生化試劑存在的問(wèn)題及解決辦法

1、全自動(dòng)生化分析儀試劑存在的問(wèn)題及解決方法1 優(yōu)質(zhì)的儀器用水優(yōu)質(zhì)的儀器用水是使用好檢驗(yàn)試劑的一個(gè)十分重要環(huán)節(jié)之一。因?yàn)闇y(cè)定離子類的項(xiàng)目：比如銅、鐵、鋅、鈣、Mg、磷。這些項(xiàng)目在使用過(guò)程中，儀器用水的質(zhì)量相當(dāng)重要，雖然現(xiàn)在一般醫(yī)院的生化儀都帶有制水系統(tǒng)，但制水系統(tǒng)基本都是制備去離子水，離子交換樹(shù)脂在使用一段時(shí)間后交換能力明顯下降，需要定期進(jìn)行更換，否則制備的水離子含量多，電導(dǎo)率偏高。使用含離子超標(biāo)的水沖洗儀器，直接影響檢驗(yàn)結(jié)果。再如血氨、二氧化碳項(xiàng)目，如果水質(zhì)不好，儀器用水中本身含氨和二氧化碳就很高，則檢測(cè)該項(xiàng)目的結(jié)果也會(huì)受到嚴(yán)重的影響。還有如果血清中含有GLDH，而儀器用水存在氨時(shí)，可消耗NAD

2、H，使利用NADH的酶聯(lián)連續(xù)監(jiān)測(cè)法結(jié)果偏高。解決辦法：定期監(jiān)測(cè)水質(zhì)，當(dāng)儀器用水的電阻小于10M時(shí)要更換離子交換樹(shù)脂或活性炭。2 標(biāo)本的及時(shí)分離及測(cè)定標(biāo)本的及時(shí)分離及測(cè)定是用好檢驗(yàn)試劑的首要環(huán)節(jié)因?yàn)榉彩抢肗ADH轉(zhuǎn)化為NAD 變化率來(lái)檢測(cè)其物質(zhì)含量的試驗(yàn)都或多或少受到血液存放時(shí)間的影響。原因是全血存放時(shí)間越長(zhǎng)，紅細(xì)胞利用血清中的糖進(jìn)行無(wú)氧酵解產(chǎn)生丙酮酸，丙酮酸使NADH轉(zhuǎn)化為NAD ，這樣使測(cè)定結(jié)果假性升高。解決辦法：作好與臨床的溝通，對(duì)抽血人員和標(biāo)本運(yùn)送人員(傳遞人員)進(jìn)行培訓(xùn)； 及時(shí)分離血清并及時(shí)檢測(cè)； 也可將全自動(dòng)生化分析儀上的延遲時(shí)間設(shè)置大于60秒，這樣試劑在延遲期內(nèi)消除丙酮酸的干擾，

3、可完全避免假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)。3 交叉污染31 生化分析儀本身的清洗問(wèn)題造成的交叉污染在使用全自動(dòng)生化分析儀時(shí)，儀器的交叉污染現(xiàn)象是引起實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏離的一個(gè)原因。由于全自動(dòng)生化分析儀試劑針需要接觸各種試劑，一般難以徹底清洗干凈，所以容易造成分析項(xiàng)目的攜帶污染而生化項(xiàng)目的測(cè)定往往僅需要幾微升樣本，試劑往往需要幾百微升，尤其在沒(méi)有自動(dòng)沖洗程序的流動(dòng)池式生化分析儀上，由于前帶現(xiàn)象的存在，如果前一個(gè)樣本為高值樣本，則接后的第一個(gè)低值標(biāo)本結(jié)果應(yīng)慎重報(bào)告。不僅沒(méi)有沖洗程序的生化分析儀器上有這種現(xiàn)象，就是具有自動(dòng)沖洗程序的全自動(dòng)生化分析儀也有交叉污染，例如Beckman全自動(dòng)生化分析儀CX4，它的試劑吸針(Pr

4、obe)、樣品吸針及反應(yīng)攪拌棒是利用高壓沖洗液沖洗，然后用高壓壓縮空氣吹于，有時(shí)由于洗液壓力和壓縮空氣的壓力偏低，使試劑吸針、樣品吸針及反應(yīng)混勻棒沖不干凈、吹不干，從而導(dǎo)致反應(yīng)池之問(wèn)相互污染、試劑問(wèn)交又污染，使檢驗(yàn)結(jié)果偏離。另一個(gè)值得注意的問(wèn)題是許多生化儀器由于長(zhǎng)期頻繁的利用，使加樣針和試劑針的注射器磨損加重或注射器的“特氟龍”吸頭不及時(shí)更換，使吸樣針或試劑針密封層增大，產(chǎn)生泄漏現(xiàn)象也是造成樣本間及試劑間相互污染的一個(gè)重要原因。試劑吸樣或樣品吸樣不準(zhǔn)確，通常導(dǎo)致利用速率法測(cè)試的標(biāo)本系統(tǒng)偏低或偏高。眾所周知，速率法計(jì)算因子是由加樣體積和試劑體積參與確定的，如果加樣體積或加試劑體積不準(zhǔn)，導(dǎo)致真正速

5、率計(jì)算因子和理論計(jì)算因子偏離，從而使檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。解決辦法：定期進(jìn)行儀器維護(hù)保養(yǎng)；按要求及時(shí)更換零部件；定期對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)；全自動(dòng)生化分析標(biāo)本和試劑用量少，殘存少量即會(huì)影響測(cè)試結(jié)果，每天應(yīng)用無(wú)水乙醇擦洗并定期更換干燥棒，保證比色杯清洗后不留殘液，避免比色杯的交叉污染。32 檢驗(yàn)項(xiàng)目間的交叉污染在全自動(dòng)生化分析儀的使用中，我們發(fā)現(xiàn)一個(gè)項(xiàng)目會(huì)影響緊隨其后項(xiàng)目的測(cè)試結(jié)果，造成這種影響的原因之一是一種試劑中含有另一試驗(yàn)的測(cè)定物質(zhì)而直接干擾其測(cè)試結(jié)果。原因之二是一種試劑中含有改變另一試驗(yàn)反應(yīng)條件或影響其反應(yīng)進(jìn)程的物質(zhì)而間接干擾其測(cè)試結(jié)果。比如：在TP試劑中含有大量的CuSO4，如果將Cu放在TP項(xiàng)目的

6、后面檢測(cè)，會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏高或重復(fù)性差。再如P放在含有磷酸鹽的項(xiàng)目后面，TBA放在含有膽酸鹽的項(xiàng)目后面都會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏高或重復(fù)性差。GLU放在CK和CKMB的項(xiàng)目后面可能會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏高或重復(fù)性差。LDH放在AIJT和AST的項(xiàng)目后面可能會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏高或重復(fù)性差。Mg放在ALP等含有鎂離子項(xiàng)目后面可能會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏高或重復(fù)性差。ca放在aAmy項(xiàng)目后面可能會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏高或重復(fù)性差。Mg試劑(CALMAGITE法)中含有EGTA，會(huì)干擾Ca的測(cè)定結(jié)果。另外我們發(fā)現(xiàn)相鄰兩個(gè)項(xiàng)目的PH值相差太大或反應(yīng)對(duì)PH要求嚴(yán)格的項(xiàng)目，也會(huì)對(duì)測(cè)定的結(jié)果產(chǎn)生影響，比如TP和Alb之間PH相差較大，會(huì)互相干擾，TB

