稻麥胚乳表層細(xì)胞發(fā)育及功能 - 揚州大學(xué)國家級精品課程

1、稻麥糊粉層細(xì)胞發(fā)育及功能張文虎（M05305） 導(dǎo)師：王忠教授（揚州大學(xué)植物生理教研室225009）水稻小麥?zhǔn)鞘澜缂Z食作物，其重要地位是毋庸置疑的。其胚乳是人類食糧、禽畜飼料、食品工業(yè)原料的重要來源。胚乳的發(fā)育狀況決定著谷物的產(chǎn)量與品質(zhì)。依據(jù)細(xì)胞在胚乳組織中所處的位置和功能，我們將谷物胚乳細(xì)胞分為兩種類型：一是內(nèi)胚乳細(xì)胞，占胚乳組織的90%以上，其生理功能主要貯藏淀粉和蛋白質(zhì)等物質(zhì)，為胚發(fā)育提供營養(yǎng)。二是胚乳表層細(xì)胞，占胚乳組織的5%10%，發(fā)育后轉(zhuǎn)化成來糊粉層細(xì)胞(aleurone layer cell)（圖版，圖版）和胚乳轉(zhuǎn)移細(xì)胞(endosperm transfer cell) 。在萌發(fā)

2、時糊粉層細(xì)胞受赤霉素的誘導(dǎo)能合成大量的水解酶類，擴散進入內(nèi)胚乳細(xì)胞分解胚乳細(xì)胞中的貯藏物質(zhì)供胚發(fā)育的需要。萌發(fā)后糊粉層細(xì)胞發(fā)生程序性細(xì)胞死亡，本身含有的物質(zhì)解體后也被胚吸收。關(guān)于谷物胚乳和糊粉層的發(fā)育及其功能的研究，國內(nèi)外已有很多的報道140，但大多是對結(jié)構(gòu)變化的描述，而關(guān)于胚乳表層細(xì)胞如何轉(zhuǎn)化成糊粉層細(xì)胞機制的研究很少。1.選題依據(jù)1.1關(guān)于糊粉層細(xì)胞的發(fā)育和結(jié)構(gòu)特點王忠等（1998）用光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡觀察了水稻胚乳的發(fā)育，指出糊粉層是由胚乳表層細(xì)胞在吸收轉(zhuǎn)運灌漿物質(zhì)的過程中積累了其中的礦質(zhì)、脂類和蛋白質(zhì)等物質(zhì)后演化而成的5; 也指出糊粉粒是由液泡積累蛋白質(zhì)、植酸鈣鎂顆粒等后發(fā)育起來的

3、，而圓球體起源于粗糙內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，積累磷脂、糖脂和中性脂肪。然而，關(guān)于糊粉層發(fā)育的成因尚未見較詳細(xì)的報道。糊粉層細(xì)胞與內(nèi)胚乳細(xì)胞相比，糊粉層細(xì)胞一般不含淀粉，而含有大量蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、礦質(zhì)和維生素。例如，小麥糊粉層中蛋白質(zhì)含量約18%，脂肪的含量6%10%。蛋白質(zhì)、維生素和礦等物質(zhì)主要存在由單層膜包裹的糊粉粒5，6中，而脂質(zhì)存在只有半層膜包裹的圓球體7中。糊粉粒的顆粒較大，而圓球體小而多（圖版）。1.2關(guān)于糊粉層的生理功能1.2.1轉(zhuǎn)運與積累養(yǎng)分功能。在胚乳細(xì)胞發(fā)育和充實過程中，灌漿物質(zhì)必須通過糊粉層才能進入胚乳細(xì)胞。另外，在胚乳中，糊粉層是積累養(yǎng)分最早的組織。1.2.2產(chǎn)生水解酶分解胚乳為胚生長提供

