生物體自身控制三十多次三十多次緩沖溶液緩沖溶液不需要不需要需要人為控制需要人為控制設(shè)備設(shè)備無無嚴(yán)格控制溫度變化嚴(yán)格控制溫度變化的溫控設(shè)備的溫控設(shè)備項(xiàng)目項(xiàng)目DNADNA復(fù)制復(fù)制PCRPCR相相同同點(diǎn)點(diǎn)原料原料四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸復(fù)制原理復(fù)制原理嚴(yán)格遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則嚴(yán)格遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則模板模板DNADNA為模板為模板引物引物都需要與模板相結(jié)合的引物都需要與模板相結(jié)合的引物3.3.血紅蛋白的提取和分離：血紅蛋白的提取和分離：(1)(1)凝膠色譜法：凝膠色譜法：蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)比較項(xiàng)目比較項(xiàng)目相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量小相對(duì)分子質(zhì)量

18、小移動(dòng)位置移動(dòng)位置凝膠顆粒外部凝膠顆粒外部凝膠顆粒內(nèi)部凝膠顆粒內(nèi)部移動(dòng)路程移動(dòng)路程短短長(zhǎng)長(zhǎng)移動(dòng)速度移動(dòng)速度快快慢慢洗脫次序洗脫次序先先后后(2)(2)主要實(shí)驗(yàn)步驟及意義：主要實(shí)驗(yàn)步驟及意義： 紅細(xì)胞的洗滌：去除雜蛋白等紅細(xì)胞的洗滌：去除雜蛋白等 樣品處理樣品處理 釋放血紅蛋白：紅細(xì)胞吸水破裂釋放血紅蛋白：紅細(xì)胞吸水破裂 分離血紅蛋白：離心處理，獲得血紅蛋白溶液分離血紅蛋白：離心處理，獲得血紅蛋白溶液 方法：透析方法：透析 目的：除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)目的：除去樣品中相對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)粗分離粗分離 方法：凝膠色譜法方法：凝膠色譜法 目的：根據(jù)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量大小去除雜蛋白目的：

19、根據(jù)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量大小去除雜蛋白 方法：方法：SDSSDS聚丙烯酰胺凝膠電泳聚丙烯酰胺凝膠電泳 遷移率：取決于蛋白質(zhì)分子的大小遷移率：取決于蛋白質(zhì)分子的大小純度鑒定純度鑒定 純化純化 【提分技法】【提分技法】凝膠色譜法和電泳法分離蛋白質(zhì)的方法分析凝膠色譜法和電泳法分離蛋白質(zhì)的方法分析(1)(1)凝膠色譜法：只看蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量大小，先洗脫出來的相凝膠色譜法：只看蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量大小，先洗脫出來的相對(duì)分子質(zhì)量大。對(duì)分子質(zhì)量大。(2)(2)電泳法。電泳法。特點(diǎn)：移動(dòng)速度由多種因素共同決定，包括待分離樣品中各種分子特點(diǎn)：移動(dòng)速度由多種因素共同決定，包括待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異

20、以及分子本身的大小、形狀的不同。帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同。常用方法：常用方法：SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，帶電性質(zhì)和電量主要取決于聚丙烯酰胺凝膠電泳，帶電性質(zhì)和電量主要取決于SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝膠顆粒，分離效果只看蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量大小。聚丙烯酰胺凝膠顆粒，分離效果只看蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量大小?！究碱}回訪】【考題回訪】1.(20131.(2013廣東高考改編廣東高考改編) )地中海貧血癥屬于常染色體遺傳病。一對(duì)夫地中海貧血癥屬于常染色體遺傳病。一對(duì)夫婦生有一位重型婦生有一位重型地中海貧血癥患兒，分析發(fā)現(xiàn)，患兒血紅蛋白地中海貧血癥患兒，分析發(fā)現(xiàn)，患兒血紅蛋白

21、鏈鏈第第3939位氨基酸的編碼序列發(fā)生了點(diǎn)突變位氨基酸的編碼序列發(fā)生了點(diǎn)突變(CT)(CT)。用。用PCRPCR擴(kuò)增包含該位擴(kuò)增包含該位點(diǎn)的一段點(diǎn)的一段DNADNA片段片段l l，突變序列的擴(kuò)增片段可用一種限制酶酶切為大小，突變序列的擴(kuò)增片段可用一種限制酶酶切為大小不同的兩個(gè)片段不同的兩個(gè)片段m m和和s s；但正常序列的擴(kuò)增片段不能被該酶酶切，如圖；但正常序列的擴(kuò)增片段不能被該酶酶切，如圖a a。目前患兒母親再次懷孕，并接受了產(chǎn)前基因診斷。家庭成員及胎。目前患兒母親再次懷孕，并接受了產(chǎn)前基因診斷。家庭成員及胎兒的兒的PCRPCR擴(kuò)增產(chǎn)物酶切電泳帶型示意圖見圖擴(kuò)增產(chǎn)物酶切電泳帶型示意圖見圖b

