原料藥和制劑質(zhì)量標準

1、原料藥質(zhì)量研究的主要內(nèi)容 一、性狀 （一）外觀 聚集狀態(tài)、色澤、臭、味、結(jié)晶性 是對藥物感官的一般性描述，一般無法定方法檢查，但仍應(yīng)準確描述。（二）溶解性 1. 溶劑的選擇 應(yīng)根據(jù)藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，考查藥物在水與常用溶劑中的溶解度。應(yīng)選擇與藥物溶解特性密切相關(guān)的溶劑，配制制劑、制備溶液和精制操作有關(guān)的溶劑，避免使用昂貴的、毒性大的、不常使用的溶劑。 2. 表述方式 用“極易溶解”、“易溶”、“溶解”等術(shù)語來表示(見中國藥典凡例)。3. 試驗方法 按中國藥典凡例的規(guī)定操作。25±2，每隔5分鐘強力振搖30秒鐘，觀察30分鐘內(nèi)的溶解情況。 （三）理化常數(shù) 理化常數(shù)包括：熔點, 餾程, 凝

2、點, 比旋度, 折光率, 黏度, 相對密度, 酸值、碘值、羥值、皂化值，吸收系數(shù)等。 測定物理常數(shù)可以鑒別藥物，也可以反映藥物的純雜程度。注意事項： 應(yīng)按藥典附錄規(guī)定的方法進行測定。測定前應(yīng)按規(guī)定對儀器進行校正。 測定理化常數(shù)時應(yīng)用精制品進行測定；質(zhì)量標準中規(guī)定的理化常數(shù)范圍，用試制的藥物來測定。 固體藥物：熔點、吸收系數(shù)。 液體藥物：餾程、相對密度、黏度、折光率。 油脂類還需測定：酸值、碘值、羥值、皂化值。 有手性中心的藥物：比旋度。 1、熔點 照中國藥典”熔點測定法”測定。（1）中國藥典使用毛細管法測定熔點，以供試品局部液化的溫度作為初熔的溫度，以全部液化的溫度作為全熔的溫度。 （2）所用

3、的傳溫液、毛細管、升溫速度等對測定結(jié)果有影響，應(yīng)按藥典要求進行測定。 （3）應(yīng)使用分浸型的溫度計，溫度計應(yīng)用熔點標準品進行校正。 (4) 應(yīng)用DSC予以佐證。 2、吸收系數(shù)（1）測定方法 配制高、低兩種不同濃度的溶液（吸光度在0.30.4和0.60.8之間）各2份，或配制吸收度在0.10.8的系列濃度的溶液，在5臺不同型號的紫外分光光度計上測定，按下式計算吸收系數(shù)。 要求： 應(yīng)使用對照品進行測定。 測定前應(yīng)對容量儀器進行校正。 測定前應(yīng)對紫外分光光度計進行校正。 應(yīng)按干燥品計算。 以平均值作為吸收系數(shù)，RSD應(yīng)小于1.5%。 3、晶型 （1） 方法 X射線粉末衍射法（中國藥典 附錄 F）。X射

4、線衍射法：用一束準直的單色X射線照射單晶或粉末晶體時，便發(fā)生衍射現(xiàn)象，發(fā)生衍射的條件符合布拉格方程：X射線衍射圖譜的橫坐標一般為2，縱坐標為衍射強度。X射線粉末衍射法可以用來鑒別藥物，測定含量，也可以用來對晶型進行考察。 要求： 固體藥物除水溶性好的外，均應(yīng)作。 若不同晶型藥物的生物利用度不同，應(yīng)將晶型的檢查列入質(zhì)量標準。 二、鑒別鑒別試驗：是使用化學(xué)的、物理化學(xué)的或生物學(xué)的方法，來辨別藥物的真?zhèn)巍Ｊ菍θ∽杂袠撕炄萜髦袠悠返拇_認。 要求：專屬性強、重現(xiàn)性好、靈敏、簡便。 通常采用 2 種以上不同類型的方法進行研究，從不同角度驗證目標化合物。 常用的方法有： 1、制備衍生物測定熔點 本法較繁瑣、

