實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)

1、實(shí) 驗(yàn) 室 生 物 安 全質(zhì) 量 手 冊(cè)1 / 65前 言為了貫徹國務(wù)院病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例的精神，適應(yīng)我國實(shí)驗(yàn)室生物安全工作發(fā)展的需要，培養(yǎng)具有較高生物安全素質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室工作人員，進(jìn)一步推動(dòng)我中心實(shí)驗(yàn)室生物安全管理工作，特編制了這本晉城市疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)，以供我中心從事病原微生物檢測工作的人員和相關(guān)人員學(xué)習(xí)使用并遵照?qǐng)?zhí)行。1.編制生物安全手冊(cè)的目的和意義：為了保證實(shí)驗(yàn)室工作人員和周圍環(huán)境的安全，明確定義已知和潛在的危害，嚴(yán)格規(guī)定操作規(guī)范和專門設(shè)備，避免和盡量減少危害。規(guī)范的微生物學(xué)操作技術(shù)是實(shí)驗(yàn)室生物安全的基礎(chǔ)，而專門的實(shí)驗(yàn)室生物安全設(shè)備僅僅是一種補(bǔ)充，絕不能替代

2、正確的操作規(guī)范。2.編制生物安全手冊(cè)的主要依據(jù)：、WHO實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)（第三版）、國務(wù)院第424號(hào)令病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例、國家標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求（GB19489-2008）、衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)微生物和生物安全醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則（WS233-2002）、國務(wù)院第380號(hào)令醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例、生物安全試驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范、人間傳染病的病原微生物名錄3.實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)的適用范圍：根據(jù)我國相關(guān)法規(guī)的規(guī)定并結(jié)合我中心實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際情況，本手冊(cè)適用于我中心從事微生物實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)的科室（微生物實(shí)驗(yàn)室）及相關(guān)職能科室（質(zhì)管科、總務(wù)科）等所有進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室工作人員等。4.生物安全手冊(cè)的發(fā)

3、布、修訂和更新：本中心生物安全手冊(cè)由生物安全委員會(huì)主任批準(zhǔn)發(fā)布，根據(jù)運(yùn)行和評(píng)審情況，必要時(shí)由生物安全委員會(huì)審議修訂。若國家法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)改版或在實(shí)際運(yùn)行過程中變化情況較多時(shí)，本手冊(cè)應(yīng)相應(yīng)做出改版更新。第一章 組 織1.1實(shí)驗(yàn)室概況1.2實(shí)驗(yàn)室生物安全管理委員會(huì)及成員1.3 實(shí)驗(yàn)室生物危害的危險(xiǎn)度評(píng)估專家組成員1.4實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系及職責(zé)分工1.4.1 生物安全委員會(huì)主任為實(shí)驗(yàn)室生物安全第一負(fù)責(zé)人，副主任負(fù)責(zé)分管范圍的生物安全工作。1.4.2生物安全委員會(huì)成員按科室職責(zé)分工負(fù)責(zé)管轄范圍內(nèi)的生物安全工作。1.4.3生物危害的危險(xiǎn)度評(píng)估專家組成員負(fù)責(zé)出現(xiàn)生物安全事故時(shí)的危險(xiǎn)度評(píng)估。1.4.4有關(guān)檢

4、驗(yàn)科室生物安全負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)嚴(yán)密監(jiān)視日常實(shí)驗(yàn)室生物安全工作，嚴(yán)格執(zhí)行本手冊(cè)。對(duì)新項(xiàng)目生物安全評(píng)估提出申請(qǐng)，有權(quán)臨時(shí)決定進(jìn)入生物室人員及實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目的準(zhǔn)入和終止，對(duì)運(yùn)轉(zhuǎn)中所發(fā)生的一切不正常情況和可疑現(xiàn)象及時(shí)采取措施進(jìn)行處理，對(duì)重大事故應(yīng)第一時(shí)間內(nèi)向生物安全委員會(huì)主任、副主任報(bào)告。實(shí)驗(yàn)室工作人員日常工作中在生物安全負(fù)責(zé)人指導(dǎo)下嚴(yán)格遵守生物安全手冊(cè)。實(shí)驗(yàn)室生物安全監(jiān)督員負(fù)責(zé)本專業(yè)范圍的各項(xiàng)試驗(yàn)準(zhǔn)備、實(shí)施及終末處理中的生物安全工作，發(fā)現(xiàn)問題第一時(shí)間向?qū)嶒?yàn)室生物安全負(fù)責(zé)人報(bào)告。1.4.5檢驗(yàn)科負(fù)責(zé)對(duì)相關(guān)人員（包括檢測人員、進(jìn)修人員、實(shí)習(xí)人員等）的生物安全培訓(xùn)工作，并要有相關(guān)記錄。質(zhì)管科負(fù)責(zé)考核實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員生

5、物安全防護(hù)知識(shí)和實(shí)際操作技能，合格后發(fā)上崗證方可上崗工作。1.4.6辦公室負(fù)責(zé)對(duì)分管主任準(zhǔn)入實(shí)驗(yàn)室的外來人員的備案登記、掛牌著裝和檔案管理工作。1.4.7總務(wù)科負(fù)責(zé)水電安全、廢棄物處置，實(shí)驗(yàn)室日常工作生物安全設(shè)施設(shè)備維護(hù)、維修及實(shí)驗(yàn)室保衛(wèi)、防盜、防丟失。1.4.8質(zhì)管科負(fù)責(zé)組織落實(shí)生物安全工作的內(nèi)部審核和管理審核工作及生物安全手冊(cè)的修訂改版。1.4.9 BSL-2級(jí)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人每年向生物安全委員會(huì)專題報(bào)告生物安全工作。第二章 生物危害評(píng)估2.1 生物危害程度分級(jí)管理一切微生物和生物活性物質(zhì)統(tǒng)稱為生物因子?？墒谷恕?dòng)物和植物致病的生物因子稱為病原體。根據(jù)生物因子對(duì)個(gè)體和群體的危害程度將其生物危害

6、程度分為4級(jí)。2.1.1 危害等級(jí)（低個(gè)體危害，低群體危害）不會(huì)導(dǎo)致健康工作者和動(dòng)物致病的細(xì)菌、真菌、病毒和寄生蟲等生物因子。2.1.2 危害等級(jí)（中等個(gè)體危害，有限群體危害）能引起人或動(dòng)物發(fā)病，但一般情況下對(duì)健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會(huì)引起嚴(yán)重危害的病原體。實(shí)驗(yàn)室感染不導(dǎo)致嚴(yán)重疾病，具備有效治療和預(yù)防措施，并且傳播風(fēng)險(xiǎn)有限。2.1.3 危害等級(jí)（高個(gè)體危害，低群體危害）能引起人或動(dòng)物嚴(yán)重疾病，或造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失，但通常不能因偶然接觸而在個(gè)體間傳播，或能用抗生素、抗寄生蟲藥治療的病原體。2.1.4 危害等級(jí)（高個(gè)體危害，高群體危害）能引起人或動(dòng)物非常嚴(yán)重的疾病，一般不能治愈，容易直接、間接

7、或因偶然接觸在人與人，或動(dòng)物與人，或人與動(dòng)物，或動(dòng)物與動(dòng)物之間傳播的病原體。2.2 病原微生物分類管理國家根據(jù)病原微生物的傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的危害程度，將病原微生物分為四類：第一類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。第三類病原微生物，是指能夠引起人類或者動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或者環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害、傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類病原微生物，