22、b。( (終止密碼子為終止密碼子為UAAUAA、UAGUAG、UGAUGA。) )(1)(1)在獲得單鏈模板的方式上，在獲得單鏈模板的方式上，PCRPCR擴(kuò)增與體內(nèi)擴(kuò)增與體內(nèi)DNADNA復(fù)制不同，前者通復(fù)制不同，前者通過過解開雙鏈，后者通過解開雙鏈，后者通過解開雙鏈。解開雙鏈。(2)(2)據(jù)圖分析，胎兒的基因型是據(jù)圖分析，胎兒的基因型是( (基因用基因用A A、a a表示表示) )?；純??；純夯疾】赡艿脑蚴腔疾】赡艿脑蚴堑脑忌臣?xì)胞通過的原始生殖細(xì)胞通過過程產(chǎn)生配子時(shí)，發(fā)生了基因突變；從基因表達(dá)水平分析，其患病過程產(chǎn)生配子時(shí)，發(fā)生了基因突變；從基因表達(dá)水平分析，其患病是由于是由于_?！窘?/p>

23、題指南】【解題指南】(1)(1)題干關(guān)鍵信息：突變序列的擴(kuò)增片段可用一種限制題干關(guān)鍵信息：突變序列的擴(kuò)增片段可用一種限制酶酶切為大小不同的兩個(gè)片段酶酶切為大小不同的兩個(gè)片段m m和和s s，但正常序列的擴(kuò)增片段不能被該，但正常序列的擴(kuò)增片段不能被該酶酶切。酶酶切。(2)(2)題干隱含信息：不同片段經(jīng)電泳后位置不同。題干隱含信息：不同片段經(jīng)電泳后位置不同。(3)(3)圖中隱含信息：胎兒既有正常序列，也有突變序列。圖中隱含信息：胎兒既有正常序列，也有突變序列?！窘馕觥俊窘馕觥?1)PCR(1)PCR是體外擴(kuò)增是體外擴(kuò)增DNADNA的方式，通過高溫使雙鏈解開，體內(nèi)的方式，通過高溫使雙鏈解開，體內(nèi)DN

24、ADNA的復(fù)制則是通過解旋酶使的復(fù)制則是通過解旋酶使DNADNA雙鏈解開。雙鏈解開。(2)(2)由題意可知重型由題意可知重型地中海貧血癥是隱性遺傳病，突變后的序列可地中海貧血癥是隱性遺傳病，突變后的序列可以被剪切成以被剪切成m m和和s s兩個(gè)片段，而正常序列無法被剪切，因此母親、父親、兩個(gè)片段，而正常序列無法被剪切，因此母親、父親、患兒和胎兒的基因型分別為患兒和胎兒的基因型分別為AAAA、AaAa、aaaa和和AaAa。母親和父親的基因型為。母親和父親的基因型為AAAA和和AaAa，生下患兒可能是因?yàn)槟赣H的原始生殖細(xì)胞通過減數(shù)分裂產(chǎn)生，生下患兒可能是因?yàn)槟赣H的原始生殖細(xì)胞通過減數(shù)分裂產(chǎn)生配子

25、時(shí)發(fā)生了基因突變。由圖可知，該突變?yōu)橛赡０彐溕系呐渥訒r(shí)發(fā)生了基因突變。由圖可知，該突變?yōu)橛赡０彐溕系腉TCGTC突變突變成成ATCATC，mRNAmRNA上由上由CAGCAG變成變成UAGUAG，因此終止密碼子提前出現(xiàn)，使翻譯提，因此終止密碼子提前出現(xiàn)，使翻譯提前終止。前終止。答案：答案：(1)(1)高溫解旋酶高溫解旋酶(2)Aa(2)Aa母親減數(shù)分裂母親減數(shù)分裂mRNAmRNA上編碼第上編碼第3939位氨基酸的密碼子變?yōu)榻K位氨基酸的密碼子變?yōu)榻K止密碼子，止密碼子，鏈的合成提前終止，鏈的合成提前終止，鏈變短而失去功能鏈變短而失去功能【延伸探究】【延伸探究】電泳法只能分離蛋白質(zhì)分子嗎？試分析原因

26、。電泳法只能分離蛋白質(zhì)分子嗎？試分析原因。提示：提示：不是。電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程，該不是。電泳是指帶電粒子在電場(chǎng)的作用下發(fā)生遷移的過程，該方法除用于分離蛋白質(zhì)外，也可用于分離大小不等的方法除用于分離蛋白質(zhì)外，也可用于分離大小不等的DNADNA片段等。片段等。2.(20152.(2015西安模擬西安模擬) )血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分，負(fù)責(zé)血液中成分，負(fù)責(zé)血液中O O2 2和部分和部分COCO2 2的運(yùn)輸。請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分的運(yùn)輸。請(qǐng)根據(jù)血紅蛋白的提取和分離回答問題：離回答問題：(1)(1)凝膠色譜法的基

27、本原理是根據(jù)凝膠色譜法的基本原理是根據(jù)_分離蛋白質(zhì)分離蛋白質(zhì)的有效方法。的有效方法。(2)(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除洗滌紅細(xì)胞的目的是去除，洗滌次數(shù)過少，無法除去，洗滌次數(shù)過少，無法除去；離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使；離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使等一同等一同沉淀，達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是沉淀，達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是。釋放。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是血紅蛋白的過程中起作用的是 。(3)(3)洗脫的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體洗脫的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體( (填填“相同相同”或或“不同不同”) )，洗脫時(shí)，對(duì)洗脫液的流速要求是，洗脫時(shí)，對(duì)洗脫液的流速要求是。(4)