7、A放在Alb后面測(cè)定，會(huì)使測(cè)定結(jié)果偏低等等。解決辦法：調(diào)整實(shí)驗(yàn)的前后順序來(lái)消除這種影響；在造成污染的項(xiàng)目和受污染的項(xiàng)目之間設(shè)置清洗劑并設(shè)定進(jìn)行清洗的次數(shù)。4 正確的參數(shù)設(shè)置也是用好檢驗(yàn)試劑的一個(gè)關(guān)鍵因素現(xiàn)代化分析儀上通常有分析程序供用戶設(shè)定，包括樣品量、試劑量、波長(zhǎng)、分析方式和延遲時(shí)間、測(cè)試時(shí)間的設(shè)定等。下面我們就延遲時(shí)間和加樣程序的設(shè)定來(lái)說(shuō)明正確使用分析參數(shù)對(duì)于正確運(yùn)用試劑的作用。比如肌酐苦味酸測(cè)定法，我們?cè)谠O(shè)定延遲時(shí)間時(shí)應(yīng)注意到苦味酸在堿性條件下50秒前首先快速與如乙酰乙酸等快反應(yīng)物質(zhì)產(chǎn)生紅色化合物，而在120秒后堿性苦味酸又能與慢反應(yīng)物質(zhì)產(chǎn)生陽(yáng)性干擾，解決辦法：最好設(shè)定延遲時(shí)間為506O

8、秒之間，測(cè)定時(shí)間小于6O秒，這樣就充分消除了快反應(yīng)和慢反應(yīng)干擾，從而檢測(cè)到真正肌酐含量。5 校準(zhǔn)液的正確使用由于目前生產(chǎn)廠家提供的校準(zhǔn)液并非通用的，只適用于某一特定的分析系統(tǒng)。同一項(xiàng)目不同方法學(xué)之間有很大差異，同一項(xiàng)目不同方法學(xué)的校準(zhǔn)液更不能混用，但是在臨床檢驗(yàn)中經(jīng)常會(huì)發(fā)生膽紅素釩酸鹽法用重氮法的校準(zhǔn)液校準(zhǔn)，乳酸脫氫酶LP法用PL法校準(zhǔn)液校準(zhǔn)。TBA循環(huán)酶法用比色法校準(zhǔn)液校準(zhǔn)等都會(huì)造成測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。另外同一方法學(xué)，不同廠家的校準(zhǔn)品和試劑都會(huì)有所差異。解決辦法：建議結(jié)合各實(shí)驗(yàn)室條件選擇適合自已實(shí)驗(yàn)室的校準(zhǔn)品，如有條件可進(jìn)行系統(tǒng)溯源；建立滿足在同一方法學(xué)、同一測(cè)定條件、與理論計(jì)算的factor值

9、差異不大，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)有明顯影響因素，方可進(jìn)行校正測(cè)定；建立一個(gè)可靠的參考系統(tǒng)作為準(zhǔn)確性基礎(chǔ)，然后將準(zhǔn)確性轉(zhuǎn)移到“使用方法”測(cè)定中去，使“使用方法”測(cè)定結(jié)果可溯源到參考系統(tǒng)所提供的準(zhǔn)確性基礎(chǔ)上來(lái)。在實(shí)現(xiàn)溯源性目標(biāo)過(guò)程中，永遠(yuǎn)以患者新鮮標(biāo)本為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以方法學(xué)對(duì)比試驗(yàn)方法為驗(yàn)證手段。采用回歸方程進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，斜率接近1，截距較小，說(shuō)明“使用方法”對(duì)標(biāo)本測(cè)定結(jié)果和溯源目標(biāo)參考系統(tǒng)對(duì)標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果非常接近，檢測(cè)結(jié)果可靠。6 抗凝劑的使用目前臨床上常用的抗凝劑有EDTA-2K、肝素、草氨酸鈉等，TBA和AFU不能用肝素抗凝劑，因?yàn)楦嗡貢?huì)使TBA和AFU試劑發(fā)生混濁，導(dǎo)致吸光度假性偏高，從而使檢測(cè)結(jié)果偏高。解

10、決辦法：認(rèn)真參閱試劑說(shuō)明書(shū)；作好與抽血人員之間的溝通和培訓(xùn)，使抽血人員知道什么項(xiàng)目用何種標(biāo)本。7 混成單一試劑的問(wèn)題比如酶法肌酐試劑，第一步R中的酶要消除樣品中內(nèi)源性肌酸的干擾，如果混成單一試劑，則會(huì)使檢測(cè)結(jié)果偏高，消除法HDL、LDL也不能混成單一試劑，因?yàn)樗鼈兌家謩e清除HDL和LDL以外的脂蛋白，從而達(dá)到檢測(cè)的目的，如果混成單一試劑，則會(huì)使測(cè)定的HDL和LDL不準(zhǔn)確。另外，有的試劑混成單一試劑后，穩(wěn)定性和抗干擾能力也會(huì)明顯下降。解決辦法：在儀器通道或試劑位允許的情況下盡量使用雙試劑；如一定要使用單一試劑，最好選擇試劑廠家針對(duì)部份項(xiàng)目專門生產(chǎn)好的單一試劑。8 試劑開(kāi)瓶的問(wèn)題隨著全自動(dòng)生化分

11、析儀的普及，“開(kāi)瓶穩(wěn)定性”也隨之受到了大家的重視，但是就目前有的試劑方法學(xué)來(lái)講，還達(dá)不到人們所要求的試劑開(kāi)瓶后在儀器內(nèi)放很長(zhǎng)時(shí)間不需要定標(biāo)，比如ALP、TP、GSP等PH為堿性的試劑，開(kāi)瓶后試劑會(huì)吸收空氣中的二氧化碳，使試劑本身的PH值下降，如果長(zhǎng)時(shí)間開(kāi)瓶不定標(biāo)或校準(zhǔn)，會(huì)使檢測(cè)結(jié)果發(fā)生偏離，在國(guó)外有的項(xiàng)目有明文規(guī)定，必須72小時(shí)之內(nèi)定標(biāo)，比如BUN。但是在國(guó)內(nèi)的某些實(shí)驗(yàn)室為了方便，很長(zhǎng)時(shí)間都不作校準(zhǔn)，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果的不準(zhǔn)確。解決辦法：了解試劑的特性，及時(shí)對(duì)部份項(xiàng)目進(jìn)行校準(zhǔn)，2對(duì)于每天標(biāo)本量不多的醫(yī)院，可按12天的用量取用試劑放入儀器。9 不同批號(hào)試劑相混的問(wèn)題目前將不同批號(hào)的試劑混合在一起使用的