8、是指在通常情況下不會(huì)引起人類或者動(dòng)物疾病的微生物。第一類、第二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。2.3 生物危害評(píng)估所需信息當(dāng)實(shí)驗(yàn)室活動(dòng)涉及傳染或潛在傳染性生物因子時(shí)，應(yīng)進(jìn)行危害程度評(píng)估。危害程度評(píng)估應(yīng)至少包括下列內(nèi)容：、生物因子的種類（已知的、未知的、基因修飾的或未知傳染性的生物材料）、來源、傳染性、致病性、傳播途徑、在環(huán)境中的穩(wěn)定性、感染劑量、濃度、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、預(yù)防和治療危害程度評(píng)估應(yīng)由適當(dāng)?shù)挠薪?jīng)驗(yàn)的專業(yè)人員進(jìn)行。本中心由生物危害的危險(xiǎn)度評(píng)估專家組成員負(fù)責(zé)。2.4 信息有限標(biāo)本的生物危害評(píng)估對(duì)相關(guān)信息了解較少的標(biāo)本進(jìn)行危險(xiǎn)度評(píng)估時(shí)（如對(duì)于一些現(xiàn)場收集的臨床標(biāo)本或流行病學(xué)樣品），應(yīng)當(dāng)謹(jǐn)

9、慎地采取一些較為保守的標(biāo)本處理方法。、只要標(biāo)本取自病人均應(yīng)當(dāng)遵循標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法，并采用隔離防護(hù)措施（如手套、防護(hù)服、眼鏡等）。、基礎(chǔ)防護(hù)處理此類標(biāo)本時(shí)最低需要二級(jí)生物安全水平。、標(biāo)本的運(yùn)送應(yīng)當(dāng)遵循國家和/或國際的規(guī)章和規(guī)定。下列信息可能有助于確定這些標(biāo)本的危險(xiǎn)度：、病人的醫(yī)學(xué)資料。、流行病學(xué)資料（發(fā)病率和死亡率資料、可疑的傳播途徑、其他有關(guān)暴發(fā)的調(diào)查資料）。、有關(guān)標(biāo)本來源地的信息。在暴發(fā)病因不明的疾病時(shí)，可能由國家主管部門和/或WHO制訂并公布適當(dāng)?shù)膶ｉT指南，指導(dǎo)標(biāo)本應(yīng)如何運(yùn)輸以及在標(biāo)本分析時(shí)應(yīng)按何種生物安全水平執(zhí)行。第三章 防護(hù)屏障和實(shí)驗(yàn)室生物安全 水 平 分 級(jí) 管 理3.1 一級(jí)防護(hù)屏障：

10、實(shí)驗(yàn)室的生物安全柜和個(gè)人防護(hù)裝備等構(gòu)成的防護(hù)屏障。3.2 二級(jí)防護(hù)屏障：實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施結(jié)構(gòu)和通風(fēng)系統(tǒng)等構(gòu)成的防護(hù)屏障。3.3 生物安全水平一級(jí)實(shí)驗(yàn)室（BSL-1）實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)健康成年人已知無致病作用的微生物。3.4 生物安全水平二級(jí)實(shí)驗(yàn)室（BSL-2）實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)人或環(huán)境具有中等潛在危害的微生物。3.5 生物安全水平三級(jí)實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預(yù)防傳染的疫苗。艾滋病病毒的研究（血清學(xué)實(shí)驗(yàn)除外）應(yīng)在三級(jí)生物安全

11、防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。3.6 生物安全水平四級(jí)實(shí)驗(yàn)室（BSL-4）實(shí)驗(yàn)室結(jié)構(gòu)和設(shè)施、安全操作規(guī)程、安全設(shè)備適用于對(duì)人體具有高度的危險(xiǎn)性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效的疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。與上述情況類似的不明微生物，也必須在四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。待有充分?jǐn)?shù)據(jù)后再?zèng)Q定此種微生物或毒素應(yīng)在四級(jí)還是在較低級(jí)別的實(shí)驗(yàn)室中處理。注：1、三、四級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室本中心不適用。2、一、二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。3、沒有一個(gè)實(shí)驗(yàn)室能夠完全控制所接收的標(biāo)本，故操作人員可能接觸比預(yù)期更高危險(xiǎn)度的微生物，應(yīng)隨時(shí)遵循標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法。第四章 設(shè)施設(shè)備管理要求4

12、.1 BSL-1實(shí)驗(yàn)室4.1.1、無須特殊選址，普通建筑物即可，但應(yīng)有防止節(jié)肢動(dòng)物和嚙齒動(dòng)物進(jìn)入的設(shè)計(jì)。4.1.2、每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近出口處。4.1.3、在實(shí)驗(yàn)室門口處應(yīng)設(shè)掛衣裝置，個(gè)人便裝與實(shí)驗(yàn)室工作服分開設(shè)置。4.1.4、實(shí)驗(yàn)室的墻壁、天花板和地面應(yīng)平整、易清潔、不滲水、碉化學(xué)品和消毒劑的腐蝕。地面應(yīng)防滑，不得鋪設(shè)地毯。4.1.5、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面應(yīng)防水，耐腐蝕、耐熱。4.1.6、實(shí)驗(yàn)室中的櫥柜和實(shí)驗(yàn)臺(tái)應(yīng)牢固。櫥柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)彼此之間保持一定距離，以便于清潔。4.1.7、實(shí)驗(yàn)室如有可開戶的窗戶，應(yīng)設(shè)置紗窗。4.1.8、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)保證工作照明，避免不必要的反光和強(qiáng)光。4.1.9、應(yīng)有適當(dāng)

13、的消毒設(shè)備。4.2 BSL-2實(shí)驗(yàn)室4.2.1、滿足4.1要求。4.2.2、實(shí)驗(yàn)室門應(yīng)帶鎖并可自動(dòng)關(guān)閉。實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)有可視窗。4.2.3、應(yīng)有足夠存儲(chǔ)空間擺放物品以方便使用。實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域外應(yīng)有供長期使用的存儲(chǔ)空間。4.2.4、在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)使用專門的工作服和戴乳膠手套。4.2.5、在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域外應(yīng)有存放個(gè)人衣物的條件。4.2.6、在實(shí)驗(yàn)室所在的建筑物內(nèi)應(yīng)配備高壓蒸汽滅菌器，并按期檢查和驗(yàn)證，以保證符合要求。4.2.7、應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)配備生物安全柜。4.2.8、應(yīng)設(shè)洗眼設(shè)施，必要時(shí)應(yīng)設(shè)有噴淋裝置。4.2.9、應(yīng)通風(fēng)，如使用窗戶自然通風(fēng)，應(yīng)有紗窗。4.2.10、有可靠的電力供應(yīng)和應(yīng)急照明。重要設(shè)

14、備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等應(yīng)設(shè)備用電源。4.2.11、實(shí)驗(yàn)室出口應(yīng)有在黑暗中可明確辯論的標(biāo)識(shí)。4.2.12、實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國際通用的生物危害警告標(biāo)志。4.3 基本生物安全設(shè)備及使用4.3.1、移液輔助器。避免用口吸的方式移液?？墒褂貌煌O(shè)計(jì)的移液器產(chǎn)品。4.3.2、生物安全柜。以下情況時(shí)使用：處理感染性物質(zhì)。如果使用密封的安全離心杯，并在生物安全柜內(nèi)裝樣、取樣時(shí)，則這類材料可在開放實(shí)驗(yàn)室離心?？諝鈧鞑ジ腥镜奈ｋU(xiǎn)增大時(shí)。進(jìn)行極有可能產(chǎn)生氣溶膠的操作時(shí)（包括離心、研磨、混勻、劇烈搖動(dòng)、超聲破碎、打開內(nèi)部壓力和周圍環(huán)境壓力不同的盛放有感染性物質(zhì)的容器、動(dòng)物鼻腔接種以及從動(dòng)物或卵胚采集感染性組織

