不同的烯效唑濃度對小麥種子成苗的影響

1、 不同的烯效唑濃度對小麥種子成苗的影響 指導老師：劉帆 趙山行 植物保護 20136788摘要 以小麥品種“川育20”為材料，研究了烯效唑浸種處理后對小麥幼苗生理指標和形態(tài)指標的影響。結果表明，烯效唑浸種處理增加了小麥葉片中葉綠素含量，提高小麥植株的抗逆性；烯效唑浸種處理還抑制小麥地上部分的生長。促進了根系的生長。增加植株的根冠比。關鍵詞 烯效唑；小麥幼苗；生長發(fā)育小麥是小麥系植物的統(tǒng)稱，是一種在世界各地廣泛種植的禾本科植物，小麥的穎果是人類的主食之一，磨成面粉后可制作面包、饅頭、餅干、面條等食物；發(fā)酵后可制成啤酒、酒精、伏特加，或生質燃料。小麥富含淀粉、蛋白質、脂肪、礦物質、鈣、鐵、硫胺素、

2、核黃素、煙酸、維生素A及維生素C等。烯效唑具有延緩植物生長，降低植物生長速度，這種延緩作用可為外源GA與IAA所逆轉2。烯效唑能作用于小麥的葉綠體，使葉綠素含量升高、光能利用能力提高，可在一定程度上增強葉片光合作用和提高根系對土壤養(yǎng)分的吸收1。還可使植株細胞長度變短，層數(shù)增加，從而使節(jié)間變短、植株矮壯，且葉色濃綠，葉片寬厚，直立上沖，形成合理株型，為后期反彈生長創(chuàng)造了條件4-6。烯效唑處理的小麥幼苗在低溫下仍有較高的SoD、POD活性7，提高總糖含量，從而增強了小麥幼苗抗逆性能力，對小麥赤霉病具有良好的防治效果1。1.材料與方法1.1材料：小麥品種為“川育20”（來自四川農業(yè)大學成都校區(qū)農場）

3、、烯效唑S33071.2處理種子與栽植：1.2.1種子處理：選種：選取籽粒飽滿、大小一致的小麥種子數(shù)粒；消毒：用0.1%氯化汞浸種處理10min，用清水沖洗45次，用吸水紙將種子吸干（防止影響試劑濃度）；浸種：用0、10、20、40mg/L四種濃度S3307將種子浸泡24h；催芽：在2528環(huán)境下催芽3d1.2.2幼苗培養(yǎng)與管理：栽苗：2人為一小組，4人一大組，每一小組分別選擇一種濃度S3307處理的發(fā)芽種子80粒，栽入以瓊脂為基質的燒杯中（40粒/杯，每小組栽種2杯）；加水：向栽入發(fā)芽種子的燒杯中加入適量蒸餾水；管理：以每大組為單位，將其放于3-424生長室培養(yǎng)（用記號筆標注好姓名、學號、濃

4、度等信息）1.3測定項目與方法：1.3.1種子成苗率：成苗數(shù)/栽植種子數(shù)*100%1.3.2幼苗形態(tài)指標：每小組S3307處理濃度各取10苗，用直尺測定其株高、根長（取每粒種子最長根）、根數(shù)（莖基部根的數(shù)量）、根芽比（R/P）、根冠比（R/T），收集四個小組的數(shù)據(jù)繪制成表格。根芽比=根長度/芽長度（注：取10株苗所測平均數(shù)）根冠比=根重量/芽重量（注：取10株苗鮮重，去胚乳）1.3.3標準曲線的制作：取1ml1mg/ml的TTC于50ml容量瓶中，加乙酸乙酯約30ml及一半藥匙的保險粉，劇烈震蕩，使TTC還原為紅色的TPF并溶于乙酸乙酯，用乙酸乙酯定容至刻度（此時，TPF濃度為20g/ml）。

