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1、實驗一糖類的性質(zhì)實驗 (一 ) 糖類的顏色反應(yīng)一、 目的1、了解糖類某些顏色反應(yīng)的原理。2、學(xué)習(xí)應(yīng)用糖的顏色反應(yīng)鑒別糖類的方法。二、 顏色反應(yīng)(一 ) Molisch 反應(yīng)1、原理 糖在濃無機(jī)酸(硫酸,鹽酸)作用下,脫水生成糠醛及糠醛衍生物,后者能與萘酚生成紫紅色物質(zhì)。因為糠醛及糠醛衍生物對此反應(yīng)均呈陽性,故此反應(yīng)不是糖類的特異反應(yīng)。2、器材試管及試管架滴管3、試劑莫氏試劑 1%葡萄糖溶液 1%果糖溶液 1%淀粉溶液 0.1% 糠醛溶液 濃硫酸4、操作取 5 支試管,分別加入 1%葡萄糖溶液、 1%果糖溶液、 1% 蔗糖溶液、 1%淀粉溶液、 0.1%糠醛溶液內(nèi)各 1ML 。再向 5 支試管中
2、各加入 2 滴莫氏試劑,充分混合。斜執(zhí)試管,沿管壁慢慢加入濃硫酸 1ML ,慢慢立起試管,切勿搖動。濃硫酸在試液下形成兩層。在二液分界處有紫紅色環(huán)出現(xiàn)。觀察,記錄各管顏色。供參考實驗二糖的還原作用一、 目的學(xué)習(xí)幾種常用的鑒定糖類還原性的方法及其原理。二、 原理許多糖類由于分子中含有自由的醛基及酮基, 故在堿性溶液中能將銅、鐵等金屬離子還原,同時糖類本身被氧化成糖酸及其他衍生物。糖類這種性質(zhì)常被利用于檢測糖的還原性及還原糖的定量測定。本實驗進(jìn)行糖類的還原作用的試劑為斐林試劑和本尼迪克特試劑。他們是含銅離子的堿性溶液,能使還原糖氧化而本身被還原成紅色或黃色的氧化亞銅沉淀 。生成氧化亞銅沉淀的顏色之
3、所以不同是由于在不同條件下產(chǎn)生的沉淀顆粒大小不同引起的,顆粒越小呈黃色,越大則呈紅色。三、 器材試管及試管架竹試管架水浴鍋電爐四 試劑斐林試劑本尼迪克特試劑1%葡萄糖溶液1%果糖溶液1%蔗糖溶液1%麥芽糖溶液1%淀粉溶液五 操作取 5 支試管,分別加入 2ML 斐林試劑, 再向各試管分別加入 1% 葡萄糖、 1%果糖、 1%蔗糖溶液、 1%麥芽糖溶液、 1%淀粉溶液各 1ML 。置水浴中加熱數(shù)分鐘,取出,冷卻。觀察各管溶液的供參考變化。另取6 支試管,用本尼迪克特試劑重復(fù)上述實驗。實驗三氨基酸的分離鑒定- 紙層析法一、 目的通過氨基酸的分離,學(xué)習(xí)紙層析法的基本原理及操作方法。二、 原理紙層析法
4、是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法。層析溶劑由有機(jī)溶劑和水組成。物質(zhì)被分離后在紙層析圖譜上的位置用 Rf 表示。在一定的條件下某種物質(zhì)的 RF 是常數(shù) 。三、 器材層析缸 毛細(xì)管 噴霧器 培養(yǎng)皿 層析濾紙四、 試劑1、擴(kuò)展試劑2、氨基酸溶液3、顯色試劑五、 操作1、將盛有平衡溶劑的小燒杯置于密閉的層析缸中。2、取層析濾紙一張。在紙的一端距邊緣2 到 3 厘米處用鉛筆劃一條直線,在此直線上間隔2 厘米作一記號。3、點樣4、擴(kuò)展5、顯色 6、計算各種氨基酸的 Rf 。供參考實驗四蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)一、 目的1、了解構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位及主要連接方式。2、了解蛋白質(zhì)的某些氨基酸的呈色反應(yīng)原理。3、學(xué)習(xí)幾種常用的鑒定蛋白質(zhì)和氨基酸的方法。二、 呈色反應(yīng)(一)雙縮脲反應(yīng)1、原理 尿素加熱至 180 攝氏度,生成雙縮脲并放出一分子氨。雙縮脲在堿性環(huán)境中能與銅離子結(jié)合生成紫色化合物,此反應(yīng)稱為雙縮脲反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子中有肽鍵,也能發(fā)生此反應(yīng)。(二)茚三酮反應(yīng)(三)黃色反應(yīng)三 操作取少量尿素結(jié)晶,放在干燥試管中。用微火加熱使尿素熔化。熔化的尿素開始硬化時,停止加
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