創(chuàng)新計(jì)劃課題投標(biāo)書

1、創(chuàng)新計(jì)劃課題投標(biāo)書項(xiàng)目名稱：特色中草藥新產(chǎn)品的研究與開發(fā)課題名稱：*膠囊的開發(fā)研究投標(biāo)單位： 通訊地址： 郵 編：聯(lián) 系 人： 聯(lián)系電話：聯(lián)系傳真：電子信箱：*科學(xué)技術(shù)廳制二00二年四月1、課題摘要本項(xiàng)目根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論，創(chuàng)制中藥復(fù)方制劑安心膠囊，并在用于治療冠心病心絞痛取得顯著療效基礎(chǔ)上，擬按三類中藥新藥要求，從藥物的制劑工藝、質(zhì)量控制、藥理毒理及臨床應(yīng)用等方面，對(duì)該藥的工藝、質(zhì)量、安全性及有效性作進(jìn)一步研制與考察，以期開發(fā)出一種具有廣西地方特色的防治冠心病心絞痛的中藥復(fù)方制劑，進(jìn)一步提高中醫(yī)藥防治冠心病的水平。本項(xiàng)目預(yù)期成果可完成該藥臨床前期016號(hào)資料，寫出新藥研究報(bào)告，并與廠家進(jìn)一步

2、合作，共同申報(bào)國家三類中藥新藥臨床驗(yàn)證，將該藥開發(fā)成產(chǎn)品，推向社會(huì)，可望獲得較好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益，對(duì)推動(dòng)廣西的中醫(yī)藥衛(wèi)生事業(yè)發(fā)展具有重要意義。 2、意義和必要性（包括技術(shù)突破對(duì)行業(yè)技術(shù)進(jìn)步的重要意義和作用、國內(nèi)外現(xiàn)狀和技術(shù)發(fā)展趨勢(shì)，特別是市場需求分析）項(xiàng)目立題的意義及必要性 冠心病是嚴(yán)重危害中、老年人群鍵康的心血管疾病之一，此病以歐美國家最多見，是工業(yè)發(fā)達(dá)國家的流行病，其死亡率也較高，據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)告，1985年冠心病死亡數(shù)北愛爾蘭為406/10萬（男性）和130/10萬（女性）、美國為235/10萬（男性）和80/10萬（女性）。1988年美國約有608萬人患冠心病，約54萬人死于此病

3、。據(jù)中國MONICA方案調(diào)研資料表明，我國各地人群冠心病事件發(fā)生率和病死率與國際相比屬較低水平，男性發(fā)病率最高為108.7/10萬，也明顯低于歐美國家平均水平（400/10萬），但衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)、流行病學(xué)、臨床及病理解剖等各方面的資料都說明，近一二十年來我國冠心病呈明顯的上升趨勢(shì)。因此，目前對(duì)冠心病的防治研究很有必要，它仍然是當(dāng)今國內(nèi)外關(guān)注的課題。已往大量的研究資料表明，中醫(yī)藥在冠心病治療中的應(yīng)用十分廣泛，且療效肯定，因此，加強(qiáng)對(duì)冠心病的中醫(yī)藥防治研究，進(jìn)一步發(fā)掘有效方藥，提高中醫(yī)藥防治冠心病的整體水平，具有重要的意義。展國內(nèi)外現(xiàn)狀及技術(shù)發(fā)趨勢(shì) 關(guān)于冠心病心絞痛的防治研究，在實(shí)驗(yàn)方面，七十年代以前主

4、要側(cè)重于調(diào)節(jié)心肌血氧的供需平衡，強(qiáng)調(diào)降低心臟負(fù)荷，增加冠脈血流量和促進(jìn)側(cè)支循環(huán)的建立等。八十年代以來，對(duì)心肌缺血損傷發(fā)病機(jī)理的認(rèn)識(shí)深入到細(xì)胞分子水平，如自由基介質(zhì)的脂質(zhì)過氧化造成缺血再灌注心肌損傷、心律失常及持久性的心功能障礙等嚴(yán)重問題，正逐步得到進(jìn)一步揭示。而在臨床應(yīng)用方面，目前改善心肌缺血藥物的應(yīng)用仍是治療冠心病的主要方法，如硝酸酯類、受體阻滯劑、鈣拮抗劑等。近年來，血小板抑制劑如阿斯匹林、雙嘧達(dá)莫等常用于不穩(wěn)定性心絞痛和心肌梗死后患者，以防止AMI與猝死發(fā)作或再梗死的發(fā)生。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑如卡托普利等用于治療AMI已被證實(shí)安全有效。溶栓制劑如尿激酶、鏈激酶等應(yīng)用治療AMI目前也獲得