4、養(yǎng)分的功能。一般認(rèn)為在種子發(fā)芽過程中，由胚釋放出赤霉素，誘發(fā)糊粉層產(chǎn)生淀粉酶、蛋白酶等水解酶，這些水解酶分解胚乳中淀粉和蛋白質(zhì)等貯藏物質(zhì)16，在為胚生長提供養(yǎng)分方面起著重要的作用。也有人指出，糊粉層中的-淀粉酶與穗發(fā)芽密切有關(guān)，糊粉層細(xì)胞合成-淀粉酶能力低的品種抗穗發(fā)芽，反之則易發(fā)生穗發(fā)芽。然而，尚需進一步研究糊粉層細(xì)胞中激素信號的傳導(dǎo)、水解酶的基因表達和活性調(diào)節(jié)等方面的問題12，17。糊粉層產(chǎn)生水解酶分解小麥胚乳細(xì)胞中的蛋白質(zhì)和淀粉體的掃描電鏡照片1.未被水解酶分解的胚乳細(xì)胞中的淀粉體和蛋白質(zhì)，內(nèi)含大小兩種淀粉體和蛋白質(zhì)。2.在種子萌發(fā)過程中，胚乳細(xì)胞中蛋白質(zhì)首先被水解酶降解，淀粉體尚完整。

5、3. 淀粉體開始水解時淀粉體表面出現(xiàn)一些小孔。4. 處于水解中的淀粉體，淀粉體上出現(xiàn)許多大孔。5. 處于水解后期的淀粉體，由于淀粉體內(nèi)淀粉大量被消耗，淀粉體收縮和消亡。a.淀粉體；p. 貯存在淀粉體間隙中的蛋白體；（顧蘊潔2005）1.3糊粉層的營養(yǎng)價值雙向電泳分析大麥種子各組織的蛋白質(zhì)組分，結(jié)果表明糊粉層和胚中蛋白質(zhì)不僅含量高，而且種類比胚乳中的多。香氣的物質(zhì)也主要存在于糊粉層中27。谷物種子中的磷大部分以植酸(肌醇六磷酸脂)形式貯藏于糊粉層的糊粉粒中現(xiàn)已成功地從麥麩中分離出細(xì)顆粒狀的糊粉層物質(zhì)，純度達96%以上。無味 ,口感好,不僅可以單獨食用，也能作食品添加劑26。近年來, 隨著糧食安全

6、保障問題嚴(yán)峻，以及人們對谷物產(chǎn)量、品質(zhì)和衛(wèi)生安全無公害的進一步要求，對于環(huán)境中重金屬的存在對作物生長的影響及其與谷物糊粉層的關(guān)系的研究也越發(fā)重視和深入3638。如果能確定糊粉層是重金屬元素的積聚部位，那么只要對稻麥籽粒進行深度加工，徹底去除糊粉層，就能避免或減輕重金屬在食糧中的污染；對于某些已受到一定污染程度谷物或許也能加以合理利用。綜上所述，本項目將在借鑒他人和總結(jié)我們實驗室以往工作的基礎(chǔ)上，擬進一步探明谷物胚乳發(fā)育過程，弄清表層細(xì)胞和內(nèi)胚乳細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的特點，進一步探明糊粉層細(xì)胞分化過程以及影響因素，弄清其生理功能和調(diào)節(jié)機理。闡明谷物胚乳發(fā)育、轉(zhuǎn)化和充實的規(guī)律，為谷物生產(chǎn)提供理論和方法。2

7、.研究內(nèi)容2.1糊粉層的分化與充實我們將進一步以稻麥穎果為材料，觀察胚乳組織中由胚乳表層細(xì)胞轉(zhuǎn)化成糊粉層細(xì)胞次序和詳細(xì)過程，以及其中糊粉粒和圓球體的形成和充實過程；設(shè)置向穎果輸送 “灌漿廢物”的量（如增施N素和P、K、Mg等礦質(zhì)元素的量），測定“灌漿廢物”在胚乳各部分分布；設(shè)置改變粒重的試驗（如選種粒重差異的品種，進行增“庫”減“源”處理）比較粒重與糊粉層充實關(guān)系。驗證糊粉層細(xì)胞是胚乳表層細(xì)胞囤積“灌漿廢物”后轉(zhuǎn)變來的觀點。另外通過組織化學(xué)和分子生物學(xué)方法研究內(nèi)胚乳細(xì)胞和表層細(xì)胞的化學(xué)組成，酶蛋白和核酸種類以及墓基因表達等方面的差異，分析胚乳細(xì)胞轉(zhuǎn)化成糊粉層細(xì)胞控制因素和發(fā)育信號。2.2糊粉層