12、現(xiàn)象在檢驗(yàn)中經(jīng)常發(fā)生，當(dāng)然這一方面是為了節(jié)省成本，另一方面為了方便。但是不管是什么品牌、什么試劑，由于不同批號(hào)的試劑生產(chǎn)時(shí)間不同，試劑中工具酶的活性會(huì)有差異，會(huì)發(fā)生水解的底物濃度隨時(shí)間長(zhǎng)短也會(huì)不同。因此混在一起使用而又不定標(biāo)，可能會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。還有如果有的試劑開(kāi)瓶時(shí)間太長(zhǎng)，空氣中的灰塵或細(xì)菌會(huì)進(jìn)入瓶中，由于有的試劑含有大量的蛋白質(zhì)和鹽，是細(xì)菌生長(zhǎng)的最好條件，雖然有的試劑添加了防腐劑，但防腐劑的防腐也是有一定限度的，而且絕大多數(shù)廠家的試劑中是沒(méi)有加防霉劑的。解決辦法： 不同批號(hào)試劑建議不要混用，如果混用最好重新定標(biāo)；試劑瓶在儀器內(nèi)使用時(shí)間不要過(guò)長(zhǎng)，及時(shí)更換。一般每個(gè)試劑瓶?jī)?nèi)由于試劑針不

13、能吸完，或多或少都會(huì)留有幾毫升的試劑，如果是同一批號(hào)可以將未開(kāi)瓶的同一批號(hào)試劑往里倒。但如果不是同一批號(hào)的試劑時(shí)倒人后最好定標(biāo)，最好的做法是將每個(gè)批號(hào)的剩余試劑留起來(lái)待一定數(shù)量后混在一起，然后重新定標(biāo)后檢測(cè)。通過(guò)我們這幾年使用伊得利康試劑，參加衛(wèi)生部的室間質(zhì)評(píng)都取得很好的成績(jī)，確實(shí)認(rèn)為該公司試劑質(zhì)量好。純水質(zhì)量對(duì)全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)的影響水是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)一個(gè)常常被忽視但又至關(guān)重要的試劑。在全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)過(guò)程中，純水作為生化反應(yīng)的載體或介質(zhì)、樣品或試劑的稀釋液和溶劑、儀器的清洗液甚至反應(yīng)的參與者等貫穿檢測(cè)的全過(guò)程，其純度的高低直接關(guān)系水是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)一個(gè)常常被忽視但又至關(guān)重要的試劑。在全自動(dòng)生化分

14、析儀檢測(cè)過(guò)程中，純水作為生化反應(yīng)的載體或介質(zhì)、樣品或試劑的稀釋液和溶劑、儀器的清洗液甚至反應(yīng)的參與者等貫穿檢測(cè)的全過(guò)程，其純度的高低直接關(guān)系到檢測(cè)結(jié)果的可信度。目前全國(guó)大部分實(shí)驗(yàn)室都使用反滲透的中央純水系統(tǒng)，通過(guò)對(duì)該系統(tǒng)工作流程的分析以及遇到的實(shí)際情況，發(fā)現(xiàn)并總結(jié)了導(dǎo)致水純度不夠的幾種因素及其對(duì)全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)的影響。1 純水系統(tǒng)工作流程及影響因素11 原水預(yù)處理原水是指進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的自來(lái)水，預(yù)處理就是除去自來(lái)水中絕大部分的雜質(zhì)。1.1.1方法：預(yù)處理一般使用機(jī)械過(guò)濾法，分三步進(jìn)行：精密濾芯（又稱過(guò)濾濾芯、分線繞濾芯和熔噴濾芯）過(guò)濾原水中的泥沙等大的顆粒物；活性炭濾芯通過(guò)吸附作用去除水中的絕

15、大部分有機(jī)物和重金屬離子等（特別是自來(lái)水中的余氯，其對(duì)反滲透膜有很大的氧化作用，所以必須經(jīng)由活性炭去除）；反滲透膜(RO)進(jìn)一步去除水中的微觀粒子和鹽分。1.1.2影響因素：自來(lái)水水質(zhì)：自來(lái)水中雜質(zhì)含量高時(shí)會(huì)導(dǎo)致預(yù)處理部件使用壽命縮短和處理后水質(zhì)不達(dá)標(biāo)，甚至?xí)氯艿?，?dǎo)致需要更高的進(jìn)水壓才能工作，一般要求自來(lái)水中固體溶解物含量(TDS)小于200 mg/L。 預(yù)處理部件使用壽命：精密濾芯、活性炭濾芯、反滲透膜等都是具有相對(duì)壽命的材料，其中精密濾芯和活性炭濾芯又對(duì)反滲透膜具有保護(hù)作用，如果它們失效，RO 膜負(fù)荷就會(huì)加重，壽命就會(huì)縮短。由于各廠家產(chǎn)品質(zhì)量各異，RO膜又價(jià)格昂貴，因此在實(shí)際使用中應(yīng)

16、根據(jù)各地自來(lái)水水質(zhì)合理搭配使用。進(jìn)水壓：一般純水系統(tǒng)預(yù)處理都需要用高壓泵維持一定的進(jìn)水壓力(0. lMpa)才能維持正常工作，當(dāng)高壓泵壓力不足時(shí)會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)水量下降。純水系統(tǒng)的維護(hù)：純水系統(tǒng)一般都具有自動(dòng)反沖洗功能，當(dāng)其設(shè)置不合理或故障以及人工維護(hù)不當(dāng)時(shí)也會(huì)影響純水機(jī)的正常工作，導(dǎo)致純化效率及水質(zhì)下降。1.2去離子水的制備一般的純水系統(tǒng)由于受到成本限制，RO膜質(zhì)量一般，經(jīng)其處理過(guò)的水只能達(dá)到三級(jí)純水(電阻率>0. 2MO.cm)的標(biāo)準(zhǔn)。三級(jí)純水雖然經(jīng)過(guò)預(yù)處理已經(jīng)去除了大部分離子，但其中的離子濃度還較高，還會(huì)影響生化分析儀的微量檢測(cè)，因此必須將三級(jí)純水進(jìn)一步去離子以達(dá)到一級(jí)純水(電阻率lOM.

17、cm)的標(biāo)準(zhǔn)才能用于生化檢測(cè)。1.2.1方法：離子交換樹(shù)脂法是去離子水制備的常用方法，所用的部件就是離子交換柱即純化柱（罐），包括陰離子交換柱、陽(yáng)離子交換柱和混合柱等，試劑為陰陽(yáng)離子交換樹(shù)脂。陰陽(yáng)離子交換樹(shù)脂一般是由苯乙烯聚合成后再通過(guò)二乙烯苯交聯(lián)得到多孔網(wǎng)狀骨架結(jié)構(gòu)，然后在骨架上連接活性基團(tuán)而形成的高分子聚合物。離子交換樹(shù)脂所連接的活性基團(tuán)可分為酸性基團(tuán)和堿性基團(tuán)兩大類型。連接酸性基團(tuán)的離子交換樹(shù)脂稱為陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，連接堿性基團(tuán)的樹(shù)脂稱為陰離子交換樹(shù)脂。1.2.2原理：陽(yáng)離子交換柱原理即硬水軟化原理：陽(yáng)離子交換樹(shù)脂中的酸性基團(tuán)有磺酸基(-S03H)、羧基(一COOH)和苯酚基 (-C6H4