5、了大量成功的病例。隨著臨床研究的不斷深入，除藥物治療外，冠狀動(dòng)脈介入性治療技術(shù)的開展，如PTCA、CASI等已成為目前和今后冠心病治療的主要手段之一，但術(shù)后再狹窄問題至今尚未能有效地解決。近廿年來，中醫(yī)藥治療冠心病的臨床研究也取得了較大的進(jìn)展，單味藥如葛根（葛根素）、丹參（丹參酮）、川芎（川芎嗪）、三七（三七皂甙）、水蛭（水蛭素）、黃山藥（甾體總皂甙）、銀杏（銀杏葉黃酮）等均有肯定的治療冠心病心絞痛的作用；復(fù)方制劑如復(fù)方丹參滴丸、養(yǎng)心陰口服液、補(bǔ)心氣口服液、通心絡(luò)膠囊、生脈注射液等在冠心病心絞痛的治療應(yīng)用中也取得了較好療效。但就中醫(yī)藥的研究而言，目前單味藥及其有效成分研究較多，而單味藥對(duì)復(fù)雜的

6、疾病證候來說其作用受限。中藥復(fù)方能針對(duì)復(fù)雜證候，符合中醫(yī)辨證論治原則，但其藥物有效成分比較復(fù)雜，研究成功且療效顯著的較少，能在國內(nèi)推廣應(yīng)用的防治冠心病心絞痛的中藥復(fù)方膠囊制劑不多，*在這方面的研究更是薄弱。因此，進(jìn)一步加強(qiáng)防治冠心病的有效中藥復(fù)方制劑的研究，仍屬必要。為此，我們基于對(duì)冠心病的病機(jī)認(rèn)識(shí)，采用益氣通陽、化痰逐瘀中藥制成安心口服液（含人參、桂枝、水蛭等）。自1993年以來，我們應(yīng)用該藥對(duì)130例冠心病心絞痛患者進(jìn)行了前瞻性臨床對(duì)照觀察（其中冠心丹參片對(duì)照組50例），結(jié)果表明：該藥緩解心絞痛總有效率為88.8%，心電圖改善有效率54.7%，冠心丹參片分別為74.0%和40.0%，緩解癥

7、狀療效優(yōu)于冠心丹參片（P<0.05），有較好的臨床應(yīng)用前景。但口服液制劑需加防腐劑，保質(zhì)問題不易解決，且不便于攜帶，故改為膠囊劑。現(xiàn)擬按三類中藥新藥要求，對(duì)該藥的制劑工藝、質(zhì)量和臨床療效作進(jìn)一步研究，旨在開發(fā)出一種具有特色的治療冠心病的有效中藥復(fù)方制劑。 市場需求分析：冠心病為嚴(yán)重危害中、老年人群健康的常見心血管疾病，據(jù)我國22個(gè)省市40歲以上人群調(diào)查資料，其發(fā)病率約為6.46% 。近年來，發(fā)病率有上升趨勢(shì)，必須加強(qiáng)防治。我們?cè)袕V東茂金地方科技應(yīng)用調(diào)研所對(duì)該藥的市場與效益進(jìn)行分析，從對(duì)經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)廣東10個(gè)城市的抽樣調(diào)查看，其需求者：廣州市為23.5%、陽江市19.3%、順德市21.

8、7%、中山市20.1%、惠州市17.3%、茂名市20.1%、珠海市23.6%、深圳市25.2%、湛江市21.9%、江門市19.1%?？梢?，開發(fā)該項(xiàng)技術(shù)有著廣闊的市場前景。（以上資料由茂金地方科技應(yīng)用調(diào)研所提供） 3、現(xiàn)有基礎(chǔ)條件（相關(guān)前期工作情況、現(xiàn)有技術(shù)和工作基礎(chǔ)、國內(nèi)外技術(shù)專利情況、新藥證書或批文情況、相關(guān)領(lǐng)域的試驗(yàn)情況、研究開發(fā)隊(duì)伍和產(chǎn)學(xué)研結(jié)合等情況）相關(guān)前期工作情況本課題曾于1993年由*衛(wèi)生廳立項(xiàng)（資助經(jīng)費(fèi)1.5萬元）。立項(xiàng)以來，曾做過*口服液的工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及臨床療效初步研究，并于1996年結(jié)題?，F(xiàn)有技術(shù)和工作基礎(chǔ)于1998年由*自然科學(xué)基金立項(xiàng)（資助經(jīng)費(fèi)3.1萬元），對(duì)該藥顆粒劑

9、防治心肌缺血再灌注損傷的機(jī)理進(jìn)行了研究，于2001年12月完成并已結(jié)題。于2000年由衛(wèi)生廳立項(xiàng)（資助經(jīng)費(fèi)1.0萬元），主要工作為該藥膠囊劑提取最佳工藝的篩選研究，擬于今年6月完成。該項(xiàng)研究自立項(xiàng)以來，已發(fā)表的論文有5篇，如，“*口服液治療冠心病心絞痛的臨床觀察-附73例對(duì)照分析”（）；“*口服液治療冠心病心絞痛的臨床報(bào)道”（中日韓血瘀證及活血化瘀研究學(xué)術(shù)大會(huì)論文集，1999，10：59）；“*口服液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)研究”（中國中醫(yī)藥科技，1997，4(1)：17）；“益心脈顆粒對(duì)家兔心肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用的研究”（周光召主編新世紀(jì)新機(jī)遇新挑戰(zhàn)-知識(shí)創(chuàng)新和高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)發(fā)展第1版(下冊(cè))，北京