8、的生理功能對不同發(fā)育階段的稻麥子粒，按照預(yù)先設(shè)定的實驗方案，擬進一步從糊粉層細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞壁、質(zhì)膜、胞間連絲、內(nèi)膜系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)特點分析糊粉層的吸收和轉(zhuǎn)運灌漿物質(zhì)的生理功能，以及研究在糊粉粒和圓球體的發(fā)育過程中糊粉層囤積“灌漿廢物”的生理功能。在種子萌發(fā)過程中，糊粉層會產(chǎn)生-淀粉酶、蛋白酶等水解酶，對水解內(nèi)胚乳貯藏物質(zhì)供胚生長起著重要作用。通常認(rèn)為糊粉層中水解酶的產(chǎn)生由胚分泌的赤霉素誘導(dǎo)。我們擬進一步研究糊粉層細(xì)胞在種子萌發(fā)過程中的生理功能和程序性死亡。3研究方案：3.1糊粉層細(xì)胞的發(fā)育和功能的研究方案：用掃描電鏡觀察結(jié)構(gòu)，并同步測定觀察區(qū)中的元素種類與含量冰凍切片，組織化學(xué)法檢定細(xì)胞成分

9、和酶活性樹脂切片后特異性染色，免疫熒光觀察顯微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器內(nèi)含物超薄切片結(jié)合免疫定位，用透射電鏡重點觀察與物質(zhì)轉(zhuǎn)運的細(xì)胞器如質(zhì)膜、胞間連絲等超微結(jié)構(gòu)探明谷物糊粉層和胚乳轉(zhuǎn)移細(xì)胞發(fā)育機制和生理功能比較分析各發(fā)育階段細(xì)胞結(jié)構(gòu)內(nèi)含物種類，酶活性的變化發(fā)育不同天數(shù)的穎果萌發(fā)不同天數(shù)的穎果3.2關(guān)于論證糊粉層分化與灌漿廢物沉積相關(guān)的研究方案觀察糊粉層的發(fā)育與胚乳充實的關(guān)系結(jié)果：如果表層細(xì)胞中糊粉粒隨內(nèi)胚乳淀粉積累而充實，糊粉層染色性由內(nèi)向外以次加深，最外層先形成糊粉細(xì)胞結(jié)果：如果向內(nèi)胚乳輸導(dǎo)物質(zhì)多的表層細(xì)胞處，則靠近果皮維管束的部位，糊粉層細(xì)胞的層數(shù)多結(jié)果：不管是同品種或不同品種，總是粒重大的糊粉層厚度

10、大些，或是細(xì)胞層數(shù)多結(jié)果： N素和礦質(zhì)等物質(zhì)留在糊粉層中，或者N素和礦質(zhì)進入糊粉層的顯著比進入內(nèi)胚乳的高驗證糊粉層分化與充實是由灌漿廢物沉積在胚乳表層細(xì)胞引發(fā)的觀點觀察庫源強度改變對糊粉層發(fā)育的影響結(jié)果：如果進行減源增粒處理，在減少粒重的同時，是否也顯著影響到糊粉層的分化和充實比較觀察穎果中不同部位糊粉層細(xì)胞的層數(shù)比較粒重差異的同部位的糊粉層細(xì)胞的厚度觀測增施的N素和礦質(zhì)在糊粉層中分配比例3.3關(guān)于闡明內(nèi)胚乳細(xì)胞和糊粉層細(xì)胞結(jié)構(gòu)和發(fā)育特點差異的研究方案組織和細(xì)胞的分離后進行核酸與蛋白質(zhì)等成分分析組織化學(xué)法檢定細(xì)胞成分和酶活性樹脂切片后特異性染色，免疫熒光觀察顯微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞器內(nèi)含物用電鏡觀察結(jié)構(gòu)