18、0H)等酸性基團(tuán)，其中的氫離子能與溶液中的金屬離子或其他陽(yáng)離子進(jìn)行交換。例如苯乙烯和二乙烯苯的高聚物經(jīng)磺化處理得到強(qiáng)酸性陽(yáng)離子交換樹(shù)脂，其結(jié)構(gòu)式可表示為R-SO3H，式中R代表樹(shù)脂母體，以Ca2+為例其表達(dá)式為2R-S03H+ Ca2+- (R-SO3 )2Ca+ 2H+。 陰離子交換柱的原理：陰離子交換樹(shù)脂中的堿性基團(tuán)有季胺基-N (CH3)30H、胺基(-NHz)和亞胺基(-NHz)等。它們?cè)谒心苌蒓H-離子，可與各種陰離子起交換作用，以Cl-為例其表達(dá)式為R-N (CH3)30H+Cl-RN(CH3)3Cl+OH-?；旌现寒?dāng)兩者串聯(lián)使用或混合使用時(shí)，產(chǎn)物就只有水，總表達(dá)式為：2R-

19、S03H+Ca2+2(CH3)30H+2Cl- - (R-S03)2Ca+2 RN (CH3)3C1+2H影響因素：離子交換樹(shù)脂的質(zhì)與量：離子交換樹(shù)脂是有壽命限制的，當(dāng)離子交換達(dá)到一定量時(shí)就達(dá)到飽和，需要進(jìn)行再生處理，因此質(zhì)量越好總量越大其使用期限越長(zhǎng)。陰陽(yáng)離子交換樹(shù)脂的連接方式：復(fù)床式：若干個(gè)陽(yáng)離子交換柱和若干個(gè)陰離子交換柱串聯(lián)而成，陽(yáng)在前陰在后，其優(yōu)點(diǎn)是再生方便，缺點(diǎn)是出水質(zhì)量不高(單級(jí)復(fù)床式出水電阻率只有0.5 M.cm，雙級(jí)復(fù)床式出水電阻率為2 MO·cm)。混床式：將陽(yáng)離子樹(shù)脂和陰離子樹(shù)脂以1:2容積比均勻混合裝入同一個(gè)交換柱內(nèi)而成，優(yōu)點(diǎn)是出水純度高（電阻率

20、1OM.cm），缺點(diǎn)是再生困難。聯(lián)合式：將復(fù)床式和混床式串聯(lián)起來(lái)即成，多采用三柱式，出水質(zhì)量高（電阻率最高可達(dá)18. 3M.cm，即超純水），使用壽命長(zhǎng)。三級(jí)純水的純度：當(dāng)三級(jí)純水質(zhì)量不合格，其中一些非離子雜質(zhì)通過(guò)離子交換柱時(shí)就會(huì)影響離子交換柱的使用壽命并造成出水水質(zhì)的降低。該情況主要受預(yù)處理過(guò)程的影響，同時(shí)有些開(kāi)放性的純水系統(tǒng)將生成的三級(jí)純水儲(chǔ)存于水箱中以備其它用途使用時(shí)儲(chǔ)存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或其它原因?qū)е碌亩挝廴疽矔?huì)使水純度下降。2純水質(zhì)量對(duì)生化分析儀及檢測(cè)結(jié)果的影響2.1 不合格純水中的雜質(zhì)成分純水質(zhì)量不合格也就意味著純水系統(tǒng)水純化的失敗，可能出現(xiàn)在原水預(yù)處理過(guò)程、三級(jí)純水的儲(chǔ)存和離子交換過(guò)程中

21、的任何一步。無(wú)論哪一步失敗，其雜質(zhì)來(lái)源無(wú)外乎自來(lái)水和純水機(jī)水通道的污染物，主要有： 電解質(zhì)，常見(jiàn)的有H+，Na+，K+，NH4+，Mg2+，Ca2+，F(xiàn)e3+，Cu2+，Mn2+，Zn2+，Al3+等陽(yáng)離子和 F-，CI-,N03-,HC03-,S042-,P043-,H2P04-,HSi03-等陰離子；有機(jī)物質(zhì)，如有機(jī)酸、農(nóng)藥、烴類、醇類和酯類等；顆粒物；微生物；溶解氣體(Nz，02，C1z，HzS，CO，COz，CH4等)；其它。2.2不同雜質(zhì)成分對(duì)生化分析儀及檢測(cè)結(jié)果的影響2.2.1 電解質(zhì)含量高的影響：最直接的影響就是對(duì)血清（漿）中同種離子測(cè)定結(jié)果的升高，如對(duì)Mg2+，Ca2+，F(xiàn)e3

22、+，Cu2+，Zn2+等的測(cè)定，同時(shí)也對(duì)這些項(xiàng)目的定標(biāo)產(chǎn)生影響。由于很多金屬離子都是酶的輔因子，因此當(dāng)金屬離子含量高時(shí)往往影響酶活性的檢測(cè)（如Mg2+是多種磷酸化激酶的激活劑，水中含量超標(biāo)時(shí)會(huì)導(dǎo)致這些酶活性測(cè)定值的升高；而許多重金屬離子則對(duì)酶有抑制作用，導(dǎo)致酶活性下降）。很多陰離子也作為酶的輔因子存在，對(duì)酶活性測(cè)定產(chǎn)生影響（如CI-對(duì)a-淀粉酶就有激活作用）。電解質(zhì)含量高的水更容易形成結(jié)晶和導(dǎo)致蛋白等有機(jī)物變性附著于管道系統(tǒng)，從而使得生化分析儀管道系統(tǒng)更易堵塞，最終造成測(cè)定失真或失敗；同時(shí)，在使用其對(duì)反應(yīng)杯進(jìn)行清洗時(shí)也很難清洗干凈，會(huì)加速反應(yīng)杯的老化和損壞，使杯空白升高。2.2.2有機(jī)物質(zhì)的影

23、響：有機(jī)物質(zhì)的影響主要在于對(duì)類似物質(zhì)測(cè)定時(shí)導(dǎo)致類似物質(zhì)測(cè)定結(jié)果的升高。同時(shí)，有機(jī)物含量升高也會(huì)加速管道系統(tǒng)和反應(yīng)杯的清洗困難及老化。2.2.3顆粒物的影響：顆粒物一般很難通過(guò)純水系統(tǒng)進(jìn)入生化分析儀管道和反應(yīng)系統(tǒng)，其來(lái)源一般都是三級(jí)純水或一級(jí)純水的儲(chǔ)水箱發(fā)生二次污染，但是一旦進(jìn)入除了會(huì)導(dǎo)致吸光度升高外，還很容易堵塞管道和損壞反應(yīng)杯。2.2.4微生物的影響：微生物的去除主要依賴原水的預(yù)處理，有些純水系統(tǒng)還在一級(jí)純水或超純水處加裝紫外殺菌或者微濾、超濾等裝置，進(jìn)一步除去水中殘余的細(xì)菌、微粒、熱源等。但一旦預(yù)處理失敗或純水儲(chǔ)存箱被二次污染，微生物及其產(chǎn)物就能進(jìn)入生化分析儀管道系統(tǒng)和反應(yīng)系統(tǒng)，可能出現(xiàn)的