5、取8個10ml容量瓶，編號，依次向各管加入0、1、2、3、4、5、6、7mlTPF溶液，加入乙酸乙酯定容至10ml。以空白（濃度為0）作為參比，在分光光度計上測定485nm下的吸光度，記錄數(shù)據(jù)，用excel繪制成標準曲線（記錄其公式及R平方值）1.3.4根系活力測定：選取10株幼苗，剪下其根尖（約1cm），根尖總數(shù)達50根，吸干表面水分后，迅速投入盛有反應混合液（磷酸緩沖液2ml+0.4%TTC2ml）的小瓶中，使根充分浸沒在溶液中，之后放入37培養(yǎng)箱中放置1h，1h后，將根尖從小瓶中取出，置吸水紙上吸干水分，加5ml乙酸乙酯一起放入研缽中研磨，提取紅色上清液移入試管中，并用少量乙酸乙酯洗滌殘

6、渣2次，最后加乙酸乙酯定容至10ml，在分光光度計上測定485nm下的吸光度（乙酸乙酯為參比液），查繪制出的標準曲線，得到濃度值（C），將C代入：根系活力（gTPF/株/h）=C*V*100/W*t(V為提取液體積，W為所用根的數(shù)量，t為反應時間)由此公式可計算出根系活力值1.3.5幼苗葉綠素含量的測定：各小組分別取S3307處理幼苗倒2葉5片，按長4cm，寬0.3cm切取葉片中間部位，將切取的5片葉切碎，與58ml80%乙醇、少許石英砂、碳酸鈣一起加入研缽中，充分研磨，過濾到25ml容量瓶中，定容。以80%乙醇為參比液，在分光光度計上測定663nm、645nm下的吸光度，用以下公式計算出葉綠

7、素a、葉綠素b、總葉綠素的值：葉綠素a含量（mg/g）=（12.7OD663-2.69OD645）*V/W*1000葉綠素b含量（mg/g）=（22.9OD645-4.68OD663）*V/W*1000葉綠素總含量（mg/g）=（20.2OD645+8.02OD663）*V/W*1000V：葉綠素提取液總體積（ml）W:每片葉面積4*0.3cm21.3.6幼苗MDA含量的測定：各小組分別取S3307處理幼苗倒2葉，將葉片剪碎混勻后稱取0.5g,放入研缽中，加入10%TCA2ml磨成勻漿后，再加入8ml10%TCA，混勻后倒入10ml離心管中，離心（轉速4000）10min后取上清液，取兩只潔凈

8、試管，樣品取上清液3ml加0.5%TBA3ml,空白組10%TCA3ml加0.5%TBA3ml，兩組同時加熱煮沸10min，冷卻后以空白組為參比，在分光光度計上測450nm、600nm、532nm下的吸光度，用以下公式計算MDA含量：提取液中MDA濃度C（mol/L）=6.45（OD532-OD600）-0.56OD450MDA的含量（mol/gFW）=C*V*10-3/W（V為提取液總體積，W為樣品鮮重）2.結果與分析本小組（ck）種子成苗率為：100% 表1 不同濃度烯效唑對小麥幼苗形態(tài)指標的影響濃度(mg/L)株高(cm)根長(cm)根數(shù)（根）根芽比(R/P)根冠比(R/T)ck11.8

9、27.468.000.630.72107.736.926.900.900.93206.986.828.200.530.75406.545.475.500.841.17由表1可知，不同濃度烯效唑處理對幼苗平均株高、根部伸長生長均有抑制作用，且抑制作用隨著濃度的加大而增強，幼苗平均根數(shù)隨濃度加大呈先增加后減少的趨勢。濃度為20mg/L時，烯效唑對幼苗根芽比為抑制作用；濃度為10mg/L對根芽比促進作用最強，濃度為40mg/L對根冠比促進作用最強。圖1 標準曲線 表2 不同濃度烯效唑處理的幼苗根系活力測定濃度(mg/L)A485根系活力(gTPF/株/h)ck0.3131.849100.5961.7