11、，并同步測定觀察區(qū)中的元素種類與含量探明內(nèi)胚乳細(xì)胞與糊粉層細(xì)胞在結(jié)構(gòu)和發(fā)育特點上的差異比較分析兩種細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)，內(nèi)含物種類，酶活性的變化發(fā)育不同天數(shù)的內(nèi)胚乳發(fā)育不同天數(shù)的糊粉層3.4關(guān)于探討糊粉層對種子萌發(fā)的作用方案用I-KI染色法檢測剖面上淀粉消化情況用TTC染色法檢測穎果各部位細(xì)胞活性冰凍切片，化學(xué)檢定水解酶，免疫定位激素樹脂切片組織化學(xué)，觀測細(xì)胞結(jié)構(gòu)和組成比較萌發(fā)不同天數(shù)的糊粉細(xì)胞活性，結(jié)構(gòu)和組成成分變化，就能確定糊粉細(xì)胞的壽命和作用，以及判別糊粉層內(nèi)含物是否最后能被胚生長而利用，并分析出萌發(fā)種子的物質(zhì)代謝概況和物質(zhì)轉(zhuǎn)運途徑萌發(fā)不同天數(shù)的谷物穎果如果胚乳中淀粉僅先在靠盾片處消亡，而靠糊粉

12、層的淀粉最后消亡，說明糊粉層不產(chǎn)生淀粉酶(水稻似這樣)；反之，糊粉層中有赤霉素和淀粉酶，則表明糊粉層能被赤霉素誘導(dǎo)產(chǎn)生淀粉酶(如大麥)4.實驗材料與方法本試驗選用水稻和小麥為材料，選用常規(guī)水稻和小麥品種：揚粳9538，優(yōu)118以及揚稻6號；小麥為揚12和揚15。限源限庫與不同施氮處理等結(jié)合，采用記號筆點開穎穎花與植株上掛牌相結(jié)合的方法來標(biāo)記穎花的開花日期與授粉時刻。在開花期每天標(biāo)花，直標(biāo)到全田開花結(jié)束，這樣能在某一天里采集到發(fā)育不同天數(shù)或授粉后不同時間的穎果，進行多項實驗4.1糊粉層細(xì)胞成分和酶的組織化學(xué)檢定取發(fā)育不同天數(shù)的谷物穎果或萌發(fā)不同天數(shù)的穎果，冰凍切片。用檢測試劑染色，在顯微鏡觀察。

13、根據(jù)呈色情況，判斷糊粉層細(xì)胞成分和酶的定位。也可采用免疫熒光法對糊粉層細(xì)胞中的激素等物質(zhì)定位。根據(jù)細(xì)胞成分和酶活性在糊粉層發(fā)育過程中的變化，就可分析糊粉層的發(fā)育過程和部分生理功能。4.2供光鏡和透射電鏡(TEM)觀察的樣品制作將發(fā)育不同天數(shù)的穎果或萌發(fā)不同天數(shù)的種子的觀察部位切成薄片,用2% GAL(戊二醛)、1% PAL(多聚甲醛)、0.05mol/L pH 7.2 CaCO(甲基砷酸鈉)緩沖液,前固定3小時,后用1%鋨酸后固定數(shù)小時,乙醇系列脫水,環(huán)氧丙烷置換,用低粘性的Spurr樹脂浸透與包埋,先切1m半薄切片,用1% TBO(甲苯胺蘭)染色,供光鏡觀察,在光鏡觀察確定需要作超微結(jié)構(gòu)觀察