28、(4)在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L20 mmol/L的磷酸緩沖液的磷酸緩沖液(pH(pH為為7.0)7.0)的目的是的目的是，如果紅色，如果紅色區(qū)帶區(qū)帶，說明色譜柱制作成功。，說明色譜柱制作成功?！窘忸}指南】【解題指南】(1)(1)關(guān)鍵詞：關(guān)鍵詞：“洗滌紅細(xì)胞洗滌紅細(xì)胞”“”“離心速度離心速度”“”“釋放血紅釋放血紅蛋白蛋白”。(2)(2)隱含信息：紅色區(qū)帶為血紅蛋白。隱含信息：紅色區(qū)帶為血紅蛋白?！窘馕觥俊窘馕觥?1)(1)凝膠色譜法是根據(jù)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量大小分離蛋白凝膠色譜法是根據(jù)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。質(zhì)的有效方

29、法。(2)(2)洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿蛋白等雜蛋白，如果洗滌次數(shù)過少，洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿蛋白等雜蛋白，如果洗滌次數(shù)過少，無法除去血漿蛋白；離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使白細(xì)胞等一同沉淀，無法除去血漿蛋白；離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使白細(xì)胞等一同沉淀，達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是離心后的上清液中沒有黃色。達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是離心后的上清液中沒有黃色。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是蒸餾水和甲苯，其中蒸餾水的作用釋放血紅蛋白的過程中起作用的是蒸餾水和甲苯，其中蒸餾水的作用是使紅細(xì)胞吸水破裂，甲苯可溶解細(xì)胞膜，加入甲苯能加速紅細(xì)胞破是使紅細(xì)胞吸水破裂，甲苯可溶解細(xì)胞膜，加入甲

30、苯能加速紅細(xì)胞破裂并釋放血紅蛋白。裂并釋放血紅蛋白。(3)(3)洗脫的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體相同，否則會(huì)影響洗脫洗脫的液體應(yīng)盡量與浸泡凝膠所用的液體相同，否則會(huì)影響洗脫液的液的pHpH，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)受到破壞。洗脫時(shí)，洗脫液的流速要保持穩(wěn)，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)受到破壞。洗脫時(shí)，洗脫液的流速要保持穩(wěn)定，否則將影響蛋白質(zhì)的分離效果。定，否則將影響蛋白質(zhì)的分離效果。(4)(4)在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L20 mmol/L的磷酸緩沖液的磷酸緩沖液(pH(pH為為7.0)7.0)的目的是準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的的目的是準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的

31、生理環(huán)境，保持體外的pHpH和體內(nèi)的和體內(nèi)的一致，進(jìn)而保持蛋白質(zhì)的正常形態(tài)結(jié)構(gòu)；洗脫時(shí)，血紅蛋白的顏色可一致，進(jìn)而保持蛋白質(zhì)的正常形態(tài)結(jié)構(gòu)；洗脫時(shí)，血紅蛋白的顏色可以指示血紅蛋白的位置，因此當(dāng)紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng)時(shí)，說明色以指示血紅蛋白的位置，因此當(dāng)紅色區(qū)帶均勻一致地移動(dòng)時(shí)，說明色譜柱制作成功。譜柱制作成功。答案：答案：(1)(1)相對(duì)分子質(zhì)量的大小相對(duì)分子質(zhì)量的大小(2)(2)雜蛋白雜蛋白( (血漿蛋白血漿蛋白) )血漿蛋白白細(xì)胞離心后的上清液中沒有血漿蛋白白細(xì)胞離心后的上清液中沒有黃色蒸餾水和甲苯黃色蒸餾水和甲苯(3)(3)相同保持穩(wěn)定相同保持穩(wěn)定(4)(4)準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，

32、保持體外的準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pHpH和體內(nèi)的一致均和體內(nèi)的一致均勻一致地移動(dòng)勻一致地移動(dòng)【延伸探究】【延伸探究】在血紅蛋白的提取過程中，哪些過程能影響血紅蛋白提在血紅蛋白的提取過程中，哪些過程能影響血紅蛋白提取的純度？取的純度？提示：提示：細(xì)胞的洗滌次數(shù)：次數(shù)少，不能除去血漿蛋白。細(xì)胞的洗滌次數(shù)：次數(shù)少，不能除去血漿蛋白。離心速度和時(shí)間：離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)，會(huì)使白細(xì)胞等一同沉離心速度和時(shí)間：離心速度過高和時(shí)間過長(zhǎng)，會(huì)使白細(xì)胞等一同沉淀，得不到純凈的紅細(xì)胞。淀，得不到純凈的紅細(xì)胞。透析：透析不徹底，會(huì)含有小分子雜質(zhì)。透析：透析不徹底，會(huì)含有小分子雜質(zhì)。色譜柱的裝填：不能存