10、：中國科學(xué)技術(shù)出版社，2001，9：1245）；“*口服液治療冠心病心絞痛80例療效觀察”（新中醫(yī)，2002，34(3)：36）。待發(fā)表的論文有4篇。相關(guān)領(lǐng)域的試驗(yàn)情況該藥顆粒劑防治心肌缺血再灌注損傷的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：該藥對(duì)家兔實(shí)驗(yàn)性心肌缺血再灌注損傷具有明顯的保護(hù)作用，可提高血清及心肌組織中SOD、GSH-PX活性，減少M(fèi)DA的產(chǎn)生。同時(shí)能抑制心肌細(xì)胞CK、AST、LDA的釋放，減輕心肌細(xì)胞的損害。而且該藥可以改善左心的舒縮功能，增強(qiáng)心肌收縮力，改善心肌順應(yīng)性，對(duì)心肌細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)也有顯著的保護(hù)作用。以上結(jié)果提示該藥可用于心肌缺血再灌注損傷的防治。國內(nèi)外技術(shù)專利情況、新藥證書或批文情況1995

11、年，曾向國家申請(qǐng)?jiān)撍帯?996年將該藥改為顆粒劑，經(jīng)*市衛(wèi)生局批準(zhǔn)，作為院內(nèi)制劑生產(chǎn)，2000年經(jīng)衛(wèi)生廳復(fù)審批準(zhǔn)為院內(nèi)中藥制劑（批文：）。研究開發(fā)隊(duì)伍和產(chǎn)學(xué)研結(jié)合情況研究開發(fā)隊(duì)伍：產(chǎn)學(xué)研結(jié)合情況：擬由*等學(xué)院和企業(yè)共同組成產(chǎn)學(xué)研結(jié)合的聯(lián)合攻關(guān)隊(duì)伍。組織中藥學(xué)專家、臨床醫(yī)學(xué)專家及醫(yī)藥方面工程技術(shù)人員共同研究解決該藥提取工藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、藥理藥效及臨床療效試驗(yàn)等問題。若能開發(fā)成產(chǎn)品，可望在全國范圍內(nèi)推銷，甚至推向歐美等西方國家。課題已具備的主要儀器設(shè)備及條件ANGILEN高效液相色譜儀(美國)薄層掃描儀(日本)氣相色譜儀(日本)電子分析天平(1/10萬)(美國)同步十二導(dǎo)心電圖工作站（美國）多普勒彩

12、色心臟B超（美國）Hpias系列彩色病理圖文分析系統(tǒng)（同濟(jì)醫(yī)科大）Finesse325石臘切片機(jī)（英國）AS620冰凍切片機(jī)（英國）-86超低溫冰箱（FORMA1725）（美國）實(shí)驗(yàn)試劑可由國內(nèi)有關(guān)生產(chǎn)廠家或公司聯(lián)系。*藥業(yè)公司具有中試和生產(chǎn)膠囊的必備條件。*醫(yī)院設(shè)有心內(nèi)科病床45張，可提供合格試驗(yàn)病例。4、總體目標(biāo)、實(shí)施年限、具體考核指標(biāo)（含主要技術(shù)、經(jīng)濟(jì)指標(biāo)）及年度安排總體目標(biāo)與實(shí)施年限：擬用三年時(shí)間（2002年10月至2005年12月）完成中藥新藥*膠囊的臨床前研究。具體考核指標(biāo)及年度安排： 2002年10月-2002年12月查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料,選擇藥物制備工藝路線?？己酥笜?biāo)：可確定工藝路

13、線及劑型。2003年1月-2003年3月藥物提取制備工藝篩選試驗(yàn)考核指標(biāo)：提取工藝達(dá)到最佳條件，質(zhì)量穩(wěn)定。2003年1月-2003年6月藥理藥效實(shí)驗(yàn)考核指標(biāo)：ST段和T波值改善，具有明確的對(duì)抗心肌缺血、心肌缺氧作用，冠脈血流量增加30%以上。2003年7月-2003年12月藥物急性毒性實(shí)驗(yàn)和長期毒性試驗(yàn)考核指標(biāo)：半數(shù)致死量不易測(cè)出，最大耐受量達(dá)到成人用量300倍以上，確定本品服用安全，無明顯毒性反應(yīng)。2004年1月-2004年6月藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究、衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)考核指標(biāo)：達(dá)到部頒藥典質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求。2004年1月-2005年7月完成100例住院患者的臨床對(duì)照觀察考核指標(biāo)：緩解心絞痛療效達(dá)到90.0%

14、，心電圖改善有效率達(dá)到55.0%，寫出臨床總結(jié)報(bào)告。2005年8月-2005年12月收集整理全部研究資料，寫出新藥臨床前研究總結(jié)報(bào)告，組織申報(bào)鑒定評(píng)審，與企業(yè)合作，申請(qǐng)三類中藥新藥臨床驗(yàn)證?？己酥笜?biāo)：完成新藥臨床前研究總結(jié)報(bào)告，達(dá)到三類中藥臨床前要求。5、主要研究內(nèi)容（技術(shù)方案、技術(shù)工藝路線、實(shí)施方案、可能取得的批文、專利或藥證）主要研究內(nèi)容*膠囊的藥物組成：人參、桂枝、瓜蔞殼、水蛭、茯苓等。*膠囊制備工藝及其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。*膠囊的藥理藥效試驗(yàn)。*膠囊急性毒性和長期毒性試驗(yàn)。*膠囊的期臨床對(duì)照觀察。技術(shù)方案、技術(shù)路線及實(shí)施方案制備工藝研究：本課題藥物制備工藝擬按如下流程進(jìn)行（見附圖），并應(yīng)用正交試