14、的部位的基礎(chǔ)上,進一步作超薄切片(50nm),用6%醋酸鈾和佐滕氏鉛混合液,雙重染色,用TEM觀察樣品的超微結(jié)構(gòu)（如圖版、所示）。為了探明糊粉層和轉(zhuǎn)移細(xì)胞的發(fā)育和生理功能，要著重觀察與物質(zhì)積聚有關(guān)的糊粉粒、圓球體等細(xì)胞器，與物質(zhì)輸導(dǎo)有關(guān)的細(xì)胞壁、胞間連絲等細(xì)胞器超微結(jié)構(gòu)隨穎果發(fā)育的變化4.3細(xì)胞壁的熒光觀察取發(fā)育不同天數(shù)的穎果，固定、用Leica 7022 LH樹脂包埋，制作切片，用0.1%熒光增白劑溶液染色10分鐘，清洗后將切片放在熒光顯微鏡下用紫外光激發(fā)觀察，發(fā)出的藍(lán)色熒光的部位為細(xì)胞壁 (圖版)。用此法可以觀察糊粉層細(xì)胞壁發(fā)育情況。4.4供掃描電鏡(SEM)觀察的樣品制作把開花后不同日數(shù)

15、的穎果先用3% GAL、1.4% PAL、0.05mol/L pH7.2 CaCO固定,然后用1% 鋨酸固定,二甲亞砜過渡,在液氮中斷裂,丙酮脫水,醋酸異戊酯過渡,CO2臨界點干燥,離子濺射鍍金制樣后用SEM觀察它們的斷面結(jié)構(gòu)，分析子粒萌發(fā)過程中的糊粉層消耗情況，從而分析糊粉層在子粒萌發(fā)中的功能4.5谷物種子中礦質(zhì)元素分布分析采用電子探針法。利用我校測試中心附有能譜儀的掃描電鏡，在觀察斷面結(jié)構(gòu)的同時，分析觀察區(qū)中的礦質(zhì)元素種類與含量4.6胚乳細(xì)胞的分離與核酸與蛋白質(zhì)成分分析取發(fā)育不同天數(shù)的穎果（最適宜酶解胚乳細(xì)胞的材料是花后10天左右的稻麥穎果）。剝?nèi)スづc胚。將胚乳組織用纖維素酶和果膠酶酶解

16、，首先解離下來的是糊粉層細(xì)胞，其次是內(nèi)胚乳細(xì)胞。用顯微鏡可觀察兩種胚乳細(xì)胞形態(tài)。如分別提取兩種細(xì)胞中內(nèi)含物，用電泳等方法分離與鑒定其中核酸與蛋白質(zhì)的種類和特異性。4.7糊粉層在種子萌發(fā)過程中結(jié)構(gòu)和功能的觀察每隔2d將吸足水分的稻麥等種子播于附有濕砂的培養(yǎng)皿中發(fā)芽，當(dāng)首批播種的小苗長至3葉期（斷乳期）時，收集萌發(fā)不同天數(shù)的種子。采用上述大多數(shù)方法可用于研究糊粉層在種子萌發(fā)過程中超微結(jié)構(gòu)的變化，分析糊粉層細(xì)胞的生理功能4.8灌漿物質(zhì)進入胚乳途徑的觀察取發(fā)育15天數(shù)左右的小麥或水稻穗，留下同一天標(biāo)花的穎果，其余全部剪除。將穗莖插入含有14C-蔗糖液中，每隔半小時取下穎果后冰凍切片，將切片貼在玻片上，

17、烤干后在切片上涂感光乳膠，進行同位素自顯影，根據(jù)浸穗不同時間后穎果橫切面自顯影顯微觀察到的情況，分析14C-蔗糖液到達穎果各部位的時間與進入胚乳途徑。用小麥穗實驗，浸穗約20分鐘14C-標(biāo)記物出現(xiàn)在子房維管束，1小時14C-標(biāo)記物進入胚乳。另外也可用熒光顯微法觀察灌漿物質(zhì)進入胚乳途徑。例如給小麥或水稻小穗飼喂熒光示蹤物如小分子量的葡聚糖，每隔半小時取出穎果后徒手切片，在熒光顯微鏡下觀察穎果橫切面上由葡聚糖分子發(fā)出的綠色熒光，由此可分析灌漿物質(zhì)進入胚乳途徑。5、年度研究計劃及預(yù)期研究結(jié)果5.1 研究計劃基于今年暑假的實驗情況，擬定：1、2006.122007.4利用實驗室的光照培養(yǎng)箱進行子粒萌發(fā)

