高速逆流色譜技術(shù)

1、高速逆流色譜技術(shù)目 錄介紹1高速逆流色譜的原理11.系統(tǒng)描述21.1主機21.2恒流泵21.3紫外檢測器31.4恒溫循環(huán)器31.5色譜工作站32.主機描述32.1操作42.1.1傳感器控制面板42.1.2電源開關(guān)42.1.3樣品進樣口及樣品出樣口42.1.4進口42.1.5出口42.2六通閥42.3進樣步驟82.4控制面板92.4.1功能鍵介紹92.4.2控制面板的操作92.5TBE-300B高速逆流色譜的工作流程103.安裝103.1檢查包裹103.2安裝環(huán)境103.3連接管103.4連接保溫系統(tǒng)的管路113.5連接信號線124.操作124.1準備124.2操作程序124.3系統(tǒng)平衡134.

2、3.1單泵平衡134.3.2雙泵平衡144.4樣品分離145.維護145.1清洗系統(tǒng)145.2警告156.系統(tǒng)特性及工作參數(shù)15附錄A15附錄B16附錄C17同田生物介紹逆流色譜（CCC）是一種無固體載體支持的液-液分配色譜技術(shù)。與其他柱色譜相比，逆流色譜不會導(dǎo)致不可逆吸附，樣品，變性，污染及 等問題。除此之外，它能夠分離分子量從小變到大的化合物，甚至一些生物大分子。高速逆流色譜（HSCCC）是逆流色譜中的最新的發(fā)展。高速逆流色譜不僅減少的分離時間，而且也極大地提高了分離度和制備能力。高速逆流色譜的應(yīng)用：1、 制備性地分離毫克到克規(guī)模的樣品；2、 從粗樣品中分離目標化合物；3、 分離放射性同位

3、素。高速逆流色譜在分離天然產(chǎn)物中的優(yōu)勢：1、 更加方便和迅速；2、 不需要對樣品進行前處理；3、 液-液分配容積系統(tǒng)的選擇廣泛；4、 因為沒有固體載體，所以無死吸附，無污染；5、 高的重現(xiàn)性及重復(fù)性。高速逆流色譜的原理高速逆流色譜是基于一種特殊的現(xiàn)象流體動力學(xué)平衡。當(dāng)高速逆流色譜在運轉(zhuǎn)時，在呈螺旋狀盤繞的線圈的高速行星式運動產(chǎn)生的離心力的作用下，不相容的兩相將不斷地混合。其中一相將作為固定相(上相或者下相)，而另一相將作為流動相通過恒流泵不斷地注入柱子中去。固定相在行星運動產(chǎn)生的離心力作用下會保留在螺線管柱中，而流動相將不斷地穿過固定相然后經(jīng)出口流出。溶解物被流動相帶入柱子中，在兩相溶劑之間不

4、斷地重復(fù)分配，然后根據(jù)各自不同的分配系數(shù)一次流出柱子。在流動相中分配系數(shù)大的溶質(zhì)將先被洗脫出來，在流動相中分配系數(shù)小的溶質(zhì)將后被洗脫出來。圖1描述了流體動力學(xué)運動以及行星運動中不相容的兩相溶劑的分布情況。在描述的上部分中，流體動力學(xué)平衡達到穩(wěn)定后，柱子中出現(xiàn)徹底不同的兩個區(qū)域：靠近軸直徑四分子一的區(qū)域是混合區(qū)；該區(qū)域兩相溶劑高頻混合。其他區(qū)域是固定區(qū)：溶劑分成兩層。重相溶劑相在系統(tǒng)外部，輕相溶劑系統(tǒng)在系統(tǒng)內(nèi)部。在兩相表面之間有一個分界線。描述的下部分是柱子從到到拉伸圖，其與上部分描述中的和是符合的。隨著柱子的旋轉(zhuǎn)，每一混合區(qū)域都將以同樣的速度朝著柱子的尾端流動（類似海浪表面的運動原理）。圖1