5、費時，但專屬性強，必要時可使用。 （1）成酯的反應(yīng) 例 炔雌醇和苯甲酰氯反應(yīng)成酯，炔雌醇苯甲酸酯的熔點為201。 （2）成腙的反應(yīng) 例 異煙肼和香草醛反應(yīng)生成異煙腙，熔點為226。 （3）酯的水解 例 丙酸睪酮水解為睪酮和丙酸，睪酮的熔點為150156。 （4）與生物堿沉淀劑的反應(yīng) 2呈色反應(yīng)或沉淀反應(yīng) 要求：反應(yīng)現(xiàn)象明顯，專屬性強。 一般鑒別試驗： 為一類藥物共有的反應(yīng)，收載在中國藥典 附錄 “一般鑒別試驗”項下。 例 水楊酸鹽（中國藥典 附錄 第20頁） （1）取供試品的稀溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色。 （2）取供試品，加稀鹽酸，即顯水楊酸的白色沉淀；分離，沉淀在醋酸銨溶液中溶解。

6、又如：“丙二酰脲類”、“有機氟化物”、“鈉鹽”、“鉀鹽”的鑒別反應(yīng)等。 （2）個別藥物的鑒別試驗 例 維生素C的鑒別 取本品0.2g，加水10ml溶解后，照下述方法試驗。 取溶液5ml，加硝酸銀試液0.5ml，即生成銀的黑色沉淀。 取溶液5ml，加二氯靛酚鈉試液12滴，試液的顏色即消失。 3紫外特征吸收 方法： （1）核對光譜的數(shù)據(jù) a核對吸收光譜峰、谷的位置。 b核對吸收光譜峰、谷處的吸收度、吸收系數(shù)或吸收度比值。 C核對經(jīng)反應(yīng)處理后反應(yīng)產(chǎn)物的吸收特征。 （2）核對紫外吸收光譜 例1 葉酸的鑒別（p.137）取本品，加0.4%的氫氧化鈉制成每1ml中含10g的溶液，照分光光度法測定，在256

7、、283±2和365±4nm的波長處有最大吸收；在256與365nm波長處的吸收度比值應(yīng)為2.83.0。 例2 苯妥英鈉的鑒別（p.440）取本品約0.3g，加高錳酸鉀10mg，氫氧化鈉0.25g與水10ml，小火加熱5分鐘，放冷，取上清液5ml，加正庚烷20ml振搖提取，靜置分層后，取正庚烷提取液，照分光光度法測定，在248nm的波長處有最大吸收。 4紅外分光光度法（中國藥典 附錄 C） 主要用于原料藥的鑒別，特別適合于同類藥物用其它理化方法不易區(qū)別者。 方法：按要求錄制紅外吸收光譜，與藥品紅外光譜集中的標準圖譜比較，應(yīng)一致。 注意事項： （1）測定前應(yīng)對儀器進行校正（用

8、聚苯乙烯薄膜對儀器的波數(shù)和分辨率進行校正）。 （2）確定制樣的方法。 （3）如果是多晶型的樣品，應(yīng)收載有效的晶型，并應(yīng)提出晶型轉(zhuǎn)化的條件。 （4）對圖譜中的主要吸收峰進行解釋。 5色譜法主要用于制劑的鑒別，對原料藥僅在沒有其它更好的方法時， 或檢查和含量測定中已使用了色譜法時使用。 方法：取供試品和對照品，在相同的色譜條件下進行色譜分離，其 Rf 或 tR 應(yīng)一致。 例1 鹽酸苯海索片的鑒別（p.726）取本品的細粉適量，加氯仿制成每1ml中含鹽酸苯海索2mg的溶液，濾過，作為供試品溶液，另取鹽酸苯海索對照品，加氯仿制成每1ml中含鹽酸苯海索2mg的溶液，作為對照品溶液，照薄層色譜法試驗，吸取

9、上述溶液各10l，分別點于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-甲醇（91）為展開劑，展開后晾干，噴以稀碘化鉍鉀試液使顯色。供試品溶液主斑點的位置應(yīng)與對照品溶液主斑點相同。 例2 鹽酸林可霉素的鑒別（p.727）取本品與鹽酸林可霉素對照品，分別加流動相制成每1ml中含2mg的溶液，照含量測定項下的色譜條件進行試驗，供試品與對照品主峰的保留時間應(yīng)一致。 6、生物化學(xué)或生物學(xué)方法 四. 檢查 檢查項下包括有效性、均一性、純度要求和安全性四個方面。 （一）有效性 指與療效有關(guān)，但在鑒別、純度檢查和含量測定中不能控制的特殊性質(zhì)的檢查。如： 結(jié)晶性（利福平）；制酸力（氫氧化鋁）；吸著力（藥用炭 ）；凝凍濃度（明膠