15、驗(yàn)對(duì)其煎煮時(shí)間、次數(shù)及加水量等因素進(jìn)行提取最佳工藝的研究。質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究：擬采用薄層色譜法對(duì)本品中人參、桂枝、瓜蔞及水蛭等藥味進(jìn)行定性鑒別，并采用薄層色譜掃描法（TLCS法）或高效液相色譜法（HPLC法）對(duì)本品中主要有效成分人參皂苷Rg1、Re和桂皮醛進(jìn)行定量研究。 定性鑒別：采用薄層色譜法對(duì)本品中人參、桂枝、瓜蔞及水蛭等藥味進(jìn)行定性鑒別，具體實(shí)驗(yàn)方案如下： a. 人參的鑒別： 取本品內(nèi)容物約10g，加水50ml，超聲處理30分鐘，加乙醚振搖提取2次，每次30ml,收集乙醚提取液（另作鑒別桂枝藥材用）。水溶液加水飽和正丁醇溶液振搖提取3次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用氨試液洗滌3次，每次5

16、0ml，棄去氨試液。正丁醇液水浴蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取人參對(duì)照藥材制成對(duì)照藥材溶液，再取人參皂苷Rg1、Re和Rb1對(duì)照品制成對(duì)照品溶液。層析條件：硅膠GCMC-Na薄層板，正丁醇乙酸乙酯水（415）上層溶液或氯仿乙酸乙酯甲醇水（15402010）10下放置的下層溶液為展開劑，10硫酸乙醇溶液為顯色劑，105加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。b. 瓜蔞的鑒別取本品內(nèi)容物約10g，加石油醚乙酸乙酯（11）混合溶劑或加乙醇適量加熱回流提取1小時(shí) ，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取瓜蔞對(duì)照藥材制成對(duì)照藥材溶液。層析條件：硅膠GCMC-Na薄層板，環(huán)己烷乙

17、醚乙酸乙酯（2054）或石油醚（6090）乙酸乙酯（41）為展開劑，10硫酸乙醇溶液或5香草醛硫酸溶液為顯色劑，105加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。 c. 桂枝的鑒別取人參鑒別項(xiàng)下的乙醚提取液（或取本品內(nèi)容物約10g，加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，取濾液），蒸干，殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取桂枝對(duì)照藥材制成對(duì)照藥材溶液，再取桂皮醛對(duì)照品制成對(duì)照品溶液。層析條件：硅膠GCMC-Na薄層板，正己烷乙酸乙酯（41）或石油醚（6090）乙酸乙酯（173）為展開劑，二硝基苯肼乙醇試液為顯色劑。d. 水蛭的鑒別取本品內(nèi)容物約10g，加乙醇30ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液蒸干（或取

18、本品內(nèi)容物約10g，加水50ml緩緩煮沸15分鐘，濾過，濾液加3倍量乙醇，靜置，濾過，濾液蒸干），殘?jiān)訜o水乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取水蛭對(duì)照藥材制成對(duì)照藥材溶液。層析條件：硅膠GCMC-Na薄層板，正丁醇冰醋酸水（651520）為展開劑，0.2茚三酮乙醇溶液為顯色劑，105加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。含量測(cè)定：人參皂苷Rg1、Re 的含量測(cè)定擬采用薄層掃描法（TLCS法）或高效液相色譜法（HPLC法）進(jìn)行測(cè)定：取本品內(nèi)容物約10g，精密稱定，加乙醚適量回流提取1小時(shí)，濾過，棄去乙醚液，藥渣揮干溶劑，精密加入甲醇50ml，稱定重量，加熱回流2小時(shí)，放冷，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，濾過，精密量取

19、續(xù)濾液25ml，蒸干，殘?jiān)铀?0ml溶解，置分液漏斗中，加水飽和正丁醇溶液提取4次，每次30ml，合并正丁醇溶液，加氨試液洗滌3次，每次80ml,棄去氨試液，正丁醇溶液蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，并轉(zhuǎn)移至5ml量瓶中，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rg1和Re對(duì)照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的對(duì)照品溶液。供試品溶液點(diǎn)2l，對(duì)照品溶液點(diǎn)2l和4l。層析條件：硅膠GCMC-Na薄層板，正丁醇乙酸乙酯水（415）上層溶液為展開劑，10硫酸乙醇溶液為顯色劑，105加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，進(jìn)行掃描測(cè)定，S=530nm，R=650nm?；虿捎肏PLC法進(jìn)行測(cè)定