15、）。4.3.3、一次性塑料接種環(huán)。也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán)，以減少生成氣溶膠。4.3.4、螺口蓋試管及瓶子。4.3.5、用于清除感染性材料污染的高壓滅菌器或其他適當(dāng)工具。4.3.6、一次性巴斯德塑料移液管。盡量避免使用玻璃制品。4.3.7、在投入使用前，高壓滅菌器和生物安全柜等設(shè)備必須用正確方法進(jìn)行驗(yàn)收。應(yīng)參照生產(chǎn)商的說明書定期檢測。第五章 人員管理要求5.1 人員進(jìn)入規(guī)定5.1.1、進(jìn)入微生物實(shí)驗(yàn)室所有工作人員及管理人員等必須遵守此規(guī)定。5.1.2、只有經(jīng)主管領(lǐng)導(dǎo)批準(zhǔn)、辦公室登記、科主任安排的人員方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域（包括參觀學(xué)習(xí)、實(shí)習(xí)進(jìn)修、后勤保障人員等）。5.1.3、兒童不允

16、許進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。5.1.4、與實(shí)驗(yàn)室無關(guān)的動(dòng)物和植物不得帶入實(shí)驗(yàn)室。5.1.5、實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前，應(yīng)按照有關(guān)規(guī)定正確穿戴個(gè)人防護(hù)用品。工作完畢必須按順序脫下個(gè)人防護(hù)用品，就地消毒，不得穿工作服離開實(shí)驗(yàn)室。5.2 人員崗位培訓(xùn)5.2.1、崗前培訓(xùn) 實(shí)驗(yàn)人員上崗前必須掌握生物安全手冊(cè)的內(nèi)容，經(jīng)過生物安全知識(shí)、個(gè)人防護(hù)原則、有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程、儀器設(shè)備操作規(guī)程等專門培訓(xùn)，由質(zhì)管辦考試合格發(fā)證，并經(jīng)實(shí)驗(yàn)室主任同意方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作。實(shí)驗(yàn)人員及其輔助工作人員要接受有關(guān)的潛在危險(xiǎn)知識(shí)的培訓(xùn)，掌握預(yù)防暴露和暴露后的處理程序和原則。如吸入危險(xiǎn)、食入危險(xiǎn)、刺傷危險(xiǎn)、接觸感染危險(xiǎn)等。在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室前，實(shí)驗(yàn)室

17、主任有責(zé)任向所有工作人員提供標(biāo)準(zhǔn)微生物學(xué)操作規(guī)程和技術(shù)、儀器操作規(guī)程。實(shí)驗(yàn)人員要閱讀并按照操作規(guī)程操作。5.2.2、 崗中培訓(xùn)從事實(shí)驗(yàn)室工作的所有人員，每年必須將生物安全有關(guān)內(nèi)容培訓(xùn)一次。生物安全手冊(cè)或微生物安全操作程序等發(fā)生改變，應(yīng)及時(shí)培訓(xùn)和考核。5.3 健康監(jiān)測實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對(duì)職業(yè)獲得性疾病進(jìn)行監(jiān)控。5.3.1、根據(jù)需要提供主動(dòng)或被動(dòng)免疫。5.3.2、所有實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)行上崗前體檢并記錄病史，必要時(shí)進(jìn)行有目的的職業(yè)健康評(píng)估并保存血清。5.3.3、實(shí)驗(yàn)室主任應(yīng)禁止高度易感人群（孕婦或免疫損傷人員）在高危實(shí)驗(yàn)室工作。5.3.4、實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)注意個(gè)人的健康狀況，出現(xiàn)身體不適情況，及時(shí)向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人報(bào)告，采

18、取相應(yīng)措施，以便早期發(fā)現(xiàn)或避免職業(yè)獲得性疾病。5.3.5、實(shí)驗(yàn)人員暴露于感染性物質(zhì)時(shí)，必須及時(shí)消毒處理，并立即報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人，同時(shí)記錄事故經(jīng)過，采取相應(yīng)措施。5.4 個(gè)人防護(hù)實(shí)驗(yàn)室所用任何個(gè)人防護(hù)裝備應(yīng)符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的要求。在危害評(píng)估的基礎(chǔ)上，按不同級(jí)別的防護(hù)要求選擇適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備。5.4.1 實(shí)驗(yàn)室防護(hù)服實(shí)驗(yàn)室應(yīng)確保具備足夠的有適當(dāng)防護(hù)水平的清潔防護(hù)服可供使用。不用時(shí)，應(yīng)將清潔的防護(hù)服置于專用存放處。污染的防護(hù)服應(yīng)置于黃色垃圾袋中作為特種垃圾處置。當(dāng)知道防護(hù)服已被危險(xiǎn)材料污染應(yīng)立即更換，并按消毒規(guī)程進(jìn)行消毒處理。離開實(shí)驗(yàn)室區(qū)域之前應(yīng)按要求脫去防護(hù)服。當(dāng)具潛在危險(xiǎn)的物質(zhì)極有可能濺到工作

19、人員時(shí)，應(yīng)使用塑料圍裙或防液體的長罩服等。5.4.2 防護(hù)眼鏡或面罩在處理生物因子可能濺到工作人員面部時(shí)，應(yīng)使用防護(hù)眼鏡或面部罩或其他的眼部面部保護(hù)裝置。5.4.3 手套手套應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)可供使用，以防生物危險(xiǎn)、化學(xué)品、輻射污染、冷和熱、產(chǎn)品污染、刺傷、擦傷和動(dòng)物抓咬傷等。手套應(yīng)按所從事操作的性質(zhì)符合舒服、合適、靈活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并應(yīng)對(duì)所涉及的危險(xiǎn)提供足夠的防護(hù)。應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行選擇手套，使用前及使用后的西域及摘除等培訓(xùn)。使用時(shí)應(yīng)保證：、所戴手套無漏損。、戴好手套后可完全遮住手及腕部，如必要，可覆蓋實(shí)驗(yàn)室長罩服或外衣的袖子。、在撕破、損壞或懷疑內(nèi)部受污染時(shí)應(yīng)更換手套。

20、、手套為實(shí)驗(yàn)室工作專用。工作完成或中止后應(yīng)先消毒、后摘除、隨后必須洗手，并規(guī)范處置。5.4.4鞋鞋應(yīng)舒適，防滑，不漏腳趾。推薦使用皮制或合成材料的不滲液體的鞋類。在從事可能出現(xiàn)漏出的工作時(shí)可穿一次性防水鞋套并規(guī)范處置。5.5 行為規(guī)范5.5.1良好內(nèi)務(wù)行為、應(yīng)指定專人監(jiān)督，保持良好內(nèi)務(wù)行為。、工作區(qū)應(yīng)時(shí)刻保持整潔有序，禁止在工作場所存放可能導(dǎo)致阻礙和絆倒危險(xiǎn)的無關(guān)物品。、每班工作結(jié)束后，有任何或發(fā)生了其他污染時(shí)應(yīng)使用適當(dāng)?shù)脑噭┣鍧嵑拖竟ぷ髋_(tái)面。、感染性材料及污染器具廢棄和清洗前，必須消毒處理。、對(duì)漏出的樣本、化學(xué)品、放射性核素或培養(yǎng)物應(yīng)在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估后清除并對(duì)涉及區(qū)域去污染。、內(nèi)務(wù)行為不規(guī)范時(shí)應(yīng)

21、報(bào)告實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人以確保避免發(fā)生潛在危險(xiǎn)或危險(xiǎn)。、應(yīng)在設(shè)備保養(yǎng)或修理之前對(duì)每件可能污染設(shè)備去污染、凈化和消毒。、禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙和處理隱形眼鏡。5.5.2安全工作行為、洗手實(shí)驗(yàn)室工作人員在實(shí)際或可能接觸了血液、體液或其他污染材料后，即使戴有手套也應(yīng)立即洗手。摘除手套后、使用衛(wèi)生間前后、離開實(shí)驗(yàn)室前、進(jìn)食或吸煙前、接觸每一口才前后應(yīng)例行洗手。應(yīng)為過敏或?qū)δ承┫痉栏瘎┲械奶厥饣衔镉衅渌磻?yīng)的工作人員提供洗手用的替代品。洗手池不得用于其他目的。在限制使用洗手池的地點(diǎn)，使用基于乙醇的“無水”手部清潔產(chǎn)品是可接受的替代方法。、減少接觸、刺傷如果樣本在收到時(shí)有損壞或泄漏，應(yīng)由穿著個(gè)人