33、在氣泡，若存在氣泡，則會(huì)降低分離效果。色譜柱的裝填：不能存在氣泡，若存在氣泡，則會(huì)降低分離效果。洗脫：洗脫液的流速要保持穩(wěn)定，否則將影響蛋白質(zhì)的分離效果。洗脫：洗脫液的流速要保持穩(wěn)定，否則將影響蛋白質(zhì)的分離效果。3.(20153.(2015臨沂模擬臨沂模擬) )某生物興趣小組開展某生物興趣小組開展DNADNA粗提取的相關(guān)探究活動(dòng)。粗提取的相關(guān)探究活動(dòng)。具體步驟如下：具體步驟如下：材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2 2份，每份份，每份10 g10 g。剪碎后。剪碎后分成兩組，一組置于分成兩組，一組置于2020，另一組置于，另一組置于-20-20條件下，

34、保存條件下，保存24 h24 h。DNADNA粗提取：粗提?。旱谝徊剑簩⑸鲜霾牧戏謩e放入研缽中，各加入第一步：將上述材料分別放入研缽中，各加入15 mL15 mL研磨液，充分研研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。磨。用兩層紗布過濾，取濾液備用。第二步：先向第二步：先向6 6只小燒杯中分別注入只小燒杯中分別注入10 mL10 mL濾液，再加入濾液，再加入20 mL20 mL體積分體積分?jǐn)?shù)為數(shù)為95%95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。狀物纏繞在玻璃棒上。第三步：取第三步：取6 6支試管，分別加

35、入等量的支試管，分別加入等量的2 mol/L2 mol/L的的NaClNaCl溶液溶解上述絮溶液溶解上述絮狀物。狀物。DNADNA檢測(cè)：在上述試管中各加入檢測(cè)：在上述試管中各加入4 mL4 mL二苯胺試劑?；旌暇鶆蚝螅糜诙桨吩噭??；旌暇鶆蚝?，置于沸水中加熱沸水中加熱5 min5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表。，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺，結(jié)果如下表。材料保存溫度材料保存溫度花菜花菜辣椒辣椒蒜黃蒜黃2020+ +-20-20+( (注：注：“+”+”越多表示藍(lán)色越深越多表示藍(lán)色越深) )分析上述實(shí)驗(yàn)過程，回答下列問題：分析上述實(shí)驗(yàn)過程，回答下列問題：(1)(1)該探

36、究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是該探究性實(shí)驗(yàn)課題名稱是_。(2)(2)第二步中第二步中“緩緩地緩緩地”攪拌，這是為了減少攪拌，這是為了減少_。(3)(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，得出結(jié)論并分析。結(jié)論結(jié)論1 1：與：與2020相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在相比，相同實(shí)驗(yàn)材料在-20-20條件下保存，條件下保存，DNADNA的提的提取量較多。取量較多。結(jié)論結(jié)論2 2：_。針對(duì)結(jié)論針對(duì)結(jié)論1 1，請(qǐng)?zhí)岢龊侠淼慕忉專?，?qǐng)?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲。(4)(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNADNA均不相溶，且均不相溶，且對(duì)對(duì)DNADNA影響極小。為了進(jìn)一步

37、提高影響極小。為了進(jìn)一步提高DNADNA純度，依據(jù)氯仿的特性，在純度，依據(jù)氯仿的特性，在DNADNA粗提取粗提取第三步第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是：的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是：。然。然后用體積分?jǐn)?shù)為后用體積分?jǐn)?shù)為95%95%的冷酒精溶液使的冷酒精溶液使DNADNA析出。析出?！窘馕觥俊窘馕觥勘绢}考查本題考查DNADNA粗提取技術(shù)的原理、操作過程及分析、判斷能粗提取技術(shù)的原理、操作過程及分析、判斷能力，從題目力，從題目實(shí)驗(yàn)步驟看出，該實(shí)驗(yàn)的課題是探究不同材料和不同保存實(shí)驗(yàn)步驟看出，該實(shí)驗(yàn)的課題是探究不同材料和不同保存溫度對(duì)溫度對(duì)DNADNA提取量的影響。在第二步中提取量的影響。在第二步中，為了防

38、止，為了防止DNADNA斷裂，要緩緩地?cái)嗔?，要緩緩地?cái)嚢?；從表中結(jié)果看出，由于低溫抑制了相關(guān)酶的活性，攪拌；從表中結(jié)果看出，由于低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNADNA降解慢，降解慢，使得相同材料在低溫保存下的使得相同材料在低溫保存下的DNADNA提取量大；在相同條件下，蒜黃藍(lán)提取量大；在相同條件下，蒜黃藍(lán)色最深，說明相同條件下從蒜黃中提取的色最深，說明相同條件下從蒜黃中提取的DNADNA量最大；由于氯仿密度量最大；由于氯仿密度比水大，可使蛋白質(zhì)變性沉淀，而與水、比水大，可使蛋白質(zhì)變性沉淀，而與水、DNADNA不相溶，這樣可將不相溶，這樣可將第三第三步獲得步獲得的溶液與等量的氯仿混合，靜置一段時(shí)間

