黃連中鹽酸小檗堿的提取分離及鑒定

1、實(shí)驗(yàn)七 黃連中鹽酸小篥堿的提取分離及鑒定黃連為毛戛科黃連屬植物黃連(coptis chinensis Eraneh )、三角 葉黃連(coptis deltoidca C . Ycheng et Hsiao )或云連 (coptiteetoidesC.Y .cheng )的干燥根莖。黃連具有清熱燥濕、清心除煩，瀉火解毒的功效。黃連的有效成分主要是生物堿，已分離出的主要生物堿有小璧堿 (berberine )、掌葉防己堿(palmatine )、黃連堿(jatrorrhizine )等。其中小璧堿含量最高，可達(dá)10%左右，是以鹽酸鹽的狀態(tài)存在于黃連 中。小璧堿有很強(qiáng)的抗菌作用，已廣泛地應(yīng)用于臨床

2、，掌葉防己堿也 作藥用，其抗菌性能和小璧堿相似。目的要求1 .學(xué)習(xí)和掌握水溶性生物堿的提取方法。2. 學(xué)習(xí)和掌握生物堿的柱色譜分離方法。3. 學(xué)習(xí)和掌握生物堿的化學(xué)檢識及薄層色譜的鑒定方法。實(shí)驗(yàn)原理小璧堿為黃色針狀結(jié)晶，mp為145 C,游離的小璧堿能緩緩溶于 水(1: 20)及乙醇中(1: 100),易溶于熱水及熱醇，難溶于乙酬， 石油酬、苯、三氯甲烷等有機(jī)溶劑，其鹽在水中溶解度很小，尤其是 鹽酸鹽。鹽酸鹽為l: 500,枸椽酸鹽1: 125,酸性硫酸鹽1: 100, 硫酸鹽l: 30,但在熱水中都比較容易溶解。小璧堿常以季鉉堿形式存在，堿性強(qiáng)(pka11.53 ),能溶于水中， 其水溶液有

3、三種互變形式。季俊式（紅棕色）醛式（黃色）醇式（黃色）小栗堿（黃連素）掌葉防己堿又稱巴馬亭，為黃色結(jié)晶，溶于水、乙醇、幾乎不溶于 三氯甲烷、乙酬等有機(jī)溶劑。鹽酸掌葉防已堿為黃色針狀結(jié)晶，并有 強(qiáng)烈的黃色熒光。易溶于熱水或熱乙醇，在冷水中的溶解度也比鹽酸 小璧堿大。本實(shí)驗(yàn)是利用小璧堿和掌葉防己堿的硫酸鹽在水中溶解度大的性 質(zhì)，用硫酸水提取出來總生物堿，再利用其鹽酸鹽難溶于水及鹽析作 用，使生物堿鹽析出，以除去水溶性雜質(zhì)。再利用兩種生物堿極性不 同，采用柱色譜分離。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、提取分離黃連粗粉50g加 0.3% H2SO4500ml，浸漬 20 分鐘煎煮30分鐘，濾過藥渣疽液加石灰乳調(diào)PH值至中性&

4、#39;放置10分鐘，抽濾濾液加HCl調(diào)PH23加濾液體積45%的NaCl，放置30分鐘，抽濾沉淀濾液(主要含小栗堿、掌葉防己堿、黃連堿等生物堿)柱加200ml水加熱至澄明趁熱抽濾濾液放置、抽濾V沉淀二、生物堿類檢識1. 化學(xué)檢識：(1) 丙酮加成反應(yīng)：取樣品0.05g ,溶于50ml熱水中，加入10% NaOH溶液2ml，混合均勻后，于水浴中加熱至50 C，加入丙酮5ml, 放置，即有檸檬黃色結(jié)晶析出。此反應(yīng)可用于原小璧堿型季鉉生物堿的鑒別。(2) 漂白粉顯色反應(yīng)：小璧堿酸性水溶液中加漂白粉(或通入氯 氣)，溶液即變櫻紅色。2. 薄層色譜檢識吸附劑：硅膠G對照品：鹽酸小璧堿甲醇溶液樣品：不同色帶的甲醇溶液展開劑：CHCls-MeOH-冰 HAc (7: 1 : 2)檢視：先在紫外燈光(365nm)下觀察熒光，再噴改良碘化鉉'鉀 試劑。實(shí)驗(yàn)說明及注意事項(xiàng)1 .以硫酸鹽代替鹽酸鹽，可增加生物堿的浸出量。2. 鹽析最佳用量為45%。思考題1.根據(jù)小璧堿的性質(zhì)，除用硫酸水溶液提取外，尚可用哪些提取 方法？請?jiān)O(shè)計(jì)一個(gè)提取工藝流程。2 .掌握根據(jù)化合