22、防護(hù)并受過培訓(xùn)的人員開啟樣本以防止漏出或產(chǎn)生氣溶膠。禁止口吸移液和舔巾標(biāo)簽。禁止用手對(duì)任何利器剪、彎、折斷、重新戴套或從注射器上移去針頭。應(yīng)盡可能減少使用利器和晝使用替代品。包括針頭、玻璃、一次性手術(shù)刀在內(nèi)的利器應(yīng)在使用后立即放在耐扎容器中。容器應(yīng)在內(nèi)容物達(dá)到三分之二前置換。所有樣本、培養(yǎng)物和廢棄物應(yīng)被假定含有傳染性生物因子，作為特種醫(yī)療垃圾處置。、減少產(chǎn)生氣溶膠使用接種環(huán)、劃線接種瓊脂平板、移液、制作涂片、打開培養(yǎng)物、采集血液標(biāo)本、離心等操作都有氣溶膠產(chǎn)物，應(yīng)盡量在生物安全柜內(nèi)操作。應(yīng)在有蓋安全罩內(nèi)或生物安全柜內(nèi)離心。所有進(jìn)行渦流攪拌的樣本應(yīng)置于有蓋容器內(nèi)。在能產(chǎn)生氣溶膠的大型分析設(shè)備上應(yīng)使

23、用局部通風(fēng)防護(hù)，在操作小型儀器時(shí)使用定制的排氣罩。在可能出現(xiàn)有害氣體和生物源性氣溶膠的地方工業(yè)應(yīng)采取局部排風(fēng)措施。第六章 生物安全技術(shù)操作規(guī)范6.1 采樣生物安全采集病原微生物樣本應(yīng)當(dāng)具備下列條件：6.1.1、具有與采集病原微生物樣本所需要的生物安全防護(hù)水平相適應(yīng)的設(shè)備。6.1.2、具有掌握相關(guān)專業(yè)知識(shí)和操作技能的工作人員。6.1.3、具有有效的防止病原微生物擴(kuò)散和感染的措施。6.1.4、具有保證病原微生物樣本質(zhì)量的技術(shù)方法和手段。采集高致病性病原微生物樣本的工作人員在采集過程中應(yīng)當(dāng)防止病原微生物擴(kuò)散和感染，并對(duì)樣本的來源、采集過程和方法等作詳細(xì)記錄。6.2 標(biāo)本安全操作6.2.1 標(biāo)本容器標(biāo)

24、本容器可以是玻璃的，但最好使用塑料制品。標(biāo)本容器應(yīng)當(dāng)堅(jiān)固，正確地用蓋子或塞子蓋好后應(yīng)無泄漏。在容器外部不能有殘留物。容器上應(yīng)當(dāng)正確地粘貼標(biāo)簽以便于識(shí)別。標(biāo)本的要求或說明書不能夠卷在容器外面，而是要分開放置，最好放置在防水的袋子里。6.2.2 標(biāo)本在設(shè)施內(nèi)的傳遞為了避免意外泄漏或溢出，應(yīng)當(dāng)使用盒子等二級(jí)容器，并將其固定在架子上使裝有標(biāo)本的容器保持直立。二級(jí)容器可以是金屬或塑料制品，應(yīng)該可以耐高壓滅菌或耐受化學(xué)消毒劑的作用。密封口最好有一個(gè)墊圈，要定期清除污染。6.2.3 標(biāo)本接收需要接收大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)安排專門的房間或空間進(jìn)行標(biāo)本驗(yàn)收和登記。接收和打開標(biāo)本的人員應(yīng)當(dāng)了解標(biāo)本對(duì)身體健康的潛在危

25、害，并接受過如何采用標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法的培訓(xùn)，尤其是處理破碎或泄漏的容器時(shí)更應(yīng)如此。標(biāo)本的內(nèi)層容器要在生物安全柜內(nèi)打開，并準(zhǔn)備好消毒劑。6.3 移液管和移液輔助器操作6.3.1應(yīng)使用移液輔助器，嚴(yán)禁用口吸取。6.3.2所有移液管應(yīng)帶有棉塞以減少移液器具的污染。6.3.3不能向含有感染性物質(zhì)的溶液中吹入氣體。6.3.4感染性物質(zhì)不能使用移液管反復(fù)吹吸混合。6.3.5不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。6.3.6刻度對(duì)應(yīng)（Mark-to-mark）移液管不需要排出最后一滴液體，因此最好使用這種移液管。6.3.7污染的移液管應(yīng)該完全浸泡在盛有適當(dāng)消毒液的防碎容器中。移液管應(yīng)當(dāng)在消毒劑中浸泡適當(dāng)時(shí)間后再進(jìn)行處理。

26、6.3.8盛放廢棄移液管應(yīng)該完全浸泡在盛有適當(dāng)消毒液的防碎容器中。移液管應(yīng)當(dāng)在消毒劑中浸泡適當(dāng)時(shí)間后再進(jìn)行處理。6.3.9有固定皮下注射針頭的注射器不能夠用于移液。6.3.10在打開隔膜封口的瓶子時(shí)，應(yīng)使用可以使用移液管的工具，而避免使用皮下注射針頭和注射器。6.3.11為了避免感染性物質(zhì)從移液管中滴出而擴(kuò)散，在工作臺(tái)面應(yīng)當(dāng)放置一塊浸有消毒液的布或有消毒液的紙，使用后將其按感染性廢棄物處理。6.4 防擴(kuò)散操作6.4.1為了避免被接種物灑落，微生物接種環(huán)的直徑應(yīng)為23mm并完全封閉，柄的長度應(yīng)小于6cm以減小抖動(dòng)。6.4.2使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán)，能夠避免在本生燈的明火上加熱所引起的感

27、染性物質(zhì)爆濺。最好使用不需要再進(jìn)行消毒的一次性接種環(huán)。6.4.3干燥痰液標(biāo)本時(shí)要注意避免生成氣溶膠。6.4.4準(zhǔn)備高壓滅菌和/或?qū)⒈惶幚淼膹U棄標(biāo)本和培養(yǎng)物應(yīng)當(dāng)旋置在防漏的容器內(nèi)（如實(shí)驗(yàn)室廢棄物袋）。在丟棄到廢棄物盛器中以前，頂部要固定好（如采用高壓滅菌膠帶）。6.4.5在第一階段工作結(jié)束后，必須采用適當(dāng)?shù)南緞┣宄ぷ鲄^(qū)的污染。6.5 生物安全柜操作6.5.1應(yīng)參考國家標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)所有可能的使用者都介紹生物安全柜的使用方法和局限性。應(yīng)當(dāng)發(fā)給工作人員局面的規(guī)章、安全手冊(cè)或操作手冊(cè)。特別需要明確的是，當(dāng)出現(xiàn)溢出、破損或不良操作時(shí)，安全柜就不再能保護(hù)操作者。6.5.2生物安全柜運(yùn)行正常時(shí)才能使

28、用。6.5.3生物安全柜在使用中不能打開下班觀察擋板。6.5.4安全柜內(nèi)應(yīng)晝少放置器材或標(biāo)本，不能影響壓力排風(fēng)系統(tǒng)的氣流循環(huán)。6.5.5安全柜內(nèi)不能使用本生燈，否則燃燒產(chǎn)生的熱量會(huì)干擾氣流并可能損壞過濾器。允許使用微型電加熱器，但最好使用一次性超負(fù)荷運(yùn)轉(zhuǎn)接種環(huán)。6.5.6所有工作必須在工作臺(tái)面的中后部進(jìn)行，并能夠通過玻璃觀察擋板看到。6.5.7盡量減少操作者身后的人員活動(dòng)。6.5.8操作者不應(yīng)反復(fù)移出和伸進(jìn)手臂以免干擾氣流。6.5.9不要使實(shí)驗(yàn)記錄本、移液管以及其他物品阻擋空氣格珊，因?yàn)檫@將干擾氣體流動(dòng)，引起物品的潛在污染和操作者的暴露。6.5.10工作完成后以及每天下班前，應(yīng)使用適當(dāng)?shù)南緞?/p>