20、：以十八烷基硅烷化鍵合硅膠為填充劑，乙腈0.05磷酸溶液（2080）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長為203nm。對(duì)照品溶液和供試品溶液各進(jìn)樣10l。初步穩(wěn)定性試驗(yàn)：a. 常溫下考察法：對(duì)常溫下放置的樣品進(jìn)行考察，以開始考察的結(jié)果為0月結(jié)果，以后每月考察一次，連續(xù)考察三個(gè)月。考察項(xiàng)目和指標(biāo)按膠囊劑要求進(jìn)行，即對(duì)本品的性狀、鑒別、水分、溶散時(shí)限、衛(wèi)生學(xué)檢查和含量測(cè)定等項(xiàng)目進(jìn)行考核。b. 加速試驗(yàn)法：在進(jìn)行常溫下考察的同時(shí)，還進(jìn)行加速試驗(yàn)考察，將本品在臨床試驗(yàn)用包裝條件下，于3740和相對(duì)濕度75條件下保存，每月考核一次，連續(xù)三個(gè)月進(jìn)行考核。藥理藥效學(xué)試驗(yàn)：抗心肌缺血試驗(yàn)a. 阻斷犬冠狀動(dòng)脈致心肌缺血（犬冠脈結(jié)

21、扎法） 取犬巴比妥鈉麻醉，分離氣管，開胸，暴露心臟，分離冠狀動(dòng)脈左前降支中段，以備結(jié)扎，縫置心外膜電極，用多導(dǎo)生理記錄儀記錄心外膜電圖（20個(gè)），待穩(wěn)定后，結(jié)扎冠狀動(dòng)脈，30min后記心外膜電圖作為用藥前對(duì)照，然后分安心膠囊組（大、小兩個(gè)劑量）、陽性對(duì)照組（消心痛）、空白對(duì)照組三組給藥。給藥后60min、120min、180min測(cè)定心外膜電圖，計(jì)算ST值變化，進(jìn)行組間比較用F檢驗(yàn)或作自身對(duì)照。b. 家兔急性心梗范圍的影響（NBT染色法）取體重2.53kg的家兔40只，隨機(jī)分為四組，1組為安心膠囊大劑量組（30g/kg）、2組為安心膠囊小劑量組（15g/kg）、3組為消心痛組、4組為空白對(duì)照組

22、。家兔背部固定于手術(shù)臺(tái)上，麻醉下開胸。在左冠狀動(dòng)脈前降支處穿線以備結(jié)扎。結(jié)扎前給藥一次，給藥后30min結(jié)扎冠狀動(dòng)脈，立即縫合切口，3h后再給藥一次。結(jié)扎6h后處死動(dòng)物，取出心臟，橫切45片，以NS沖冼，涼干稱重。將心肌片放入NBT染色液中，15min取出，正常心肌為蘭色，梗塞心肌不染色，切下梗塞心肌稱重，計(jì)算梗塞心肌所占心臟的百分率，與對(duì)照組比較作F檢驗(yàn)。c. 藥物致大鼠（或豚鼠）急性心肌缺血EKG的影響取大鼠40只，隨機(jī)分為四組。給藥同上。烏拉坦溶液麻醉，分離頸靜脈，連接有注射器的塑料套管，大鼠四肢安插針狀電極，描記正常導(dǎo)聯(lián)心電圖。注入腦垂體后葉素0.5ml/kg，觀察EKG，恢復(fù)后注入供

23、試藥，記錄60min內(nèi)不同時(shí)間EKG的變化。以ST段和T波升高為標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，評(píng)定藥物對(duì)心肌缺血的作用。抗心肌缺氧試驗(yàn)（小鼠氣管結(jié)扎法）取小白鼠40只，隨機(jī)分為四組。用藥同上，連續(xù)給藥兩周。末次給藥后1h，麻醉，分離氣管，四肢連接心電監(jiān)護(hù)儀，用導(dǎo)聯(lián)觀察給藥前的心電圖，然后結(jié)扎氣管并同時(shí)按動(dòng)秒表計(jì)時(shí)，通過心電監(jiān)護(hù)儀觀察小白鼠心電活動(dòng)消失時(shí)間，即為心肌缺氧時(shí)間，以此評(píng)價(jià)藥物抗心肌缺氧作用。冠脈循環(huán)實(shí)驗(yàn)對(duì)離體豚鼠心臟冠脈流量的影響（Langendorff法）取300g左右豚鼠，擊昏后頸動(dòng)脈放血，取出心臟低溫洛氏液中排出余血。插入主動(dòng)脈導(dǎo)管，連接肌張力換能器。穩(wěn)定后，在充氧恒溫恒壓的洛氏液中收

24、集灌流液，測(cè)定3min內(nèi)冠脈流量。藥物分組：a.安心膠囊大劑量組；b.安心膠囊小劑量組；c.異丙腎上腺組；d.對(duì)照組。經(jīng)動(dòng)脈插管分別注入種藥物，觀察藥物對(duì)離體豚鼠心臟冠脈流量的影響，冠脈流量增加30%以上可以認(rèn)為有擴(kuò)張冠脈作用。毒理實(shí)驗(yàn)研究急性毒性試驗(yàn)半數(shù)致死量（LD50）或最大耐受量（MTD）的測(cè)定。LD50測(cè)定，觀察一次給藥后動(dòng)物產(chǎn)生的毒性反應(yīng)和死亡情況。MTD測(cè)定，以動(dòng)物能耐受的最大濃度、最大容積的劑量一次或24h內(nèi)23次給予小白鼠，觀察不產(chǎn)生動(dòng)物死亡的最大耐受量，推算出相當(dāng)臨床用藥的倍數(shù)。長期毒性試驗(yàn)取Wistar大鼠80只，各半，隨機(jī)分為四組，安心膠囊設(shè)三個(gè)劑量組，另設(shè)一個(gè)對(duì)照組。如