39、，吸取上清液。的溶液與等量的氯仿混合，靜置一段時(shí)間，吸取上清液。答案：答案：(1)(1)探究不同材料和不同保存溫度對(duì)探究不同材料和不同保存溫度對(duì)DNADNA提取量的影響提取量的影響(2)DNA(2)DNA斷裂斷裂(3)(3)等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的DNADNA量最多量最多低溫抑制了相關(guān)酶的活性，低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNADNA降解速度慢降解速度慢(4)(4)將將第三步第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，吸獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時(shí)間，吸取上清液取上清液【知識(shí)總結(jié)】【知識(shí)總結(jié)】

40、DNADNA粗提取實(shí)驗(yàn)的相關(guān)提醒粗提取實(shí)驗(yàn)的相關(guān)提醒(1)(1)制備雞血細(xì)胞液時(shí)，要注意向雞血中加檸檬酸鈉，防止血液凝固。制備雞血細(xì)胞液時(shí)，要注意向雞血中加檸檬酸鈉，防止血液凝固。(2)(2)漲破細(xì)胞的方法：向血細(xì)胞中加入蒸餾水，血細(xì)胞溶液的濃度大漲破細(xì)胞的方法：向血細(xì)胞中加入蒸餾水，血細(xì)胞溶液的濃度大于蒸餾水的濃度，從而使血細(xì)胞大量吸水而漲破。不能用生理鹽水，于蒸餾水的濃度，從而使血細(xì)胞大量吸水而漲破。不能用生理鹽水，因?yàn)檠?xì)胞溶液的濃度與生理鹽水的濃度相當(dāng)，所以血細(xì)胞在生理鹽因?yàn)檠?xì)胞溶液的濃度與生理鹽水的濃度相當(dāng)，所以血細(xì)胞在生理鹽水中不能吸收水分。水中不能吸收水分。(3)(3)兩次加入

41、蒸餾水，第一次是為了使血細(xì)胞吸水漲破；第二次是為兩次加入蒸餾水，第一次是為了使血細(xì)胞吸水漲破；第二次是為了降低氯化鈉的濃度，有利于了降低氯化鈉的濃度，有利于DNADNA的析出。的析出。(4)(4)兩次析出兩次析出DNADNA的方法：第一次是加入蒸餾水，降低氯化鈉的濃度，的方法：第一次是加入蒸餾水，降低氯化鈉的濃度，使使DNADNA析出；第二次是加入冷酒精溶液，因?yàn)槲龀?；第二次是加入冷酒精溶液，因?yàn)镈NADNA不溶于酒精溶液。不溶于酒精溶液?！炯庸逃?xùn)練】【加固訓(xùn)練】1.1.凝膠色譜技術(shù)是一種快速而又簡(jiǎn)單的分離技術(shù)，對(duì)高分子物質(zhì)有很凝膠色譜技術(shù)是一種快速而又簡(jiǎn)單的分離技術(shù)，對(duì)高分子物質(zhì)有很好的分離

42、效果，不但應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工好的分離效果，不但應(yīng)用于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究，而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。請(qǐng)據(jù)圖回答問題：業(yè)生產(chǎn)。請(qǐng)據(jù)圖回答問題：(1)a(1)a、b b均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是均為蛋白質(zhì)分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是，原因是原因是_。(2)(2)自己制作凝膠色譜柱時(shí)，在色譜柱底部自己制作凝膠色譜柱時(shí)，在色譜柱底部d d位置相當(dāng)于多孔板的位置相當(dāng)于多孔板的結(jié)構(gòu)可由結(jié)構(gòu)可由替代。替代。(3)(3)裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是裝填凝膠色譜柱時(shí)，色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，原因是_。(4)(4)若選用若選用Sephadex G-7

43、5Sephadex G-75，則，則“G”G”表示表示，7575表示表示?！窘馕觥俊窘馕觥?1)(1)用凝膠色譜技術(shù)分離各種不同蛋白質(zhì)時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量用凝膠色譜技術(shù)分離各種不同蛋白質(zhì)時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量較大的物質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較較大的物質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，所以向下移動(dòng)的速度較快。相對(duì)分子質(zhì)量較小的物質(zhì)容易進(jìn)入凝短，所以向下移動(dòng)的速度較快。相對(duì)分子質(zhì)量較小的物質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢，所以大分子物質(zhì)先洗脫出膠內(nèi)部的通道，路程較長(zhǎng)，移動(dòng)速度較慢，所以大分子物質(zhì)先洗脫出來。來。(2)(2)制作凝膠色譜柱時(shí)，在色

44、譜柱底部制作凝膠色譜柱時(shí)，在色譜柱底部d d位置相當(dāng)于多孔板的結(jié)構(gòu)位置相當(dāng)于多孔板的結(jié)構(gòu)可由尼龍網(wǎng)和尼龍紗替代?？捎赡猃埦W(wǎng)和尼龍紗替代。(3)(3)在色譜柱中裝填凝膠的時(shí)候要盡量緊在色譜柱中裝填凝膠的時(shí)候要盡量緊密，以降低凝膠顆粒之間的空隙。一是在裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡密，以降低凝膠顆粒之間的空隙。一是在裝填凝膠柱時(shí)，不得有氣泡存在，因?yàn)闅馀輹?huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。存在，因?yàn)闅馀輹?huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果。二是凝膠色譜操作過程中，不能發(fā)生洗脫液流干、露出凝膠顆粒的現(xiàn)二是凝膠色譜操作過程中，不能發(fā)生洗脫液流干、露出凝膠顆粒的現(xiàn)象。一旦發(fā)生上述兩種情況，凝