29、對(duì)生物安全柜的表面進(jìn)行擦拭。6.5.11在安全柜內(nèi)的工作開始前和結(jié)束后，安全柜的風(fēng)機(jī)應(yīng)至少運(yùn)行5min。6.5.12在生物安全柜內(nèi)操作時(shí)，不能進(jìn)行文字工作。6.6 防食入和接觸操作6.6.1微生物操作中釋放的較大粒子和液滴（直徑大于5m）會(huì)迅速沉降到工作臺(tái)面和操作者的手上。實(shí)驗(yàn)室人員在操作時(shí)應(yīng)戴一次性手套，并避免觸摸口、眼及面部。6.6.2不能在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)飲食和儲(chǔ)存食品。6.6.3在實(shí)驗(yàn)室里時(shí)，嘴里不應(yīng)有東西鋼筆、鉛筆、口香糖等。6.6.4不應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室化妝。6.6.5在所有可能產(chǎn)生潛在感染性物質(zhì)噴濺的操作過程中，操作人員應(yīng)將面部、口和眼遮住或采取其他防護(hù)措施。6.7 防注入操作6.7.1通過認(rèn)真

30、練習(xí)和仔細(xì)操作，可以避免破損玻璃器皿的刺傷所引起的接種感染。應(yīng)盡可能用塑料制品代替玻璃制品。6.7.2銳器損傷（如通過皮下注射針頭、巴斯德玻璃吸管以及破碎的玻璃）可能引起意外注入感染性物質(zhì)。6.7.3以下兩點(diǎn)可以減少針刺損傷：減少使用注射器和針頭（可用一些簡單的工具來打開瓶塞，然后使用吸管取樣而不用注射器和針頭）；在必須使用注射器和針頭時(shí)，采用銳器安全裝置。6.7.4不要重新給用過注射器針頭戴護(hù)套。一次性物品應(yīng)丟棄在防/耐穿透的帶蓋容器中。6.7.5應(yīng)當(dāng)用巴斯德塑料吸管代替玻璃吸管。6.8 血清分離操作6.8.1只有經(jīng)過嚴(yán)格培訓(xùn)的人員才能進(jìn)行這項(xiàng)工作。6.8.2操作時(shí)應(yīng)戴手套以及眼睛和黏膜的保

31、護(hù)裝置。6.8.3規(guī)范的實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)可以避免或盡量減少噴濺和氣溶膠的產(chǎn)生。血液和血清應(yīng)當(dāng)小心吸取，而不能傾倒。嚴(yán)禁用口吸液。6.8.4移液管使用后應(yīng)完全浸入適當(dāng)?shù)南疽褐?。移液管?yīng)在消毒液中浸泡適當(dāng)?shù)臅r(shí)間，然后再丟棄或滅菌清洗后重復(fù)使用。6.8.5帶有血凝塊等的廢棄標(biāo)本管，在加蓋后應(yīng)當(dāng)放在適當(dāng)?shù)姆缆┤萜鲀?nèi)高壓滅菌和/或焚燒。6.8.6應(yīng)各有適當(dāng)?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出標(biāo)本。6.9 離心機(jī)操作6.9.1在使用實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)時(shí)，儀器良好的機(jī)械性能是保障微生物安全的前提條件。6.9.2應(yīng)按照操作手冊(cè)來操作離心機(jī)。6.9.3離心機(jī)放置的高度應(yīng)當(dāng)使小個(gè)子工作人員也能夠看到離心機(jī)內(nèi)部，以正確放置十字軸和離心

32、桶。6.9.4離心管和盛放離心標(biāo)本的容器應(yīng)當(dāng)由厚壁玻璃制成，或最好為塑料制品，并且在使用前應(yīng)檢查是否破損。6.9.5用于離心的試管和標(biāo)本容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊（最好使用螺旋蓋）。6.9.6離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。6.9.7離心桶和十字軸應(yīng)按重量配對(duì)，并在裝載離心管后正確平衡。6.9.8操作指南中應(yīng)給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。6.9.9空離心桶應(yīng)當(dāng)用蒸餾水或乙醇（異丙醇，70%）來平衡。鹽溶液或次氯酸鹽溶液對(duì)金屬具有腐蝕作用，因此不能使用。6.9.10對(duì)于危險(xiǎn)度3級(jí)和4級(jí)的微生物，必須使用可封口的離心桶（安全杯）。6.9.11當(dāng)使用固定角離心轉(zhuǎn)子時(shí)，必須小

33、心不能將離心管裝得過滿，否則會(huì)導(dǎo)致漏液。6.9.12應(yīng)當(dāng)每天檢查離心機(jī)內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟。如污染明顯，應(yīng)重新評(píng)估離心操作規(guī)范。6.9.13應(yīng)當(dāng)每天檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細(xì)微裂痕。6.9.14每次使用后，要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機(jī)腔的污染。6.9.15使用后應(yīng)當(dāng)將離心桶倒置存放使平衡液流干。6.9.16當(dāng)使用離心機(jī)時(shí)，可能噴射出可在空氣中傳播的感染性顆粒。如果將離心機(jī)傳統(tǒng)的前開式的級(jí)或級(jí)生物安全柜內(nèi)，這些粒子由于運(yùn)動(dòng)過快而不能被安全柜內(nèi)的氣流截留。而在級(jí)生物安全柜內(nèi)封閉離心時(shí)，可以防止生成的氣溶膠廣泛擴(kuò)散。但是，良好的離心操作技術(shù)和牢固加蓋的離心管可以提供足夠的保護(hù)，以防

34、止感染性氣溶膠和可擴(kuò)散粒子的產(chǎn)生。6.10 勻漿器、搖床、攪拌器、超聲處理器操作6.10.1實(shí)驗(yàn)室不能使用家用（廚房）勻漿器，因?yàn)樗鼈兛赡苄孤┗蜥尫艢馊苣z。使用實(shí)驗(yàn)室專用攪拌器和消化器更為安全。6.10.2蓋子、杯子或瓶子應(yīng)當(dāng)保持正常狀態(tài)，沒有裂縫或變形。蓋子應(yīng)能封蓋嚴(yán)密，襯墊也應(yīng)處于正常狀態(tài)。6.10.3在使用勻漿器、搖床和超聲處理器時(shí)，容器內(nèi)會(huì)產(chǎn)生壓力，含有感染性物質(zhì)的氣溶膠就可能從蓋子和容器間隙逸出。由于玻璃可能破碎而釋放感染性物質(zhì)并傷害操作者，建議使用塑料容器，尤其是聚四氟乙烯（polytetrafluoroethylene,PTEE）容器。6.10.4使用勻漿器、搖床和超聲處理器時(shí)，

35、應(yīng)該用一個(gè)結(jié)實(shí)透明的塑料箱覆蓋設(shè)備，并在用完后消毒?？赡艿脑?，這些儀器可在生物安全柜內(nèi)覆蓋塑料罩進(jìn)行操作。6.10.5操作結(jié)束后，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)打開容器。6.10.6應(yīng)對(duì)使用超聲處理器的人員提供聽力保護(hù)。6.11 組織研磨器操作6.11.1拿玻璃研磨器時(shí)應(yīng)戴上手套并用吸收性材料包住。塑料（聚四氟乙烯）研磨器更加安全。6.11.2操作和打開組織研磨器時(shí)應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。6.12 冰箱、冰柜的維護(hù)和使用6.12.1冰箱、低溫冰箱和干冰柜應(yīng)當(dāng)定期除霜和清潔，應(yīng)清理出所有在儲(chǔ)存過程中破碎的安瓿和試管等物品。清理時(shí)應(yīng)戴厚橡膠手套并進(jìn)行面部防護(hù)，清理后要對(duì)內(nèi)表面進(jìn)行消毒。6.12.2儲(chǔ)存在冰箱內(nèi)的