25、急毒結(jié)果顯示毒性很低可設(shè)二個(gè)劑量組。試驗(yàn)同期為23個(gè)月，Qd×60d。最后一次給藥次日，取2/3的動(dòng)物處死，作臟器系數(shù)測(cè)定、備流學(xué)、血液生化和病理組織學(xué)檢查。余下1/3動(dòng)物停止給藥，繼續(xù)觀察兩周，了解毒性反應(yīng)的可逆程度和可能出現(xiàn)的遲緩性毒性。檢查項(xiàng)目同上。臨床觀察方案病例選擇標(biāo)準(zhǔn)a. 診斷標(biāo)準(zhǔn)：按WHO關(guān)于缺血性心臟病的命名及診斷標(biāo)準(zhǔn)。b. 試驗(yàn)病例標(biāo)準(zhǔn)：納入病例標(biāo)準(zhǔn)：凡心絞痛發(fā)作每周3次以上，未經(jīng)治療或雖經(jīng)治療而癥狀無改善，并具有下列條件之一者：一是心電圖有缺血樣改變者；二是心電圖正常但心絞痛發(fā)作典型，含服硝酸酯制劑可緩解，可確診為冠心病心絞痛者。排除病例標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)相關(guān)檢查證實(shí)為心肌

26、梗塞以及其它心臟疾病、重癥神經(jīng)官能癥、更年期癥候群、頸椎病所致胸痛者；合并中度以上高血壓，重度心肺功能不全，重度心律失常，肝、腎、造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)疾病，精神病患者；18歲以下，妊婦或哺乳期婦女，對(duì)本藥過敏者。分組方法：用隨機(jī)數(shù)字表法，將合格的入選病例按入院先后順序隨機(jī)分為兩組，治療組和對(duì)照組各50例。治療方法：治療組給予口服安心膠囊每次2粒（0.35g/粒），每日3次；對(duì)照組給予口服通心絡(luò)膠囊每次2粒（0.38g/粒），每日3次。采用雙盲法給藥（上兩藥分裝同型號(hào)、同顏色膠囊），以4周為1個(gè)療程。觀察指標(biāo)：觀察并記錄治療前后患者癥狀（采用Likert scale記分法）、體征、舌脈變化，心絞痛

27、發(fā)作時(shí)間、次數(shù)、程度、持續(xù)時(shí)間、誘發(fā)原因，硝酸甘油服用量，藥物副作用等；治療前后行心電圖、血脂、心肌酶譜、血液流變學(xué)、血、尿、便常規(guī)檢查及心、肝、腎功能檢查。療效判定標(biāo)準(zhǔn)：主要考核心絞痛、心電圖和硝酸酯制劑停減率等項(xiàng)目。心絞痛、心電圖療效參照1979年上海會(huì)議冠心病心絞痛和心電圖療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：療程結(jié)束后，由課題組收集觀察資料。計(jì)量資料采用T檢驗(yàn)或F檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)或Ridit分析。所有數(shù)據(jù)均用華西醫(yī)科大設(shè)計(jì)的統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理?？赡苋〉玫呐?、專利或藥證本課題結(jié)束后，可完成三類新藥臨床前016號(hào)資料，并可申報(bào)國家三類中藥新藥臨床驗(yàn)證，有希望獲得國家新藥批文。6、主要技術(shù)特點(diǎn)

28、和創(chuàng)新點(diǎn)（圍繞關(guān)鍵技術(shù)、技術(shù)工藝路線、新藥的特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)、可能取得的專利，尤其是發(fā)明專利和取得國外專利及知識(shí)產(chǎn)權(quán)分析）本課題主要技術(shù)關(guān)鍵及特點(diǎn)：*膠囊的提取制備工藝是建立在四部位提取法基礎(chǔ)上，結(jié)合臨床用藥特點(diǎn)，分別采用醇提、蒸餾、水提與醇沉等多種方法，使該藥的有效成分（或部位）盡可能被提取出來。并用正交試驗(yàn)法考察提取最佳條件如加水量、次數(shù)、時(shí)間等而確定的。*膠囊的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，采用薄層層析法對(duì)本品人參、桂枝、瓜蔞、水蛭進(jìn)行定性鑒別，用高效液相色譜法對(duì)人參總皂甙的含量進(jìn)行測(cè)定。本品20%的藥物可以定量，60%的藥物可以定性，符合國家三類新藥質(zhì)量要求。按DME原則，嚴(yán)格設(shè)計(jì)臨床研究方案，采用雙盲法考