10、）；乙炔基（炔諾孕酮）；含氟量（諾氟沙星） 例 氫氧化鋁制酸力的檢查(p.553)取本品約0.12g，精密稱定，置250ml具塞錐形瓶中，精密加鹽酸滴定液（0.1mol/L）50ml，密塞，在37不斷振搖1小時，放冷后，加溴酚藍指示液68滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，每1g消耗鹽酸滴定液（0.1mol/L）不得少于230ml。 （二）純度的檢查中國藥典（2005年版）附錄新增了“藥品雜質(zhì)分析指導(dǎo)原則”。指導(dǎo)原則是參照ICH（人用藥品注冊技術(shù)要求國際協(xié)調(diào)會）的文本Q3A和Q3B制訂的。適用于化學(xué)合成的或半合成的有機原料藥及其制劑。1、雜質(zhì)的分類及其在藥品質(zhì)量標準中項目的名稱 （1

11、） 藥物中的雜質(zhì) 雜質(zhì)：影響藥品純度的物質(zhì)均稱為雜質(zhì)。 雜質(zhì)的來源： 生產(chǎn)過程引入：按規(guī)定工藝、規(guī)定原輔料生產(chǎn)，引入成品的合成的起始物、中間體、副產(chǎn)物、試劑等； 貯存過程引入：經(jīng)穩(wěn)定性試驗確認在貯存過程中產(chǎn)生的降解產(chǎn)物。 藥品質(zhì)量標準中的雜質(zhì)不包括變更工藝或原輔料時產(chǎn)生的新的雜質(zhì)，也不包括摻入或污染的外來物質(zhì)。（2） 雜質(zhì)的分類： 按化學(xué)類別和性質(zhì)分類：有機雜質(zhì)、無機雜質(zhì)、有機揮發(fā)性雜質(zhì)。 有機雜質(zhì)：合成的起始物、中間體、副產(chǎn)物、降解產(chǎn)物、試劑、催化劑、配位體等。 無機雜質(zhì)：試劑、催化劑、配位體、重金屬或其他殘留金屬、無機鹽、其他物質(zhì)。 有機揮發(fā)性雜質(zhì)：殘留的有機溶劑。 按毒性分類：毒性雜質(zhì)和

12、普通雜質(zhì)。3. 雜質(zhì)項目的名稱： 明確為某一物質(zhì)時，以該物質(zhì)的化學(xué)名稱作為項目名稱。如磷酸可待因中的“嗎啡”，阿司匹林中的“游離水楊酸”等。 僅知為某一類物質(zhì)時，用該類物質(zhì)的名稱。如“其他甾體”、“還原糖”、“有關(guān)物質(zhì)”等。 對未知雜質(zhì)，可根據(jù)檢測方法命名。如“雜質(zhì)吸收度”、“易炭化物”、“不揮發(fā)物”等。4、質(zhì)量標準中雜質(zhì)檢查項目的確定 根據(jù)生產(chǎn)和貯存過程可能引入的雜質(zhì)來確定，包括存在的雜質(zhì)和潛在的雜質(zhì)。 考察產(chǎn)品中是否引入了合成的起始物、中間體、副產(chǎn)物、試劑。 通過影響因素試驗、加速試驗和長期試驗來確定降解產(chǎn)物。 對表觀含量>0.1%或雖<0.1%，但具有強烈生物作用或毒性的雜質(zhì)