36、所有容器應(yīng)當(dāng)清楚地標(biāo)明內(nèi)裝物品的科學(xué)名稱、儲(chǔ)存日期和儲(chǔ)存者的姓名。未標(biāo)明的或廢舊物品應(yīng)當(dāng)高壓滅菌并丟棄。6.12.3應(yīng)當(dāng)保存一份凍存物品的清單。6.12.4除非有防爆措施，否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。冰箱門上應(yīng)注明這一點(diǎn)。6.13 裝有凍干感染性物質(zhì)安瓿的開啟應(yīng)該小心打開裝有凍干物的安瓿，因?yàn)槠鋬?nèi)部可能處于負(fù)壓，突然沖入的空氣可能使一些物質(zhì)擴(kuò)散進(jìn)入空氣。安瓿應(yīng)該在生物安全柜內(nèi)打開，建議按下列步驟打開安瓿：、首先清除安瓿外表面的污染。、如果管內(nèi)有棉花或纖維塞，可以在管上靠近棉花或纖維塞的中部銼一痕跡。、用一團(tuán)酒精浸泡的棉花將安瓶包起來以保護(hù)雙手，然后手持安瓿從標(biāo)記的銼痕處打開。、將頂部小心移去并

37、按污染材料處理。、如果塞子仍然在安瓿上，用消毒鑷子除去。、緩慢向安瓿中加入液體來重懸凍干物，避免出現(xiàn)泡沫。6.14 對(duì)血液有其它液體、組織及排泄物的標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法6.14.1標(biāo)本收集、標(biāo)記和運(yùn)輸6.14.1.1始終遵循標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)方法；所有操作均要戴手套。6.14.1.2應(yīng)當(dāng)由受過培訓(xùn)的人員來采集病人或動(dòng)物的血樣。6.14.1.3在靜脈抽血時(shí)，應(yīng)當(dāng)使用一次性的安全真空采血管取代傳統(tǒng)的針頭和注射器，因?yàn)檫@樣可以使血液直接采集到帶塞的運(yùn)輸管和/或培養(yǎng)管中。用完后自動(dòng)廢棄針頭。6.14.1.4裝有標(biāo)本的試管應(yīng)置于適當(dāng)容器中運(yùn)至實(shí)驗(yàn)室，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)也應(yīng)這樣。檢驗(yàn)申請(qǐng)單應(yīng)當(dāng)分開放置在防水袋或信封內(nèi)。6.1

38、4.1.5接收人員不應(yīng)打開這些袋子。6.14.2打開標(biāo)本管和取樣6.14.2.1應(yīng)當(dāng)在生物安全柜內(nèi)打開標(biāo)本管。6.14.2.2必須戴手套，并建議對(duì)眼睛和黏膜進(jìn)行保護(hù)（護(hù)目鏡或面罩）。6.14.2.3在防護(hù)衣外面要再穿上塑料圍裙。6.14.2.4打開標(biāo)本管是時(shí)，應(yīng)用紙或紗布抓住塞子以防止噴濺。6.14.3使用玻璃制品和銳器6.14.3.1盡可能用塑料制品代替玻璃制品。只能用實(shí)驗(yàn)室級(jí)別（硼硅酸鹽）的玻璃，任何破碎或有裂痕的玻璃制品均應(yīng)丟棄。6.14.3.2不能將皮下注射針作為移液管使用。6.14.4使用蓋玻片和涂片用于顯微鏡觀察的血液、唾液和糞便標(biāo)本在固定和染色時(shí)，不必殺死涂片上的所有微生物和病毒

39、。應(yīng)當(dāng)用鑷子拿取這些東西，妥善儲(chǔ)存，并經(jīng)清除污染和/或高壓滅菌后再丟棄。6.14.5使用自動(dòng)化儀器（超聲處理器、渦旋混合器）6.14.5.1為了避免液滴和氣溶膠的擴(kuò)散，這些儀器應(yīng)采用封閉型的。6.14.5.2排出物應(yīng)當(dāng)?shù)磕钤诜忾]的容器內(nèi)進(jìn)一步高壓滅菌和/或廢棄。6.14.5.3在每一步完成后應(yīng)根據(jù)操作指南對(duì)儀器進(jìn)行消毒。6.14.6處理組織6.14.6.1組織標(biāo)本應(yīng)用福爾馬林固定。6.14.6.2應(yīng)當(dāng)避免冰凍切片。如果必須進(jìn)行冰凍切片，應(yīng)當(dāng)罩住冰凍機(jī)，操作者要戴安全防護(hù)面罩。清除污染時(shí)，儀器的溫度要升至20。6.14.7清除污染建議使用次氯酸鹽和高級(jí)別的消毒劑來清除污染。一般情況可使用新鮮配制

40、的含有效氯1g/L的次氯酸鹽溶液，處理溢出的血液時(shí)，有效氯濃度應(yīng)達(dá)到5g/L。戊二醛可以用于清除表面污染。第七章 菌（毒）種安全管理要求菌（毒）種的管理是保證生物安全實(shí)驗(yàn)室安全的重要內(nèi)容之一，只有嚴(yán)格的管理制度以及對(duì)該制度有效的監(jiān)督，才能防止在病原微生物檢測、科學(xué)研究過程中造成菌（毒）種的擴(kuò)散或遺失，避免發(fā)生實(shí)驗(yàn)室感染或引起傳染病的傳播；同時(shí)規(guī)范的菌（毒）種的管理可避免菌（毒）種差錯(cuò)，保證菌（毒）種保藏的質(zhì)量以確保試驗(yàn)結(jié)果的可靠性。7.1 職責(zé)菌（毒）種安全管理責(zé)任到人、措施到位。本實(shí)驗(yàn)室可保存日常工作必須的三、四類病原微生物的標(biāo)準(zhǔn)品、檢定株。做到防丟、防盜、防濫用、防有意釋放。有關(guān)科室負(fù)責(zé)人

41、為菌（毒）種安全管理責(zé)任人，并指定專人按有關(guān)要求保管于加鎖的冰箱內(nèi)并做好標(biāo)記。7.2 記錄有關(guān)科室負(fù)責(zé)人和指定的保管人員負(fù)責(zé)做好菌（毒）種的保存和使用記錄，包括保存記錄、使用記錄、運(yùn)送記錄、銷毀/處理記錄等。7.3 丟失報(bào)告發(fā)現(xiàn)菌（毒）種丟失等意外事故的第一人，應(yīng)在第一時(shí)間向科室負(fù)責(zé)人報(bào)告，并妥善保護(hù)現(xiàn)場。7.4 調(diào)查處理科室負(fù)責(zé)人立即向生物安全委員會(huì)報(bào)告，組織有關(guān)人員對(duì)事故進(jìn)行生物安全危害評(píng)估，并采取相應(yīng)措施。第八章 消毒和滅菌8.1 消毒方法8.1.1儀器等的表面消毒：工作結(jié)束后，用70%乙醇溶液擦拭消毒。8.1.2實(shí)驗(yàn)器材的分類消毒：將使用后的銳器放入防刺破、防滲漏的密閉專用銳器處置盒內(nèi)

42、，121高壓消毒30分鐘。其他器材放入有效氯為2000mg/L的含氯消毒液內(nèi)浸泡1小時(shí)以上。處理時(shí)應(yīng)避免皮膚損傷。8.1.3工作臺(tái)等物體表面消毒：工作完畢，用10%（w/v）次氯酸鈉（含10,000ppm有效氯）或70%乙醇溶液擦拭消毒。8.1.4個(gè)人防護(hù)用品消毒：實(shí)驗(yàn)結(jié)束，將隔離衣、口罩、帽子、手套、鞋套等放入包裝袋內(nèi)扎緊袋口進(jìn)行121高壓滅菌30分鐘。防護(hù)鏡浸泡10%（w/v）次氯酸鈉或70%乙醇作用3060分鐘，用潔凈水反復(fù)沖洗后包裝。8.1.5手的消毒：用含有效碘為30005000mg/L的消毒液或70%乙醇溶液擦拭，作用13分鐘。8.1.6空氣消毒：每次實(shí)驗(yàn)前后用紫外燈照射消毒，每次

