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1、白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)臨床檢驗(yàn)教研室l目的:掌握顯微鏡外周血白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的方目的:掌握顯微鏡外周血白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的方法及各種白細(xì)胞正常形態(tài)。法及各種白細(xì)胞正常形態(tài)。l原理:將血液制成細(xì)胞分布均勻的血涂片,用原理:將血液制成細(xì)胞分布均勻的血涂片,用瑞氏染色,根據(jù)各類細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)和顏色差瑞氏染色,根據(jù)各類細(xì)胞的形態(tài)特點(diǎn)和顏色差異將白細(xì)胞區(qū)別進(jìn)行計(jì)數(shù)。通常分類異將白細(xì)胞區(qū)別進(jìn)行計(jì)數(shù)。通常分類100100個(gè)白個(gè)白細(xì)胞,計(jì)數(shù)得出各種白細(xì)胞所占的百分率。細(xì)胞,計(jì)數(shù)得出各種白細(xì)胞所占的百分率。l器材:顯微鏡、香柏油、擦鏡紙。器材:顯微鏡、香柏油、擦鏡紙。l試劑:瑞氏染液、磷酸鹽緩沖液(試劑:瑞氏染
2、液、磷酸鹽緩沖液(PH6.4-6.8PH6.4-6.8)l標(biāo)本:制備好的血涂片標(biāo)本:制備好的血涂片。l1.先在低倍鏡下觀察染色時(shí)候恰當(dāng)先在低倍鏡下觀察染色時(shí)候恰當(dāng) 過(guò)深過(guò)深 過(guò)淺過(guò)淺 2.2.細(xì)胞數(shù)目是否異常細(xì)胞數(shù)目是否異常l3.3.細(xì)胞類型,聚集情況。細(xì)胞類型,聚集情況。l4.4.理想視野理想視野 紅細(xì)胞呈單層分布,互相緊密聯(lián)系但不重疊。紅細(xì)胞呈單層分布,互相緊密聯(lián)系但不重疊。lWBC計(jì)數(shù)4.0-10109/L中性桿狀核粒細(xì)胞中性桿狀核粒細(xì)胞 1-5%中性分葉核粒細(xì)胞中性分葉核粒細(xì)胞 50-70%嗜酸粒細(xì)胞嗜酸粒細(xì)胞 0.5-5%嗜堿粒細(xì)胞嗜堿粒細(xì)胞 0-1%淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞 20-40%單
3、核細(xì)胞單核細(xì)胞 3-8%中性桿狀核粒細(xì)胞中性桿狀核粒細(xì)胞中性分葉核粒細(xì)胞中性分葉核粒細(xì)胞胞體圓形細(xì)胞核深紫紅色染色質(zhì)致密成塊,粗糙不均細(xì)胞質(zhì)豐富,粉紅色,含有較多細(xì)小均勻的淡粉紅色中性顆粒。區(qū)別:細(xì)胞核最窄處小于最寬處1/3即為分葉嗜酸粒細(xì)胞 胞體胞體圓形圓形細(xì)胞核細(xì)胞核兩葉、偶見(jiàn)兩葉、偶見(jiàn)3-4葉葉 染色質(zhì)染色質(zhì)粗糙染紫紅色粗糙染紫紅色 細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞質(zhì)充満粗大、整齊、充満粗大、整齊、均勻、緊密排列且折光性強(qiáng)均勻、緊密排列且折光性強(qiáng)的的桔紅色桔紅色嗜酸性顆粒嗜酸性顆粒l嗜酸性粒細(xì)胞易破碎,顆粒可分散于細(xì)胞周圍嗜酸性粒細(xì)胞易破碎,顆??煞稚⒂诩?xì)胞周圍嗜堿粒細(xì)胞嗜堿粒細(xì)胞胞體胞體圓形圓形細(xì)胞核細(xì)胞核
4、分葉不明顯,分葉不明顯,形態(tài)不規(guī)則形態(tài)不規(guī)則胞質(zhì)胞質(zhì)含有少量粗大但大小不一、含有少量粗大但大小不一、 分布不均的紫黑色嗜堿性顆粒分布不均的紫黑色嗜堿性顆粒 注意:顆粒常蓋于核上,致使核的輪廓與結(jié)構(gòu)不清注意:顆粒常蓋于核上,致使核的輪廓與結(jié)構(gòu)不清淋巴細(xì)胞淋巴細(xì)胞胞體胞體圓開(kāi)或橢圓形圓開(kāi)或橢圓形細(xì)胞核細(xì)胞核圓形或橢圓形,圓形或橢圓形,偶見(jiàn)凹陷偶見(jiàn)凹陷染色質(zhì)染色質(zhì)粗糙致密,排列均勻粗糙致密,排列均勻無(wú)空隙,隱約成塊,染深紫紅色無(wú)空隙,隱約成塊,染深紫紅色細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞質(zhì)很少,僅在核一側(cè)見(jiàn)到少量淡藍(lán)色胞質(zhì),有時(shí)似裸核很少,僅在核一側(cè)見(jiàn)到少量淡藍(lán)色胞質(zhì),有時(shí)似裸核單核細(xì)胞單核細(xì)胞胞體胞體圓形或不規(guī)則形圓形或
5、不規(guī)則形 細(xì)胞核細(xì)胞核腎形、馬蹄形或不規(guī)則分葉,淡紫紅色腎形、馬蹄形或不規(guī)則分葉,淡紫紅色 ,常折疊扭曲,常折疊扭曲細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞質(zhì)豐富,染淡灰藍(lán)色或淡粉紅色,含有大量細(xì)小、豐富,染淡灰藍(lán)色或淡粉紅色,含有大量細(xì)小、 彌散分布的灰塵樣淡紫紅色嗜天青顆粒彌散分布的灰塵樣淡紫紅色嗜天青顆粒染色質(zhì)染色質(zhì)細(xì)致,疏松如網(wǎng)狀細(xì)致,疏松如網(wǎng)狀操作操作l1.染色 瑞士染色、沖洗晾干待用。l2.低倍鏡觀察 全片(分布,染色情況)。l3.油鏡觀察 選擇體尾交界處(分布均勻,著色良好的區(qū)域),按照一定的方向?qū)Π准?xì)胞逐個(gè)進(jìn)行分類。l4.計(jì)算 百分率。l5.報(bào)告方式 百分率(%)。注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)l1.計(jì)數(shù)區(qū)域 體尾交界處。l2.分類方法 l(1)有秩序,遵循一定方向連續(xù)進(jìn)行。l(2)計(jì)數(shù)結(jié)果可用手工劃“正”。l3.分類計(jì)數(shù)的細(xì)胞數(shù)l3.0109/L 50個(gè)l 15109/L 200個(gè)l4.影響因素影響因素l(1)如見(jiàn)到有核紅細(xì)胞,應(yīng)該逐個(gè)計(jì)數(shù),但)如見(jiàn)到有核紅細(xì)胞,應(yīng)該逐個(gè)計(jì)數(shù),但不能計(jì)入不能計(jì)入100個(gè)白細(xì)胞內(nèi),個(gè)白細(xì)胞內(nèi),?個(gè)有
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