45、膠色譜柱需要重新裝填。象。一旦發(fā)生上述兩種情況，凝膠色譜柱需要重新裝填。(4)Sephadex G-75(4)Sephadex G-75中中“G G”表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍；圍；7575表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水表示凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水7.5 g7.5 g。答案：答案：(1)a(1)aa a相對(duì)分子質(zhì)量較大，無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能相對(duì)分子質(zhì)量較大，無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快在凝膠外部移動(dòng)，路程較短，移動(dòng)速度較快(2)(2)尼龍網(wǎng)和尼龍紗尼龍網(wǎng)和尼龍紗(3)(3)氣泡會(huì)攪亂洗脫

46、液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果氣泡會(huì)攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序，降低分離效果(4)(4)凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍凝膠得水值，即每克凝凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍凝膠得水值，即每克凝膠膨脹時(shí)吸水膠膨脹時(shí)吸水7.5 g7.5 g2.2.科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在著一種抗菌活性蛋白。這種蛋白具有極強(qiáng)科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在著一種抗菌活性蛋白。這種蛋白具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視。的抗菌能力，受到研究者重視。(1)(1)分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的、大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的不同而實(shí)

47、現(xiàn)分離。不同而實(shí)現(xiàn)分離。(2)(2)可用金黃色葡萄球菌來檢驗(yàn)該蛋白的體外抗菌特性。抗菌實(shí)驗(yàn)可用金黃色葡萄球菌來檢驗(yàn)該蛋白的體外抗菌特性。抗菌實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供_和和。(3)(3)分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時(shí)間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的一定時(shí)間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的，確定該蛋白質(zhì)的，確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果?？咕Ч?。(4)(4)細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有和和。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，

48、對(duì)使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行處理。處理?！窘馕觥俊窘馕觥?1)(1)電泳法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的電荷電泳法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的電荷( (帶電帶電情況情況) )、大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。、大小及形狀不同，在電場(chǎng)中的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。(2)(2)牛肉膏和蛋白胨均為天然成分，含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，主要為細(xì)牛肉膏和蛋白胨均為天然成分，含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，主要為細(xì)菌生長(zhǎng)提供碳源和氮源。菌生長(zhǎng)提供碳源和氮源。(3)(3)由于抗菌蛋白能夠抑制微生物的生長(zhǎng)，因此在加入該抗菌蛋白的由于抗菌蛋白能夠抑制微生物的生長(zhǎng)，因此在加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落少，通過

49、比較菌落數(shù)量即可確定該抗菌蛋白的抗培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落少，通過比較菌落數(shù)量即可確定該抗菌蛋白的抗菌效果。菌效果。(4)(4)細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，實(shí)驗(yàn)細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，為避免有害菌污染環(huán)境，對(duì)使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理。結(jié)束后，為避免有害菌污染環(huán)境，對(duì)使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理。答案：答案：(1)(1)電荷電荷( (帶電情況帶電情況) )遷移速度遷移速度(2)(2)碳源氮源碳源氮源(3)(3)數(shù)量數(shù)量(4)(4)平板劃線法稀釋涂布平板法滅菌平板劃線法稀釋涂布平板法滅菌考點(diǎn)二考點(diǎn)二植物有效成分的提取植物有效成分的提取1

50、.1.植物有效成分的提取的三種方法比較：植物有效成分的提取的三種方法比較：提取提取方法方法水蒸氣水蒸氣蒸餾法蒸餾法壓榨法壓榨法有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑萃取法萃取法實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理原理利用水蒸氣將揮利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來芳香油攜帶出來通過機(jī)械加壓，壓榨出通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油果皮中的芳香油使芳香油溶解在有使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶機(jī)溶劑中，蒸發(fā)溶劑獲得芳香油劑獲得芳香油方法方法步驟步驟水蒸氣蒸餾水蒸氣蒸餾分離油層分離油層除水過濾除水過濾石灰水浸泡、漂洗石灰水浸泡、漂洗壓榨、過濾、靜置壓榨、過濾、靜置再次過濾再次過濾粉碎、干燥粉碎、干燥萃取、過濾萃取、過濾濃

51、縮濃縮提取提取方法方法水蒸氣水蒸氣蒸餾法蒸餾法壓榨法壓榨法有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑萃取法萃取法適用適用范圍范圍適用于提取玫瑰適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油發(fā)性強(qiáng)的芳香油適用于柑橘芳香油、適用于柑橘芳香油、檸檬芳香油等原料易檸檬芳香油等原料易焦糊芳香油的提取焦糊芳香油的提取適用范圍廣，要求適用范圍廣，要求原料的顆粒要盡可原料的顆粒要盡可能細(xì)小，能充分浸能細(xì)小，能充分浸泡在有機(jī)溶劑中泡在有機(jī)溶劑中優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)簡(jiǎn)單易行，便于簡(jiǎn)單易行，便于分離分離生產(chǎn)成本低，易保持生產(chǎn)成本低，易保持原料原有的結(jié)構(gòu)和功原料原有的結(jié)構(gòu)和功能能出油率高，易分離出油率高，易分離局限局限性性水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致水中蒸餾