18、操作，以研究糊粉層的功能。2、2007.42007.8進行小麥的田間取樣以及實驗室分析工作，研究小麥糊粉層的發(fā)育。3、2007.82007年底進行水稻的田間取樣以及實驗室分析工作，研究水稻糊粉層的發(fā)育。4、2008年初整理試驗資料，撰寫論文。5.2預(yù)期結(jié)果1、闡明糊粉層細(xì)胞分化過程和調(diào)控分化的因素。2、探明糊粉層細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。3、盡全力在核心期刊上發(fā)表論文較高質(zhì)量的論文。10圖版 水稻糊粉層細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)1.花后10d掃描電鏡照片；2. 花后15d掃描電鏡照片；3. 糊粉層細(xì)胞透射電鏡照片，花后8d；4. 糊粉粒透射電鏡照片(3局部放大)A. 糊粉層；ag.糊粉粒；n.細(xì)胞核；NE.珠心；s

19、.圓球體；SA.亞糊粉層；p.淀粉質(zhì)體； （顧蘊潔等2000）圖版小麥糊粉層的形成16分別為花后7d、9d、13d、20d、25d、30d的穎果橫斷面切片(×400)。A糊粉層；a.淀粉體；ES.內(nèi)胚乳；n.細(xì)胞核；NE.珠心表皮；p.蛋白體；SA.亞糊粉層；Pe.果皮。（顧蘊潔2000）參考文獻：1 田中國介.稻學(xué)大成，第二卷生理編,第三章 登熟生理，第2節(jié) 胚乳發(fā)育貯藏物資集積.東京:農(nóng)文協(xié),1990，56742 王 忠,李衛(wèi)芳, 顧蘊潔.水稻胚乳的發(fā)育及其養(yǎng)分輸入的途徑.作物學(xué)報,1995,21(5):5205273 Christine F,Birte S.Feasibilit

20、y study of a tissue-specific approach to barley proteome analysis: aleurone layer, endosperm, embryo and single seeds. Journal of Cereal Science，2003（38）：2172274 Mauricio A, Lopes, Brian A. Larkins. Endosperm origin development, and function.The Plant Cell, 1993, Vol.5 13831399.5 王 忠，顧蘊潔，李衛(wèi)芳，黃山，李克武.

21、水稻糊粉層的形成及其在萌發(fā)過程中的變化. 揚州大學(xué)學(xué)報, 1998, 1(1):3234.6 松田智明. 登熟期水稻子房淀粉貯藏細(xì)胞微細(xì)構(gòu)造轉(zhuǎn)流、蓄積機構(gòu). 日本作物學(xué)會紀(jì)事,1984,53(別號1):1441477 Buchanan BB，Gruissem W，Jones RL. Biochemistry & molecular biology of plants.北京：科學(xué)出版社，2002，18198 Gu Yujie(顧蘊潔)，Wang Zhong(王忠)，Chen Yifang(陳義芳)，Chen Gang(陳剛). The Study on the Development o

22、f Sorghum Endosperm. JOURNAL OF NATURAL SCIENCE NANJING NORMAL UNIVERSITY,2002,4(2)：4960.9 星川清親. 米胚乳發(fā)育關(guān)組織形態(tài)的研究，第4報，糊粉層分化發(fā)育.日作紀(jì)，1967，36：21622010 徐是雄，徐雪賓稻的形態(tài)與解剖北京：農(nóng)業(yè)出版社，19844557 11 Davis RW, Smith JD, Cobb BG. A lightand and electronmicroscop investigation of the transfer cell Region of maiz ecaryopse