29、核與評(píng)價(jià)臨床試驗(yàn)結(jié)果。新藥的特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)：*膠囊是在傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論基礎(chǔ)上，根據(jù)冠心病“正氣虛于內(nèi)，痰瘀痹于中”的病機(jī)特點(diǎn)，采用益氣通陽、化痰逐瘀治則篩選藥物而制成的，其中醫(yī)理論上的創(chuàng)新在于：在國內(nèi)首次提出冠心病的病機(jī)為“正氣虛于內(nèi)，痰瘀痹于中”，其治法當(dāng)“益氣通陽、化痰逐瘀”，闡明了冠心病正虛邪實(shí)、錯(cuò)綜復(fù)雜的病理過程及其治療上應(yīng)通補(bǔ)并籌、痰瘀同治的觀點(diǎn)；在藥物配伍上的創(chuàng)新在于：開創(chuàng)了益氣藥與破血逐瘀藥、通陽藥與蟲類藥配伍治療冠心病的先例。方劑的藥物組成味數(shù)不多，只有五味藥物，且均為常用中藥，藥材資源豐富，價(jià)格也較低廉，規(guī)模生產(chǎn)成本不高；臨床應(yīng)用其療效與同類藥有競爭優(yōu)勢(shì)，且無明顯毒副作用。該藥口服

30、液制劑于1995年申請(qǐng)專利，1996年已獲得專利公開號(hào)。根據(jù)以往申請(qǐng)藥物專利的經(jīng)驗(yàn)，本品在配方及提取制備工藝方面可向國家申請(qǐng)發(fā)明專利，以保護(hù)該藥的知識(shí)產(chǎn)權(quán)。7 關(guān)聯(lián)行動(dòng)（相關(guān)基地建設(shè)、技術(shù)改造、技術(shù)引進(jìn)、國際合作等落實(shí)情況，與其它相關(guān)的國家科技計(jì)劃工作研究內(nèi)容的銜接和分工，課題的組織管理措施，基地、技術(shù)或工程依托等其它必要的支撐和成套條件落實(shí)情況）本課題合作單位*藥業(yè)公司，為藥品生產(chǎn)企業(yè)。該公司位于，按國家GMP要求進(jìn)行藥品生產(chǎn)與管理，具有較好的產(chǎn)品中試條件和較強(qiáng)的技術(shù)改造能力。并以該公司為依托，進(jìn)行技術(shù)改造和引進(jìn)先進(jìn)生產(chǎn)技術(shù)。本課題的組織管理實(shí)行課題負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)制，并有專職科研管理人員參與課題

31、，負(fù)責(zé)課題的組織、管理、協(xié)調(diào)與監(jiān)督實(shí)施。實(shí)驗(yàn)室為重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，設(shè)有中藥藥理、中藥化學(xué)、藥物分析等實(shí)驗(yàn)室，具有進(jìn)行藥物成分分析、藥理藥效等相關(guān)實(shí)驗(yàn)所需儀器、設(shè)備等實(shí)驗(yàn)條件。醫(yī)院設(shè)有心血管科，現(xiàn)有病床45張，其中每年冠心病住院患者占半數(shù)以上，可提供臨床試驗(yàn)所需病例。8、總投資預(yù)算、資金籌措及來源渠道本課題完成臨床前研究約需投資30萬元，經(jīng)費(fèi)預(yù)算情況如下： 支出項(xiàng)目 金額實(shí)驗(yàn)室改裝費(fèi) 20.0儀器設(shè)備費(fèi) （1）電腦控制的TLC分析儀 20.0（2）全自動(dòng)膠囊分裝機(jī) 20.0 科研業(yè)務(wù)費(fèi) 1.0水電管理費(fèi) 0.5 購買動(dòng)物及飼料 3.0購買藥材 1.0藥物制備 1.5實(shí)驗(yàn)試劑 0.5藥物分析 2.5藥品

32、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究 5.0藥物毒性實(shí)驗(yàn) 3.5藥理藥效實(shí)驗(yàn) 4.0衛(wèi)生學(xué)檢查 1.0臨床病例觀察 2.0差旅費(fèi) 0.5協(xié)作費(fèi) 1.0 參加學(xué)術(shù)會(huì)議 1.0鑒定評(píng)審會(huì) 1.0勞務(wù)費(fèi) 1.0 合 計(jì) 90.0經(jīng)費(fèi)籌措及來源渠道：主要從以下三個(gè)渠道籌措經(jīng)費(fèi)：一是爭取*科技廳新藥開發(fā)基金30萬元，主要用于完成臨床前研究；二是合作單位*藥業(yè)有限公司投入資金50萬元，主要用于新藥臨床驗(yàn)證；三是通過投標(biāo)，爭取國家新藥開發(fā)基金10萬元，主要用于申報(bào)新藥證書。9、預(yù)期成果（經(jīng)濟(jì)、社會(huì)、環(huán)境分析、與國內(nèi)外同類產(chǎn)品或技術(shù)競爭力分析，可申報(bào)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的條件分析，成果應(yīng)用和產(chǎn)業(yè)化前景分析）社會(huì)效益：冠心病為嚴(yán)重危害中、老年