5、螺旋管柱中流體動力學(xué)運動及兩相溶劑分布在螺線管柱的任意一部分，兩相溶劑總是以很高的頻率混合和分層。當(dāng)柱子以800轉(zhuǎn)/分的速度旋轉(zhuǎn)時，流動將在一分鐘內(nèi)13次通過固定相。因此，流動相流率在一個相對寬跨度的范圍內(nèi)，高速逆流色譜仍然達到很高的分離效率。1.系統(tǒng)描述TBE-300B高速逆流色譜系統(tǒng)包括如下幾個部分：TBE-300主機，泵，檢測器，溫度調(diào)節(jié)循環(huán)器及色譜工作站。1.1主機主機分離樣品。在螺旋管柱中，樣品將被分成單一成分。根據(jù)它們各自的分配率，不同的成分將依次隨流動相流出。主機系統(tǒng)包括，速度調(diào)節(jié)，六通閥，分離柱，保溫膜等。1.2恒流泵恒流泵以恒定流率將主機泵入主機中。當(dāng)泵運轉(zhuǎn)時，泵的過濾器應(yīng)該

6、處于溶劑表面之下以避免空氣進入泵中，導(dǎo)致分離效率受影響。注意：建議采用中壓及低壓泵。安全壓力設(shè)為2Mpa，精確度不超過0.1mL。1.3紫外檢測器檢測器會利用脈沖將經(jīng)過分離的各組分的信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?，同時將電信號傳遞到色譜工作站。在收集信號前，應(yīng)該將檢測器預(yù)熱45min。1.4恒溫循環(huán)器通過提供包裹有保溫膜的恒定溫度的工作介質(zhì)，恒溫循環(huán)器將幫助分離過程維持一個恒定及合適地溫度。1.5色譜工作站色譜工作站將來自檢測器的電信號經(jīng)相關(guān)軟件轉(zhuǎn)換為數(shù)字信號，并記錄它們的起伏。2.主機描述流路六通閥進樣六通閥進口出口樣品進口樣品出口電源開關(guān)傳感器控制面板圖3 TBE-300B主機前面視圖2.1操作2.1.

7、1傳感器控制面板控制和顯示旋轉(zhuǎn)速度（轉(zhuǎn)/分）。2.1.2電源開關(guān)向上推表示開，向下推表示關(guān)。用于接通和切斷電源。當(dāng)儀器不工作時，必須切斷設(shè)備電源。在切斷電源之前，必須保證主機完全停止運轉(zhuǎn)。2.1.3樣品進樣口及樣品出樣口使用兩個注射器針頭作為樣品進樣口和出樣口。將裝有樣品溶液的干凈注射器A與樣品進樣口相連，將另一只空的注射器B與樣品出樣口相連。通過抽注射器B將注射器A中的樣品吸入樣品環(huán)中。2.1.4進口通過管將泵與分配柱的進口相連接。泵將流動相從進口經(jīng)六通閥（當(dāng)連接時）泵入分配柱中。主機面板上以In標記。2.1.5出口高速逆流色譜柱通過管與檢測器相連。檢測器不斷地檢測流出物。主機面板上以O(shè)ut

8、標記。2.1.6六通閥見下面的2.2部分。2.2六通閥儀器配備有兩個六通閥：流路轉(zhuǎn)換六通閥（閥A）和進樣六通閥（閥B）。閥A用于控制流動相的流路；在正向洗脫的情況下，當(dāng)閥A轉(zhuǎn)向In（錯誤的設(shè)置），流動相的流動方向是從分離柱的頭到分離柱的尾。當(dāng)閥A轉(zhuǎn)向Out時，流動相的流動方向是從分離柱的尾到分離柱的頭。過程A和B：過程A 流動相：親水性相。洗脫方向：從頭到尾（向下）。當(dāng)閥A處于In時，流動相的流動方向是從分離柱的頭到分離柱的尾。在親脂性相中分配系數(shù)小的（K值）組分1首先被洗脫出來。其次，組分2被洗脫出來。K值大的組分3和4很難被洗脫出來而保留在疏水性的固定相中。洗脫組分3和4的操作：1. 在不

9、停主機的情況下，停泵；2. 將閥A從In轉(zhuǎn)向Out；3. 調(diào)換流動相和固定相。用疏水性的相作為流動相，而用親水性的相作為新的固定相；4. 重新連接，開泵；5. 如果出現(xiàn)基線漂移和真實的洗脫速度與設(shè)定的洗脫速度不一致的情況，在管的出口設(shè)置一個反壓。6.過程B 流動相：疏水性相。 洗脫模式：從尾到頭（向上）。如圖C所示，當(dāng)閥A轉(zhuǎn)向Out，組分3和4的分配系數(shù)減小，然后被洗脫下來，因為親水相和疏水相之間的調(diào)換。如圖d所示，當(dāng)閥A處于“In”且用親水相作為流動相時，成份1和2被一次洗脫出來。當(dāng)閥A處于“Out”且用親脂相作為流動相時，成份3和4被洗脫出來。這樣，樣品中所有的成份都被洗脫出來了。 閥B是