24、情況有兩種： 微生物在管道及反應(yīng)系統(tǒng)孳生，導(dǎo)致管道堵塞，同時(shí)令吸光度和杯空白升高；微生物產(chǎn)生特定的酶對(duì)生化分析儀酶測(cè)定產(chǎn)生影響，具體產(chǎn)生什么影響取決于污染菌的類型。2.2.5溶解氣體：溶解氣體增多產(chǎn)生的影響有：對(duì)同種氣體的測(cè)定的影響；對(duì)水的pH值也產(chǎn)生影響，如C02，Cl2，H2S等溶解增多導(dǎo)致水pH值的下降，也對(duì)pH值依賴性較強(qiáng)的生化項(xiàng)目測(cè)定產(chǎn)生影響；某些氣體如C12增多，因其自身氧化性較強(qiáng)，會(huì)對(duì)與氧化還原反應(yīng)相關(guān)的生化測(cè)定項(xiàng)目產(chǎn)生影響，如對(duì)基于340 nm處NADH和NADPH有吸收峰而建立的ALT，AST，BUN等的測(cè)定方法，會(huì)導(dǎo)致測(cè)定值的升高。2.2.6其它雜質(zhì)的影響：有些純水系統(tǒng)也將

25、最終生成的超純水或一級(jí)純水儲(chǔ)存于水箱中，當(dāng)水箱有生銹情況時(shí)導(dǎo)致鐵測(cè)定不正常；還有當(dāng)機(jī)械裝置密封不嚴(yán)造成的漏油時(shí)導(dǎo)致TG測(cè)定結(jié)果升高。這些情況雖然少見(jiàn)，但也最容易被忽視。3討論3.1 實(shí)驗(yàn)室常用的自動(dòng)化純水系統(tǒng)有兩種：大型蒸餾器系統(tǒng)，日出水量在100 L左右，原水利用率10%15%，能耗大，自動(dòng)化程度低，制備的蒸餾水純度一般較低，適用范圍較窄，現(xiàn)在基本已經(jīng)被淘汰；反滲透的中央純水系統(tǒng)，由機(jī)械過(guò)濾、活性炭吸附、反滲透膜和離子交換樹(shù)脂等組成，日產(chǎn)水量900 L左右，原水利用率30%40%，自動(dòng)化程度高，能耗低，主部件可反復(fù)使用，出水純度高，目前使用廣泛。另外，有些實(shí)驗(yàn)室因條件所限，直接購(gòu)買商品化純凈

26、水使用，但商品化純凈水多為飲用水，其標(biāo)準(zhǔn)與實(shí)驗(yàn)室用水標(biāo)準(zhǔn)有所不同，因此購(gòu)買前一定要清楚該產(chǎn)品的各項(xiàng)指標(biāo)，避免對(duì)檢測(cè)造成影響。3.2評(píng)價(jià)水質(zhì)的常用指標(biāo)電阻率，是衡量實(shí)驗(yàn)室用水導(dǎo)電性能的指標(biāo)，其隨著水內(nèi)無(wú)機(jī)離子的減少而增大，但由于水自身的解離作用，電阻率最大只能達(dá)到18.3M.cm左右，是檢測(cè)水中離子濃度的主要指標(biāo)；pH值，一級(jí)純水及超純水的pH值測(cè)定較為困難，測(cè)定值浮動(dòng)范圍較大(67)，主要是因?yàn)槠渲腥苜|(zhì)極低，導(dǎo)電性差，測(cè)定時(shí)極易受到外界干擾，但正因如此，水質(zhì)的細(xì)小變化對(duì)pH值的影響就很明顯，是評(píng)價(jià)水質(zhì)的一個(gè)非常靈敏的指標(biāo)；www.clin-總有機(jī)碳，是指水中碳的濃度，反映水中有機(jī)化合物的含量；

27、內(nèi)毒素，即革蘭氏陰性細(xì)菌的脂多糖細(xì)胞壁碎片，又稱之為“熱原”。3.3 建議對(duì)實(shí)驗(yàn)室超純水進(jìn)行嚴(yán)格規(guī)范的質(zhì)量控制，定時(shí)測(cè)定純水電阻率和pH值等指標(biāo)，繪制質(zhì)控圖。增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室用水質(zhì)量意識(shí)，積極防范因用水而造成的影響和損失。對(duì)于開(kāi)放式水儲(chǔ)存箱的取用水要嚴(yán)格把關(guān)，嚴(yán)防因此而造成的二次污染。要掌握純水機(jī)各部件的使用壽命和維護(hù)方法，積極防范因純水機(jī)部件失效而造成的各種影響水質(zhì)的情況，同時(shí)延長(zhǎng)或保證RO膜和離子交換樹(shù)脂的壽命。要對(duì)本地區(qū)自來(lái)水水質(zhì)狀況有所了解并評(píng)估其對(duì)純水機(jī)的影響，如水質(zhì)較硬，應(yīng)考慮加裝前處理設(shè)備。成為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人之前必須要知道的幾件事當(dāng)初本科填志愿，其實(shí)很大程度上根本不了解醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)這個(gè)專業(yè)，班

28、里的同學(xué)第一志愿填報(bào)檢驗(yàn)的也寥寥無(wú)幾。有過(guò)迷茫，有過(guò)失望，一路走來(lái)，也有很多體會(huì)。在各大專業(yè)論壇上，每年都會(huì)有人問(wèn)，“檢驗(yàn)可以考醫(yī)師執(zhí)照嗎？”“我是*專業(yè)的，想去檢驗(yàn)科工作，可以嗎？”這里就說(shuō)說(shuō)自己在進(jìn)入醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)這個(gè)專業(yè)以后，才知道的一些事情與其中的一些體會(huì)，希望對(duì)后來(lái)人有所幫助，特別是想過(guò)從事檢驗(yàn)專業(yè)的年輕師弟師妹。1、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)不能考醫(yī)師執(zhí)照這是大3才徹底了解的事實(shí)，雖然當(dāng)初我所在的院校（211）給本專業(yè)的定位是檢驗(yàn)醫(yī)師。但是事實(shí)是全國(guó)各醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)本科文憑都不能報(bào)考執(zhí)業(yè)醫(yī)師，雖然我們學(xué)制5年，雖然我們大綱要求所有的內(nèi)外婦兒傳染等臨床學(xué)習(xí)。但是國(guó)家的政策如此，胳膊擰不過(guò)大腿。要想考執(zhí)照，