23、s. Can J Bot,1990.68:47147912 Odd-Arne Olsen. Endosperm development: cellularization and cell fate specification. Annu.Rev.Plant Physiol. Plant Mol.Biol.2001.52:233-6713 顧蘊潔, 王忠, 陳義芳, 陳剛, 黃海. 高粱胚乳發(fā)育的觀察與研究. 南京師大學(xué)報(自然科學(xué)版), 2002，25(3)9910814韋存虛, 蘭盛銀, 徐珍秀. 水稻胚乳發(fā)育中ATP酶的超微細(xì)胞化學(xué)定位和功能分析. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2003，36（3）：25

24、926215 Kolli VS, Rupali D, Rameshwar S. Amylases synthesis in scutellum and aleurone layer of maize seeds. Phytochemistry,1998,49(3)：65766616 Okamoto K，Murai T，Eguchi G，et alEnzymic echanism of starch breakdown in germinating rice seeds Plant Physiol，1982，70：90591117 Ogawa M, Hanada, Ayamauchi Y. Ku

25、wahara A, Kamiya Y and Yamaguchi S. Gibberellin Biosynthesis and Response during Arabidopsis Seed Germination. PLANT CELL, July 1, 2003，15(7): 15911604.18何萍，馮宗云，張靜. 小麥抗穗發(fā)芽性的機理與遺傳研究.種子，1996,6，333619 楊居榮等. 污染稻麥籽實中Cd、Pb、Cu 的分布及其形態(tài)初探.中國環(huán)境科學(xué)1999,19（6）：50050420何孟常，楊居榮，查燕. 污染作物籽實中As的分布及其結(jié)合形態(tài)初探.應(yīng)用

26、生態(tài)學(xué)報2000年8月第11卷第4期62462821匡少平，張書圣. 作物對土壤中環(huán)境激素鉛的吸收效應(yīng)及污染防治. 農(nóng)業(yè)環(huán)境保護2002,12(6):48148422 衣艷萍,范亞君,劉慶杰, 論多酚物質(zhì)對啤酒質(zhì)量的影響及控制. 釀酒 1998.3，3323 Odd-Arne Olsen, Casper Linnestad and Scott E. Nichols.Developmental biology of the cereal endosperm trends in plant science 1999,Vol.4,No.7：25325724王若仲, 浪濤, 丁君輝,嚴(yán)欽泉. 植酸形成

27、與水稻籽粒充實的關(guān)系. 中國水稻科學(xué)2003,17(1):424625 Rhodes DI , Stone BA. Proteins in Walls of Wheat Aleurone Cells. Journal of Cereal Science 36 (2002) 8310126 Cheng BQ, Topping DL, Stone BA et al. Comparative effect of dietary wheat bran and its morphorlogical compoments(aleurone and pericarpseed coat ) on volati

28、le fatty acid concentration in the rat. Brit J nutr,1987,576927 趙秀蘭,梅行,林希蘊等.谷類糧食中17種元素含量測定. 微量元素與健康研究，1997年第14卷第4期353728 何瑞國，麻益良等，豬消化代謝試驗對糙米營養(yǎng)價值的研究. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 13(3)：268273 29 Benamrouche S，Cronier D，Debeire P，Chabbert B. A Chemical and Histological Study on the Effect of (14)-endo-xylanase Treatment

29、 on Wheat Bran. Journal of Cereal Science 36 (2002) 25326030 沙怡梅. 谷類與冠心病. 國外醫(yī)學(xué)衛(wèi)生學(xué)分冊2002年第29卷第6期,35836331 中華糧網(wǎng). 小麥制粉基本原理. 2001-12-12 0832 顧堯臣. 96小麥剝皮制粉技術(shù)研討會評述(二). 糧食與飼料工業(yè)，1997年第4期33 程炳欣, 肖軍. 膳食纖維 小麥糊粉的應(yīng)用價值. 生物學(xué)雜志，1998年第4期34 Tanaka K，Ogawa M, Kasai ZThe rice scutellumA comparison of scutellar and aleurone electron-dense particles by transmiss