10、97200.1860.551400.4991.502由表2可知，使用烯效唑能降低小麥幼苗根系活力，但隨著濃度的加大，抑制作用先增強后減弱，其中濃度為20mg/L時，小麥幼苗根系活力最小。表3 不同濃度烯效唑對小麥幼苗葉綠素含量的影響濃度(mg/L)A663A645葉綠素a（mg/g）葉綠素b(mg/g)總葉綠素(mg/g)ck0.5060.1910.12320.04180.1649100.8210.3420.19810.08310.2811200.4340.1880.10430.04740.1516400.5440.2120.13210.04810.1801 由表3可知，烯效唑濃度為10、40

11、mg/L，對小麥幼苗皆為促進作用，烯效唑濃度為10mg/L時，小麥幼苗中葉綠素a、葉綠素b、葉綠素總量都最多；濃度為20mg/L時，小麥幼苗中葉綠素含量最少，對葉綠素a、總葉綠素含量為抑制作用，但對葉綠素b為促進作用。表4 不同濃度烯效唑對小麥幼苗中丙二醛（MDA）含量的影響濃度(mg/L)MDA（mol/gFW）ck0.0168100.0150200.0088400.0092由表4可知，只要烯效唑處理過的小麥幼苗，MDA的含量均減少，濃度為20mg/L時MDA含量最少。3. 結論與討論(1)結合已有的研究結果表明，烯效唑浸種抑制幼苗地上部分生長，而能促進根系生長。由于烯效唑可以抑制植物體內赤

12、霉素的生物合成，唐利民等報道抑制赤霉素合成的作用位點是從貝殼杉烯到貝殼杉烯酸的氧化，而赤霉素的主要作用之一正是控制細胞伸長生長9。(2)植物苗期的根冠比是最重要的壯苗指標之一。該試驗結果表明，烯效唑浸種處理的小麥幼苗根冠比(RT)均增大，表現(xiàn)出壯苗效果，與周欣等的研究結果相一致10。說明烯效唑處理能夠在一定濃度范圍內具有壯苗作用。(3)烯效唑浸種處理可以增強小麥葉綠素的生物合成，增加葉片中葉綠素總含量，進而增強植物光合作用的能力，這與關華等3和易良等11的研究結果相一致。烯效唑提高了小麥幼苗葉片葉綠素含量的原因可能是烯效唑作用抑制了小麥葉片細胞的伸長，因而抑制了葉片的生長和葉面積的擴大，但由于

13、葉片內葉綠體的數(shù)目和大小沒有改變，因此單位葉面積內的葉綠素含量增加8。，從而增強了植物的光合作用能力。(4)烯效唑處理的小麥幼苗MDA含量均明顯降低，這可能與烯效唑能提高植物葉片膜脂不飽和脂肪酸含量有關。楊大旗等研究表明，烯效唑能增大亞油酸棕櫚酸的比值12。而寧萬光等7的研究，烯效唑還可以通過促進SOD、POD基因的表達。增強植物對于不良環(huán)境的抵抗力，進一步說明烯效唑浸種在小麥抗逆境領域應用上具有較大潛力。參考文獻1朱木蘭烯刪農作物的生理效應及應用效應J作物研究，1999(2)：40442王熹，俞美玉烯效唑的生理活性及應用研究初報J作物雜志，1993(2)：33343關華，韓惠芳，楊文鈺烯效唑對小麥苗期生長的調控效應()J中國農學通報，200218(4)：5658894王熹俞美玉，陶龍興烯效唑對水稻幼苗的生理影響J中國水稻科學，1994，7(4)：1992045粱雪蓮。楊文鈺烯效唑拌種對小麥形態(tài)及營養(yǎng)的調節(jié)效應J四川農業(yè)大學學報，1998，z6(4)：4034066盛亞紅，沈岳清，盛敏智烯效唑(S一3307)對冬小麥生長發(fā)育的影響J上海農業(yè)學報，1993，9(4)：69747寧萬光，劉紅敏，張萬平烯效唑對小麥幼苗高溫脅迫的緩解效應研究J現(xiàn)代農業(yè)科2007(14)：1031048熊慶娩植物生理學實驗教程M成都：四川科學技術出版社，20：68，31，55，1