29、你需要考臨床專業(yè)檢驗(yàn)地 帶網(wǎng)搜集整理的研究生，即使這樣，部分地區(qū)仍有困難，如在上海地區(qū)，這種情況還是不能報(bào)考。2、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)學(xué)制多樣 中山、華西、湘雅醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)5年制，交大、南方醫(yī)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)4年制，前者拿醫(yī)學(xué)學(xué)位，后者拿理學(xué)學(xué)位。出來(lái)除個(gè)別單位喜歡5年制以外，找工作無(wú)本質(zhì)區(qū)別，誰(shuí)不知道現(xiàn)在找工關(guān)系第一。貌似醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)全國(guó)重點(diǎn)也就是專業(yè)排名第一的重慶醫(yī)科大學(xué)，還有醫(yī)檢7年制，出來(lái)是MM，具執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試資格。如此復(fù)雜參差的學(xué)制和培養(yǎng)方法，也難怪國(guó)家不給考執(zhí)業(yè)醫(yī)師的資格。3、沒(méi)有真正意義上的檢驗(yàn)醫(yī)師如果你想報(bào)考檢驗(yàn)醫(yī)師，你必須先具有臨床執(zhí)業(yè)醫(yī)師執(zhí)照，按照第1條所說(shuō)，所以你本科必須是學(xué)臨床然后轉(zhuǎn)入檢驗(yàn)專業(yè)

30、。這在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)的人看來(lái)確實(shí)非常不公平和可笑，要承認(rèn)這樣一個(gè)事實(shí)，很多情況下，臨床專業(yè)的人改行進(jìn)入檢驗(yàn)專業(yè)，大多是在臨床混的不好，這樣的檢驗(yàn)隊(duì)伍你覺(jué)得是壯大了還是魚(yú)龍混雜了？而正規(guī)接受醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)培訓(xùn)的人卻沒(méi)有資格？另外，即使你成為了一名檢驗(yàn)醫(yī)師，在絕大多數(shù)時(shí)候你從事的是技師的工作。罕見(jiàn)或不見(jiàn)有讓檢驗(yàn)科人員協(xié)助臨床診斷、治療會(huì)診的醫(yī)院?jiǎn)挝唬瑱z驗(yàn)醫(yī)師，名存實(shí)無(wú)。4、檢驗(yàn)科在醫(yī)院地位普遍不高輔助科室，地位不高也難怪，看看到處都是的關(guān)于檢驗(yàn)科室被臨床科室肢解的討論就知道了，不用多說(shuō)。5、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作相對(duì)好找 開(kāi)始說(shuō)些這個(gè)專業(yè)的好處吧，找工作對(duì)于醫(yī)檢專業(yè)的同學(xué)來(lái)說(shuō)，不用像臨床那般發(fā)愁，本科進(jìn)入三甲的機(jī)會(huì)

31、很多，碩士基本夠用。公務(wù)員、公司、科研機(jī)構(gòu)，都有不錯(cuò)的選擇。如果你有好的idea，試劑開(kāi)放也許可以讓你一夜暴富。6、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)發(fā)展迅猛所有生物技術(shù)方法上的革新，以及基礎(chǔ)研究上突破，都給醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)帶來(lái)了無(wú)窮無(wú)盡的動(dòng)力。在這個(gè)專業(yè)，可以學(xué)習(xí)最先進(jìn)的醫(yī)學(xué)診斷方法進(jìn)展，而且這些方法的更替日新月異。如果你是個(gè)科研愛(ài)好者，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)，診斷試劑、儀器、病人標(biāo)本，都是你豐富的資源，即使其他科室搞個(gè)項(xiàng)目，也免不了需要你的幫忙。7、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)不用直面冰冷的醫(yī)患關(guān)系不用多說(shuō)，現(xiàn)實(shí)有時(shí)候我們無(wú)法改變。檢驗(yàn)專業(yè)只需要在后面認(rèn)真負(fù)責(zé)地處理病人標(biāo)本，用自己的良心報(bào)給臨床醫(yī)生準(zhǔn)確的結(jié)果。8、沒(méi)有差的專業(yè)，

32、只有差的人看看專業(yè)的大佬們，叢玉隆、王鴻利、倪語(yǔ)星、陳宏礎(chǔ)、仲人前，很多臨床科研的巨擘都烙著醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的印子，看看他們的工作和經(jīng)歷。最后套用我老板的一句話：做的好做什么都好，做不好做什么都不好全自動(dòng)生化分析儀及其試劑間化學(xué)污染對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響臨床實(shí)驗(yàn)室：全自動(dòng)生化分析儀在各級(jí)醫(yī)院現(xiàn)在都普遍使用，并且測(cè)試速度越來(lái)越快，但是很多醫(yī)院過(guò)分依賴儀器，在測(cè)試結(jié)果不理想 的情況下，不知如何排除，根據(jù)您多年經(jīng)驗(yàn)，請(qǐng)您談?wù)劀y(cè)試結(jié)果不理想主要都有哪些原因？于主任：全自動(dòng)生化分析儀在各級(jí)醫(yī)院的使用已經(jīng)非常普遍，當(dāng)生化儀保養(yǎng)不當(dāng)時(shí)往往會(huì)導(dǎo)致：儀器清洗能力下降，比 色杯老化后引起吸附力增加，生化儀內(nèi)灰塵及污物的積聚，常

33、規(guī)清洗不能有效消除交叉污染等，或者測(cè)試順序安排不當(dāng)，這些均會(huì)增加儀器及試劑間交叉污染的可能 性，引起測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。常見(jiàn)影響因素及污染來(lái)源包括：（1）試劑通道堵塞或試劑針污染：有些試劑易產(chǎn)生結(jié)晶，會(huì)使試劑通道部分堵塞，造成試劑加入量不 足，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果；當(dāng)試劑針在清洗不完全或黏附力增加時(shí)，殘留試劑可能會(huì)對(duì)下一檢測(cè)結(jié)果造成影響。（2）攪拌棒污染：試劑與樣本、第一試劑與第二試劑的混 勻需要攪拌棒，而攪拌棒如果清洗不完全，或黏附力增加時(shí)，殘留試劑可能會(huì)對(duì)下一檢測(cè)結(jié)果造成影響。（3）比色杯污染：生化分析儀的比色杯大體分為兩種，一 種是循環(huán)使用的（如石英比色杯等），另一種是需要定期更換的（如塑料比色杯等

34、），每個(gè)比色杯檢測(cè)完畢后，進(jìn)行清洗，然后繼續(xù)下一個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目的檢測(cè)。當(dāng)由于 各種原因?qū)е履硞€(gè)比色杯清洗不完全或該比色杯老化時(shí)，吸附在比色杯上的上一個(gè)項(xiàng)目的殘留試劑可能會(huì)對(duì)在這個(gè)比色杯中進(jìn)行的下一個(gè)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果造成影響。 根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，比色杯的污染對(duì)結(jié)果影響最大，因?yàn)楸壬铍y以清洗干凈，且在實(shí)際工作中難以判斷該比色杯上一測(cè)試的項(xiàng)目。（4）燈泡老化：這也是常見(jiàn)影響結(jié)果 的原因，應(yīng)按照要求及時(shí)更換燈泡，使儀器處于良好的工作狀態(tài)。臨床實(shí)驗(yàn)室：除了儀器本身設(shè)計(jì)方面造成結(jié)果不穩(wěn)定性這個(gè)我們不能自己解決的原因，很多讀者反映日常使用時(shí)，質(zhì)控往往在控，單獨(dú) 測(cè)試一個(gè)項(xiàng)目時(shí)，比如肌酐非常準(zhǔn)確，但是同時(shí)測(cè)定很多項(xiàng)目，