10、用于將待分離的樣品引入分離柱中。當(dāng)閥B轉(zhuǎn)向“Load”時，樣品進入樣品環(huán)中；然后，將閥B轉(zhuǎn)向“Inject”，樣品被流動相帶入分配柱中。兩個閥的連接及閥A的工作流路描述：圖4 當(dāng)閥A轉(zhuǎn)向“In”時（閥B處于Inject）圖5 當(dāng)閥A轉(zhuǎn)向“Out”時（閥B處于Inject）注意：當(dāng)主機順時針旋轉(zhuǎn)時，閥A應(yīng)該轉(zhuǎn)向In。相反，當(dāng)主逆時針旋轉(zhuǎn)時，閥A應(yīng)該轉(zhuǎn)向Out。樣品經(jīng)過閥B的描述：圖6 當(dāng)閥B轉(zhuǎn)向Load注射器與樣品環(huán)相連，樣品被注入樣品環(huán)中（閥A處于In）圖7 當(dāng)閥B轉(zhuǎn)向Inject泵與樣品環(huán)相連，同時樣品環(huán)與注射器之間的連接中斷。樣品環(huán)中的樣品被流動相帶入分離柱中。（閥A處于In）。當(dāng)進樣閥轉(zhuǎn)

11、向Load。當(dāng)進樣閥轉(zhuǎn)向Load位置時，拉注射器B的活塞使進樣管中產(chǎn)生一個負壓，注射器A中的樣品在負壓的作用下進入進樣閥；然后將進樣閥轉(zhuǎn)向Inject位置。這樣，整個進樣完成。2.3進樣步驟1、稱取適量待分離樣品；2、用分離系統(tǒng)溶劑（流動相或者固定相或者兩者的混合溶劑）溶解樣品。溶液中不應(yīng)出現(xiàn)可見的顆粒。3、將進樣閥轉(zhuǎn)向“Load”（在轉(zhuǎn)換時，操作要迅速以防瞬時產(chǎn)生的高壓使管道爆破）。4、通過注射器將樣品吸入樣品環(huán)中。5、將閥B轉(zhuǎn)向“Inject”。6、清洗進樣閥的進樣管道清洗步驟如下：1） 向注射器A中倒入大約20mL清洗液（例如乙醇）；2） 通過注射器B將清洗液抽入樣品環(huán)中；3） 重復(fù)步驟

12、1和2，直到載樣管道被清洗干凈。注意：在進樣時，首先通過進樣閥B向樣品環(huán)中注入一些空氣以從Outlet端排除樣品環(huán)中的空氣；然后，拉注射器B的活塞將樣品吸入樣品環(huán)中。2.4控制面板控制面板用于調(diào)節(jié)分離柱的旋轉(zhuǎn)參數(shù)。緩慢的增加（順時針）或減少（逆時針）旋轉(zhuǎn)速度直到獲得理想速度。2.4.1功能鍵介紹：調(diào)高及調(diào)低設(shè)定值“FWD”：順時針旋轉(zhuǎn)鍵。選著順時針旋轉(zhuǎn)模式?！癛EV”：逆時針旋轉(zhuǎn)鍵。選著逆時針旋轉(zhuǎn)模式。速度調(diào)節(jié)旋鈕。調(diào)節(jié)旋轉(zhuǎn)速度。順時針旋轉(zhuǎn)增加轉(zhuǎn)速，逆時針旋轉(zhuǎn)減小轉(zhuǎn)速?！癝TOP”：停止鍵。關(guān)閉主機。2.4.2控制面板的操作調(diào)節(jié)順時針旋轉(zhuǎn)速度1、 打開電源開關(guān)。三秒鐘后，顯示屏將閃爍。2、 按