43、不少于1小時(shí)。跟紫外燈1m處照射強(qiáng)度70uW/cm2。終末消毒采用18ml/ m2福爾馬林（40%甲醛，w/v），3040密閉熏蒸消毒6小時(shí)。8.1.7紙張消毒：盡可能使用傳真機(jī)、電腦打印等方式將信息傳至清潔區(qū)。否則，應(yīng)用18 ml/ m2福爾馬林，3040密閉熏蒸消毒6小時(shí)后方可帶出。8.1.8地面消毒：工作結(jié)束，應(yīng)用含有效氯2000mg/L的消毒液噴灑拖地。8.1.9廢棄物和一次性用品的處理：實(shí)驗(yàn)的廢棄物和一次性用品應(yīng)放入醫(yī)療特種垃圾容器內(nèi)，BSL-2級(jí)實(shí)驗(yàn)室的廢棄物，就地121高壓消毒30分鐘，消毒后的廢棄物集中回收按醫(yī)療特種垃圾處理。8.2 實(shí)驗(yàn)室高壓消毒安全操作技術(shù)程序8.2.1高壓

44、滅菌器的使用使用前應(yīng)了解并掌握高壓滅菌器的原理及操作規(guī)則，以及不正確使用導(dǎo)致災(zāi)難性后果，保障消毒滅菌的質(zhì)量，使用人員需經(jīng)過有關(guān)培訓(xùn)或由專人進(jìn)行高壓滅菌。所有具有傳染性的廢物都應(yīng)該高壓滅菌。開始滅菌前所有物品必須貼有滅菌指示帶，廢物滅菌后可以看到滅菌是否完全。高壓滅菌器操作人員在使用高壓滅菌器時(shí)不得離開崗位，高壓滅菌器應(yīng)按照規(guī)定進(jìn)行安全和計(jì)量檢定，檢定合格方可投入使用，并應(yīng)注意日常維護(hù)保養(yǎng)。高壓滅菌器內(nèi)的物品不得放的過滿，否則影響滅菌效果。放好被消毒滅菌的物質(zhì)后，高壓滅菌器的蓋子或門盡量擰緊。實(shí)驗(yàn)室高壓滅菌器由生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室監(jiān)督員定期檢查，以確保高壓滅菌器正常工作，防止意外事故發(fā)生，保證消毒

45、滅菌效果。8.2.2高壓滅菌安全操作技術(shù)步驟在主實(shí)驗(yàn)室將已經(jīng)準(zhǔn)備好的所有待滅菌的廢物裝入不同大小的塑料袋中或不銹鋼筒中，在暫時(shí)儲(chǔ)存和滅菌時(shí)，所有廢物必須放在這些袋內(nèi)并放入一個(gè)滅菌盤中。在滅菌前將雙層的高壓滅菌袋包好，廢物在滅菌袋中的體積不能超過袋子體積的3/4，滅菌袋用橡皮帶捆好，但不能扎得太死，否則蒸汽不能進(jìn)入塑料袋中，在儲(chǔ)存和滅菌期間必須保持安全放置，不銹鋼廢物容器必須牢牢地蓋緊并安全地放入滅菌的盤內(nèi)，每個(gè)袋子必須貼上滅菌指示帶以評(píng)價(jià)滅菌效果。實(shí)驗(yàn)操作間產(chǎn)生的所有廢物應(yīng)該及時(shí)就地滅菌處理。如果滅菌器正在使用或由于其它原因不能馬上使用，則廢物必須放在滅菌盤內(nèi)、滅菌袋內(nèi)捆好并放在實(shí)驗(yàn)操作間內(nèi)，

46、在存放期間確保袋子無損壞。所有廢物必須放在滅菌盤內(nèi)，用一個(gè)安全的推車把他們運(yùn)到滅菌器處，連同滅菌盤一同放入高壓鍋。當(dāng)高壓鍋消毒滅菌到時(shí)間后，在生物安全實(shí)驗(yàn)室的外部打開高壓鍋，取出物品放在廢物收集處。當(dāng)開始滅菌時(shí)必須確信滅菌鍋內(nèi)的水量合適，高壓溫度和時(shí)間設(shè)置正確。對(duì)三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，滅菌應(yīng)保持在12135分鐘，滅菌時(shí)間和溫度不得超過設(shè)定值，否則滅菌袋會(huì)融化，清理困難。第九章 感染性物質(zhì)運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料不僅包括來自病人的各種標(biāo)本，而且包括來自生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的各種材料，這些來自人體的標(biāo)本和來自實(shí)驗(yàn)室的材料都可能含有傳染性病原體或其毒素，為保障對(duì)環(huán)境、對(duì)人體的安全，保障病原體不向外擴(kuò)散，做到安全

47、運(yùn)輸和安全接受這些標(biāo)本和材料，在整個(gè)實(shí)施過程中必須遵守如下操作規(guī)則。9.1 運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料9.1.1運(yùn)輸器材：運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料必須使用專用的器材，以防止造成傳染性物質(zhì)和有毒有害物質(zhì)擴(kuò)散。經(jīng)常使用的工具有計(jì)劃免疫專用冷藏包、冷藏箱和大小不等的冰瓶（廣口保溫瓶）。無論是冷藏包不是冷藏箱，在使用時(shí)一般都必須帶冰排，而冰瓶在使用時(shí)常常放入冰塊或碎冰。由于冷藏包和冷藏箱是通過箱壁的泡沫保溫，所以運(yùn)輸過程中不怕磕碰，而對(duì)于冰瓶來說，由于它是通過雙層玻璃抽真空保溫，玻璃易碎，所以運(yùn)輸過程中需輕拿輕放。9.1.2包裝傳染性物品的方法：在運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料之前必須進(jìn)行適當(dāng)?shù)臋z查和準(zhǔn)備工作。首先要認(rèn)真檢查所運(yùn)輸?shù)?/p>

48、材料是否已經(jīng)裝好，如檢查瓶口、試管口、離心管口的旋蓋或蓋子是否旋緊或蓋緊，容器是否完好，是否存在不易查出的破損等等，然后再進(jìn)行包裝。目的是減少被運(yùn)輸物與運(yùn)輸工具之間震蕩和摩擦，減少被運(yùn)輸物破損的機(jī)會(huì)，保證對(duì)人員和環(huán)境的安全。第一層包裝：將病原樣品裝入事先檢查好的容器中，如帶旋蓋的試管、離心管或培養(yǎng)瓶中，然后旋蓋并使用封口膜封好。不要使用膠帶，因?yàn)槟z帶遇液體后會(huì)張開；每一個(gè)容器應(yīng)分別密封包裝。一個(gè)包裝中樣品不能超過50毫升或50毫克。第二層包裝：使用足夠的吸水性材料（如衛(wèi)生紙或棉花）包裝容器，目的是，如果容器破碎，能夠保證滲漏的樣品被吸收。一般最好是一個(gè)容器一包裝。如果是小型容器，還可以把它們最

49、后再匯集到一起，相互之間使用緩沖減壓材料隔開，最后再在外面包括緩沖材料并套上至少兩層塑料帶。放入冷藏箱、冷藏包或冰瓶后，用緩沖材料填充，防止撞擊破碎。在包裝過程中一定要帶兩層乳膠手套，當(dāng)套上第一層塑料帶時(shí)，就可以脫掉外層手套，套第二層塑料帶。使用消毒液擦拭運(yùn)輸器材的外表面，作好消毒工作。以上包裝只適合與專人專車的運(yùn)輸。第三層包裝：當(dāng)需要借助于公共設(shè)施進(jìn)行運(yùn)輸時(shí)，還必須把上面提到的運(yùn)輸器材再放入木質(zhì)箱子中，并填充大量緩沖保溫材料，箱外貼上生物危險(xiǎn)標(biāo)志。9.1.3運(yùn)輸條件：一般情況下運(yùn)輸生物危險(xiǎn)材料都需要在低溫條件下，對(duì)個(gè)別病原微生物根據(jù)其生物學(xué)特性采取特殊的運(yùn)輸條件。需要冷凍（-20以下）的樣本