35、結(jié)果就非常不好，這主要是什么原因（試劑間化學(xué)污染的可能性，引起測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確）？于主任：試劑化學(xué)成分的交叉污染很難發(fā)現(xiàn)，往往質(zhì)控結(jié)果很好，或驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果也良好，但實(shí)際測(cè)定的個(gè)別結(jié)果會(huì)誤 差很大。引起試劑間化學(xué)污染的原因很多，主要有兩個(gè)，一是試劑中含有下一個(gè)檢測(cè)所要測(cè)定的底物，或是含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)的底物有作用，因而直接 干擾下一反應(yīng)的測(cè)定結(jié)果；另一種原因是該試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對(duì)下一個(gè)項(xiàng)目的反應(yīng)進(jìn)程帶來(lái)間接的干擾，在有試劑污染的情況下，下一個(gè)測(cè)試所測(cè)定的是前后兩個(gè)項(xiàng) 目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。臨床實(shí)驗(yàn)室：造成以上試劑間化學(xué)污染導(dǎo)致測(cè)試結(jié)果不穩(wěn)定的種類都有哪些？于主任：根據(jù)試劑化學(xué)成分污染的途

36、徑可分為：（1）試劑成分的直接污染：上一個(gè)測(cè)定試劑中含有下一個(gè)測(cè)試所要測(cè) 定的物質(zhì)，直接干擾下一檢測(cè)的測(cè)定結(jié)果。如：淀粉酶（AMY）試劑中含有較高濃度的鈣（Ca 2+ ）；堿性磷酸酶（ALP）（IFCC法）、肌酸激酶（CK）（NAC法）、肌酸激酶-MB（CK-MB）（NAC法）、二氧化碳（CO2） （PEPC法）、AMY（EPS法）、三酰甘油（TG）等試劑中含有鎂（Mg 2+）；葡萄糖（GLU）（氧化酶法）、總蛋白 （TP）與酸性磷酸酶（ACP）試劑中含有較高濃度的鉀（K + ）；膽堿酯酶（ChE）、總膽固醇（CHOL）、GLU（GOD法）、尿酸（UA）（尿酸酶法）、乳酸脫氫酶（LD）（IFC

37、C法）、羥丁酸脫氫酶 （HBDH）（DGKC法）等試劑中含有磷酸緩沖液；CHOL、TG試劑及高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）試劑中含有膽酸鈉；丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶 （ALT）（IFCC法）、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）（IFCC法）試劑中含有高活性的LD；以上試劑的交叉污染就分別會(huì)對(duì)Ca 2+、Mg 2+、K+（紫外酶法）、磷（P）、總膽汁酸（TBA）及LD的測(cè)定結(jié)果造成干擾。（2）試劑成分參與反 應(yīng)：上一個(gè)試劑中含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測(cè)定的底物有作用，因而干擾下一反應(yīng)的測(cè)定結(jié)果。如：Mg 2+測(cè)定試劑的絡(luò)合 劑亦能與鐵（Fe）結(jié)合，影響鐵與鐵絡(luò)合劑的結(jié)合；直接膽紅素（DBil）（重氮法

38、）試劑含有EDTA，Mg 2+試劑中含有 EGTA，均能與Ca結(jié)合，從而影響Ca的測(cè)定；以甘油作為酶保護(hù)劑的試劑，會(huì)對(duì)TG的測(cè)定帶來(lái)干擾；鈣（MTB法）試劑對(duì)K+有 負(fù)干擾；CHOL試劑中含有膽固醇酯酶，可水解膽固醇酯形成游離膽固醇，而引起對(duì)游離膽固醇測(cè)定的干擾。（3）反應(yīng)進(jìn)程相同：上一個(gè)試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對(duì)下 一個(gè)項(xiàng)目的反應(yīng)進(jìn)程帶來(lái)間接的干擾，下一項(xiàng)目所測(cè)定的是前后兩個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。如：當(dāng)上一反應(yīng)產(chǎn)物為H2O2時(shí)，則對(duì)以Trinder反應(yīng)產(chǎn)生 顏色的測(cè)定結(jié)果引起干擾，如UA對(duì)CHOL結(jié)果的影響，CHOL對(duì)肌酐（CREA）（酶法）測(cè)定結(jié)果的影響，GLU（氧化酶法）對(duì)CREA測(cè)定結(jié)果的影

39、 響；CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）試劑中含有GLU成分，其分析方法的原理中包含GLU的己糖激酶（HK）反應(yīng)過(guò)程，因此可能對(duì)GLU的測(cè)定 帶來(lái)干擾，尤其對(duì)GLU的HK法測(cè)定可能帶來(lái)嚴(yán)重干擾。（4）影響反應(yīng)條件：如上一試劑緩沖液成分改變了下一反應(yīng)的pH環(huán)境，從而改變反應(yīng)速率，如 TP（雙縮脲法）測(cè)定需在pH89時(shí)，蛋白肽鍵才都能與堿性銅溶液作用生成紫色反應(yīng)，若pH8時(shí)，則會(huì)導(dǎo)致TP結(jié)果偏低，還直接影響球蛋白、白蛋白/ 球蛋白的結(jié)果；酶活性測(cè)定有最適pH，大多數(shù)酶反應(yīng)pH在6.07.5之間，ALP、-GT、LDH則在堿性條件下最適宜；CREA（苦味酸速率法） 反應(yīng)條件為堿性，果糖胺（動(dòng)力

40、學(xué)法）反應(yīng)條件為酸性，受到污染后反應(yīng)速率會(huì)減慢。CREA（酶法）試劑中含有抗壞血酸氧化酶，影響了氧化還原反應(yīng)的進(jìn)程， 會(huì)對(duì)TBA（酶循環(huán)法）測(cè)定結(jié)果有影響。DBil（釩酸鹽氧化法）試劑中含有表面活性劑的酒石酸鹽緩沖液會(huì)影響ALT活性，對(duì)測(cè)定結(jié)果有負(fù)干擾。臨床實(shí)驗(yàn)室：如何判別試劑間存在化學(xué)污染？于主任：由于試劑中化學(xué)成分非常復(fù)雜，各種穩(wěn)定劑、反應(yīng)物質(zhì)、緩沖體系共存，且各品種、各廠商的試劑內(nèi)含物均不 同，因此試劑間的化學(xué)污染往往較難判別。日常工作中往往是儀器評(píng)估沒(méi)問(wèn)題，而用戶使用時(shí)存有污染；質(zhì)控品和Westgard法則不起作用，質(zhì)控往往在控； 污染具有偶然性，并不是每次都出現(xiàn)。當(dāng)按照日常的分析順序

