ClonePix細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)公司概況Genetix學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1ClonePix細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)公司概況細(xì)胞克隆篩選系統(tǒng)公司概況Genetix1991: 由Mark Reid創(chuàng)立，總部位于英國(guó)New Milton。1993: 開(kāi)發(fā)出第一個(gè)系統(tǒng) QBot2000: 在倫敦交易所上市2007: 收購(gòu)應(yīng)用影像公司 2009: 收購(gòu)Slidepath2010: 被Danaher (LMS)收購(gòu)2011: 與Molecular Devices合并,為公司帶來(lái)一系列新的產(chǎn)品，ClonePix，QPix，CloneSelect Imager，CellReporter。核心技術(shù): 設(shè)計(jì)，開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)創(chuàng)新性系統(tǒng)，減少新的生物藥物的研發(fā)時(shí)間和費(fèi)用。公司在微生物克隆篩選方

2、面建立行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。第一家也是全球最好的生產(chǎn)全自動(dòng)細(xì)胞株篩選儀器廠家（申請(qǐng)專利，全球第一家也是全球最好的生產(chǎn)全自動(dòng)細(xì)胞株篩選儀器廠家（申請(qǐng)專利，全球160160臺(tái)）臺(tái)）第1頁(yè)/共20頁(yè)篩選（找到好克?。┎⑻羧。ㄗ詣?dòng)化挑?。┘?xì)胞克隆 雜交瘤細(xì)胞 CHO、HEK等表達(dá)細(xì)胞系 昆蟲(chóng)細(xì)胞 干細(xì)胞等第2頁(yè)/共20頁(yè)12/5/2021 2011 Molecular Devices, Inc.4半固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基 + 細(xì)胞細(xì)胞 + 熒光檢測(cè)試劑熒光檢測(cè)試劑Secreted antibody (IgG)Complex Initiation Factor (CIF) = unconjugated CloneD

3、etectAntigen (fluorescently conjugated or tagged)Hybridoma篩選特異性抗體雜交瘤：篩選特異性抗體雜交瘤：二、技術(shù)原理（怎么做？）二、技術(shù)原理（怎么做？）第3頁(yè)/共20頁(yè)技術(shù)特點(diǎn)技術(shù)特點(diǎn)1、半固體培養(yǎng)基（SSM）培養(yǎng)得到克隆2、熒光檢測(cè)試劑顯示蛋白的表達(dá)水平3、白光定性（識(shí)別克隆）4、熒光定量（定量熒光信號(hào)水平）WLFITC FITC: 20 x mag.第4頁(yè)/共20頁(yè)12/5/2021 2011 Molecular Devices, Inc.6高水平分泌克隆高水平分泌克隆軟件對(duì)熒光信號(hào)進(jìn)行定量軟件對(duì)熒光信號(hào)進(jìn)行定量，排列克隆。，排列克隆

4、。排除掉低產(chǎn)克隆排除掉低產(chǎn)克隆第5頁(yè)/共20頁(yè)準(zhǔn)確準(zhǔn)確挑取挑取12/5/20217 2011 Molecular Devices, Inc.第6頁(yè)/共20頁(yè)第7頁(yè)/共20頁(yè)找到能生產(chǎn)特異性抗體的找到能生產(chǎn)特異性抗體的細(xì)胞克隆細(xì)胞克隆找到能高產(chǎn)特異性抗體的穩(wěn)找到能高產(chǎn)特異性抗體的穩(wěn)定細(xì)胞系定細(xì)胞系Target discoveryAntibody discoveryCandidate SelectionCell Line DevProcess DevBulk ProductionClinical StudyPre-ClinicalPK/ToxstudiesClonePix 2ClonePix 2第

5、8頁(yè)/共20頁(yè)12/5/2021 2011 Molecular Devices, Inc.10應(yīng)用方向：應(yīng)用方向：1、抗體藥物研發(fā)：如雜交瘤細(xì)胞的篩選2、蛋白表達(dá)：如抗體的表達(dá)，融合蛋白的表達(dá)，篩選建立穩(wěn)定高產(chǎn)的細(xì)胞系3、具有特異性表面標(biāo)記的干細(xì)胞的篩選1、挑克隆自動(dòng)化 （解決怎么挑的問(wèn)題）2、篩選克隆自動(dòng)化（解決挑什么，挑哪些克隆的問(wèn)題）第9頁(yè)/共20頁(yè)160 ClonePixGSK, Merck, Wyeth, Genentech, Centocor, MedImmune, UCB, Genmab北京腫瘤醫(yī)院，無(wú)錫藥明康德，諾華，康弘藥業(yè)，江蘇泰康生物醫(yī)藥等，蘭州健順等。第10頁(yè)/共20頁(yè)

6、第11頁(yè)/共20頁(yè)第12頁(yè)/共20頁(yè)ClonePix2 VS 有限稀釋有限稀釋“We have implemented the use of ClonePix FL to increaseour fusion productivity by approximately 50%, while decreasing our time from fusion to stable clone by 50%” Dr Robin Barbour, Associate Director, Elan Pharmaceuticals第13頁(yè)/共20頁(yè)12/5/2021 2011 Molecular Device

7、s, Inc.15Data courtesy of MedImmune LLC第14頁(yè)/共20頁(yè)12/5/2021 2011 Molecular Devices, Inc.16ClonePix FLLimited DilutionCloneTiter (g/L)qP (pcd)Clone 14.554.6Clone 24.444.6Clone 34.349.4Clone 44.043.8Clone A2.932.7Clone B2.821.0Clone C2.720.9Clone D2.629.0Data courtesy of MedImmune LLC第15頁(yè)/共20頁(yè)12/5/2021 2011 Molecular Devices, Inc.17第16頁(yè)/共20頁(yè)分泌性蛋白從細(xì)胞上脫離對(duì)分泌表達(dá)細(xì)胞表面標(biāo)記非常弱單細(xì)胞在不同細(xì)胞周期有不同的表達(dá)水平稀少的高產(chǎn)株容易丟失FACS CapillaryClonePix 2 vs FACS:第17頁(yè)/共20頁(yè)Clonepix 2FACS工作流程有利于后續(xù)生產(chǎn)；避免有限稀釋。只是富集細(xì)胞，仍然需要有限稀釋。細(xì)胞成活率200細(xì)胞/h，成活率超過(guò)90%。雖然很快，1000-800cells/s，只有70%成活率。(很嚴(yán)重的很嚴(yán)重的問(wèn)題問(wèn)題)易操作度幾天培訓(xùn)后，實(shí)驗(yàn)室的所有人都