13、應(yīng)確定結(jié)構(gòu)。 對可能存在的無機雜質(zhì)進行考察并制定檢查項目。 有機揮發(fā)性雜質(zhì)：應(yīng)根據(jù)工藝所使用的有機溶劑及殘留情況，確定檢查的項目。 除降解產(chǎn)物和毒性雜質(zhì)外，在原料中已控制的雜質(zhì)在制劑中一般不再控制。 共存的異構(gòu)體和抗生素多組分一般情況不作為雜質(zhì)檢查項目，作為共存物質(zhì)。5、要求 （1）在保證用藥安全、有效的前提下，允許有一定量的雜質(zhì)存在。 （2）一般為限量檢查。 （3）檢查項目的確定既要保證藥物的安全性、有效性，又要根據(jù)藥物在生產(chǎn)和貯存中可能產(chǎn)生的雜質(zhì)來確定。 （4）應(yīng)重點檢查影響藥物療效、危害人體健康或能真實反應(yīng)藥品內(nèi)在質(zhì)量的項目。 （5）限量的確定，既要根據(jù)生產(chǎn)的實際水平，又要根據(jù)藥典的慣例

14、。 雜質(zhì)檢查方法 1. 酸堿度 分為酸度、堿度或酸堿度。 方法：酸堿滴定法、pH值測定法、指示劑法。 2. 溶液的澄清度與顏色（中國藥典 附錄 A, B） （1）溶液的澄清度（中國藥典 附錄 B） 主要用于注射用原料藥的檢查。 方法：與溶劑或濁度標準液比較。 “澄清”：供試品溶液的澄清度應(yīng)相同于所用的溶劑或不超過0.5號濁度標準液。 （2）溶液的顏色（中國藥典 附錄 A） 檢查樣品中的有色雜質(zhì)。 檢查方法： 第一法：與標準比色液比較 第二法：測定吸收度 第三法：色差計法 3無機雜質(zhì) 主要有氯化物（Cl-）、硫酸鹽（SO42-）、鐵鹽（Fe3+）、重金屬（Pb2+）、砷鹽（AsO43-, AsO

15、33-）、氰化物（CN-）等。 方法：收載于中國藥典 附錄 。如“氯化物檢查法”、“砷鹽檢查法”等。 供試品與對照品在相同條件下比色、比濁，以確定雜質(zhì)的量是否超過限量。 注意： 應(yīng)完全按照藥典附錄的方法進行檢查。 注意遵循平行原則。 研究時，可取系列濃度的雜質(zhì)對照品溶液與供試品溶液進行比較，以確定雜質(zhì)含量的范圍。 應(yīng)考察樣品本身對檢查是否有影響。 4.有機雜質(zhì) 有機雜質(zhì)是指殘存在產(chǎn)品中的原料、中間體、副產(chǎn)物和降解產(chǎn)物等。雜質(zhì)能夠確定的，檢查的項目一般以雜質(zhì)的名稱命名；也可以雜質(zhì)的類別命名；不能確定的原料、中間體、副產(chǎn)物一般稱為“有關(guān)物質(zhì)”。 檢查方法： （1）色譜法紙色譜法 主要用于極性較大的

16、雜質(zhì)的檢查。如地高辛中洋地黃毒苷的檢查（中國藥典（2000年版）。薄層色譜法 薄層色譜法分離效率高、簡便、不需要特殊的設(shè)備，有多種檢測的方法，是有關(guān)物質(zhì)檢查中應(yīng)用最多的方法。 常用的方法：雜質(zhì)對照品法；供試品自身稀釋對照法。 HPLC，GC法（中國藥典 附錄 D, E） 1. 內(nèi)標法加校正因子測定某個雜質(zhì)的含量。 2. 外標法測定主成分或某個雜質(zhì)的含量。 3. 加校正因子的主成分自身對照法。 4. 不加校正因子的主成分自身對照法 5. 面積歸一化法 方法的考察： 1. 色譜系統(tǒng)適用性試驗。 2. 測定雜質(zhì)含量: 專屬性、準確度、精密度、定量限、線性、范圍、耐用性。 3. 限量檢查：專屬性、檢測

17、限、線性、耐用性。 （2）分光光度法 控制特定波長處的吸收度?；蚩刂苾刹ㄩL處吸光度的比值。 （3）化學(xué)法 容量法、比色或比濁的方法。 5殘留溶劑的檢查 （1）溶劑的分類 ICH將溶劑分為三類： 第一類溶劑：致癌物、危害環(huán)境的物質(zhì)，應(yīng)避免使用的溶劑。 第二類溶劑：具有非基因毒性，不可逆或可逆毒性，應(yīng)限制使用的溶劑。 第三類溶劑：毒性低，對人體危害較小的溶劑。 （2）殘留溶劑測定法: （中國藥典（2010年版）附錄 P） 色譜柱： 載氣： N2 或He , 檢測器：FID, 對于氯代的溶劑也可以使用MS或ECD。 系統(tǒng)適用性試驗： 供試品溶液的制備： 測定方法： 附注： 6. 干燥失重或水分 干燥