41、出現(xiàn)異常結(jié)果時(shí)，將出現(xiàn)異常結(jié)果的分析項(xiàng)目及其前一個(gè)項(xiàng)目單獨(dú)復(fù)檢又恢復(fù)正常，多是由于發(fā)生試劑 間交叉污染所致。但由于試劑成分的復(fù)雜多樣性，儀器狀況的獨(dú)特性，可能發(fā)生的試劑間交叉污染的情況不盡相同。各個(gè)公司所提供的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)常不能夠全面反映 試劑組成的情況，因此需要通過(guò)試驗(yàn)才能發(fā)現(xiàn)試劑交叉污染可能帶來(lái)的干擾。一般可以以下試驗(yàn)及步驟來(lái)加以判別：（1）追溯可疑檢測(cè)項(xiàng)目的反應(yīng)杯序號(hào)，在這之 前該反應(yīng)杯做的是什么項(xiàng)目的檢測(cè)，以此來(lái)初步估計(jì)是什么反應(yīng)或什么物質(zhì)對(duì)后項(xiàng)目檢測(cè)產(chǎn)生干擾；初步確定后可選擇同類反應(yīng)，有針對(duì)性地實(shí)施交叉污染試驗(yàn)加以 驗(yàn)證，并尋找方法避開(kāi)此污染。如加做清洗，更換試劑順序，甚至更換檢測(cè)試劑

42、或方法。（2）將某一試劑作為樣本進(jìn)行全套項(xiàng)目測(cè)定，觀察各項(xiàng)生化結(jié)果的情況， 進(jìn)而確定發(fā)生試劑交叉污染時(shí)造成直接干擾的項(xiàng)目。（3）1份樣品分成2份，1份加生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)南♂屢海硪环菁拥攘康哪吃噭?，同時(shí)測(cè)定，觀察結(jié)果 的變化，進(jìn)而確定可能發(fā)生試劑交叉污染時(shí)造成干擾的項(xiàng)目。（4）試劑交叉污染實(shí)驗(yàn)方法：交叉污染初試：假設(shè)有3個(gè)項(xiàng)目A、B、C，以一混合血清 作為標(biāo)本，按以下順序測(cè)試：A2A5、B2B5、C2C5： 以此4次測(cè)定值平均值分別作為A、B、C項(xiàng)目無(wú)污染時(shí)的均值；AB-A：表示B項(xiàng)目對(duì)A項(xiàng)目污染時(shí)A項(xiàng)目的測(cè)定值，其余表示類同。若（AB- A/A×100）95%或105%則強(qiáng)烈支

43、持B試劑對(duì)A有交叉污染。疑似污染確認(rèn)：若上述初試結(jié)果B對(duì)A有污染，則可進(jìn)行以下試驗(yàn)進(jìn)行確認(rèn)。臨床實(shí)驗(yàn)室：如何消除試劑間的化學(xué)污染？于主任：首先要求檢驗(yàn)人員對(duì)儀器工作流程、試劑組成、測(cè)定原理要了如指掌，對(duì)試劑交叉污染的各種可能性加以考 慮，合理設(shè)計(jì)程序。更換試劑時(shí)，應(yīng)仔細(xì)研究說(shuō)明書(shū)，發(fā)現(xiàn)和避免可能存在的試劑交叉污染。實(shí)際工作中，用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行連續(xù)的多個(gè)項(xiàng)目的測(cè)定，每個(gè)反 應(yīng)的詳細(xì)過(guò)程難以探知，特別是比色杯的交叉污染無(wú)明顯的特征，因此應(yīng)理論分析結(jié)合實(shí)際應(yīng)用摸索出一套符合本單位工作的方法：（1）為減少試劑間的化學(xué)污 染，應(yīng)定期對(duì)儀器進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋ｐB(yǎng)，如更換管道，用去污劑、酸性洗液清洗比色杯，用

44、去污劑擦清試劑針，用無(wú)水乙醇擦洗攪拌棒等。（2）合理安排檢測(cè)項(xiàng)目的順 序：一般在安排項(xiàng)目順序時(shí)要求兩個(gè)項(xiàng)目間至少要有一個(gè)非干擾項(xiàng)目，由于各廠商試劑盒原理不同，內(nèi)含成分不同，故無(wú)固定的測(cè)定順序格式，需要自己摸索。較好 的做法是將被干擾項(xiàng)目置于干擾項(xiàng)目之前，以消除干擾發(fā)生的可能。一般檢測(cè)順序有以下原則：不受上一試劑的干擾；不影響下一試劑測(cè)定；不影響測(cè)試速 度；充分運(yùn)用剩余試劑位開(kāi)展新項(xiàng)目；利用好儀器的功能。（3）當(dāng)合理設(shè)置測(cè)試順序無(wú)法消除交叉污染時(shí)，可使用生化分析儀的試劑針、比色杯清洗程序，對(duì) 試劑針、比色杯進(jìn)行2次或多次清洗。用堿性清洗液及酸性清洗液交叉沖洗試劑針可以有效地避免攜帶污染。（4）選

45、用具有抗交叉污染的試劑盒：如在游離膽固醇 試劑中添加膽固醇酯酶抑制劑，以減少膽固醇酯酶水解膽固醇酯而引起對(duì)游離膽固醇測(cè)定的污染。（5）部分大型全自動(dòng)生化分析儀有多個(gè)模塊或通道，可以將有化 學(xué)污染干擾的項(xiàng)目排在不同的模塊或通道中檢測(cè)。三種肺炎支原體血清學(xué)檢測(cè)方法比較（廣告成分嚴(yán)重）肺炎支原體是急性呼吸道感染的常見(jiàn)病原體之一。近年來(lái)，已成為小兒肺炎常見(jiàn)的病原體，由其引起的呼吸感染日趨增多。目前，實(shí)驗(yàn)室診斷方法主要依靠血清學(xué)。我們對(duì)2002年9月-2003年4月分院收治住院的呼吸道感染患兒進(jìn)行微量顆粒凝集法和酶聯(lián)免疫吸附法進(jìn)行肺炎支原體抗體IgM的測(cè)試，并且同時(shí)檢測(cè)冷凝集試驗(yàn)，現(xiàn)告如下。1材料與方法

46、1.1對(duì)象標(biāo)本來(lái)源2002年10月2003年4月就診的呼吸道感染癥狀的分院兒科病房呼吸道感染患者216例。每例均于入院2天內(nèi)抽血，。同時(shí)用間接血凝法和酶聯(lián)免疫法檢測(cè)MP-IgM抗體及冷凝集試驗(yàn)。1.2 方法1.2.1微量顆粒凝集法測(cè)MP-IgM抗體，試劑盒SERODIASMYCO-由日本富士瑞比歐株式會(huì)社提供。嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，每次均設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照，滴度1：80為陽(yáng)性。1.2.2ELISA法試劑由美國(guó)診斷自動(dòng)化公司生產(chǎn)，上海領(lǐng)檢科技公司提供，操作嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。1.2.3冷凝集試驗(yàn)按臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)“冷凝集試驗(yàn)”進(jìn)行操作，滴度1：64為陽(yáng)性。2結(jié)果2.1 治療結(jié)果216例受檢樣品中，MP感染和非MP感染患兒MP三種結(jié)果比較見(jiàn)表1。172例疑為MP感染的病例中，PA法陽(yáng)性占 93.0%，ELISA法占95.3%，CAT法占67.4%。在44