33、人群健康的常見心血管疾病，據(jù)我國22個(gè)省市40歲以上人群調(diào)查資料，其發(fā)病率約為6.46% 。近二十年來，我國冠心病發(fā)病率呈明顯的上升趨勢(shì)，需要研究有效藥物進(jìn)行防治。本產(chǎn)品研制成功，可推廣應(yīng)用，無疑是廣大病人的福音。安心膠囊選用藥物均為常用中藥，市場藥源充足。本產(chǎn)品開發(fā)成功，對(duì)中醫(yī)藥資源的開發(fā)利用，增強(qiáng)中醫(yī)藥在世界醫(yī)藥行業(yè)的競爭力，促進(jìn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化，具有重要意義。經(jīng)濟(jì)效益：本課題研究可給冠心病患者的防治提供一種新的中藥復(fù)方制劑，可望取得較顯著的經(jīng)濟(jì)效益，推動(dòng)地方經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。其經(jīng)濟(jì)效益情況參考廣東茂金地方科技應(yīng)用調(diào)研所提供數(shù)據(jù)：項(xiàng)目直接經(jīng)濟(jì)效益：每年400萬元以上； 投產(chǎn)后年經(jīng)濟(jì)效益：年新增生產(chǎn)能

34、力：400萬盒（24#/盒）；年新增產(chǎn)值：約6000萬元；年新增利稅：400萬元；年創(chuàng)匯：250萬元；年節(jié)匯：無；年節(jié)支：無。與國內(nèi)外同類產(chǎn)品或技術(shù)競爭力分析目前，除了開展藥物溶栓和心臟介入治療外，改善心肌缺血藥物的應(yīng)用仍然是國內(nèi)外治療冠心病的一個(gè)主要途徑，西藥應(yīng)用較多的有硝酸酯類、受體阻滯劑及鈣拮抗劑等藥物，但由于這些化學(xué)藥物不同程度地存在一定的毒副作用，長期應(yīng)用不易為患者所接受。因此，探索治療冠心病的有效天然植物藥物，已成了當(dāng)今冠心病藥物防治的一種趨勢(shì)。據(jù)近年國家中醫(yī)藥管理局所公布的急癥必備中成藥，用于治療冠心病心絞痛的復(fù)方制劑約有8種，以報(bào)道較多且已推上市場的口服中藥制劑復(fù)方丹參滴丸、補(bǔ)

35、心氣、養(yǎng)心陰口服液及通心絡(luò)膠囊來說，復(fù)方丹參滴丸心絞痛緩解總有效率最低為80.0%，最高為93.0%，心電圖改善有效率分別為46.0%和61.4%；補(bǔ)心氣、養(yǎng)心陰口服液心絞痛緩解總有效率為84.87%和86.94%，心電圖改善總有效率分別為44.92%和48.81%；通心絡(luò)膠囊心絞痛緩解總有效率最低為76.7%，最高為96.67%，心電圖改善有效率分別為53.33%和85.14%。其中復(fù)方丹參滴丸、通心絡(luò)膠囊對(duì)冠心病心絞痛及心電圖療效臨床報(bào)道結(jié)論不甚一致，尚難作出評(píng)價(jià)。我們研制的安心口服液，經(jīng)臨床130例觀察，心絞痛緩解和心電圖改善總有效率分別為88.8%和54.7%，與補(bǔ)心氣、養(yǎng)心陰口服液療

36、效相似，改成膠囊劑后，更方便服用和攜帶，具有較強(qiáng)的市場競爭力。可申報(bào)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的條件分析該藥曾獲得過專利公開號(hào)，課題組已有申報(bào)新藥研制專利的經(jīng)驗(yàn)；企業(yè)具有向國家申報(bào)新藥中藥保護(hù)品種的資格和條件。成果應(yīng)用和產(chǎn)業(yè)化前景分析*膠囊經(jīng)臨床初步驗(yàn)證，其治療冠心病心絞痛療效肯定，且臨床觀察未發(fā)現(xiàn)有明顯毒副作用，是一種安全有效、服用方便的口服中藥制劑，改革劑型后療效可望提高，改革劑型后療效可望提高。治療冠心病的藥物市場需求量較大，該藥若能研制成功，具有較高的推廣應(yīng)用價(jià)值，產(chǎn)業(yè)化前景較好。10、風(fēng)險(xiǎn)分析（技術(shù)、市場、管理、經(jīng)濟(jì)等風(fēng)險(xiǎn)）技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)分析 本課題從已經(jīng)進(jìn)行的臨床和實(shí)驗(yàn)研究分析，*膠囊療效肯定，其作用機(jī)理已有一定的了解，且該藥制備工藝已基本確定，技術(shù)上基本無大的風(fēng)險(xiǎn)，但藥物劑型的工藝、質(zhì)量仍需要不斷完善。合作單位*藥業(yè)公司經(jīng)過四年多的生產(chǎn)研究，已熟練掌握了中藥材前處理、提取、濃縮、分離、干燥、制粒等一整套中藥生產(chǎn)的技術(shù)，擁有一批有實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的高科技人才，公司所生產(chǎn)的中成藥質(zhì)量穩(wěn)定，工藝成熟、設(shè)備先進(jìn)，完全達(dá)到國家現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)，有能力生產(chǎn)“安心膠囊”這一產(chǎn)品。市場風(fēng)險(xiǎn)分析目前國內(nèi)市場上雖然已有一些同類產(chǎn)品，但市場推廣好的品種不多，*內(nèi)還是空白，而本品配方精煉，療效肯定，無毒副作用，且其價(jià)格、質(zhì)量