果蠅唾液腺染色體標(biāo)本的制備和觀察

1、實(shí)驗(yàn)2果蠅唾液腺染色體標(biāo)本的制備和觀察2012012415 生23 李天奇1. 實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆罩破椒ǎ私夤壨僖合傩螒B(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)并練習(xí)解剖果蠅幼蟲技術(shù)2. 實(shí)驗(yàn)原理唾液腺染色體是一類廣泛存在于雙翅目昆蟲幼蟲唾液腺內(nèi)的巨大染色體。由于其染色體dna經(jīng)過多次復(fù)制，但并未發(fā)生細(xì)胞核分裂，同時唾液腺細(xì)胞中的染色體總是處于配對狀態(tài)即體細(xì)胞聯(lián)會，重復(fù)復(fù)制后的染色線聚集在一起，并被稱為多線染色體。3. 實(shí)驗(yàn)用具及材料解剖鏡、顯微鏡、解剖針、果蠅三齡幼蟲4. 實(shí)驗(yàn)方法及步驟調(diào)試雙筒顯微鏡剖取唾液腺去除脂肪體染色并壓片鏡檢并顯微照相5. 結(jié)果與討論在用解剖針扯去果蠅幼蟲的頭部后，可以清晰地看到一個透明茄型并附有

2、乳白色條帶的 囊狀體出現(xiàn)。經(jīng)過小心的剝離脂肪體和其他雜物后，顯微攝像圖附于最后。首先rti于其形狀和分布可以確定這是一個唾液腺多線染色體，整個多線染色體的位置居 中且亮度、對比度合適，染色適中，可以清晰看到每一條染色體和其上面的橫紋。在這 幅圖中染色體分得比較開，可以清晰地分別出各條染色體和圖片左下方的深染中心。但 是美屮不足的是由于壓片時候的力量過大（壓片50次），可以看到有部分染色體被壓斷， 在深染屮心左上的染色體條帶的末端較深且粗壯，我判斷應(yīng)該是深染中心上的一臂。位 于中心的多線染色體左側(cè)的小段染色體由于在中心的多線染色體的線頭處沒有發(fā)現(xiàn)非 常粗糙的短線處，因此判斷其應(yīng)該為非本染色體組的

3、其他染色體的斷片。位于中心部位 的染色體末端短線處較為粗糙并染色較深，我判斷其應(yīng)該是深染中心處的另一個斷穆, 這樣就找到了深染中心的全部的四個臂。位于圖片上方的小斷臂和其右方的長臂由于斷 處的距離和粗糙程度我判斷為第一條x染色體形成的長條。就此，所有的染色體的條數(shù) 就應(yīng)該全部數(shù)清。6 思考與感悟什么是染色中心：染色屮心是果蠅唾液腺染色體染色后呈現(xiàn)較深色的區(qū)域，其成因是第二和第三對染色體以各 自的著絲粒部位相聚集，形成一個一屮心四臂的結(jié)構(gòu)，其屮心由于有較高的染色體密度（在 單位體積上有很多的條帶）因而會在染色時呈現(xiàn)出較深的染色中心。剖取唾液腺時的注意事項：在果蠅頭部（有黑點(diǎn)處）用解剖針按住并扯下

4、，因?yàn)楣壣眢w中有腸管等形狀相似的結(jié)構(gòu)可 能造成混淆，因此首先擠圧果蠅的頭部，觀察是否岀現(xiàn)唾液腺，如果沒有，再在果蠅的身體 的近頭部小心地用解剖針擠壓來得到唾液腺染色體。在下結(jié)論時，要特別注意該結(jié)構(gòu)需要同 時滿足三個條件：透明，茄型，有乳白色脂肪體位于其一側(cè)。収出后由于唾液腺肉眼可見, 因此可以直接在實(shí)驗(yàn)臺血上利用吸水紙快速地把其他雜物剝離載玻片。對于這一操作，直接 在肉眼下要比在解剖鏡下更為容易做到快速除去雜物，從而降低了吸水紙將唾液腺吸走的風(fēng) 險。照相和選収時的注意事項：首先需要選取一個好的多線染色體組，好的標(biāo)準(zhǔn)是：一個，無其他多線染色體干擾和重疊; 染色體組完整，斷裂較少并可以通過線頭斷裂后的性狀進(jìn)行重新拼接；染色體z間分開程度 較大；無氣泡或其他雜物干擾。作者選擇的染色體組雖然分開程度較好，但是存在一定的由 于壓片力量過大而造成的染色體被壓斷的情況。在照相的時候，可以選擇油鏡。油鏡的亮度和分辨率都要優(yōu)于正常情況，但是油鏡存在著景 深較小，如果壓片的吋候樣品不是很均勻的分開，很容易出現(xiàn)不能將染色體組的每個部分都 完成對焦的情況。在照相時，需要將所準(zhǔn)備照相的物體移至視野屮央