52、會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效原料焦糊和有效成分水解等問題成分水解等問題分離較為困難，出油分離較為困難，出油率相對(duì)較低率相對(duì)較低使用的有機(jī)溶劑處使用的有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會(huì)影響芳香理不當(dāng)會(huì)影響芳香油的質(zhì)量油的質(zhì)量2.2.增加植物有效成分提取量的關(guān)鍵措施：增加植物有效成分提取量的關(guān)鍵措施：(1)(1)蒸餾法提取植物芳香油。蒸餾法提取植物芳香油。提取量主要取決于植物材料中芳香油的含量。提取量主要取決于植物材料中芳香油的含量。由于植物芳香油易揮發(fā)，因此用水蒸氣蒸餾法提取植物芳香油時(shí)應(yīng)由于植物芳香油易揮發(fā)，因此用水蒸氣蒸餾法提取植物芳香油時(shí)應(yīng)選擇新鮮的植物材料選擇新鮮的植物材料( (干燥后植物芳香油揮發(fā)干燥后植物芳

53、香油揮發(fā)) )。(2)(2)壓榨法提取植物芳香油：植物材料中的果膠、果蠟會(huì)影響壓榨和壓榨法提取植物芳香油：植物材料中的果膠、果蠟會(huì)影響壓榨和出油率，壓榨前通常采用石灰水浸泡的方法除去果膠、果蠟，以提高出油率，壓榨前通常采用石灰水浸泡的方法除去果膠、果蠟，以提高出油率。出油率。(3)(3)影響胡蘿卜素萃取的因素及解決措施：影響胡蘿卜素萃取的因素及解決措施：影響因素影響因素解決措施解決措施萃取劑的性質(zhì)萃取劑的性質(zhì)用水不溶性有機(jī)溶劑用水不溶性有機(jī)溶劑原料的顆粒大小、緊密程度原料的顆粒大小、緊密程度粉碎粉碎材料的含水量材料的含水量干燥干燥萃取溫度萃取溫度探索最佳萃取溫度，嚴(yán)格控制溫度探索最佳萃取溫度，

54、嚴(yán)格控制溫度萃取時(shí)間萃取時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)萃取時(shí)間適當(dāng)延長(zhǎng)萃取時(shí)間【高考警示】【高考警示】(1)(1)植物有效成分的提取方法不同。植物有效成分的提取方法不同。根據(jù)不同的植物精油的性質(zhì)，選擇合適的方法進(jìn)行提取。根據(jù)不同的植物精油的性質(zhì)，選擇合適的方法進(jìn)行提取。能夠利用蒸餾法提取的物質(zhì)應(yīng)該具有熱穩(wěn)定性，否則會(huì)發(fā)生植物有能夠利用蒸餾法提取的物質(zhì)應(yīng)該具有熱穩(wěn)定性，否則會(huì)發(fā)生植物有效成分的分解。效成分的分解。不適于蒸餾法的可以考慮壓榨法，但是需要原料中植物芳香油的含不適于蒸餾法的可以考慮壓榨法，但是需要原料中植物芳香油的含量較大，否則不易壓榨出來。量較大，否則不易壓榨出來。(2)(2)用萃取法提取植物有效成分

55、應(yīng)注意的問題。用萃取法提取植物有效成分應(yīng)注意的問題。萃取溫度和時(shí)間都會(huì)影響萃取的效果，萃取效率與萃取溫度呈正相萃取溫度和時(shí)間都會(huì)影響萃取的效果，萃取效率與萃取溫度呈正相關(guān)，通常采用加熱的方法提高萃取效率。關(guān)，通常采用加熱的方法提高萃取效率。萃取溫度過高會(huì)影響植物有效成分的品質(zhì)，因此萃取時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制萃取溫度過高會(huì)影響植物有效成分的品質(zhì)，因此萃取時(shí)應(yīng)嚴(yán)格控制溫度，適當(dāng)延長(zhǎng)萃取時(shí)間。溫度，適當(dāng)延長(zhǎng)萃取時(shí)間。【考題回訪】【考題回訪】1.(20131.(2013海南高考改編海南高考改編) )根據(jù)相關(guān)知識(shí)，回答胡蘿卜素提取和鑒定根據(jù)相關(guān)知識(shí)，回答胡蘿卜素提取和鑒定方面的問題：方面的問題：(1)(1)從胡蘿

56、卜中提取胡蘿卜素時(shí)，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和 ，以提高萃取效率。，以提高萃取效率。(2)(2)水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法( (填填“適合適合”或或“不適合不適合”) )胡蘿卜素的胡蘿卜素的提取，原因是提取，原因是_。(3)(3)為了提高萃取效果，萃取時(shí)應(yīng)為了提高萃取效果，萃取時(shí)應(yīng)。(4)(4)除去萃取液中的有機(jī)溶劑，可以采用除去萃取液中的有機(jī)溶劑，可以采用法。法。(5)(5)鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時(shí)，通?？刹捎描b定萃取物中是否含有胡蘿卜素時(shí)，通?？刹捎梅ǎ⒎?，并以以樣品作為對(duì)照。樣品作為對(duì)照?！窘忸}指南】【解題指南】解答本題需注意