13、下FWD鍵，順時針旋轉(zhuǎn)指示燈將變亮。3、 緩慢正向調(diào)節(jié)速度調(diào)節(jié)旋鈕直到顯示器上的速度到達理想值。調(diào)節(jié)逆向旋轉(zhuǎn)速度1、 打開電源開關(guān)。三秒鐘后，顯示屏將閃爍。2、 按下REV鍵，逆時針旋轉(zhuǎn)指示燈將變亮。3、 正向緩慢調(diào)節(jié)速度調(diào)節(jié)旋鈕直到顯示器上的速度到達理想值。停止旋轉(zhuǎn)1、 逆時針緩慢調(diào)節(jié)速度調(diào)節(jié)旋鈕直到顯示屏顯示速度為0。2、 按下STOP。旋轉(zhuǎn)指示燈將熄滅，顯示器上的0將閃爍。改變旋轉(zhuǎn)方向A、 從正向旋轉(zhuǎn)變成反向旋轉(zhuǎn)1、 按照停止旋轉(zhuǎn)的操作步驟停止分離柱的正向旋轉(zhuǎn)。2、 按照逆向速度調(diào)節(jié)操作步驟操作。B、 從逆向旋轉(zhuǎn)變成正向旋轉(zhuǎn)1、 按照停止旋轉(zhuǎn)的操作步驟停止分離柱的逆向旋轉(zhuǎn)2、 按照正向速

14、度調(diào)節(jié)操作步驟操作2.5TBE-300B高速逆流色譜的工作流程3.安裝3.1檢查包裹在安裝之前，請仔細檢查儀器，看是否存在明顯的破損以及附件是否齊全。3.2安裝環(huán)境必須將儀器放置在一個長大約1500mm，寬大約750mm的穩(wěn)定而安全的平臺上。在儀器底部和平臺之間放置一塊厚3mm的彈性橡膠墊以防震動。確保將儀器安放在裝有空調(diào)的房間內(nèi)，并使其遠離易燃易爆物品。3.3連接管.將濾頭放入已配好的溶劑中。.將泵的出口端與TBE-300主機進口端通過聚四氟乙烯管相連。用扳手將接口扭緊至不漏液。.將溶劑泵入高速逆流色譜儀主機。.用聚四氟乙烯管將主機路出口端與檢測器流通池進口端相連。.溶劑從主機流出，經(jīng)管路進

15、入檢測器流通池中。.最終，溶劑經(jīng)檢測流入收集容器中。3.4連接保溫系統(tǒng)的管路將循環(huán)器的出口端與主機背面的INLET端相連。然后，將主機背面的OUTLET端與循環(huán)水浴器的進口端相連。所有的連接都需要很好的固定。3.5連接信號線從檢測器中產(chǎn)生的信號經(jīng)由信號線傳入色譜工作站中。注意：在信號線的端口有紅、黑兩個終端。根據(jù)顏色將這些終端相連。4.操作4.1準備以一定的比例混合固定相和流動相。將混合液靜置幾個小時或者超聲脫氣半個小時。連接電源、信號線及管路。確保電源及信號線連接牢固，并確保流通管路無漏液。仔細檢查管線保證它們處于正確的連接位置。4.2操作程序打開水?。捍蜷_循環(huán)器的電源開關(guān)，介質(zhì)將在循環(huán)器和

16、主機保溫管路之間循環(huán)。根據(jù)用戶使用指南設(shè)定溫度，然后開始水浴。達到設(shè)定溫度后，樣品將在一個恒定的溫度下被分離。警告：1.在開啟主機前，確保加熱循環(huán)介質(zhì)已處于循環(huán)狀態(tài)以防主機齒輪熱膨脹被損壞。 2.我們建議采用蒸餾水作為溫度調(diào)節(jié)循環(huán)器的工作介質(zhì)，并且應(yīng)該經(jīng)常更換水。 3.循環(huán)器的設(shè)定溫度應(yīng)該小于40。 4.溫度調(diào)節(jié)循環(huán)器上顯示的溫度比保溫管中的實際溫度小2。4.3系統(tǒng)平衡在行星運動下，當(dāng)流動相通過螺旋管柱時，它會逐漸占據(jù)柱子中固定相的部分空間。由于行星運動，柱子中的兩溶劑將到達動力學(xué)平衡。流動相不斷地通過固定相并流出。在此過程中，柱子中仍然會保留部分固定相。我們稱這一過程為系統(tǒng)平衡。平衡系統(tǒng)有兩