50、應(yīng)放入干冰，冷藏（4）的樣品放入冰排或冰袋，以確保樣本析質(zhì)量。9.1.4樣品登記和清單：被運(yùn)輸?shù)纳镂ｋU(xiǎn)材料一定要做好登記工作，詳細(xì)登記被運(yùn)輸樣品名稱、病原名、危險(xiǎn)級(jí)別、數(shù)量、聯(lián)系電話、聯(lián)系人等詳細(xì)信息，把該清單放在箱子里面和外面各一份，同時(shí)備好一份以備查驗(yàn)。9.2 接受生物危險(xiǎn)材料9.2.1查驗(yàn)：使出放在運(yùn)輸箱外面的運(yùn)輸清單，根據(jù)運(yùn)輸清單上標(biāo)明的運(yùn)輸樣本的性質(zhì)、病原體種類和危險(xiǎn)級(jí)別，決定把該協(xié)放在幾級(jí)實(shí)驗(yàn)室或是否需要放在生物安全柜內(nèi)。由于液體運(yùn)輸物會(huì)因運(yùn)輸途中震蕩而產(chǎn)生氣溶膠，故應(yīng)把該運(yùn)輸箱放置在合適位置靜止至少1小時(shí)，再打開。9.2.2開箱：打開運(yùn)輸箱時(shí)應(yīng)穿好隔離衣和防護(hù)用品。在開箱前先預(yù)

51、備好盛包裝材料的塑料袋，準(zhǔn)備好消毒液。開箱后先檢查盛樣品的容器是否有破損，如容器有破損首先應(yīng)使用含消毒液的濕紗布覆蓋，過一段時(shí)間后再擦拭消毒處理；如果無破損可直接擦拭容器外壁，按需要的溫度條件保存樣品。檢查樣品實(shí)物是否與清單所列樣品一致。最后，注意將廢棄的包裝材料高壓滅菌，并對(duì)運(yùn)輸設(shè)備進(jìn)行消毒。第十章 廢棄物處理10.1 生物型廢棄物的類型主要包換各種培養(yǎng)物；含有菌毒種的液體、固體物；血液工血液污染的材料；各種利器；吸管、吸頭、包裝材料；一次性個(gè)人防護(hù)用品及其它實(shí)驗(yàn)室勝過的材料。10.2 生物廢棄物的處理方法10.2.1實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的污染性液體物質(zhì)、廢棄的液體標(biāo)本、各種培養(yǎng)物、血液等應(yīng)小心放

52、在盛有消毒劑的嚴(yán)格防滲漏的專用容器中，并及時(shí)加蓋。10.2.2實(shí)驗(yàn)過程中所必須使用的利器，如一次性注射器、手術(shù)刀片、針頭必須放入防刺穿專用的堅(jiān)壁容器，加蓋密封。10.2.3實(shí)驗(yàn)過程中廢棄的一次性吸頭、吸管、離心管、平皿、個(gè)人防護(hù)用品和其它實(shí)驗(yàn)材料等放入防漏耐高壓的袋內(nèi)，封口。10.2.4以上廢棄物必須有專人負(fù)責(zé)，避免過滿并就地高壓消毒，確保121至少30分鐘。最后置于黃色醫(yī)療垃圾袋中，做好標(biāo)記和登記，并由專人送至特種垃圾站集中焚燒處理。第十一章 實(shí)驗(yàn)室生物危險(xiǎn)標(biāo)識(shí)使用規(guī)定11.1、生物安全標(biāo)識(shí)（見圖1）圖1：生物安全標(biāo)識(shí) 生物安全防護(hù)水平    級(jí)  注

53、：標(biāo)志為黑色，背景為黃色11.2、 生物安全標(biāo)識(shí)的使用在生物安全實(shí)驗(yàn)室入口的明顯位置必須張貼生物危害標(biāo)志。標(biāo)志上應(yīng)明確標(biāo)示實(shí)驗(yàn)室生物安全水平等級(jí)，實(shí)驗(yàn)室生物安全責(zé)任人、緊急聯(lián)系方式等。見圖2圖2：生物安全實(shí)驗(yàn)室標(biāo)識(shí)  授權(quán)人員方可進(jìn)入責(zé) 任 人：緊急聯(lián)系電話：凡是盛裝生物危害物質(zhì)的容器、運(yùn)輸工具、進(jìn)行生物危險(xiǎn)物質(zhì)操作的儀器和專用設(shè)備等都必須粘貼標(biāo)示有相應(yīng)危害級(jí)別的生物安全標(biāo)志。第十二章 其它安全管理實(shí)驗(yàn)室人員可能要面對(duì)與能量形式有關(guān)的危害，包括火、電、輻射以及噪聲。本章分別介紹這些危害的基本情況。12.1 化學(xué)品危害（見附件3）12.2 電離輻射危害12.2.1電

54、離輻射的危害12.2.1.1對(duì)身體的影響，例如暴露人員可以觀察到臨床癥狀。輻射對(duì)身體的影響包括癌癥（例如白血病、骨癌、肺以及皮膚癌），并可能在輻射暴露后許多年才發(fā)生。對(duì)身體不很嚴(yán)重的影響還包括的皮膚損傷、脫發(fā)、貧血、胃腸系統(tǒng)損傷以及白內(nèi)障等。12.2.1.2對(duì)遺傳的影響，例如可以在暴露人員的后代中觀察到癥狀。生殖腺輻射暴露對(duì)遺傳的影響包括染色體損害或基因突變。生殖腺的生死細(xì)胞在受到高劑量輻射時(shí)間能引起細(xì)胞死亡，從而對(duì)人造成生育能力的損害，對(duì)女性還造成月經(jīng)改變。發(fā)育期胎兒（特別是815周齡胎兒）暴露時(shí)，可能增加先天性畸形的危險(xiǎn)，或增加以后發(fā)生精神損害或輻射誘發(fā)的癌癥的危險(xiǎn)。12.2.2電離輻射保

55、護(hù)原則為了限制電離輻射對(duì)人體的有害影響，應(yīng)該控制使用放射性同位素，并遵守相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)。輻射防護(hù)的管理需要遵循以下四項(xiàng)原則：12.2.2.1盡可能減少輻射暴露的時(shí)間。12.2.2.2盡可能增大與輻射源之間的距離。12.2.2.3隔離輻射源。12.2.2.4用非放射測量技術(shù)來取代放射性核素。12.3 火的危害必須考慮火對(duì)感染性物質(zhì)播散的可能影響。這將決定滅火或控制火災(zāi)的最佳方案。應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室成員進(jìn)行火災(zāi)發(fā)生時(shí)的應(yīng)急行動(dòng)和如何使用消防器材等方面的消防培訓(xùn)。在每個(gè)房間、走廊以及過道中應(yīng)設(shè)置顯著的火警標(biāo)志、說明以及緊急通道標(biāo)志。在實(shí)驗(yàn)室中引起火災(zāi)的通常原因包括：、超負(fù)荷用電。、電器保養(yǎng)不良，例如電費(fèi)的絕緣層破舊或損壞。、供氣管或電線過長。、儀器設(shè)備在不使用時(shí)未關(guān)閉電源。、使用不是專為實(shí)驗(yàn)室環(huán)境設(shè)計(jì)的儀器設(shè)備。、明火。、供氣管老化銹蝕。、易燃、易爆品處理、保存不當(dāng)。、不相容化學(xué)品沒有正確隔離。、