57、：提取不同植物的有效成分所用的方法解答本題需注意：提取不同植物的有效成分所用的方法不一定相同，需要根據(jù)原料的特點(diǎn)進(jìn)行選擇。不一定相同，需要根據(jù)原料的特點(diǎn)進(jìn)行選擇?！窘馕觥俊窘馕觥勘绢}考查胡蘿卜素的提取和鑒定的有關(guān)知識(shí)。本題考查胡蘿卜素的提取和鑒定的有關(guān)知識(shí)。(1)(1)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和干從胡蘿卜中提取胡蘿卜素時(shí)，通常在萃取前要將胡蘿卜粉碎和干燥。干燥是為了去水，以提高萃取效率。燥。干燥是為了去水，以提高萃取效率。(2)(2)水蒸氣蒸餾法不適合胡蘿卜素的提取，因?yàn)樗魵庹麴s法適用于水蒸氣蒸餾法不適合胡蘿卜素的提取，因?yàn)樗魵庹麴s法適用于分離揮發(fā)性物質(zhì)，而胡蘿

58、卜素為非揮發(fā)性物質(zhì)，不能隨水蒸氣蒸餾出。分離揮發(fā)性物質(zhì)，而胡蘿卜素為非揮發(fā)性物質(zhì)，不能隨水蒸氣蒸餾出。(3)(3)由于萃取溫度和萃取時(shí)間會(huì)影響萃取效果，提高溫度有利于胡蘿由于萃取溫度和萃取時(shí)間會(huì)影響萃取效果，提高溫度有利于胡蘿卜素溶于有機(jī)溶劑，但是如果溫度過高會(huì)破壞胡蘿卜素，因此為了提卜素溶于有機(jī)溶劑，但是如果溫度過高會(huì)破壞胡蘿卜素，因此為了提高萃取效果，應(yīng)嚴(yán)格控制萃取溫度并延長(zhǎng)萃取時(shí)間。高萃取效果，應(yīng)嚴(yán)格控制萃取溫度并延長(zhǎng)萃取時(shí)間。(4)(4)由于有機(jī)溶劑易揮發(fā)，而胡蘿卜素不易揮發(fā)，因此除去萃取液中由于有機(jī)溶劑易揮發(fā)，而胡蘿卜素不易揮發(fā)，因此除去萃取液中的有機(jī)溶劑可采用蒸餾法。有機(jī)溶劑可經(jīng)冷

59、凝回收再利用。的有機(jī)溶劑可采用蒸餾法。有機(jī)溶劑可經(jīng)冷凝回收再利用。(5)(5)胡蘿卜素的鑒定通常采用紙層析法。胡蘿卜素能夠溶解在層析液胡蘿卜素的鑒定通常采用紙層析法。胡蘿卜素能夠溶解在層析液中，并隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散而擴(kuò)散，且擴(kuò)散速度與溶解度呈正相中，并隨層析液在濾紙上的擴(kuò)散而擴(kuò)散，且擴(kuò)散速度與溶解度呈正相關(guān)。可以用標(biāo)準(zhǔn)樣品關(guān)。可以用標(biāo)準(zhǔn)樣品( (胡蘿卜素胡蘿卜素) )作為對(duì)照，分析萃取樣品是否含胡蘿作為對(duì)照，分析萃取樣品是否含胡蘿卜素和雜質(zhì)。卜素和雜質(zhì)。答案：答案：(1)(1)干燥干燥(2)(2)不適合水蒸氣蒸餾法適用于分離揮發(fā)性物質(zhì)，而胡蘿卜素為非不適合水蒸氣蒸餾法適用于分離揮發(fā)性物質(zhì)，

60、而胡蘿卜素為非揮發(fā)性物質(zhì)，不能隨水蒸氣蒸餾出揮發(fā)性物質(zhì)，不能隨水蒸氣蒸餾出(3)(3)嚴(yán)格控制萃取溫度并延長(zhǎng)萃取時(shí)間嚴(yán)格控制萃取溫度并延長(zhǎng)萃取時(shí)間(4)(4)蒸餾蒸餾(5)(5)紙層析標(biāo)準(zhǔn)的胡蘿卜素紙層析標(biāo)準(zhǔn)的胡蘿卜素2.(20152.(2015大連模擬大連模擬) )下面是與植物芳香油的提取有關(guān)的問題，請(qǐng)回答：下面是與植物芳香油的提取有關(guān)的問題，請(qǐng)回答：(1)(1)玫瑰精油的提取可使用圖一所示裝置，這種方法叫玫瑰精油的提取可使用圖一所示裝置，這種方法叫蒸蒸餾法。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液餾法。蒸餾時(shí)收集的蒸餾液( (填填“是是”或或“不是不是”) )純的玫瑰純的玫瑰精油。精油。(2)(2)胡蘿卜素是胡