17、種方法：4.3.1單泵平衡當(dāng)色譜系統(tǒng)只配置一個當(dāng)通道泵時，單泵平衡是唯一可行的方法。操作步驟如下：a)打開泵，以最高的流速將配好的固定相從主機進口端泵入主機；當(dāng)固定相從出口端流出時，停泵?，F(xiàn)在，主機中的管路充滿了固定相；注意：1.在實驗之前，應(yīng)該將固定相和流動相靜置24小時或者超聲脫氣半個小時。 2.確保固定相足夠充滿管路；確保泵的砂芯濾頭總是處于固定相的液面之下以防將空氣泵入分離柱中。 3.要經(jīng)常清洗泵的砂芯濾頭。 4.保持流體的壓力在2MPa下以防主機中管路爆破。5.當(dāng)泵下相時，做如下檢查： 5-1.確保進樣閥處于INJECT檔； 5-2.檢查管路有無泄漏情況。如果有，按照下述操作解決：a

18、.如果管路破了，用新的管路替換。b.如果管路的連接出有泄漏，將它們扭緊。c.如果仍然有泄漏情況，檢查管路末端的氣封墊是否損壞；如果是，則用新的替換。 5-3.檢查管路是否堵塞。如果是，壓力會逐漸增高。當(dāng)超過2MPa，管路會爆破。因此，如果管路被堵塞，應(yīng)該盡快地停泵。不要運行泵，除非故障被解決。b）打開主機電源開關(guān)，按下控制面板上的FWD鍵。然后緩慢地順時針旋轉(zhuǎn)速度調(diào)節(jié)柄知道旋轉(zhuǎn)速度到達理想值。使主機逆時針旋轉(zhuǎn)，先按REV鍵，其他操作同上。c）將泵進口端的濾頭插入流動相液面下；運行泵，將流動相以適合的流速（建議2mL/min）泵入柱子中使系統(tǒng)平衡。警告：1.應(yīng)該緩慢增加或減小旋轉(zhuǎn)速度； 2.確保

19、泵的濾頭總是處于流動相的液體中，以防空氣被泵入分離柱中。 3.保持流體壓力小于2MPa，以防損壞分離柱。 4.當(dāng)環(huán)境中的溫度低于5時，在關(guān)掉主機后，將循環(huán)系統(tǒng)中的所有水排空。 5.當(dāng)長時間不使用儀器時，將循環(huán)系統(tǒng)中的水排放干凈。4.3.2雙泵平衡當(dāng)高速逆流色譜系統(tǒng)配備有2個單通道泵或一個雙通道泵時，我們能夠選擇這種方法。具體步驟如下： 以合適的比例設(shè)定兩個泵的流率，然后同時運行它們。流速大的泵用于泵固定相，而流速小的泵用于泵流動相。 溶劑從主機的流出口流出，表明溶劑已經(jīng)充滿柱子，停止泵固定相；然后，設(shè)定流動相的流率作為工作流率。按照設(shè)定的速度和方向運行主機。 當(dāng)溶劑在主機中到達平衡時，流出物為

20、流動相。4.4樣品分離1.平衡后，記下固定相流出物的體積。通過注射器進樣，同時調(diào)整檢測器及色譜工作站的參數(shù)。記下色譜圖，并收集樣品成份。注意：在檢測之前，運行檢測器45min；通過記錄固定相的體積，我們能夠計算保留率。2.收集到成份后，關(guān)掉主機，排空管中的液體（用氣體或者液體），同時收集固定相中的樣品成份。5.維護5.1清洗系統(tǒng)a.在排完管路中的所有溶劑后，向分離柱中泵入大約50mL甲醇或乙醇；b.停泵，并將主機進口端與一氣體供應(yīng)裝置相連。然后，將清洗溶劑經(jīng)由吹出。c.如果需要，重復(fù)步驟1-2兩次；d.在低于300的轉(zhuǎn)速下逆時針旋轉(zhuǎn)分離柱5min，同時向分離柱中吹氣以排出剩余的溶劑。注意：根據(jù)

21、樣品的特性選擇清洗劑；甲醇和乙醇是常用的清洗劑。 如果溶劑系統(tǒng)中溶解有某種鹽或者緩沖液，首先用蒸餾水清洗系統(tǒng)，然后用甲醇或乙醇清洗； 在清洗過程中，可以將主機與檢測器相連以便檢測器的流通池能夠同時被清洗。5.2警告保持流體壓力小于2MPa（大約每平方厘米20千克），以防分離柱被損壞。主機應(yīng)該遠離危險品（至少1m）。操作過程中，至少應(yīng)有一人負責(zé)看管。6.系統(tǒng)特性及工作參數(shù)：管路容積：260mL旋轉(zhuǎn)速度范圍：01000rpm，建議轉(zhuǎn)速范圍700900rpm流動相的流速：通常采用1.52.5mL/min樣品環(huán)體積：20mL最大壓力：2MPa（每平方厘米20千克）電壓：220±20v，頻率：