18、失重測定法（中國藥典 附錄 L）： 水分測定法：（中國藥典 附錄 M）： 第一法：費休氏法（Karl Ficher法）； 第二法：甲苯法。 7. 熾灼殘渣（中國藥典 附錄 N） （三）安全性的檢查 熱原或細菌內(nèi)毒素；異常毒性；降壓物質(zhì)；無菌。 五含量測定 1重量法 用適當?shù)姆椒▽⒈粶y組分與樣品中的其他組分分離，轉(zhuǎn)化為一定的稱量形式，用稱量來測定該組分含量的方法。 特點：精確，但操作繁瑣，費事。必要時采用。 例如：苯妥因鈉的含量測定（中國藥典 2005年版） 順鉑的含量測定（中國藥典 2005年版） 2. 容量法 容量法是將一種已知、準確濃度的試劑溶液滴定液滴加到供試品溶液中，至化學(xué)反應(yīng)按劑量關(guān)

19、系反應(yīng)完全，根據(jù)滴定反應(yīng)的化學(xué)劑量關(guān)系以及消耗滴定液的體積和濃度來計算測定組分含量的方法。 特點：精確，簡便，一般不需要對照品，是原料藥和制劑含量測定的首選方法。常用的方法：中和滴定法，沉淀滴定法，配位滴定法，碘量法，溴酸鉀法，溴量法，高錳酸鉀法，鈰量法，亞硝酸納法，非水溶液滴定法等。方法的建立：應(yīng)根據(jù)藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)選擇適當?shù)姆椒?；作滴定曲線，以考察突躍的范圍，并確定終點時指示劑顏色的變化。 方法的考察：準確性（作對照實驗）、精密度（重復(fù)性）。 3紫外分光光度法（中國藥典 附錄 A） 特點：靈敏，簡便、較準確。 測定方法： （1）吸收系數(shù)法 配制一定濃度的供試品溶液，測定吸收度，按吸收系數(shù)計

20、算含量。 （g/100ml） 特點：不需要對照品，但測定條件應(yīng)符合要求。 (2) 對照品比較法 配制一定濃度的供試品溶液和對照品溶液，測定吸收度，按下式計算含量。 特點：需要對照品，但可以克服測定條件對結(jié)果的影響，使提倡的方法。 例如：注射用硫噴妥鈉的含量測定（p367）,甲硝唑片的含量測定（p124）。 (3) 計算分光光度法 方法的建立：選擇測定波長：應(yīng)選擇最大吸收波長；選擇溶劑：易于溶解樣品，吸收度值穩(wěn)定，無毒、價廉。 確定供試品溶液的制備方法和濃度（吸光度應(yīng)在0.30.7之間）。 方法的考察：線性和范圍，專屬性，準確度，精密度。 4色譜法 GC 和HPLC(1) 加校正因子的內(nèi)標法（2

21、) 外標法 方法的建立（1）色譜條件的選擇 根據(jù)藥物的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)選擇色譜條件HPLC 首選C18柱、硅膠柱，檢測器首先選擇紫外-可見檢測器。GC 首先選擇通用性的固定相甲基聚硅氧烷（SE-30, OV-1）、5%苯基甲基聚硅氧烷(SE-54)、聚乙二醇2萬(PEG-20M) ；檢測器首先選擇FID。（2） 色譜系統(tǒng)適用性試驗 柱效（n），分離度（R），拖尾因子（T），精密度等。（3） 方法的考察 專屬性，線性和范圍，精密度，準確度，耐用性等。 制劑質(zhì)量研究的主要內(nèi)容 制劑質(zhì)量研究的內(nèi)容，應(yīng)在原料藥質(zhì)量研究的基礎(chǔ)上，結(jié)合劑型的特點、處方工藝以及臨床使用方法來確定。一、性狀 制劑的外觀、色澤，或內(nèi)容物的色澤。 二、鑒別 參考原