22、50Hz尺寸：330×600×550mm重量：80Kg環(huán)境：高度<3000m 相對濕度<80% 溫度：10-30附錄ATBE-300系統(tǒng)測試（A）分離苯酚及間苯二酚 溶劑系統(tǒng)：正己烷-乙酸乙酯-乙醇-水（1:1:1.2：0.8）根據(jù)上述比率配制溶液，并靜置過液。上相溶劑作為固定相，而下相溶劑作為流動相。溶解樣品（30mg苯酚和30mg間苯二酚）在上相和下相的混合溶劑中。1、測量柱溶劑（主機中管路的體積） 將500mL上相溶劑置于有刻度的燒瓶中，并泵入分離柱中。持續(xù)泵入固定相直至上相溶劑從出口端流出，流出液體積達到20mL。停泵后，記錄有刻度燒瓶中剩余上相溶劑的體

23、積和流出液的體積：柱溶劑計算（Vwhole）：Vwhole=500-Vremianing-Voutflow(1)Vwhole分離柱的全容積（mL）Vremianing有刻度的燒瓶中剩余上相溶劑的容積（mL）Voutflow流出液的體積（mL）2、固定相保留率的測量分離柱充滿上相溶劑后，讓分離柱以850rmp速度順時針旋轉(zhuǎn)。同時，將流動相以2.0mL/min的流速泵入分離柱中。當(dāng)流動相從出口端開始流出時，記錄被流動相推出的上相溶劑的容積（Vpushed）；固定相保留率計算：固定相保留率=(Vwhole-Vpushed)/(Vwhole-Vsample loop)×100%（2）固定相的

24、保留率值應(yīng)該大于40%3、 確認標準峰系統(tǒng)平衡后，通過進樣閥裝載樣品。然后，用流動相以2.0mL/min洗脫直到標準峰出現(xiàn)。整個洗脫過程將被高度逆流色譜工作站記錄下來。附錄B經(jīng)常清洗在正常使用一段時間后，管壁上會附著一些沉淀物。這些沉淀物會使樣品受到污染，使管路堵塞甚至破裂。因此，為避免這些事情的發(fā)生，我們建議經(jīng)常清洗。清洗分離柱的程序：a) 準備60mL0.5%NaOH溶液，并將其泵入分離柱中。停泵，并讓分配柱在較低的速度（不超過300rmp）下旋轉(zhuǎn)30min。然后，停止旋轉(zhuǎn)，并用氣體吹出管路中的NaOH溶液；b) 向分離柱中泵入100mL水（85），讓分配柱在較低的速度（不超過300rmp

25、）下旋轉(zhuǎn)30min以使管壁上殘留的堿液排出柱子。然后，用氣體將管路中的水慢慢吹出。c) 重復(fù)步驟b2-3次，使殘留的NaOH溶液被完全排出。d) 向分離柱中泵入100mL丙酮（分析純），并讓分配柱在較低的速度（不超過300rmp）下旋轉(zhuǎn)3-4min。當(dāng)丙酮在柱子中均勻分布后，增加轉(zhuǎn)速（不超過600rmp），并讓其旋轉(zhuǎn)30min。然后，停止旋轉(zhuǎn)，并用氣體將管路中的丙酮緩慢吹出。e) 向分離柱中泵入100mL甲醇（分析純）。讓分配柱在較低的速度（不超過300rmp）下旋轉(zhuǎn)半個小時。然后，停止旋轉(zhuǎn)，并將管路中的甲醇慢慢吹出。到此，整個清洗過程就完成了。警告：！在整個清洗過程中，泵的保護壓力應(yīng)該設(shè)為1MPa以避免管道因堵塞而破裂。！不能使用飽和碳酸氫鈉溶液以防生成沉淀導(dǎo)致管路堵塞。！如果步驟3的清洗結(jié)果不好，重復(fù)步驟3一到兩次直到管路中流出的液體澄清透明。！如果整個清洗程序不能達到理想結(jié)果，建議更換清洗劑（氯仿或者乙醇）。！設(shè)備正常使用情況下，建議每6個月對設(shè)備進行一次完全的清洗。！整個清洗過程產(chǎn)生的廢液應(yīng)該分別存放于不同的容器中。！每年更換一次連接管路（1440工作小時），每6個月